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Origen de la bioquímica y derivaciones

Introducción a la posteriores

La bioquímica tiene muchas derivaciones

bioquímica y métodos de Nuestro objeto de trabajo y estudio será la célula

estudio

Todas las enfermedades tienen un origen molecular,

siempre habrá una enzima, molécula que al no
cumplir una función va a alterar los procesos
metabólicos, cáncer, enfermedades genéticas,
diabetes, obesidad, consumo de drogas,
enfermedades nutricionales, etc.

eucarionte, sin embargo, para su investigación el ser

La bioquímica deriva de la química, y la química
deriva de la alquimia (ciencia oscura que ejercían
principalmente los árabes para convertir cualquier
elemento en oro).
Bioquímica: Explicación química de los procesos
biológicos. La bioquímica ha derivado la biología
molécula, la biotecnología, la genómica molecular, la
biología celular, la ingeniería genética y la
nutrigenomica.
*Ratón: Pequeño (Laucha)
*Rata: Grande (Huaren)
Fernanda Magdalena Aravena Ortega.
humano siempre busca modelos, como el algoritmo
de la bioquímica humana.
Metodología de la investigación en
bioquímica
Modelos de estudio en organismos vivos:
-Bacterias (E. coli)
-Levaduras (Sacaromyces cerviceae)
-Invertebrados (Caenorhabditis elegans)
-Ratón, monos, conejos, perros y gatos, voluntarios
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Modelos de estudio en sistemas no vivos -Uso de isotopos

-Bacteriófagos
-Virus animal, vegetal, oncogénicos
Partículas virales

No son organismos vivos, son estructuras

macromoleculares que para multiplicarse necesitan
infectar células vivas
Debido a su estructura se pueden modificar, de
modo que su infectibilidad disminuya y se pueden
usar como vehículo para modificar ciertas células
Niveles de complejidad en los modelos de
estudio

1) Centrifugación

-Una estructura metálica, contiene un rotor de

Perfusión es cuando se le inyecta a un órgano un
liquido y se mantiene vivo. Liquido de perfusión
Un tejido no esta formado por solo un tipo de célula,
es por esto que se recurre a aislar células que se
pueden mantener vivas mediante el cultivo celular,
también puedo separar estás células mediante el
fraccionamiento sub-celular.
Métodos analíticos aplicados
bioquímica
titanio y ahí tiene cavidades donde se pone tubos y
gira a muy altas velocidades. Un campo magnético
hace que levite y genere un giro. La centrifuga
preparativa y la ultracentrífuga herramientas para la
centrifugación diferencial y por gradiente de
densidad.
Ultracentrífuga, genera una fuerza de gravedad muy
grande girando a alta velocidad.
a la

