5.2 ¿Qué cuidados deben tenerse al preparar un medio de cultivo sólido en caja de Petri?

1 MEDIO SELECTIVO (Agar Papa y Dextrosa para preparar cajas de Petri)

a) Pesar cuidadosamente la cantidad que indica la etiqueta del envase para preparar la cantidad
de medio indicada por el profesor.

b) Colocar el medio en un matraz del doble de volumen y adicionar el agua necesaria.

c) Calentar suavemente hasta disolverlo completamente.

d) Tapar el matraz que contiene el medio con un tapón y gorro de papel Kraft.

e) Esterilizar en autoclave a la temperatura y tiempo que indica la etiqueta del envase.

f) Enfriar el matraz hasta 45° C y en condiciones estériles transferir del matraz de 15 a 20 ml de

medio en cajas de Petri estériles y permitir que solidifiquen a temperatura ambiente.

g) Etiquetar con los datos correspondientes cada caja (en la base de la caja) colocar el masking
tape

o con marcador indeleble Finalmente guardar en bolsas de plástico nuevas en posición invertida.

5.3- ¿De los siguientes medios, mencionar en qué consiste su capacidad diferencial o selectiva y
qué tipos de microorganismos crecen en ellos?

Agar Papa Dextrosa.

Candida albicans ATCC 10231 Bueno

Saccharomyces cerevisiae ATCC9763 Bueno

Trichophyton mentagrophytes

4.8 AGAR ROSA DE BENGALA

a) Pesar la cantidad indicada para preparar cuatro placas según la etiqueta del frasco.

b) Fundir el medio con agua destilada, hasta que el medio este claro y sin grumos.

c) Colocar el tapón de algodón y el gorro y esterilizar, según indica el frasco.

d) Una vez esterilizado el medio, enfriarlo hasta que este a 45°C y vaciar en placas estériles

e) Dejar solidificar el medio y colocarlas en una bolsa de plástico nueva en posición invertida y

guardarlas en el refrigerador

5.4 ¿Cuál es la función de los colorantes e indicadores en los medios de cultivo?

Indicadores de potencial oxido-reducción.

Inhibidores de crecimiento microbiano como los colorantes

5.5 De los medios usados indica cuáles son específicos para mohos y cuáles para bacterias y ¿por
qué?

Hongos : el agar de papa y dextrosa, ya que

tiene un pH de 3,5 lo que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias.de agar extracto de
malta y el agar rosa de

bengala se emplea para inhibir el crecimiento radial de hongos con micelio cenocítico

Bacterias :
Un cultivo puro es aquel que está constituido por microorganismos de la misma especie.

El cultivo de microorganismos se puede realizar en medio sólido, semisólido o líquido.

Se conoce como cultivo en medio sólido al que se hace en una caja Petri con el medio de cultivo

gelificado (agar). Las variantes del cultivo en caja son diversas, pero todas se centran en la
formación

de estrías sobre la superficie del medio de cultivo con el asa en el caso de bacterias y por
picadura

Las siembras en tubos con medio sólido, por lo general se emplean para la conservación de un
cultivo

proveniente de una placa

5.6 Cuando se siembran hongos en medio líquido, describe cómo es el crecimiento con y sin

agitación.

Tomar el inóculo de bacterias con el asa y disgregar éste

“agitándolo” en las paredes del tubo o matraz, evitar la

formación de grumos.

b) Tomar el inóculo de hongos con el asa en forma de L y

sembrarlo en el matraz o en tubo, procurando tomar esporas

y micelio para disgregarlo en el medi

)Incubar los tubos y matraz con bacterias a 35° C/24 h, y el matraz con hongos a 28° C/ 5 días en

agitación a 120 rpm

5.7 ¿En qué casos se siembra en medio semisólido y cuáles son las precauciones que se deben

tomar? Tomar un inóculo de bacterias con el asa recta.

b) Sembrar por picadura, sumergiendo el asa hasta ¾ partes del medio SIM sin tocar el
fondo y sacar el asa verticalmente. (El crecimiento debe de darse en la línea de trazo en

el caso de que la bacteria sea no móvil, cuando es móvil el crecimiento se difunde a

través del medio). Esterilizar el asa una vez realizada la siembra.

c) Incubar los tubos a 37° C/ 24 h y observar los cultivos