PROTOCOLO DE LABORATORIO

CURSO MICROBIOLOGÍA
Código 151006

Claudia Patricia Jiménez Forero

Directora de curso

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Bucaramanga, febrero 2021

1
 Contenido

Pág.

Introducción.................................................................................5
Actividad práctica 1 A. Medios de cultivo, métodos de siembra y
características macroscópicas de cultivos bacterianos.........................7
Actividad práctica 1 B. Siembra de Microbiota normal.......................18
Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos
bacterianos: Coloración de Gram...................................................22
Actividad práctica 3. Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos:
difusión en disco.........................................................................26
Actividad práctica 4. Caracterización macroscópica y microscópica de
hongos......................................................................................30
Actividad práctica 5. Parásitos de importancia en salud.....................35
Bibliografía.................................................................................40

2
 Lista de tablas

Pág.

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas condiciones

del medio ambiente.......................................................................7
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios sólidos10
Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en
cultivos sólidos............................................................................11

3
 Lista de figuras

Pág.

Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo...................................9

Figura 2 Árbol filogenético de la vida..............................................18
Figura 3 Características microscópicas observables en la coloración de
Gram.........................................................................................22
Figura 4 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos
filamentosos, levaduriformes y bacterias.........................................30

4
 Introducción

La Microbiología es la ciencia que estudia aquellos organismos vivos

cuyo tamaño se encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo
humano, desde luego, ciencia precedida por la invención del
microscopio, con sus principios estructurales tal como ahora se le
conocen, alrededor del año 1620. Un siglo después, la experimentación
en animales, el descubrimiento de los cultivos bacterianos, la relación
entre patógeno y patología, el perfeccionamiento de técnicas
microbiológicas, entre otros, abrió los canales para constituir el cuerpo
de conocimientos de esta ciencia.

Fue así como resultado de la observación y análisis, aquel otro reino

diminuto y antes inexistente por descubrir, trajo consigo nuevas ciencias
como la inmunología y la virología, afianzando la relación estrecha con
la Medicina. Hecho que no quedó allí puesto que estudios posteriores
sobre microbiota del suelo han resaltado la gran diversidad fisiológica de
los microorganismos y su ubicuidad, generando la necesidad de que
otras ciencias biológicas entraran a apoyar el estudio de
microorganismos, tales como la genética y la bioquímica, dando así paso
a la biología celular y molecular.
Por las atribuciones de esta ciencia, el amplio campo de acción y el
propósito de la comprensión cabal por parte del estudiante,
especialmente desde el punto de vista práctico, de lo que se debiese
hacer y cómo se debiese hacer, el curso de Microbiología de la Escuela
de Ciencias de la salud de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia
UNAD, está diseñado para que los estudiantes, a través de actividades
prácticas, lleven a cabo procesos para comprender, aplicar y desarrollar
nuevo conocimiento en el estudio de la Microbiología.
El objetivo propuesto aquí se divide básicamente en cuatro partes, una
que involucra aplicar conceptos en la resolución de problemas por parte
del estudiante, mediante el análisis de la información; otra que
desarrolla un pensamiento crítico y de análisis a través de la discusión;
una más, explicando los conceptos de microbiología con el lenguaje
técnico apropiado en los ejercicios académicos y, otra que contiene los
elementos generales para desarrollar habilidades en el estudiante, las

5
cuales les permitan la identificación de posible causalidad, factores de
riesgo y medidas preventivas en los eventos infecciosos en salud.
Por último, es bueno resaltar que esta guía no tiene la pretensión de ser
un profundo estudio teórico, ni una guía exhaustiva para el desarrollo de
prácticas, sino que principalmente se centra en interpretar lo mejor
posible a términos prácticos algunos aspectos propios de la
Microbiología, de modo que se facilite su manejo por parte de los
interesados.

6
 Actividad práctica 1 A. Medios de cultivo, métodos de siembra y
características macroscópicas de cultivos bacterianos

Introducción

Los medios de cultivo son una preparación compuesta de biomoléculas

conformadas por macronutrientes tales como carbono, oxígeno,
hidrogeno, nitrógeno, fósforo y azufre, y de micronutrientes como el
magnesio, cobalto, entre otros; cuyo fin es lograr el crecimiento,
transporte o mantenimiento de microorganismos. Su clasificación se
puede observar en la Figura 1.

Sin embargo, los medios de cultivo no son los únicos necesarios para
generar multiplicación y desarrollo de microorganismos, se hacen
necesarias condiciones físicas tales como el pH, temperatura, luz,
presión, entre otras, su conocimiento permite el diseño de métodos para
control o destrucción de poblaciones de estos organismos. Según sean
estas condiciones, se desarrollarán algunos microorganismos y otros no,
por ello se han establecido clasificaciones para cada condición (Tabla 1).

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas

condiciones del medio ambiente

Clasificación de
Condición Definición los Significado
microorganismos
Indica la Crecen entre
Acidófilas
concentración de pH 0 y 5.0 pH
H+ en una solución Crecen entre
pH Neutrófilas
e interfiere en el pH 5.0 y 8.0
funcionamiento de Crecen entre
Alcalófilas
biomoléculas pH 8.5 a 11.5
Pueden crecer
Magnitud que mide a 0°C, pero su
el calor de un Psicrófilas temperatura
Temperatura objeto e influye en optima es
la velocidad de las 15°C
reacciones Se desarrollan
Mesófilas
químicas en los 25-40°C
microorganismos Se desarrollan
Termófilas
45-60°C
Concentración El oxígeno es un Aerobias Se desarrollan

7
 Clasificación de
Condición Definición los Significado
microorganismos
gas incoloro e en 20% de O2
inodoro que Se desarrollan
de Oxígeno Anaerobias
interviene en en presencia o
facultativas
procesos de ausencia de O2
crecimiento Se desarrollan
Anaerobias
bacteriano en <2% de O2
Se expresa como Viven en
actividad de agua medios
Disponibilidad (aw) que es una hipertónicos y
Osmófilos
de agua medida del agua se subdividen
disponible para el en halófilos y
microorganismo sacarófilos.
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Conjunto a la creación de medios de cultivo y al descubrimiento de las

condiciones de crecimiento de los microorganismos, se han creado
métodos de siembra para cultivar y separar las diversas poblaciones de
microorganismos provenientes de las muestras a estudiar. La acción de
sembrar (o inocular) implica poner una porción de la muestra (ej. Agua,
alimentos, sangre, etc) en un medio de cultivo e incubarlo en
condiciones adecuadas. Según sea el medio de cultivo, se pueden
emplear instrumentos tales como: asas bacteriológicas, hisopos, pipeta
o asa de Drigalsky, teniendo en cuenta que todos ellos deben estar
estériles a la hora de hacer uso de ellos.

