Unidad Académica de Ciencias Biológicas

Programa Académico de Ciencias Biológicas

Biología Molecular: Prácticas de laboratorio

Extracción de ADN genómico

Práctica 2

Nombre del alumno: Alaír Hernández Murillo.

Procedimiento y resultados:
1.- Tejido vegetal pulverizado fue colocado en un tubo para microcentrífuga.
2.- Posteriormente se incubó durante 20 minutos a 60 °C, agitando ocasionalmente
aproximadamente cada 5 minutos para ayudar a homogenizar.
3.- Tras ello, la muestra fue centrifugada a 13000
revoluciones por minuto, la velocidad de
centrifugación permite la ruptura de
membranas de las células vegetales. El proceso
se llevó a cabo durante 10 minutos.
4.- Producto de la centrifugación se obtuvo
un sobrenadante que fue transferido con la ayuda
de una micropipeta a un tubo nuevo,
Ilustración 1 Incubación a
evitando el contacto con la pastilla
60° C durante 20 minutos Ilustración 2 Centrifugación a 13000
formada en el fondo del microtubo. rpm por 10 minutos durante 20
Obteniendo aproximadamente 700 μL de sobrenadante. minutos

5.- Posteriormente se añadió cloroformo: alcohol isoamílico 24:1 (Saturado en TE): que
contribuye a desnaturalizar las proteínas alrededor del ácido nucleico, y se centrifugó durante
5 minutos a 13000 rpm.

Ilustración 3 Fase acuosa producto de

la centrifugación a 13000 rpm
durante 5 minutos., pastilla al fondo.

6.- Producto de la nueva centrifugación se obtuvo una nueva

separación de componentes, la fase acuosa fue transferida a un tubo
nuevo, se añadió isopropanol, y nuevamente se centrifugó por 10
minutos a 13000 revoluciones por minuto.
7.- A continuación, se eliminó la totalidad del componente acuoso, dejando únicamente la
pastilla formada por la centrifugación.
 Ilustración 4 Fase acuosa producto de la centrifugación a 13000 rpm durante 5
minutos., pastilla al fondo.

8.- Finalmente, la muestra se resuspende en 60 μl de

agua ultra pura, y se almacena a 4 para evitar la
desnaturalización del ADN por efecto de la temperatura.

Pastilla de ADN que queda al fondo del

microtubo, producto de la centrifugación.

Discusión y conclusiones:
El resultado de la extracción fue una pequeña pastilla formada en el fondo del microtubo, la cual
será utilizada en prácticas futuras. Es un proceso que requiere mucho tiempo, debido
principalmente a los procesos de centrifugación e incubación. La extracción de ADN es un
proceso básico y fundamental en la biología molecular, y su comprensión es sumamente
necesaria.
Su elaboración es compleja, y la precisión en cada uno de los pasos es crucial para obtener
una muestra íntegra, que permita desarrollar los análisis posteriores eficazmente. Dominar
técnicas como el pipeteo y el manejo de reactivos permitirá llevar a cabo extracciones de ADN
de una forma mucho más eficiente y agilizará el proceso.