ESCUELA DE BIOLOGÍA MARINA

LABORATORIO MICROBIOLOGÍA GENERAL

PRÁCTICA N°6
ACCIÓN DE LOS AGENTES FISICOS Y QUIMICOS SOBRE LOS
MICROORGANISMOS.

OBJETIVOS
Observar el efecto de algunos agentes físicos y químicos sobre el crecimiento y desarrollo
bacteriano
Explicar la diferencia entre los resultados obtenidos al utilizar el autoclave o la ebullición como
métodos para destruir las bacterias.
Probar algunos desinfectantes comerciales y conocer la acción de estos sobre los
microorganismos.

INTRODUCCIÓN
Para obtener el crecimiento óptimo de los microorganismos, no sólo son indispensables los
requerimientos nutricionales, sino otros factores ambientales tanto físicos como químicos. Un
agente físico es una condición física o propiedad física que causa un cambio, por ejemplo la
humedad, la temperatura, la presión osmótica, el pH, las radiaciones y los filtros bacteriológicos.
El crecimiento de los microorganismos se modifica o se limita al cambiar los factores ambientales
físicos en el medio. El conocimiento de los factores ambientales nos permite explicar la
distribución de los organismos en la naturaleza, sobre todo en el caso de organismos que son
patógenos, que causan deterioro en los alimentos o que dan lugar a pérdidas económicas en otras
formas. El manejo de estos factores se puede utilizar para el control del crecimiento microbiano,
por ello el empleo de sustancias desinfectantes, antisépticas que cumplan con ese objetivo

MATERIALES
• Pipetas
• Tubos estériles
• Cajas de Petri con agar nutritivo
• Hipoclorito de sodio
• Desinfectante
• Alcohol
• Autoclave
• Baño de agua a 60º C
• Baño de agua hirviendo
• Cepa de Staphylococcus aureus
• Cepas de Escherichia coli

PROCEDIMIENTO
1. Rotular 4 tubos numerados del 1 al 4 sembrados con E. coli o S.aureus

Numeración Tratamiento Tiempo

Tubo No.1 Autoclave 15 libras de presión 15 minutos
Tubo No. 2 Agua hirviendo o a 60º C 30 minutos
Tubo No. 3 No se someterá a tratamiento 5, 10, 20 min
Tubo No. 4 No se someterá a tratamiento 5, 10, 20 min
 2. ACCION DEL CALOR SOBRE LAS BACTERIAS.

• Los tubos marcados No. 1 llévelo al autoclave siguiendo las instrucciones.

• Los tubos marcados No. 2 colóquelos en el baño de agua hirviendo 30 minutos.

Una vez hecho el tratamiento térmico, siembra una asada de cada uno de los tubos sometidos a la
acción de calor en una caja de Petri con agar nutritivo, previamente rotulados.
INCUBACIÓN: Lleve los tubos inoculados a la incubadora a 37º C durante 24 horas.

3. ACCION DE LOS DESINFECTANTES SOBRE LAS BACTERIAS.

Alcohol 70%
• Tome una placa de agar nutritivo y divídala con un marcador en la parte posterior, marcando en
cada espacio 5, 10 y 20 min de Alcohol
• Coloque 5 ml del alcohol correspondiente en el tubo N° 3. Agite suavemente.
• De acuerdo con los tiempos marcados en las cajas de agar nutritivo (5-10-20 minutos), debe ir
tomando muestras del tubo N°3 y siémbrela en la parte correspondiente de la caja de agar
nutritivo. Realice esta siembra con asa.

Hipoclorito al 1%
• Tome una placa de agar nutritivo y divídala con un marcador en la parte posterior, marcando en
cada espacio 5, 10 y 20 min de Hipoclorito al 1%.
• Coloque 5 ml de hipoclorito en el tubo N°4. Agite suavemente.
• De acuerdo con los tiempos marcados en las cajas de agar nutritivo (5-10-20 minutos), debe ir
tomando muestras del tubo N° 4 y siémbrela en la parte correspondiente de la caja de agar
nutritivo. Realice esta siembra con asa.

4. INCUBACION: Incube las cajas de agar nutritivo que inoculo a 37º C durante 24 horas.

RESULTADOS

- Observe y registre los resultados, realice registro fotográfico

- Interpretar como afecta el agenté físico o químico a las bacterias y como influye el tiempo en
su efecto.
- Investigar:
1. Tiempo de acción de los desinfectantes
2. Tipos de desinfectantes
3. 10 nombres de desinfectantes comerciales
4. Cómo actúa un desinfectante frente a los microorganismos
5. Con qué criterio se usan los desinfectantes