8
Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo.

Fuente: Rojas (2011). Conceptos y práctica de Microbiología general.

Manual.

En un medio líquido, el método de cultivo es relativamente sencillo,

consiste en agregar parte de la muestra al recipiente en dónde se
encuentra el medio; esa muestra puede agregarse con una pipeta o un
asa estéril. Mientras que, para los medios de cultivo sólidos, se han
generado diversos métodos (Tabla 2).

9
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios
sólidos

Método Proceso
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar
enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
Siembra en 3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma
picadura o vertical y en el centro del tubo con medio de
punción cultivo.
4. Saque el asa rápidamente y evite tocar las
paredes del tubo.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar
enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma
Siembra en estría vertical, en el borde inferior del tubo con medio
de cultivo inclinado.
4. Sacar, lentamente el asa, e inmediatamente
realizar estrías (líneas en zigzag) en la
superficie del medio, hasta su borde superior.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Suspender la muestra en un extremo de la caja
con medio de cultivo, realizando estrías –no
superpuestas- sobre una tercera parte de la
Siembra por caja.
agotamiento 4. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
enfriar.
5. Realizar estrías en dirección perpendicular a las
estrías antes hechas, comenzando en la última
estría.
6. Repetir el paso 4 y 5.
7. Esterilizar asa.
Siembra en 1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar
cuadricula enfriar.
2. Poner volumen de muestra en caja con medio
de cultivo, usando pipeta automática.
3. Distribuir la muestra con el asa, en forma de
línea recta por el centro del medio de cultivo.
4. Hacer estrías de lado a lado del medio de

10
 Método Proceso
cultivo y en sentido contrario a la línea recta
antes hecha.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías de lado a lado del medio y en sentido
contrario a las estrías hechas antes.
6. Esterilizar asa.
1. Destapar el hisopo estéril.
2. Introducir el hisopo en la muestra.
3. Sacar el hisopo y escurrirlo en las paredes del
recipiente dónde está la muestra.
4. Hacer estrías estrechas de lado a lado de la
Siembra con caja con medio de cultivo, desde el borde
hisopo superior hasta el borde inferior.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías estrechas de lado a lado del medio y en
sentido contrario a las estrías hechas antes.
6. Repetir el paso 5, tres veces más.
7. Arrojar el hisopo en Guardián de desechos.
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Hecho esto, posterior a la siembra de microorganismos, se espera

obtener crecimiento de microorganismos, el cual tendrá unas
características macroscópicas y microscópicas.

Las características macroscópicas de un microorganismo son todos

aquellos detalles observables a simple vista en los medios de cultivo
sembrados; en medios de cultivo líquidos se puede observar
enturbiamiento u opacidad (ligera, media o nula), precipitados o
sedimentos (compacto, polvoriento, granuloso, viscoso) o formación de
película. En los medios sólidos se pueden observar diversas
características de la morfología de las colonias, entre ellas la hemólisis,
la producción de pigmentos y las que se exponen en la tabla 3.

Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en

cultivos sólidos.

Características
Tamaño Grande >1mm
Mediano 1mm
Pequeño <1mm

11
 Características
Forma Puntiforme

Circular

Filamentosa

Irregular

Rizoide

Lanceolada

Borde Continuo

Ondulado

Lobulado

Espinoso, dentado o
lacerado

Filamentoso

Elevación Plana o aplastada

Convexa

Mamelonada

12
 Características
Pulvinada

Umbilicada

Superficie Lisa
Rugosa
Consistencia Blanda
Dura
Mucoide
Aspecto Brillante
Opaco
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de
Rojas 2011.

Objetivos

 Clasificar los diferentes tipos de medios de cultivo que se manejan en

el laboratorio de microbiología.
 Practicar los métodos de siembra de microorganismos en diferentes
medios de cultivo.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Gelatina de cualquier color (simulará el medio de cultivo),
palillos largos (simulará el asa bacteriológica), recipientes
redondos (simulará cajas de Petri) y un vaso angosto o tubo de
vidrio (simulará tubo de cultivo inclinado).
 Ver vídeo introductorio en: https://www.youtube.com/watch?
v=30htD86TWzE

13
Procedimiento-Ejercicio trazo de siembra

1. Preparación de un medio de cultivo simulado (en gelatina): Prepare

en casa gelatina de cualquier color, póngala en 3 moldes redondos
del tamaño de su mano, preferiblemente transparentes y de una
profundidad aproximada de 3 a 4 centímetros. Ponga gelatina en un
tubo o vaso con tapa, déjelo en la nevera con una inclinación
aproximada de 45° de tal manera que la gelatina coagule haciendo
una superficie inclinada respecto al tubo.
2. En uno de sus cultivos redondos, pase uno de los palillos haciendo
una siembra simulada por método de agotamiento. Recuerde no
romper la gelatina sólo evidenciar el trazo.
3. En otro de sus medios de cultivo redondo, pase uno de los palillos
haciendo una siembra simulada por método de estría.
4. El que le queda haga el mismo ejercicio y siembre en rejilla.
5. En el medio de cultivo simulado con inclinación, siembre por estría.
6. Tome fotografías de la ejecución de cada uno de los puntos
anteriores y anéxalas como evidencia en la pregunta 2 del
cuestionario.
Cuestionario y resultados
1. Complete la siguiente tabla con datos consultados en internet:

Utilidad (para qué

sirve, que grupo de
Nombre del medio Componentes del
bacterias ayuda a
de cultivo agar
identificar o crecen
en él)
 Digerido pancreático de
gelatina 17,0 g.
 Digerido pancreático de
caseína 1,5g. Es un medio de cultivo
 Digerido péptico de tejido selectivo que se utiliza para
animal 1,5 g. el aislamiento de bacilos
 Lactosa 10,0 g. Gram negativos de fácil
 Mezcla de sales biliares 1,5 desarrollo, los cuales, a
Agar MacConkey partir de muestras clínicas,
g.
 Cloruro de sodio 5,0 g. agua y alimentos permiten
 Agar 13,5 g. la diferenciación sobre l
 Rojo neutro 30,0 mg. base de la fermentación de
 Cristal violeta 1,0 mg. la lactosa.
 Agua destilada 1.000 Ml.

