[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO

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ITM

Práctica. Efecto del pH y la temperatura en el crecimiento microbiano

1. OBJETIVOS y Que el estudiante conozca el efecto del pH y la temperatura como parámetros de control del crecimiento microbiano.

2. INTRODUCCIÓN

El ambiente donde se desarrolla un microorganismo tiene una gran influencia sobre su crecimiento, al igual que las demás formas de vida. Los factores del medio se pueden clasificar en tres grupos: a) Físicos: temperatura, presiones externas, humedad. b) Químicos: pH, disponibilidad de nutrimentos, presencia de productos tóxicos. c) Biológicos: las interacciones microbianas entre las especies coexistentes. Algunos microorganismos están adaptados a los hábitats extremos, donde otros definitivamente no pueden sobrevivir. Pero hay factores ambientales que se controlan en condiciones de laboratorio con mayor frecuencia, además de los factores nutrimentales son los fisicoquímicos como: la temperatura y el pH. Todos los microorganismos tienen una temperatura óptima de crecimiento que los caracteriza, en la cual muestran su tasa más alta de crecimiento. También hay límites de temperatura, como la temperatura mínima a la cual son inactivos y la temperatura máxima, donde el crecimiento ya no es posible. De acuerdo a la temperatura microorganismos se clasifican en: y óptima de crecimiento, los

Psicrófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 0-20 °C. Por ejemplo, Polaromonas vacuolata, hallado en el océano Antártico, siendo su temperatura óptima es de 4 °C.
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La concentración de iones hidrógeno del medio afecta directamente a los microorganismos y las enzimas. Sulfolobus y Thiobacillus que crece a pH 1-2 oxidando minerales de sulfuro para producir ácido sulfúrico. INGENIERÍA DE BIORREACTORES | a pH 7 a pH 5 a pH 9 a pH 7 a pH 5 a pH 9 2 . Alcalófilos: Crecen a pH mayores a 9. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 7. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. bacillus y algunas bacterias entéricas. MATERIALES y y y y y y y y y 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 5. 3.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y Mesófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 20-40 °C. y Cada microorganismo tiene un pH y temperatura óptimos. Termófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 40-80 °C. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. por lo que se pueden emplear como factores de control de crecimiento microbiano. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. 9 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. Dependiendo del pH en el cual se desarrollen los microorganismos se clasifican en: y Acidófilos: Crecen a pH menores de 5. como algunas especies de Rhizobium. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. Hipermófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 80100 °C. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. La mayoría de estos microorganismos son arqueas como Methanococcus igneus. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 9. por lo cual al modificar estos factores la velocidad de crecimiento se puede alterar y causar la muerte de los mismos. e influye también en la disociación y solubilidad de moléculas que requieren. Por ejemplo.

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA 1. cultivos líquidos de bacterias: Escherichia coli y Lactobacillus sp. 5. EFECTO DEL pH 1. 2. Preparar otra tres series de tres tubos ajustados a los mismos valores de pH del punto anterior pero utilizando soluciones amortiguadoras. 3. 7 y 9) con solución de HCl 1 M o NaOH 1 M. inocular 3 con cada una de las cepas bacterianas.1 mL de la suspensión de esporas de hongos en cada sección. otra a 30 °C y la última a 45 °C en forma invertida durante 72 horas y posteriormente hacer las observaciones macroscópicas y microscópicas. En 3 cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa divididas en 2 secciones. Espectrofotómetro. inocular 0. PROCEDIMIENTO Se proporcionará a los alumnos. véase tabla siguiente: INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 3 . 4.2. Microscopio Soluciones amortiguadoras de pH 4. 4.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y y y y 1 asa de inoculación. En 6 tubos de caldo de microinoculación ajustado a pH 7. Incubar 2 tubos de diferente cepa a 15 °C. 3 pipetas estériles. 7 y 10. Y una suspensión de esporas de los hongos: Aspergillus niger y Penicillium roqueforti.O. 4. Incubar una caja de Petri a 15 °C. Etiquetando cada uno de las cajas y tubos para su correcta identificación. Preparar tres series de tres tubos de caldo de microinoculación ajustados a 3 diferentes valores de pH (5. otros 2 tubos a 30 °C y los últimos 2 tubos a 45 °C durante 24-48 horas. 4. 1 mechero Fisher.1. Medir la D.

6 10 0. Inocular tres cajas de Petri con medio Agar Papa Dextrosa ajustado a 3 pH diferentes con cada una de las cepas de hongos. Reportar los resultados en los siguientes cuadros de acuerdo al convenio: no hay crecimiento (-).O. B. 7.2 M (mL) ------1 NaOH 0. Incubar los tubos a 35 °C durante 24-48 horas y medir la D. crece un poco (+).9 ---- ------1 3. crecimiento abundante (+++). mayor crecimiento (++).1 ---- Ácido bórico 0. 5. Inocular 0. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica Temperatura 15 °C INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 4 .9 1. 5.1 M (mL) 1.1 mL de cada una de las cepas bacterianas en la serie de 4 tubos de caldo de microinoculación ajustados a diferentes pH con amortiguador y sin amortiguador.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM pH K2HPO4 0.1 0. 4. CUADRO 1. RESUTADOS A.2 M (mL) Ácido cítrico 0. 6. Comparar los resultados obtenidos con la bibliografía correspondiente. Incubar las cajas de Petri por 72 horas. Realizar observaciones macroscópicas y microscópicas.2 M (mL) Caldo nutritivo (mL) 8 8 8 4.4 7. dejando 1 sin inocular como testigo.

de la D.O.O.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 30 °C 45 °C CUADRO 2. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación) Escherichia coli Lactobacillus sp. Morfología Morfología Morfología Morfología Temperatura de la D. microscópica microscópica colonia colonia 15 °C 30 °C 45 °C CUADRO 3. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica 5 pH INGENIERÍA DE BIORREACTORES | .

microscópica microscópica colonia colonia 5 7 9 CUADRO 4b.O.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 CUADRO 4a.O. pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación sin amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp. de la D. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación con amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp. pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D.O. de la D.O. microscópica microscópica colonia colonia INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 6 .

. Num. y SandovaL..? 2. 2 termófilos. H. Reporte la bibliografía consultada.mx/materiales/licenciatura/diversos/ AQUIAHUATL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_pract icas_de. 2 Acidófilos y 2 alcalófilos. 6. J. María de los Angeles. Manual de prácticas de microbiología general.mx/pdf/579/57937307. ¿dentro de que clasificación entra E.pdf y INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 7 . Según los resultados obtenidos por el efecto de temperatura. ¿Cómo influyó el pH en el crecimiento de hongos y bacterias? ¿Qué diferencias se observaron en los medios de cultivo amortiguados y sin amortiguar? 3.uamenlinea.uam. A. Extraido de: http://www. Microorganismo extremófilos. Extradido de: http://redalyc.pdf Ramírez . CUESTIONARIO 1. 2 mesófilos. Serrano. 3. Explique brevemente cuales son los mecanismos celulares que los microorganismos termófilos extremos y psicrófilos han desarrollado para adaptarse a condiciones extremas de temperatura y pH? 4.uaemex. (2005). N. Mencione el nombre de 2 microorganismos psicrófilos.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 6. actinomicetos en México. Iztapalapa.Vol. 5. 37. Revista mexicana de ciencias. REFERENCIAS y Aquiahuatl R. (2006). coli y Lactobacillus sp.

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