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Efecto Del pH y La Temperatura en El Crecimiento no

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[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO

]

ITM

Práctica. Efecto del pH y la temperatura en el crecimiento microbiano

1. OBJETIVOS y Que el estudiante conozca el efecto del pH y la temperatura como parámetros de control del crecimiento microbiano.

2. INTRODUCCIÓN

El ambiente donde se desarrolla un microorganismo tiene una gran influencia sobre su crecimiento, al igual que las demás formas de vida. Los factores del medio se pueden clasificar en tres grupos: a) Físicos: temperatura, presiones externas, humedad. b) Químicos: pH, disponibilidad de nutrimentos, presencia de productos tóxicos. c) Biológicos: las interacciones microbianas entre las especies coexistentes. Algunos microorganismos están adaptados a los hábitats extremos, donde otros definitivamente no pueden sobrevivir. Pero hay factores ambientales que se controlan en condiciones de laboratorio con mayor frecuencia, además de los factores nutrimentales son los fisicoquímicos como: la temperatura y el pH. Todos los microorganismos tienen una temperatura óptima de crecimiento que los caracteriza, en la cual muestran su tasa más alta de crecimiento. También hay límites de temperatura, como la temperatura mínima a la cual son inactivos y la temperatura máxima, donde el crecimiento ya no es posible. De acuerdo a la temperatura microorganismos se clasifican en: y óptima de crecimiento, los

Psicrófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 0-20 °C. Por ejemplo, Polaromonas vacuolata, hallado en el océano Antártico, siendo su temperatura óptima es de 4 °C.
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3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 9. INGENIERÍA DE BIORREACTORES | a pH 7 a pH 5 a pH 9 a pH 7 a pH 5 a pH 9 2 . La concentración de iones hidrógeno del medio afecta directamente a los microorganismos y las enzimas. por lo que se pueden emplear como factores de control de crecimiento microbiano. MATERIALES y y y y y y y y y 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 5. como algunas especies de Rhizobium. Sulfolobus y Thiobacillus que crece a pH 1-2 oxidando minerales de sulfuro para producir ácido sulfúrico. Hipermófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 80100 °C. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. 3. Por ejemplo. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado con amortiguador. y Cada microorganismo tiene un pH y temperatura óptimos. 3 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. Dependiendo del pH en el cual se desarrollen los microorganismos se clasifican en: y Acidófilos: Crecen a pH menores de 5. por lo cual al modificar estos factores la velocidad de crecimiento se puede alterar y causar la muerte de los mismos. bacillus y algunas bacterias entéricas. Termófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 40-80 °C. 9 tubos con 7 mL de caldo de microinoculación ajustado sin amortiguar. e influye también en la disociación y solubilidad de moléculas que requieren. Alcalófilos: Crecen a pH mayores a 9. 2 Cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa ajustado a pH 7. La mayoría de estos microorganismos son arqueas como Methanococcus igneus.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y Mesófilos: Cuando su crecimiento es a temperaturas entre 20-40 °C.

[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM y y y y y y 1 asa de inoculación. 2. Y una suspensión de esporas de los hongos: Aspergillus niger y Penicillium roqueforti. inocular 0. 7 y 9) con solución de HCl 1 M o NaOH 1 M. Preparar otra tres series de tres tubos ajustados a los mismos valores de pH del punto anterior pero utilizando soluciones amortiguadoras. otra a 30 °C y la última a 45 °C en forma invertida durante 72 horas y posteriormente hacer las observaciones macroscópicas y microscópicas.1. 2. EFECTO DE LA TEMPERATURA 1. PROCEDIMIENTO Se proporcionará a los alumnos. En 6 tubos de caldo de microinoculación ajustado a pH 7. 4. cultivos líquidos de bacterias: Escherichia coli y Lactobacillus sp. 4. EFECTO DEL pH 1. 4. 1 mechero Fisher. Medir la D. 4. En 3 cajas de Petri con Agar Papa Dextrosa divididas en 2 secciones. Espectrofotómetro. Etiquetando cada uno de las cajas y tubos para su correcta identificación. Incubar una caja de Petri a 15 °C. 5. véase tabla siguiente: INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 3 .1 mL de la suspensión de esporas de hongos en cada sección. 3 pipetas estériles. Incubar 2 tubos de diferente cepa a 15 °C.O.2. inocular 3 con cada una de las cepas bacterianas. 7 y 10. 3. Preparar tres series de tres tubos de caldo de microinoculación ajustados a 3 diferentes valores de pH (5. Microscopio Soluciones amortiguadoras de pH 4. otros 2 tubos a 30 °C y los últimos 2 tubos a 45 °C durante 24-48 horas.