14
  Es un medio de cultivo
usado normalmente
como rutina para todo
tipo de bacteria.
 Es muy útil porque
permanece solido
incluso a relativamente
altas temperaturas.
 0,5 % de peptona.  Además, el crecimiento
 0,3 % de extracto de bacteriano en este agar
carne/extracto de levadura. lo hace en la superficie,
 1,5% de agar. por lo que se distingue
Agar Nutritivo  0,5% de cloruro de sodio. mejor las colinas
 Agua destilada. pequeñas.
 PH casi neutro (6,8) a 25  Sirve para el subcultivo
ºc. de especies,
mantenimiento de
cepas, contaje de
colinas, como base para
preparar agar de
sangre, entre otras.
 Escherichia coli.
 Staphylococcus aureus.
 Enterococcus faecalis.
 Es un agar semisólido y
diferencial,
especialmente diseñado
para ayudar la
identificación de algunas
bacterias,
principalmente de la
familia
enterobacteriaceae.
 Tiene como ventaja que
Está compuesto por tripteina, en un mismo tubo
peptona, sulfato de hierro, pueden observarse tres
Agar SIM sulfato de amonio, tiosulfato de características
sodio y agar. esenciales en la
identificación de las
enterobacterias.
 Es un medio semisólido
y diferencial utilizado en
la confirmación
presuntiva de miembros
de la familia
enterobacteriaceae,
especialmente de
salmonella y shigella.

2. Complete la siguiente tabla con los medios de cultivo empleados y

el esquema del tipo de siembra que realizó.

15
 Medio de cultivo Esquema o
(preparado en Tipo de Siembra fotografía de la
gelatina) siembra que realizó

Estría

Agotamiento

Rejilla

Estría

3. Averigüe 3 microorganismos diferentes que puedan cultivarse en

al menos 2 de los medios de cultivos tratados en la pregunta 1 e
indique: En qué condiciones de temperatura y tiempo se realiza la
incubación.
Agar MacConkey:
 Escherichia coli
 Klebsiella sp
 Salmonella
 Shigella
Para un litro de agar MacConkey se debe pasar 50 gr del medio
deshidratado, luego se coloca en una fiola y se disuelve en un litro de
agua destilada. Después de 10 minutos de reposo se calienta
mezclando constantemente hasta dejar hervir por 1 minuto.

16
Luego se coloca la fiola en la autoclave y se esteriliza a 121ºC por 20
minutos. Culminando el tiempo, se saca autoclave y se deja enfriar
hasta alcanzar una temperatura de 45ºC, para posteriormente servir
en placas de Petri estériles dentro de una campana de flujo laminar a
frente al mechero de Bunsen.
Dejar solidificar y guardar en un portaplaquero de forma invertida y
refrigerar en nevera a 2-8ºC hasta su uso.

Agar Nutritivo
 Streptococcus pyogenes
 Escherichia coli
 Staphyococcus aureus

Rehidratar 23g del medio en un litro de agua destilada. Reoisar 10 a

15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de
ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en
autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar
aproximadamente a 45ºC. Vaciar en cajas de Petri estériles. Conversar
en refrigeración de 2 a 8ºC.

4. Describa las características macroscópicas de las colonias

resultantes de la siembra en los medios de cultivo usados en el
siguiente video de la Universidad de Salamanca.
https://www.youtube.com/watch?v=6hfS1XbPfQk

Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada: E. Coli

Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño Mediano
Forma Elevación convexa, con bordes ondulados
Superficie Lisa
Consistencia Blanda
Aspecto Opaco
Color Blanco hueso o amarillo claro

Medio de cultivo Agar MacConkey (escoja uno de los cultivos

explicados en el vídeo) cepa sembrada: E.

17
 Coli
Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño Pequeño
Forma Una elevación mamelonada y borde filamentoso
Superficie Rugosa
Consistencia Dura
Aspecto Brillante
Color Turquesa

Medio de cultivo EMB levine cepa sembrada: E. Coli

Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño Grande
Con una elevación convexa, bordes espinosos,
Forma
dentado o lacerado
Superficie Rugosa
Consistencia Mucoide
Aspecto Brillante

Medio de cultivo EMB levine cepa sembrada: E. Coli

Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Color Verde metálico

Recuerde: 1. Ver el video, indicar la cepa sembrada en cada uno de los

Agares expuestos. 2. Describir las características de la cepa o
microorganismo en el cuadro respectivo y tomar la fotografía del vídeo o
dibujar lo que ve. 3. Si desea ampliar su observación puede buscar en
los siguientes Atlas microbiológicos la cepa sembrada en el agar
correspondiente.
Atlas disponibles para ampliar visualización:

18
Atlas de Socalemi: http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-
microbiologia (en este atlas puede revisar los microorganismos por su
clasificación)

Atlas de microbiología Online:

https://www.microbiologyinpictures.com/atlas%20de
%20bacteriologia.html (en este atlas debe hacer click sobre las fotos del
encabezado de la página para ver todos los recursos, hacer la búsqueda
y ampliar la visualización)

Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada: E. Coli

Características Descripción de la Dibujo o fotografía
macroscópicas cepa tomada del vídeo

Tamaño pequeña

Forma Lanceolada

Superficie Rugosa

Consistencia Dura

Aspecto Opaco

19
Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada: E. Coli
Características Descripción de la Dibujo o fotografía
macroscópicas cepa tomada del vídeo

Magenta oscura o fascia

Color
fuerte

Agar MacConkey (escoja uno de los cultivos

Medio de cultivo explicados en el vídeo) cepa sembrada: E.
Coli
Características Descripción de la Dibujo o fotografía
macroscópicas cepa tomada del vídeo

Tamaño Mediano

Crema opaca, con

Forma
bordes ondulados

Superficie Lisa

Consistencia Cremosa

20
 Aspecto Brillante

Color Ligeramente amarilla

Actividad práctica 1 B. Siembra de Microbiota normal.  

Introducción

El árbol filogenético de la vida consta de tres dominios: Bacteria,

Archaea y Eukarya, siendo un dominio el rango taxonómico más alto de
los organismos. Muchos miembros de los dos primeros dominios
mencionados viven una vida simbiótica dentro de nosotros.

Figura 2 Árbol filogenético de la vida

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de

Woese, 1996.

21
El cuerpo humano aloja comunidades microbianas complejas cuya
población supera a nuestras propias células en al menos un factor de
10. Con el fin de caracterizar la ecología de las comunidades
microbianas asociadas con el hombre, los Institutos Nacionales de Salud
lanzaron en 2007 el Proyecto Microbioma Humano y en el 2012 se
publicaron los siguientes resultados: 4.788 muestras analizadas de 33
hábitats, tanto femeninos como masculinos, que representaban cinco
áreas principales del cuerpo (cavidad oral y orofaringe, piel, fosas
nasales, tracto gastrointestinal y vagina) de 242 adultos sanos. Las
comunidades encontradas en cada uno de los hábitats del cuerpo
poseían una fuerte especialización en su sitio, tanto dentro de este como
entre individuos. Así mismo, se observó que, dentro de los hábitats, la
variabilidad interpersonal es alta, mientras que los individuos presentan
una variabilidad temporal mínima.

