Laboratorio De Medios De Cultivo Y Hongos

Autores:
Claudia Marcela Gómez
Catalina Arboleda Franco
Yolanda Carmona
Geraldine Sanchez Rosero

Dr. Carlos Emilio Cabrera Matajira

Microbiología
Medicina Veterinaria – Universidad Santiago De Cali
Facultad De Ciencias Básicas.
 RECONOCIMIENTO DE TEJIDOS DE LOS ANIMALES-
ORGANOGRAFIA BASE

RESUMEN

En el siguiente laboratorio realizamos cultivos bacterianos, posterior observación y

estudio. Logrando conocer las dinámicas y diferencias entre cada microorganismo, es

importante tener en cuenta que un medio de cultivo adecuado para la investigación

microbiológica ha de contener, como mínimo; carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y

sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias

inductoras del crecimiento, (M, Casado, 2012) por otro lado; la observación

microscópica es importante al momento de realizar este tipo de estudios, puesto que hay

algunos hongos y bacterias que no se alcanzan a apreciar a simple vista y, finalmente el

estudio del antibiograma se realizó para conocer la sensibilidad y resistencia de algunas

bacterias a ciertas sustancias (A. Lucia, 2020).

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ABSTRACT

In the following laboratory we performed bacterial cultures, subsequent observation and

study. It is important to keep in mind that a suitable culture medium for microbiological

research must contain, as a minimum, carbon, nitrogen, sulfur, phosphorus and

inorganic salts. In many cases certain vitamins and other growth inducing substances

will be necessary, (M, Casado, 2012) on the other hand; microscopic observation is

important when performing this type of studies, since there are some fungi and bacteria

that cannot be seen with the naked eye and, finally, the study of the antibiogram was

performed to know the sensitivity and resistance of some bacteria to certain substances

(A. Lucia, 2020).

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ÍNDICE

1. Metodología

1.1. Medios de cultivo

1.2. Placas microscópicas.

1.3. Medios de cultivo

2. Resultados y diferenciación en los medios de cultivo

3. Análisis del antibiograma

4. Conclusiones

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METODOLOGIA

En la tercera práctica del curso de microbiología realizamos medios de cultivo

de bacterias. Para ello utilizamos 6 tipos de agar en los que posicionamos
diferentes microorganismos y después de 24 horas realizamos una
diferenciación entre ellos, conocimos su morfología, crecimiento y afinidades de
cada colonia bacteriana.

. En cada placa aislamos diferentes bacterias con protocolos establecidos en la

guía y al obtener los resultados tomamos una muestra fotográfica para
continuar con el desarrollo del siguiente taller.

También tuvimos la oportunidad de conocer la susceptibilidad y resistencia de

la bacteria Sthaphylocccus aeurus mediante la medida del diámetro del halo
generado por cada disco de antibiótico y finalmente analizamos el crecimiento
de los hongos filamentosos. Estos ya llevaban 4 días de crecimiento, situación
que nos permitió conocer sus características principales mediante la
observación microscópica.

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Medios de Cultivo

1. MEDIO DE CULTIVO AGAR MACCONKEY

Pseudomonas Medio de cultivo selectivo

aeruginosa y diferencial para bacterias
diseñado para aislar
selectivamente bacilos
Gram negativos y
E. coli
diferenciarlos sobre la base
de la fermentación de la
lactosa.

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Según el tipo de agar, es su coloración, el agar

MacConkey por estar formado por peptona, sales biliares,
ANÁLISIS cristal violeta, lactosa mono hidrato, cloruro de sodio.
Martin Passen (2021) “Las cepas que fermentan la lactosa
crecen como rojas o rosadas, las bacterias que no
fermentan la lactosa, conduce a la formación de colonias
blancas o incoloras formadas, estas colonias también
pueden verse de color dorado a marrón con centros
oscuros”.
La E. coli es un bacilo Gram negativo que no forma
E. coli esporas, miden 0.5 de ancho por 3 de largo, en agar
MacConkey las colonias son rojas con halo turbio debido
a la producción de ácido a partir de lactosa, la absorción
de rojo neutro y un cambio de color posterior del tinte
cuando el pH del medio cae por debajo de 6,8 (J. Canet
2016 )

Esta bacteria tiene forma de bastón aproximadamente de

Pseudomonas 0,5-1 µm de diámetro y de 1,5-5 µm de largo. Cuenta con
aeruginosa un flagelo polar que le brinda la motilidad necesaria. (A.
Cajal 2020)

2. MEDIO DE CULTIVO CHROMOCULT

E. coli
Diferenciador de bacterias
pertenecientes a la familia de
Enterobacteriaceae y que
comparten algunas
características bioquímicas.
K. neumoniae Son bacilos gramnegativos,
aerobios y anaerobios
facultativos, no esporulados.