7. Incubar los tubos a 35 °C durante 24-48 horas y medir la D. crecimiento abundante (+++). Incubar las cajas de Petri por 72 horas.1 ---- Ácido bórico 0. 5. RESUTADOS A.1 0. Inocular tres cajas de Petri con medio Agar Papa Dextrosa ajustado a 3 pH diferentes con cada una de las cepas de hongos. Realizar observaciones macroscópicas y microscópicas.2 M (mL) ------1 NaOH 0.6 10 0. Comparar los resultados obtenidos con la bibliografía correspondiente. 6.4 7. dejando 1 sin inocular como testigo. Inocular 0.2 M (mL) Caldo nutritivo (mL) 8 8 8 4.1 M (mL) 1. B.1 mL de cada una de las cepas bacterianas en la serie de 4 tubos de caldo de microinoculación ajustados a diferentes pH con amortiguador y sin amortiguador. 5. 4. crece un poco (+). mayor crecimiento (++).2 M (mL) Ácido cítrico 0.9 1.9 ---- ------1 3. CUADRO 1. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica Temperatura 15 °C INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 4 .O. Reportar los resultados en los siguientes cuadros de acuerdo al convenio: no hay crecimiento (-).[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM pH K2HPO4 0.

Morfología Morfología Morfología Morfología Temperatura de la D.O. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación) Escherichia coli Lactobacillus sp. EFECTO DEL pH EN EL CRECIMEINTO MICROBIANO (Agar Papa Dextrosa) Aspergillus niger Morfología de la colonia Morfología microscópica Penicillium roqueforti Morfología de la colonia Morfología microscópica 5 pH INGENIERÍA DE BIORREACTORES | .O. microscópica microscópica colonia colonia 15 °C 30 °C 45 °C CUADRO 3. de la D.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 30 °C 45 °C CUADRO 2.

EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación con amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp.O. pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D.O.O.O. microscópica microscópica colonia colonia 5 7 9 CUADRO 4b. pH Morfología Morfología Morfología Morfología de la D. de la D.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 CUADRO 4a. microscópica microscópica colonia colonia INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 6 . EFECTO DEL pH EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO (Cultivo de Microinoculación sin amortiguador) Escherichia coli Lactobacillus sp. de la D.

uam. Manual de prácticas de microbiología general. REFERENCIAS y Aquiahuatl R.uaemex. A. Explique brevemente cuales son los mecanismos celulares que los microorganismos termófilos extremos y psicrófilos han desarrollado para adaptarse a condiciones extremas de temperatura y pH? 4. Extradido de: http://redalyc..mx/pdf/579/57937307. H. Microorganismo extremófilos. N.mx/materiales/licenciatura/diversos/ AQUIAHUATL_RAMOS_MARIA_DE_LOS_ANGELES_Manual_de_pract icas_de. Revista mexicana de ciencias. 3. y SandovaL. 2 termófilos.pdf y INGENIERÍA DE BIORREACTORES | 7 . coli y Lactobacillus sp. Reporte la bibliografía consultada. Num. Iztapalapa. 6. 5. ¿Cómo influyó el pH en el crecimiento de hongos y bacterias? ¿Qué diferencias se observaron en los medios de cultivo amortiguados y sin amortiguar? 3.[EFECTO DEL PH Y LA TEMPERATURA EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO] ITM 5 7 9 6. CUESTIONARIO 1.. (2005). Según los resultados obtenidos por el efecto de temperatura. 2 Acidófilos y 2 alcalófilos.uamenlinea. (2006). ¿dentro de que clasificación entra E. Mencione el nombre de 2 microorganismos psicrófilos. 2 mesófilos. Extraido de: http://www.Vol. María de los Angeles.pdf Ramírez . Serrano. 37.? 2. J. actinomicetos en México.

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