En el campo de la biología, lisis se refiere al deterioro de una célula debido a una

lesión en su membrana plasmática (exterior). Esta puede ser por medios

químicos o físicos (por ejemplo, detergentes fuertes u ondas sonoras de alta
energía) o por infección con una cepa de un virus que puede lisar las células.
METODO FISICO
• Óptica: Consiste en la aplicación de pulsos láser para lisar las células, es
útil al enfocarse en una sola célula debido a que se puede modular la
potencia del láser y direccionarlo a un lugar específico.3
• Homogeneización líquida: Las células se rompen al obligarlas a pasar por
espacios muy pequeños.
• Sonificación: Ondas de alta frecuencia rompen las células.1
• Congelamiento: Ciclos de congelación continuos rompen la célula
induciendo la formación de cristales.
METODO QUIMICO
Lisis celular por medio de detergentes es una manera más suave de romper la
membrana celular. Los detergentes rompen la barrera lipídica solubilizando las
proteínas e interrumpiendo la interacción lípido-lípido, lípido-proteína y proteína-
proteína.
Lisis con detergente: La lisis con detergente es un método suave que puede
utilizarse para las células de mamíferos, las células bacterianas, las levaduras y
las plantas. Las suspensiones celulares se centrifugan suavemente y se vuelven
a suspender en una disolución de lisis con detergentes que actúan rompiendo la
membrana celular. Las membranas se solubilizan, lisando las células y liberando
su contenido. Es posible que sea necesario retirar los detergentes más adelante
si interfieren en el análisis o la producción.
METODO MECANICO
Las proteínas pueden extraerse de las células y los tejidos utilizando varias
medidas toscas pero eficaces de «trituración y molienda». Por ejemplo, las
membranas celulares pueden romperse por fuerzas mecánicas líquidas
utilizando homogeneización Dounce o Potter-Elvehjem Los tejidos pueden ser
homogeneizados cortándolos o picándolos en una disolución tampón fría
utilizando un mezclador Waring o un homogeneizador Polytron®. Los tejidos o
las células pueden congelarse en nitrógeno líquido y molerse hasta un polvo fino
utilizando un mortero y un almirez con alúmina o arena. La agitación rápida de
las células con microesferas de vidrio finas rompe las paredes celulares. Esto es
eficaz para la mayoría de las bacterias gramnegativas y grampositivas.
METODO ENZIMATICO
Digestión enzimática: Los métodos enzimáticos se utilizan a menudo cuando se
quieren extraer proteínas de bacterias, levaduras o células eucariotas incluidas
en tejidos fibrosos donde las membranas celulares están rodeadas por una
estructura protectora robusta. Las enzimas de lisis celular, o cócteles como
Lysozyme, Mutanolysin, MetaPolyzyme, Lysonase y Pronase, pueden utilizarse
en combinación con enzimas de digestión tisular (colagenasa, condroitinasa,
hialuronidasa) para disolver o desorganizar las paredes celulares, los
revestimientos, las cápsulas, las cápsides u otras estructuras que no se rompen
con facilidad sólo por medios mecánicos. La digestión enzimática puede ir
seguida de homogenización, tratamiento con ultrasonidos o agitación vigorosa
en Vórtex en un tampón para lisis.
– Lysozima: rompe enlaces b-1.4- entre N-acetil murámico y N-acetil
glucosamina de peptidoglicán de la pared celular de bacterias
– Lyticasa: rompe enlaces b-1.3 de glucano de levaduras
– Proteasas: rompe enlaces peptídicos de prot. de p