Aquí nos encontramos con un cultivo selectivo y diferencial;

selectivo porque solo muestra las coliformes y diferencial porque
entre las coliformes hay fecales que son la E. coli, que se
ANÁLISIS manifiestan de color morado y las totales que se ven de color
rosado o rojizo K. neumoniae

Según J. Larrea (2010), Para el aislamiento de

E. coli microorganismos se utilizó la técnica por estría cruzada en
placas que contenían los medios de EMB (Eosina Azul de

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Metileno), McConkey, SS (Salmonella-Shigella) y para la

caracterización de los microorganismos, se utilizaron las
bioquímicas de Kligler, MIO (Movilidad, Indol, Ornitina),
LIA (Lisina, Hierro Agar), Urea y Citrato de Simons. El
recuento de coliformes se basa en la capacidad de
la ß-D-galactosidasa, una enzima que es característica
de las bacterias coliformes, para escindir el sustrato
Salmon-GAL.
Bacteria Gram negativa, encapsulada, no móvil, fermenta la
K. neumoniae lactosa, anaerobio facultativo. Son microorganismos saprofitos,
las cuales no pueden estar como biota normal, y las colonias son
de consistencia mucoide. Sierra. (2016)

3. CULTIVO AGAR CETRIMIDE:

Pseudomonas aeruginosa

E. coli

En el agar podemos Equipo transmicenidor.

observar una parte
transparente
correspondiente al espacio
ANÁLISIS del E. coli puesto que este
agar no es selectivo para él
y si es selectivo para las
Diferenciación y Pseudomonas. Por eso se
aislamiento de toma una coloración
Pseudomonas aeruginosa amarillenta clara
Emites rayos uv
(longitud de onda) que
brinda una coloración ultra
violeta a la Pseudomonas.
Dinámica que confirma la
presencia de estas en el
cultivo

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Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa es una especie de bacterias

Gram-negativas, aeróbicas, con motilidad unipolar. Es
un patógeno oportunista en humanos y también en
plantas. Como otras Pseudomonas, P. aeruginosa secreta
una variedad de pigmentos como piocianina,
fluoresceína y piorrubina.
tiene forma de bastón aproximadamente de 0,5-1 µm in
diámetro y de 1,5-5 µm de largo

4.. BAIRD PARKER

Medio selectivo y
diferencial para el
Sthaphylocccus sp
aislamiento y recuento de
estafilococos

En la colonia podemos observar un halo transparente

alrededor de cada Sthaphylocccus, estos tienen una
ANÁLISIS coloración negra brillante; su morfología es abultada; su
apariencia

Tiene forma de coco y puede aparecer en parejas, en

cadenas o en racimos. Su tamaño oscila entre 0,8 a 1,5
micras de diámetro, es inmóvil y algunas cepas
producen una cápsula externa mucoide 

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Sthaphylocccus sp

5. AGAR EMB

E. coli
medio diferencial utilizado
para el aislamiento de
Enterobacterias con
características específicas.
K. neumoniae

ANÁLISIS

K. neumoniae Bacterias con y sin cápsula; un tamaño entre 0.5 μm y

2.0 μm. forma parte de las entero bacterias, son bacilos,
Gram (-) negativos, La inmunofluorescencia es una
poderosa técnica de inmunomarcaje que utiliza
anticuerpos unidos covalentemente a moléculas
fluorescentes para identificar blancos específicos en
muestras celulares fijadas (R. Parada 2019)

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AGAR MUELLER HINTON

Vancomycin (0.6)

Piperacilin (1.7)

Amoxixilin (1.4)

Ampicilin (1.2)

Penicilin (1.6)