Los análisis de la diversidad taxonómica asociada con la microbiota

humana -colección de microorganismos que están presentes en una
comunidad de un hábitat corporal definido- se han convertido en tema
de gran importancia, ya que estudiar los taxones comúnmente
compartidos, en comparación con los menos prevalentes, permite
establecer un elemento de base para comparar personas sanas o
enfermas.

La microbiología médica moderna se centró en microorganismos

patógenos, considerando a la microbiota normal como una población de
microbios vasta y desconocida. Sin embargo, esta visión ha ido
cambiando, el estudio de esta ha emergido como un importante factor
en la fisiología y la enfermedad en humanos.

Las relaciones entre los cerca de 100 trillones de simbiontes microbianos

y el cuerpo humano nos han facilitado la extracción de energía de los
alimentos, proporcionado factores de crecimiento, promovido la
diferenciación y función de la mucosa, estimulado el sistema inmune y
proporcionado resistencia a la colonización por patógenos. Si la
microbiota afecta la fisiología humana, los cambios de su composición
pueden alterar la homeostasia del huésped y, por tanto, incrementar el
riesgo a enfermar. De hecho, en enfermedades como el asma, la
obesidad, la vaginosis bacteriana y la enfermedad inflamatoria intestinal
se han encontrado comunidades microbianas alteradas. Lo anterior,
también sugiere que se si se conoce la composición de la microbiota

22
normal, se pueden generar intervenciones para su restablecimiento y,
por lo tanto, se puede superar la situación de enfermedad.

Objetivo

 Evidenciar la diversidad de microorganismos existentes en las

diferentes zonas del cuerpo humano en estado de salud.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Ver vídeo de microbiota humana de la Universidad de Sevilla
en: https://www.youtube.com/watch?v=TVVfAEdpj7I

Cuestionario y resultados

1. Complete ¿qué géneros de microorganismos pueden encontrarse en

las siguientes zonas anatómicas?

Zona Microorganismos Morfología y afinidad

tintorial

Piel Staphylococcus spp. Coco-Gram positivo

Boca  Lactobacillus Gram positivas y

 Actinobacillus gramnegativos
 Staphyloccus
 Streptococcus

Tracto  Estreptococos Bacilos gramnegativos

23
respiratorio  Estafilococos
superior  Micrococos
 Neisserias
 Moraxella
catarrhalis
 Corinebacterias
 Haemophilus spp
 Porphyromonas
 Prevotella
 Fusobacterium
 Veillonela
 Peptotreptococcus
 Actinomyces
 Pneumoniae
 Streptococcus
pyogenes
 Cryptococccus

Tracto  Clostridium Gram positivas y gran

gastrointestinal  Eubacterium negativos
 Faecalibacterium
 Bacteroides
 Bifidobacterium
 Streptococcus
 Escherichia coli
 enterobacteriacae

Tracto genital  chalmydia Gram positivas y gran

trachomatis negativo.
 neisseria
gonorrhoeae
 treponema pallidum
 ureaplasma
 urealyticum
 mycoplama
 lactobacilos (L.
crispatus, L. iners)
 pseudomonas

24
  Acinetobacter
 Vagacoccus
 Sphingobium

2. Reporte en la siguiente tabla, 3 microorganismos diferentes entre

sí, que pertenezcan a nuestra microbiota humana y que haya listado en
la tabla anterior. Explique en qué medio de cultivo los pondría crecer y
porqué.

Nombre del Porque escoge

Medio de cultivo este medio de
Microorganismo
cultivo
Se utiliza
usualmente en
cualquier tipo de
bacteria, es muy útil
por que permanece
solido e incluso a
relativamente altas
temperaturas.
Agar nutritivo  estreptococos
Además, el
crecimiento
bacteriano en este
agar lo hace en la
superficie, por lo
que se distingue
mejor las colonias
pequeñas.
El cual permite
evidenciar un buen
crecimiento de
bacterias ácidos
Agar MacConkey  escherichia coli
lácticos Gram
positivas; tales
como los
lactobacillus.
Agar Sabouraud  Cryptococcus Es un medio de
cultivos que por sus

25
 características
funciona como
medido de
enriquecimiento
para hongos y que
en caso de contener
cloranfenicol u otro
antibiótico, se
convierte en un
medio selectivo para
los mismo.

3. Registre las referencias citadas, usando norma APA

 https://es.wikipedia.org/wiki/agarMacCokey
 https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_nutritivo
 https://www.biocodexmicrobiotainstitute.com/es/intestinal

Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos

bacterianos: Coloración de Gram

Introducción

Dentro de las técnicas de diagnóstico directo en enfermedades

infecciosas se emplea frecuentemente el examen microscópico, con el
propósito de observar las características de los microorganismos de la
muestra a estudiar. Dicho examen puede hacerse a través de la
realización de una preparación en fresco de la muestra o se puede
realizar coloreando la misma. Dentro de las coloraciones más empleadas
en la Microbiología se encuentra la coloración de Gram, la cual fue fruto
de la curiosidad del médico Danés Hans Christian Joachim Gram, en
1884, cuando este examinaba tejido pulmonar obtenido de un paciente
fallecido por neumonía, observando que las bacterias presentes en la
muestra tomaban diferentes coloraciones cuando se les colocaban
distintos colorantes.

26
Pero ¿para qué hacer coloración? Los microorganismos no solo son
invisibles para el ojo humano, sino que también son semitransparentes;
esto hace que su visualización a través del microscopio sea aún más
difícil. Por lo anterior, la coloración de Gram permite revelar tamaño,
forma, agrupación y afinidad tintorial (Figura 1), características que
hacen posible la clasificación de microorganismos.

Figura 3 Características microscópicas observables en la

coloración de Gram.

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Con la coloración de Gram se pueden establecer dos grandes grupos de
bacterias: Gram positivas y Gram negativas. Las bacterias Gram
positivas se observarán moradas, debido a que retienen el complejo
cristal violeta-lugol, a pesar de la exposición a la solución de alcohol-
acetona; mientras que las bacterias Gram negativas se observaran
rojas, debido a que no retienen el complejo cristal violeta-lugol y por lo
tanto dejan el espacio al colorante de contraste: la safranina. Esta
diferencia en la afinidad tintorial está dada por la pared celular
bacteriana, compuesta de peptidoglicano o mureína, que para las
bacterias Gram positivas es más gruesa y forma más entrecruzamientos
que en las bacterias Gram negativas.

