[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO

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ITM

Práctica. Efecto del pH y la temperatura en el crecimiento microbiano

1. OBJETIVOS y Que el estudiante conozca el efecto del pH y la temperatura como parámetros de control del crecimiento microbiano.

2. INTRODUCCIÓN

El ambiente donde se desarrolla un microorganismo tiene una gran influencia sobre su crecimiento, al igual que las demás formas de vida. Los factores del medio se pueden clasificar en tres grupos: a) Físicos: temperatura, presiones externas, humedad. b) Químicos: pH, disponibilidad de nutrimentos, presencia de productos tóxicos. c) Biológicos: las interacciones microbianas entre las especies coexistentes. Algunos microorganismos están adaptados a los hábitats extremos, donde otros definitivamente no pueden sobrevivir. Pero hay factores ambientales que se controlan en condiciones de laboratorio con mayor frecuencia, además de los factores nutrimentales son los fisicoquímicos como: la temperatura y el pH. Todos los microorganismos tienen una temperatura óptima de crecimiento que los caracteriza, en la cual muestran su tasa más alta de crecimiento. También hay límites de temperatura, como la temperatura mínima a la cual son inactivos y la temperatura máxima, donde el crecimiento ya no es posible. De acuerdo a la temperatura microorganismos se clasifican en: y óptima de crecimiento, los

Psicrófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 0-20 °C. Por ejemplo, Polaromonas vacuolata, hallado en el océano Antártico, siendo su temperatura óptima es de 4 °C.
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La concentración de iones hidrógeno del medio afecta directamente a los microorganismos y las enzimas. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 9. e influye también en la disociación y solubilidad de moléculas que requieren. Por ejemplo. como algunas especies de Rhizobium. La mayoría de estos microorganismos son arqueas como Methanococcus igneus. MATERIALES y y y y y y y y y 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 5.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y Mesófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 20-40 °C. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. Dependiendo del pH en el cual se desarrollen los microorganismos se clasifican en: y Acidófilos: Crecen a pH menores de 5. Alcalófilos: Crecen a pH mayores a 9. 9 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. Sulfolobus y Thiobacillus que crece a pH 1-2 oxidando minerales de sulfuro para producir ácido sulfúrico. por lo cual al modificar estos factores la velocidad de crecimiento se puede alterar y causar la muerte de los mismos. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 7. Hipermófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 80100 °C. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. 3. y Cada microorganismo tiene un pH y temperatura óptimos. bacillus y algunas bacterias entéricas. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. por lo que se pueden emplear como factores de control de crecimiento microbiano. INGENIERÍA DE BIORREACTORES | a pH 7 a pH 5 a pH 9 a pH 7 a pH 5 a pH 9 2 . Termófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 40-80 °C.

Medir la D. PROCEDIMIENTO Se proporcionará a los alumnos. otros 2 tubos a 30 °C y los últimos 2 tubos a 45 °C durante 24-48 horas. EFECTO DEL pH 1. cultivos líquidos de bacterias: Escherichia coli y Lactobacillus sp.1 mL de la suspensión de esporas de hongos en cada sección. EFECTO DE LA TEMPERATURA 1. Etiquetando cada uno de las cajas y tubos para su correcta identificación. Preparar otra tres series de tres tubos ajustados a los mismos valores de pH del punto anterior pero utilizando soluciones amortiguadoras. 3 pipetas estériles. 4. 7 y 10. 2. inocular 3 con cada una de las cepas bacterianas. inocular 0. 5. 4. Preparar tres series de tres tubos de caldo de microinoculación ajustados a 3 diferentes valores de pH (5.1.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y y y y 1 asa de inoculación. 4. Y una suspensión de esporas de los hongos: Aspergillus niger y Penicillium roqueforti. 7 y 9) con solución de HCl 1 M o NaOH 1 M. Incubar una caja de Petri a 15 °C. 2. Microscopio Soluciones amortiguadoras de pH 4. Incubar 2 tubos de diferente cepa a 15 °C. véase tabla siguiente: INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 3 . 4. 3.O. Espectrofotómetro. En 3 cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa divididas en 2 secciones. 1 mechero Fisher. En 6 tubos de caldo de microinoculación ajustado a pH 7. otra a 30 °C y la última a 45 °C en forma invertida durante 72 horas y posteriormente hacer las observaciones macroscópicas y microscópicas.2.

9 1. 4. Comparar los resultados obtenidos con la bibliografía correspondiente. dejando 1 sin inocular como testigo. 5.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM pH K2HPO4 0. crece un poco (+). RESUTADOS A.2 M (mL) ------1 NaOH 0. Incubar los tubos a 35 °C durante 24-48 horas y medir la D.6 10 0. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica Temperatura 15 °C INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 4 . Inocular 0.1 mL de cada una de las cepas bacterianas en la serie de 4 tubos de caldo de microinoculación ajustados a diferentes pH con amortiguador y sin amortiguador. 6. CUADRO 1. Realizar observaciones macroscópicas y microscópicas. Inocular tres cajas de Petri con medio Agar Papa Dextrosa ajustado a 3 pH diferentes con cada una de las cepas de hongos.1 0.2 M (mL) Caldo nutritivo (mL) 8 8 8 4. 7. B.O.1 M (mL) 1. crecimiento abundante (+++). mayor crecimiento (++). Incubar las cajas de Petri por 72 horas. 5.2 M (mL) Ácido cítrico 0.9 ---- ------1 3.1 ---- Ácido bórico 0. Reportar los resultados en los siguientes cuadros de acuerdo al convenio: no hay crecimiento (-).4 7.

O.O. de la D. Morfología Morfología Morfología Morfología Temperatura de la D. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación) Escherichia coli Lactobacillus sp.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 30 °C 45 °C CUADRO 2. microscópica microscópica colonia colonia 15 °C 30 °C 45 °C CUADRO 3. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica 5 pH INGENIERÍA DE BIORREACTORES | .

[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 CUADRO 4a. microscópica microscópica colonia colonia 5 7 9 CUADRO 4b.O.O. pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación sin amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp. de la D. de la D. microscópica microscópica colonia colonia INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 6 . pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D.O.O. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación con amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp.

¿Cómo influyó el pH en el crecimiento de hongos y bacterias? ¿Qué diferencias se observaron en los medios de cultivo amortiguados y sin amortiguar? 3. CUESTIONARIO 1. Explique brevemente cuales son los mecanismos celulares que los microorganismos termófilos extremos y psicrófilos han desarrollado para adaptarse a condiciones extremas de temperatura y pH? 4.uam.uaemex. Extraido de: http://www. María de los Angeles. A. Serrano.mx/pdf/579/57937307..Vol. 2 Acidófilos y 2 alcalófilos. H. Manual de prácticas de microbiología general. Iztapalapa. (2005). REFERENCIAS y Aquiahuatl R. Revista mexicana de ciencias. y SandovaL. 37. ¿dentro de que clasificación entra E. 2 mesófilos. (2006). Reporte la bibliografía consultada.. Extradido de: http://redalyc.mx/materiales/licenciatura/diversos/ AQUIAHUATL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_pract icas_de. Num. 6.pdf Ramírez .? 2. 2 termófilos. Mencione el nombre de 2 microorganismos psicrófilos. Microorganismo extremófilos. J. Según los resultados obtenidos por el efecto de temperatura.pdf y INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 7 . 3. coli y Lactobacillus sp. N. 5.uamenlinea. actinomicetos en México.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 6.

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