PCR

Objetivo

Observar la técnica de PCR en muestras de animales para identificar una enfermedad

parasitaria.

Determinar la presencia de perkinsus olseni en muestras de hospedadores habituales de

este parasito, almeja fina (Tapes decussates) y almeja china (Tapes philippinaum).

Introducción

Existen diferentes técnicas que se usan en la biología molecular para resolver o llevar a

cabo distintas acciones. En esta practica se desglosa como actúa la técnica de PCR en

muestras de animales, específicamente en almejas. Según (Pedrosa, 1999) “La PCR es un

método enzimático in vitro que permite la amplificación de una secuencia específica del

ADN. Esta técnica se basa en el uso de dos oligonucleótidos que luego de reconocer la

secuencia complementaria en la molécula de ADN, son alargados cíclicamente mediado por la

acción de la ADN Polimerasa.”

Material y método

• Tampón de reacción

• dNTP

• Cebadores

o Almeja fina (Tapes decussates)

o Almeja china (Tapes philippinaum)

• Enzima Taq Polimerasa

• Agua milli Q estéril

 Resultados

Se observaron los resultados mediante electroforesis, una técnica en la que se irradia el gel

con la luz ultravioleta en ultra iluminador. Se puede apreciar que dos de las 4 muestras

realizadas presentan una amplificación de un fragmento de ADN de un tamaño igual que el

que se puede observar en la muestra de control positivo, si comparamos con el tamaño de los

otros fragmentos su peso molecular es de mas de 500 pares de base, esto nos indica que estas

muestras están infectadas por el parasito.

La primera muestra no presenta amplificación al igual al igual que el control negativo, esto

indica que la muestra no esta infectada por el parasito.

Figura 1. Técnica de PCR en muestra de animales.

Discusión

La reacción en cadena de Polimerasa (PCR), es considerada una técnica que consiste en

amplificación in vitro de fragmentos de ADN. Es una técnica muy sensible y especifica que

permite esta amplificación dando como resultado millones de copias de un fragmento de

ADN en pocas horas.

 Utilizando esta técnica fue como se logro observar los resultados de los parásitos que se

produjeron en las muestras de las almejas que se experimentó, en las muestras de control

positivo se pudo observar cómo los parásitos existentes se amplificaron con la técnica,

mientras que en el control positivo al no haber reactivos que lo produzcan este no presento

amplificación.

Conclusión

La práctica de PCR es una de las más utilizadas actualmente en cuanto a replicación p

amplificación de ADN. Desde el punto de vista de la parasitología esto es bastante útil ya que

permite detectar la presencia en la práctica de un único parasito presente en la muestra de

hospedador que se probó.

Bibliografía

Pedrosa, A. (1999). Reacción en cadena de la polimerasa. Revista Archivo Médico de

Camagüey, 3(2). Recuperado de

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-

02551999000200011&lng=es&tlng=es.

López, I. [¨Prácticas Docentes]. (8 de marzo de 2012). Genética: técnica PCR [Archivo de

video]. YouTube. https://www.youtube.com/watch?v=DZ7uNG9dy0E