En conclusión, esta coloración es un gran aporte al estudio de las

enfermedades infecciosas; técnica sencilla, rápida y que aporta
información valiosa a la hora de apoyar un diagnóstico, ya que no sólo
permite identificar el microorganismo sino que esta puede sugerir
antimicrobianos efectivos para tratar el mismo.

27
Objetivos

 Conocer la coloración de Gram en las muestras a estudiar.

 Clasificar las bacterias por su afinidad tintorial, su morfología y
agrupación.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Hojas blancas y colores, o uso de Word con herramientas para
gráficos con colores.
 Ver vídeo de coloración de Gram de la Universidad de Navarra
en: https://www.youtube.com/watch?v=nqzDzuwOvXo
 Revise la clasificación de las bacterias con tinción de Gram en el
simulador JOVE https://www.jove.com/v/10513?
language=Spanish
(Recuerde habilitar subtítulos en español haciendo click en el
logo de cc)

Cuestionario y resultados

1. Describa el paso a paso de la realización de una tinción de Gram, por

medio de un esquema gráfico (o flujograma) que incluya dibujos y
colores acorde con dicho procedimiento. Puede realizarlo a mano o en
Word.

28
2. Mencione cuales fueron las tinciones que se ven en el video –
simulador de JOVE, menciones 2 diferencias de las otras tinciones
respecto a la coloración de Gram.

3. Explique ¿Por qué las bacterias Gram positivas no se decoloran

cuando se les agrega la solución de alcohol-acetona?

No se decoloran porque ellos tienen una capa muy gruesa de

peptidoglicano formado entrecruzamiento retenido el complejo cristal
violeta, no se decoloran por su resistencia las gran positivas se ponen
de color azul después de la decoloración, las gran positivas no son
permeables al disolvente porque deshidrata la pared celular y cierra
poros.

4. Según el video de la coloración de Gram, diligencie la siguiente tabla.

Características
Gram positivas Gram negativas
microscópicas
Estreptococo,
Morfología estafilococo, sarcina Cocos y diplococos
y tetracoco.
Absorben y
No retienen el cristal
conservan el
violeta conservan el
colorante cristal
colorante rojo por
Afinidad tintorial violeta son
ejemplo safranina
susceptibles a la
son susceptibles a las
penicilina y
cefalosporinas.
estreptomicina
Agrupación Cadenas Parejas

Dibujo o fotografía de
las bacterias y el color
que toman con la
tinción de Gram
finalizada

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

29
 Actividad práctica 3. Prueba de susceptibilidad a
antimicrobianos: difusión en disco.

Introducción

Los antimicrobianos son compuestos que hemos empleado para

combatir los microorganismos causantes de infecciones. Entre estos se
encuentran los antiprotozoarios, los antivirales, los antimicóticos o
antifúngicos y los antibacterianos. Pero en este perpetuo combate,
algunos microorganismos han desarrollado adaptaciones que los hacen
resistentes a la acción de estos compuestos, mientras que otros
permanecen siendo sensibles, esta manifestación determinará el efecto
terapéutico de un antimicrobiano.

Las pruebas de susceptibilidad a antivirales, antiprotozoarios y

antihelmintos son complejas, costosas y no suelen realizarse en el
laboratorio clínico; mientras que las pruebas de susceptibilidad a
antibacterianos –denominadas también antibiogramas- son las mejores
estandarizadas y las más empleadas. Por su parte, las pruebas que se
hacen para antimicóticos aún están en estandarización.

A pesar de lo expuesto, las pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos

tienen por objetivo tratar de predecir el efecto terapéutico de un
antimicrobiano y aunque han sido realizadas tanto in-vitro como in-vivo,
en los laboratorios clínicos se lleva a cabo la primera modalidad, bajo
30
recomendaciones emitidas por entidades internacionales o nacionales.
Sin embargo, estas pruebas in-vitro sólo contemplan el antimicrobiano y
el microorganismo, mas no las variables en ser humano (ej. interacción
con proteínas, variación de concentración con el tiempo, distribución del
antimicrobiano en los tejidos), que es en dónde se da la enfermedad
infecciosa.

La susceptibilidad a los antibacterianos esta categorizada en tres

grupos: sensible, intermedio, resistente. Una bacteria es sensible si
esta es inhibida por una concentración de un antimicrobiano que se
asocia a una alta probabilidad de éxito terapéutico. Por otro lado, una
bacteria es resistente si es inhibida por una concentración de un
antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad de fracaso
terapéutico. Mientras que, en la categoría de susceptibilidad intermedia,
se encuentra la bacteria que es inhibida in vitro por una concentración
de un antimicrobiano que se asocia a un efecto terapéutico incierto.

Existen diversos métodos para evaluar la susceptibilidad a

antibacterianos, pero dentro de los más usados se encuentra el método
de Kirby-Bauer o difusión en disco. Este consiste en que se siembra el
microorganismo en estudio, de manera masiva, en un agar
estandarizado y posteriormente se colocan discos de papel impregnados
con una concentración dada de antibacteriano, que corresponde a
niveles que pueden obtenerse si el antimicrobiano se administra
sistémicamente. A medida que los antibacterianos se difunden en el
medio van matando el microorganismo en estudio-si este es sensible-, y
de esta manera se van generando unas zonas sin crecimiento
microbiano, cuyo diámetro se corresponde con la categoría de
susceptibilidad del microorganismo.

Objetivos

 Conocer la prueba de susceptibilidad a antibacterianos por difusión

para microorganismos determinados.
 Interpretar la zona de inhibición para los microorganismos en
estudio.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

31
  Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Ver vídeo Bacterias, Antibióticos y Resistencia de Medlineplus
en: https://www.youtube.com/watch?v=ODgdIVu1xac

Cuestionario y resultados

1. Ingrese a Educaplay, y realice el crucigrama Resistencia a los

antibióticos alojado en: https://es.educaplay.com/recursos-
educativos/4992454-resistencia_a_antibioticos.html de este
crucigrama, tome captura de pantalla cuando lo haya completado.

2. Investigue y defina los siguientes conceptos:

Betalactámicos: los antibióticos betalactamicos, cuyo mecanismo de

acción es la inhibición de la última etapa de la síntesis de la pared
celular bacteriana, constituyen la familia más numerosa de
antimicrobianos y la más utilizada en la práctica clínica. Se trata de
antibióticos de acción bacteriana lenta, con actividades dependiente
del tiempo, que en general tiene buena distribución y escasa
32
 toxicidad. Algunas modificaciones de la molécula original han dado
lugar a compuestos con mayor espectro antimicrobiano, pero la
progresiva aparición de resistencia limita su uso empírico y su
eficacia en determinadas situaciones.

