Esta es una representación grafica de la estructura que tienen los cromatografos de líquidos

A continuación se describirán las partes que conforman este sistema:

RESERVORIOS
no deben de tener interacción con mi fase móvil, por lo tanto están hechos de
un material especial, como boro silicato.

Las tapas están elaboradas con teflón o polipropileno y esto con la finalidad de
no interaccionar con la fase móvil

En el interior de estos reservorios, vamos a tener unos filtros , mejor conocidos

como “buzos” que ayudan a impedir que entre alguna partícula al sistema.

 Las tuberías o las conexiones de un cromatografo de líquidos

tienen un diámetro muy pequeño.
 Es necesario filtrar la muestra previamente Para evitar
cualquier obstrucción en nuestro sistema.
 Es importante que sean uniones que sean inertes a la fase
móvil, a la muestra y al tipo de estándares que se están
utilizando.
 Es importante verificar que todo esté cerrado herméticamente para evitar que haya una pérdida de muestra, ya que
tener una fuga va modificar la calidad de muestra que vamos a analizar y puede desplazar nuestros tiempos de
retención, entre muchos otros problemas, por eso es importante seleccionar los conectores ideales y verificar que no
exista ninguna fuga en alguna de las uniones.

Tiene como objetivo impulsar la fase móvil a través de la columna y debe de

cumplir con ciertas especificaciones:
 Que sea reproducible
 Que sea precisa
 Que tenga un flujo laminar constante
 Una velocidad constante (si hay una alteración en LA
velocidad de flujo puede verse afectada nuestra
separación)

 Puede ser un automuestreador: En el automuestreador

podemos colocar los viales.

 O podemos tener una jeringa: Son jeringas especiales

para hacer inyecciones manuales
 Si es una jeringa y vamos a hacer una inyección manual, debemos verificar que esa jeringa sea inerte, que no tenga
alguna interacción con la muestra, que sea preciso, que el volumen de estándar que estamos inyectando sea
reproducible.
 En algunos casos es necesario que en este proceso de inyección, se presente una regulación de la temperatura,
porque algunas muestras o algunos estándares son muy inestables a temperaturas elevadas, como podrían ser
analitos que son muy susceptibles a la temperatura, en esos casos se mantiene al inyector o automuestreador a
temperaturas de 4 °C o de 10 °C, en algunos casos va ser necesario controlar esa temperatura en el automuestreador,
o al momento de hacer una inyección manual.
 Hay agujas de diferentes volúmenes, generalmente utilizamos la que va de 1 a 100 micro litros. *La cantidad que
inyectamos de muestra es muy pequeña.

 pasa fase móvil que proviene de la bomba

 se dirige hacia la columna cromatográfica

Posteriormente se inyecta la muestra

Esa muestra que nosotros inyectamos se va colocar en el “loop”
Hay loops de diferente tamaño
Cierta cantidad se va ir hacia la columna cromatográfica
Cierta cantidad se va ir hacia deshechos

 La fase móvil empieza a desplazar la nuestra muestra, para que la muestra se

dirija hacia la columna cromatográfica que es donde se va llevar a cabo ese
proceso de separación.
 Es donde se lleva a cabo la separación de los analitos
Va haber columnas cromatográficas para fase normal y para fase
reversa, cada una tiene sus particularidades y su tipo de polaridad
Va haber de diferentes tamaños
Vamos a tener columnas cromatograficas desde los 5 cm hasta los
30 cm
Va haber columnas cromatográficas con diferentes tamaños de
particula
 Diferentes diámetros
 Diferentes tipos de fase estacionaria, dependiendo lo que queramos retener, si queremos analizar muestras que son
muy polares o no polares, etc.
 Tenemos una amplia variedad de columnas cromatográficas
 Cada columna tiene sus cuidados, van a ser específicos:
-el intervalo de ph
-La temperatura
- Como lavarla
- *es importante revisar la hoja de cuidados especiales*

 Después de que se separan los analitos van a dar una respuesta

que será captada por un detector.
 Ese detector va depender mucho de las características o
propiedades fisicoquímicas del analito.

 Caracteristicas que debe de tener el detector:

 Buena relación señal/ruido, porque nos va permitir establecer un límite de detección o de cuantificación, esperaríamos
determinar cantidades muy pequeñas
 Que no sea afectado por cambios de temperatura o por composición de la fase móvil
 Debe ser compatible con el analito
 Debe de tener alta sensibilidad
 Debe dar una respuesta rápida
 Fácil de manejar
 Preciso
 Debe dar una respuesta lineal para que podamos correlacionar la concentración en función de la respuesta analítica que
nos dé.