-Centrifugación
-Cromatografía
-Electroforesis
-Diálisis

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a) Centrifugación diferencial
Para estudiar un tejido se utiliza la técnica de la
homogenización, esto se obtiene en una juguera
donde un tejido se introduce y se rompe el tejido y
células, es decir, estas liberan su contenido, por lo
que todo esto se somete a la centrifugación
diferencial.
Fraccionamiento subcelular por centrifugación
diferencial, esto le permite al investigador separar
los componente de la célula, por lo que es una muy
buena herramienta para el investigador
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b) Gradiente de densidad o Centrifugación Isopicnica
Separar moléculas por un sistema en el cual la
densidad cambia de una densidad mayor a una
menor, se hace mediante una técnica de vasos
comunicantes, dos recipientes que están unidos por
una llave y al lado derecho le pongo otra llave. Las
moléculas van a migrar hasta que su densidad sea
igual a la densidad del medio. Iso: densidad
Aporte de los químicos: Cloruro de Cesio (CsCl) que
cuando se somete a una centrifugación sola adquiere
una gradiente de densidad, eso se usa mucho para
separar ácidos nucleicos
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2) Cromatografía
Principio básico de la
cromatografía:
Movimiento de moléculas
por capilaridad
arrastradas por un
solvente
La diferente solubilidad
en el solvente determina
la migración de las
-Centrifugación diferencial para separar moléculas.
componentes, estructuras celulares Cuando el papel toma
-Gradiente de densidad, separar moléculas contacto con el liquido sube por capilaridad
La capacidad de sedimentación de una
macromolécula depende:
-Su peso molecular
-Su forma geométrica (esférica o alargada)
-La viscosidad del medio
Todas estas variables fisicoquímicas se tratan
matemáticamente y se obtiene un parámetro que se
denomina “coeficiente de sedimentación” y se
designa como S
Es una formula muy compleja que incluye todo lo
mencionado anteriormente
En general, a mayor S, mayor peso molecular, pero
no siempre coincide debido que también debe incluir Hay tres tipos:
la forma geométrica de estas a) Filtración en geles: La industria química fabrica
Dos moléculas con distinto peso molecular pueden geles que tienen huequitos muy calibrados, esta
tener un S similar, ya que, influye la forma de partículas tienen túneles, es por esto que pongo
geométrica de estas moléculas pequeñas y grandes, las pequeñas se irán
atrapando por estas columnas, en cambio los
Dos moléculas con igual peso molecular pueden
grandes van a pasar de largo y así separo moléculas
tener un S distinto.
pequeñas de moléculas grandes

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b) Resinas de intercambio iónico : La industria
química fabrica esferas que pueden tener cargas
negativas o cargas positivas, paso la muestra y las
cargas positivas son repelidas y salen por la columna,
en cambio las negativas se asociaran por la atracción
de cargas y saldrán o se quedaran
c) Cromatografía de afinidad: Se usa el ppo.
Reconocimiento antígeno-anticuerpo, fabrican
partículas que tienen anticuerpos, solo retienen las
partículas del antígeno y así se saca por ejemplo la
insulina y se determina la cantidad
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3) Electroforesis
Ppo. Básico de la electroforesis
Si yo tomo dos recipientes y le pongo un electrolito
(agua en la cual disuelvo un cloruro de sodio, es un
liquido que conduce la corriente eléctrica) , pongo
después un papel y pongo una muestra, entonces
tomo una batería que tiene un cátodo y un ánodo y
al pasar corriente las moléculas se van a separar,
carga negativa (cátodo) y carga positiva (ánodo). Las
estoy separando usando el principio de movilidad
por carga eléctrica . Se debe usar corriente continua
(betería o pila)

Purificación secuencial de una proteína mediante

diferentes procedimientos de cromatografía,
asociando o utilizando varios tipos de cromatografía
es posible separar con bastante pureza moléculas
que a veces no se pueden separar de otra manera

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Esta técnica es la que utilizo Sir Alec Jeffreys el
“padre del finger print” o huella del ADN, esta basada
en la electroforesis
4) Diálisis
Yo tomo una membrana semipermeable (con poros)
y la relleno con moléculas y lo someto a un recipiente
liquido, lo que ocurre es que las partículas pequeñas
que pasan por los poros aparecerán en el agua y las
partículas grandes se irán concentrando, si sigo
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haciendo esto el saco diálisis habrá separado las
moléculas pequeñas de las grandes
En los pacientes que se dializan se desea eliminar la
urea, la cual es nitrógeno toxico que se elimina
mediante la orina
5) Uso de isotopos
a) Radioactivos, que se están contantemente
descomponiendo, sin embargo, la radiación tiene
efectos nefastos en la salud, por lo cual su uso está
muy controlado (Carbono 14, Azufre 35, Potasio 40,
Fosforo 32, Tritio) Sin embargo el hierro 59 y el yodo
135, aun tienen uso clínico
b)Estables o pesados, se utilizan hoy en día, no
emiten radiación pero se pueden detectar (Deuterio,
Carbono 13, Nitrógeno 15, Oxigeno 18)
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