Resistencia microbiana: la resistencia de los antimicrobianos

(farmacorresistencia) se produce cuando los microorganismo, sean
bacterias, virus, hongos o parásitos, sufren cambios que hacen que
los medicamentos utilizados para curar las infecciones causadas por
ellos dejen de ser eficaces.
La resistencia antimicrobiana es un problema continuo y en un
aumento. Se hace un mayor cuando un microorganismo presenta
más de un mecanismo de resistencia y cuando tiene la facultad de
trasmitirlo no solo a su descendencia, sino también a otras bacterias
de su misma o diferente especie.

Antibióticos: se denominan antibióticos a las sustancias que tienen

la capacidad de eliminar o interrumpir el crecimiento y la proliferación
de diversos microorganismo patógenos. Esto se debe a que los
antibióticos pueden actuar como bactericidas o desarrollar una acción
bacteriostática.

Amplio espectro: es el campo o poder de acción de efectividad y

eficiencia que poseen los antibióticos, con relación a la eliminación
total de la bacteria o microorganismo que se quiera atacar a mayor
aspecto de antibiótico es mayor la probabilidad de eliminar el
microrganismo, pero así también es mayor la probabilidad de
eliminar el microorganismo, pero así también es mayor la exposición
que tendrá nuestro cuerpo o para ser más exactos nuestro riñones
que son los encargados de sintetizar y eliminar los residuos que
quedan de los antibióticos utilizados.

3. Observe las siguientes fotografías y registre el resultado obtenido y

su interpretación en el siguiente cuadro, recuerde que la numeración
de los sensidiscos es igual en todas las fotografías.

Resultado e Interpretación
Interpretación (Describa
Resultado (Sensible o
porque es sensible o
Fotografía Resistente a cada
resistente según lo que
antibiótico)
puede observar)

33
 Con relación a la
imagen observamos
que el radio de acción
de la muestra 1 y 2 es
superada por la bacteria
de la E.COLI, la cual
nos hace entender que
esta bacteria es
resistente a estos
antibióticos y su poder
de acción no se vio
1.resistente
disminuido en ningún
2.resistente
momento, a
3. sensible
comparación de la
4. sensible
muestra 3 y 4 las
cuales evidencian la
eficiencia y la eficiencia
del antibiótico
utilizando, ya que se
observa que tiene
controlado el campo de
acción de la bacteria y
que la misma es
sensible a este tipo de
antibiótico.
1. resistente Con relación a la
2.resistente imagen observamos
3. sensible que el radio de acción
4. sensible de la muestra 1 y 2 es
superada por la bacteria
de la
STAPHYLOCOCCUS
AUREUS, a diferencia de
la muestra con E.COLI,
podemos observar que
el radio de dispersión
de la bacteria es menor
y más compacta que el
de E. COLI, pero sin
embargo sigue
habiendo una

34
 resistencia bacteriana al
antibiótico, a
comparación de las
muestras 3 y 4 las
cuales evidencian la
eficacia y la eficiencia
de del antibiótico,
utilizado ya que se
observa que tiene
controlado el campo de
acción de la bacteria y
que la mismo es
sensible a este tipo de
antibióticos.
1. resistente Con relación a la
2. resistente imagen observamos
3. sensible que el radio de acción
4. sensible de la muestra 1 y 2 es
superado por la bacteria
SALMONELL
TYPHIMURIUM,
podemos concluir que
tanto en las muestra
anteriores con
diferentes bacterias los
dos primeros ambiticos
no son antibióticos de
amplio espectro o que
las bacterias son
resistentes a los mismo
y por ello sobrepasan
su campo de
efectividad, y sigue
prevaleciendo la
eficiencia y la eficacia
de los antibióticos de la
muestra 3 y 4, ya que
se mantiene su
estabilidad bactericida o
bacteriostática contra
las bacterias

35
 estudiadas, y sigue
siendo sensibles al
antibiótico.
Observando esta última
imagen evidenciamos
que hay un leve cambio
de las muestras 1 y 2 a
diferencia de las demás
imágenes ya vista
anteriormente, en esta
vemos que el campo de
acción de la bacteria se
ve un poco disminuido a
las otras bacterias
anteriormente
1. resistente estudiadas, esto nos
2. resistente puede dar a entender
3. sensible que la bacteria es algo
4. sensible sensible a estos
antibióticos pero no en
su totalidad para logar
eliminar por completo y
sigue prevaleciendo la
eficiencia y la eficacia
de los antibióticos de la
muestra 3 y 4 ya que se
mantiene su estabilidad
bactericida o
bacteriostática contra
las bacterias
estudiadas. Y sigue
siendo sensibles al
antibiótico.
Fuente fotografías: F. Benakashani et al., (2016). Biosíntesis of silver
nanoparticles using Capparis spinosa L. leaf extract and their antibacterial
activity, Karbala International. Journal of Modern Science
http://dx.doi.org/10.1016/j.kijoms.2016.08.004

4. Usted tiene que seleccionar 4 antibacterianos para hacer la prueba de

susceptibilidad a antimicrobianos de una cepa de S. aureus (Indique
sus nombres). En la siguiente tabla mencione 3 aspectos que tendría
36
 en cuenta para hacer esta selección, explíquelos brevemente y con
sus palabras.

Aspectos Explicación
Efectividad y eficaciaPara poder controlar este tipo de bacterias
debemos primero que todo tener en cuenta
cual es la efectividad y eficacia, que tendrá
el antibiótico para cambiar la bacteria y así
mismo no causar una resistencia bacteriana
o eventos adversos debido a la utilización
del antibiótico
Sensibilidad y resistencia Debemos de conocer el tipo de S.aureus
que se va a tratar para sí poder tomar una
decisión en cuento al tratamiento a utilizar,
debido a que esta familia de bacterias
genera resistencia a ciertos tipos de
antibióticos, para poder estar más claro qué
tipo de antibióticos a utilizar es importante
realizar un antibiograma, para saber a qué
es sensible o resistente la bacteria a tratar.
Espectro de acción Es muy importante conocer el espectro de
acción del antibiótico, ya que así podemos
sobre qué tanta exposición tendrá nuestro
cuerpo y nuestros riñones al antibiótico y
que repercusiones podrá tener el mismo,
esto en cuento a pacientes con fallas
renales y lo otro también podemos saber
que efectividad tendrá nuestro tratamiento
y el tiempo, dosis frecuencia en la que se
debe administrar el antibiótico.

