5/2/22 9:30 Fraccionamiento celular - Wikipedia, la enciclopedia libre

Fraccionamiento celular
El fraccionamiento celular o fraccionamiento
subcelular es una técnica de laboratorio, tras la
disgregación, en la que se intenta reagrupar las partículas,
generalmente células u orgánulos celulares, en función de
sus propiedades biofísicas.1 ​

Mediante el fraccionamiento celular se consigue separar

conjuntos homogéneos, por lo general de orgánulos, a
partir de una población heterogénea de células.

Índice
Etapas
Homogeneización
Filtración
Purificación
Centrifugación en gradiente de densidad
Centrifugación diferencial
Véase también Centrifugadora de laboratorio, para separar
fracciones de diferente tamaño o densidad
Medios empleados para la separación de células
por densidad
Enlaces externos
Referencias

Etapas
Existen tres etapas principales en el fraccionamiento celular:

1. Disgregación o rotura (homogeneización) de las células y liberación de los orgánulos.

2.
Macrofiltración.
3. Purificación de componentes celulares o fraccionamiento celular
propiamente dicho: Se aplican técnicas de centrifugación diferencial y en gradiente1 ​

Homogeneización

El tejido se homogeneiza, normalmente en una solución tampón isotónica usando una variedad de
mecanismos (moler, picar, triturar, cambios de presión, choque osmótico, congelación y
descongelación, homogeneización con ultrasonidos...)

Se emplean numerosos dispositivos que forman parte del equipamiento de laboratorio.1 ​

https://es.wikipedia.org/wiki/Fraccionamiento_celular 1/3
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Homogeneizador Potter-Elvehjem, de uso frecuente, ya que es relativamente suave.

Homogeneizador de aspas, como el polytron.
Prensa de French
Mortero con mazo
Sonicador
Medios hipotónicos
Rotura celular con lisozima

La solución se homogeneiza en una solución isotónica para

detener el daño osmótico, con una solución tampón para
regular el pH, y a una temperatura muy baja para evitar daños
enzimáticos. Los orgánulos se mantienen en frío, en un medio
isotónico y tamponado.

El resultado ahora es una pasta fina de líquido, el homogenato

de células, que consta de células intactas y componentes
celulares. Con un cuidadoso trabajo se mantienen intactos los Esquema del proceso de filtración.
orgánulos celulares, siendo funcionales en gran medida.

Véase Rotura celular para más detalles.

Filtración

Este paso puede no ser necesario dependiendo de la fuente de las células. Si se trabaja con tejidos
animales, es probable que se liberen restos de tejido conectivo que debe ser eliminado.
Habitualmente, la filtración se realiza ya sea mediante el vertido a través de un tejido poroso o con un
filtrado por succión empleando el correspondiente filtro de cerámica con un tamaño de poro
adecuado.

Purificación

Se realiza por centrifugación en gradiente de densidad o por

centrifugación diferencial, aumentando secuencialmente la velocidad
de giro y la fuerza gravitacional, dando como resultado una
separación secuencial de los orgánulos de acuerdo con su densidad.

Centrifugación en gradiente de densidad

En la centrifugación en gradiente de densidad se sitúa el

homogeneizado en un medio con un gradiente de densidad y se
centrifuga. Ahora los componentes de la célula se separan, migrando Izquierda: Centrifugación en
cada uno a la zona de densidad similar. Este método es útil si se gradiente de percoll de glóbulos
desea aislar componentes celulares de tamaño semejante con una rojos infectados, separados por
diferencia de densidad baja. su diferente estado de
desarrollo.

https://es.wikipedia.org/wiki/Fraccionamiento_celular 2/3
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Centrifugación diferencial

La centrifugación diferencial es un proceso de separación

que puede separar los componentes celulares por
centrifugación repetida, a velocidades cada vez mayores.
En estas condiciones, los componentes de la célula se
separan en función de su tamaño y densidad: los
componentes de gran tamaño y más densos migran más
rápidamente hasta el fondo a velocidades relativamente
bajas y forman un sedimento. Esquema de la centrifugación diferencial, para
separar los diferentes orgánulos obtenidos
En el esquema de la derecha, se observa un
mediante fraccionamiento celular
homogeneizado celular en (1) que se centrifuga a baja
velocidad. El precipitado resultante (verde) se compone
de componentes grandes y pesados. Se elimina el
sobrenadante y se centrifuga a una velocidad algo mayor (2). Este proceso se repite y se va
aumentando en cada etapa la velocidad de centrifugación.

Véase también
Rotura celular
Centrifugación diferencial

Medios empleados para la separación de células por densidad

Percoll
Ficoll

Enlaces externos
Microfluidicscorp - MFIC OTC (https://web.archive.org/web/20070930115719/http://www.microfluid
icscorp.com/cell_disruption/index.html)

Referencias
1. Homogeneización de tejidos y células. (http://books.google.es/books?id=xoXUKiKOfFIC&pg=PA1
38) Técnicas instrumentales en bioquímica y biología. Francisca Barceló Mairata. Servicio de
Publicaciones e Intercambio Científico. Universidad de las Islas Baleares, 2003. ISBN
8476328087. Pág.138

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