ANÁLISIS Amoxicilina: es un antibiótico

Primero con la ayuda de un hisopo semisintetico derivado de la penicilina, se
hicimos el rayado con los trata de un aminoácido penicilina, actúa
microorganismos sobre el agar, luego contra un amplio espectro de bacterias
colocamos los discos de antibiótico. tanto Gram negativa como gran negativas

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Entre más grande es el halo generado por

el antibiótico, más susceptible es la
bacteria a él. Puesto que este antibiótico
no la deja crecer y entre más pequeño, la
bacteria es más resistente. Para tener una
interpretación más completa tendríamos
que comparar las medidas con la tabla de
valores
En la primera placa observamos que la
bacteria Sthaphylocccus aeurus es
susceptible para los dos antibióticos, pero
con mayor sensibilidad al Piperacilin y en
la segunda placa observamos que la
misma bacteria es susceptible a los tres
antibióticos, con más susceptibilidad al
penicilin. Sin embargo, de todos los
antibióticos, el más efectivo resulta ser el
piperacilin y el menos efectivo es el
Vancomycin, por lo que en este último
se puede sospechar de una resistencia por
la diferencia de mediada en relación con
las otras
Piperacilin medicamento combinado que
contiene el antibiótico piperacilina y el
inhibidor de la b-lactamasa- tazobactam,
esta combinación tiene actividad con
muchas bacterias Gram positivas y
negativas, incluida Pseudomonas
aeruginosa.
Penicilina: las penicilinas son
antibióticos del grupo de los
betalactamicos empleados en el
tratamiento de infecciones provocadas
por bacterias sensibles, actúa con contra
numerosas bacterias aerobias Gram
positivas.
Vancomycin: la vancomicina pertenece a
una clase de medicamentos llamados
antibióticos glucopeptidos.
La ampicilina hace que disminuya la
eficacia de los anticonceptivos que
contienen estrógenos. En los tratamientos
prolongados, se evalúan periódicamente
los sistemas renal, hepático y
hematopoyético. En el recién nacido y en
prematuros, la eliminación del fármaco es
muy lenta. Durante su administración se
presentan superinfecciones por hongos o
por microorganismos no susceptibles.

 Alteración de las proteínas de unión a la penicilina (PBPs), lo que produce una

reducción de la afinidad de la piperacilina por objetivo la diana molecular de la

bacteria.

 Por otra parte, las alteraciones de la permeabilidad de la pared bacteriana, así

como la expresión de bombas de expulsión de multirresistencia, podrían causar o

contribuir a producir la resistencia bacteriana a piperacilina/tazobactam,

especialmente en bacterias Gram-negativas.

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 La resistencia a vancomicina es una realidad en S. aureus, mediada en el caso

por alteraciones en la pared celular que atrapan el antibiótico antes de llegar al

sitio de acción

HONGOS FILAMENTOSOS

Penicilinum sp Aspergillus Níger

Forma de pincel, se presentan en cadenas Al principio el micelio es blanco, luego

secas de conidios que se forman a partir de se va tornando oscuro y finalmente
la fiálide. La fiálide es una célula adquieren diversos colores, que van del
especializada del conidióforo. Federico negro azabache al pardo oscuro.
2019

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Microsporum Canis Microsporum Canis, Caracterizados

por presentar macroconidios de paredes
gruesas, fusiformes y equinulados.
Macroconidios fusiformes, equinulados,
se observa la pared gruesa y septos, son
hialinos. Azul de algodón Lactofeno.
Rodriguez 2016

ANEXOS DE MUESTRAS LISTAS DISPUESTAS EN EL LABORATORIO DE

MICROBIOLOGIA

A.niger Asperg

illus

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Candida Candid

Canis

micros

porum

CONCLUSIONES

El Agar en la microbiología es un elemento solidificante empleado para la preparación

de medios de cultivo, permiten el crecimiento de diferentes microorganismos como por

ejemplo las bacterias y los hongos, en el presente laboratorio se realizaron cultivos

comparativos con diferentes Agares permitiendo ver su crecimiento y diferencias,

también se realizaron pruebas de antibióticos en las muestras que es de suma

importancia en la medicina ya que permite dar un mejor diagnóstico más preciso para la

trata de enfermedades.

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