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

 https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/
s2405609x16302159·fig7
 https://definicion.de/antibiotico/
 https://es.wikipedia.org/wiki/staphylococcus_aureus·tratamiento
 https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-

37
microbiologia-clinica28-articulo-antibioticos-betalatamicos-
s0213005x08000323

38
 Actividad práctica 4. Caracterización macroscópica y
microscópica de hongos.

Introducción

Los hongos son organismos conformados por células eucariotas y

agrupadas dentro del dominio Eukarya, siendo diferentes de los
protozoos, los animales y las plantas. De estos se han identificado
aproximadamente 200.000 especies, y sólo 100 generan infección en el
humano. Las infecciones causadas por estos hongos se denominan
micosis, es la micología médica quien se encarga de estudiarlas y a los
hongos raíz de la cadena causal.

Estos organismos no hacen fotosíntesis, son heterótrofos, saprofitos y

pueden llegar a ser parásitos. Adicionalmente, habitan diferentes
entornos tales como las mucosas de mamíferos, tierra, superficies
abióticas, entre otros. Poseen una pared celular constituida de
polisacáridos, que en su mayoría son quitina, mananos y α glucanos.

De acuerdo a sus características morfológicas, los hongos pueden ser

macroscópicos (ej. Champiñones) o microscópicos. Los hongos
microscópicos pueden presentar dos estructuras fúngicas básicas: las
Hifas (filamentos) que son filas de células que crecen apicalmente y
cuyo conjunto se denomina micelio; y las levaduras (blastoconidias) que
son estructuras ovaladas o esféricas unicelulares.

Figura 4 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos

filamentosos, levaduriformes y bacterias

39
Fuente: *Mold (Filamentos), Yeast (levadura). Tomado de Wolfe (2014).

De acuerdo a lo anterior, desde una perspectiva clínica, los hongos se

pueden agrupar en filamentosos y levaduriformes. Sin embargo, hay
unas especies de hongos que pueden ser filamentosos en la naturaleza
o en el laboratorio (a menos de 30 °C) y, en cambio, presentarse como
levaduriformes en los tejidos (a 37 °C). Estos son llamados hongos
dimórficos y algunos de ellos son: Candida albicans, Sporothrix schenkii,
Histoplasma capsulatum y Paracoccidioides brasiliensis.

Los cultivos de hongos pueden presentar dentro de sus características

macroscópicas, una apariencia cremosa –propia de los hongos
levaduriformes-; o apariencias: correosa, aterciopelada, algodonosa,
polvorienta y granulosa –propias de hongos filamentosos-.

Objetivo

 Identificar características macroscópicas y microscópicas de los

hongos.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

 Guantes y tapabocas
 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Explorar el Atlas Socalemi, sección de micología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
 Ver vídeo Levaduras y Hongos en:
https://www.youtube.com/watch?v=rT5cFN0fOYY

Procedimiento

1. Deje a la intemperie una fruta o pan por al menos 5 días o busque en

su hogar una fruta, verdura o pan que tenga apariencia de estar
contaminada con hongos. Recuerde al tomarla y manipularla ponerse
guantes y tapabocas con anterioridad.

40
2. Tómele fotos, obsérvela de cerca, describa lo que observa. recuerde
durante la observación no tocarla directamente, no respirar u oler la
fruta, verdura o pan seleccionado, no estornude, no sople o quite el
nada de allí.
3. Deseche cuidadosamente los guantes, tapabocas, y elementos
contaminados y posteriormente lávese las manos adecuadamente.

1. Paso 2. Paso
3. Paso
Detecte cambio en Utilice todos los
elementos de Deseche lo
apariencia contaminado
bioseguridad
Colores blanco, café Continué con el
o negro Observe y describa
cuestionario

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2020)

Cuestionario y resultados

1. ¿Cuáles son los agares más usados para hongos?

 Agar Sabouraud
 Agar Neopeptone-Glucose-Rose Bangel-Aureomycin
 Agar Czapek (para Aspergillus, Penicillium y hongos
Relacionados
 Agar YEAST Extract-Malt Extract- Glucose
 Agar Diamalt (para Levaduras)
 Agar – Dextrosa – Patata (Pda)
 Agar – caldo de Guisantes Sacarosado
 Agar – Harina de Avena (Oma)
 Agar Agua (Aa)

41
2. De acuerdo al cultivo micótico de la fruta verdura o pan complete el
siguiente cuadro.

Describa las
Fotografía Investigue que
Características
de la Fruta, Describa las tipos de hongos
microscópicas
Verdura o Características pueden haber
del hongo que
Pan macroscópicas atacado la Fruta
supone crece en
contaminado verdura o pan
él
 Se observa El moho blanco es el El moho tarde en
aspectos que comúnmente salir unos 4-5 días,
necróticos y suele aparecer en el una vez que
acuosos. tomate. El moho aparecen las
 Una película blanco es una primeras motas, su
grande de enfermedad causada crecimiento es rápido
color blanco. por el hongo y van aumentado
 Se emite un Sclerotinia hasta cubrir toda la
olor a fétido scleroiorum. Este superficie del
como patógeno tiene una tomate. Cuando el
fermentado. amplia distribución a moho ya ocupa la
 Hundimientos nivel mundial y superficie de la que
en el fruto. afectado a dispone, deja de
 Debilidad y numerosas especies. crecer (debido a que
flacidez del no tiene más
fruto. espacio) y por el
 Se observa peso que ocupa que
que el tomate se ha formado se va
perdió su hundiendo,
totalidad roja reduciendo la
y brillante a cantidad de tomate.
un tono más Formas ovaladas o
opaco. alargadas
unicelulares, son
muy parecidas entre
especies. La mayor
parte de ellos crecen
con vellosidades en
el sustrato, formado
colonias grandes y
concéntricas.

42
  Se observan Antracnosis es causa Los colletrotrichum son
manchas generalmente por parte del grupo de los
oscuras en el colletrotrichum hongos ascomicetos.
fruto. gloeosporioides, Estos organismos se
 Se evidencia aunque C. acutatum caracterizan por
necrosis también ha sido presentar una
abundante en diagnosticado, y estructura reproductora
el fruto. explicado en el ciclo de en forma de saco.
 También se estos hongos. Las
observa una lesiones causadas por La reproducción sexual
decoloración colletrotrichum siempre involucra la
de la pulpa. acutatum generalmente producción de un asca
 Debilidad y se desarrollan de forma con dos o más
flacidez del más lenta y especulan ascosporas haploides.
fruto. más abundante mente Toleran temperaturas
 Se le siente que las causadas por C. de entre 10 y 40 ºC,
un olor a gloeosporiodes. pero su temperatura,
podredumbre. óptima de desarrollo es
 Muchas y Podredumbre del de 28ºC.
hundimientos pedúnculo: diversos
hongos han sido Durante el proceso de
en la piel infección, las especies
externa. reportados como
causantes de la Fito patógenas del
pudrición del pedúnculo genero colletrotrichum
en diferentes regiones inicialmente colonizan
productora; muchos de las células vivas de la
los hongos causantes planta rompiendo la
de la pudrición de pared celular pero sin
pedúnculo se presentan penetrar la membrana
como endófitos en los plasmática de estas
tejidos del pedúnculo. células (esto evita la
La infección también se muerte progresiva de
puede dar en el células).
momento de cosecha a
través de la superficie
de corte del pedicelo
del fruto.

3. Los hongos filamentosos pueden causar infecciones en humanos

¿Qué condiciones debe tener un ser humano para ser infectado por
estos hongos?

Si actualmente los hongos filamentosos son los causantes de

infecciones del tracto respiratorio de los seres humanos, las alergias
con hongos filamentosos son muy comunes. Son causados por esporas
de moho transmitidas por el aire. Cuando las esporas ingresan el
tracto respiratorio el sistema inmune responde estas como si fueran
microbios dañinos. Los síntomas pueden incluir estornudos, tos y
43
dificultad para respirar. Los síntomas pueden ser más severos en las
personas que tienen asma u otras enfermedades respiratorias. La
exposición a largo plazo a las esporas de moho también podría
debilitar el sistema inmune.
Los hongos filamentos crecen tanto en interiores como exteriores. En
interiores, crecen en las duchas, sótanos y otros lugares húmedos, el
moho de interiores pueden causar más problemas que el moho de
exteriores, debido al espacio cerrado y confinado. Además la mayoría
de las personas pasa más tiempo en interiores que en exteriores.

4. De las siguientes fotografías al microscopio, defina por sus

características que hongo cree ver:

A. Aflatoxinas, estos hongos son infecciosos

pero se encuentran algunos que causan
enfermedades graves por que algunas personas
tiene un sistema débil como por ejemplo el
asma.

B. Levadura de las heces además son hongos

unicelulares del grupo de los ascomicetos.

44
 C. Micruspuron, hongos que es causado por la
tiña de la cabeza (tiñacorporis)

Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest e imágenes de google de

acceso libre.

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

 https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=s0001-60022004000400004
 https://prezi.com/qcojujkyfj8d/medios-de-cultivo-para-
hongos/
 https://www_ck12.org/book/ck-12-conceptos-biolo
%c3%ada/section/8_16/

45
 Actividad práctica 5. Parásitos de importancia en salud.

Introducción

La parasitología es la división de la biología que tiene por objeto de

estudio el parasitismo generado por protozoarios, helmintos y
artrópodos; siendo el parasitismo la relación simbiótica en la cual un
organismo (parásito) vive a expensas de otro (denominado huésped) y
le ocasiona daño.

Los protozoarios son organismos eucariotas, unicelulares, que no poseen

pared celular, heterótrofos -en su mayoría-, algunos móviles según el
aparato de locomoción que posean, con reproducción asexual y sexual.
Los helmintos son organismos eucariotas, pluricelulares que conforman
gusanos que se pueden clasificar en tres filum: platelmintos, nematodos
y acantocéfalos; sin embargo, los parásitos de importancia médica se
encuentran en los dos primeros filum mencionados.

Los platelmintos son gusanos planos de simetría bilateral, que pueden

ser de vida libre o endoparásitos, no poseen sistema circulatorio, pero si
un sistema digestivo. Estos gusanos se clasifican en tres clases, siendo
las clases Trematoda (duelas) y Cestoda (tenias) en donde se localizan
parásitos de humanos y animales. Los nematodos son gusanos
cilíndricos, no segmentados que mudan periódicamente su cutícula y se
reproducen sexualmente, depositando aproximadamente 200.000
huevos por día. Poseen sistema digestivo completo (boca-ano) y su boca
presenta estructuras particulares adaptadas a su estilo de alimentación.
Dentro de este grupo se encuentran el oxiuro (Enterobius vermicularis),
el trichuro (Trichuris trichiura), las uncinarias (Ancylostoma spp. y
Necator spp.), nematodo (Ascaris lumbricoides) y la triquina (Trichinella
spiralis).

Por otra parte, los artrópodos son animales invertebrados cuya

característica principal es la presencia de apéndices articulados. Así
mismo, poseen simetría bilateral, ojos compuestos, un exoesqueleto
conformado por quitina y segmentación variable en donde se pueden
encontrar los apéndices articulados; por ejemplo, en insectos se pueden
identificar tres segmentos: cabeza, tórax y abdomen. En su mayoría son
ovíparos, pero en algunos grupos puede darse la ovoviviparidad y la
viviparidad. Estos animales se dividen en cuatro grupos: Quelicerados

46
(arañas, ácaros), Crustáceos, Hexápodos (insectos: moscas, mosquitos,
pulgas, piojos), Miriápodos (ciempiés y milpiés).  Su importancia radica
en que estos pueden causar patologías directas (parasitosis, reacciones
alérgicas) o patologías indirectas, debido a que pueden actuar como
vectores o huéspedes intermediarios de microorganismos patógenos.

Finalmente, para que los protozoarios, helmintos y artrópodos lleguen a

ser parásitos tienen que existir ciertas condiciones tanto del parasito
como del huésped, entre ellas se encuentra la cantidad de parásitos
inoculados, factores de virulencia, fase del parásito y la susceptibilidad
del huésped.

Objetivo

 Observar parásitos causantes de enfermedades de importancia en

salud pública.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Explorar el Atlas Socalemi, sección de parasitología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
 Ver vídeo Parásitos en: https://www.youtube.com/watch?
v=RTI1DB42BZ4

Cuestionario y resultados

1. ¿Qué son las geohelmintiasis? Mencione 5 medidas preventivas para

estas parasitosis.

Se refiere a la infección causada por ingestión de alimentos o bebidas

contenidas con huevos de gusanos procedentes del suelo, o por
penetración de larvas o gusanos de estos parásitos a través de la piel
cuando el suelo está contaminado con materia fecal. Afecta más a los
niños y niñas; el grupo de entre 5 y 14 años concentra el 80% de la
carga parasitaria.

Los geohelmintos deben ser evitados y pueden ser controlados con

47
medidas como:

 Lavar cuidadosamente las manos después de defecar, antes de

comer o de manipular y preparar alimentos o luego de jugar.
 Usar permanentemente botas, zapatos o tenis; no son
aconsejables las chanclas o las sandalias.
 Hervir el agua durante al menos 10 minutos, si creemos que la
calidad es dudosa.
 Lavar con agua potable las verduras y otros alimentos crudos
antes de consumirlo.
 No usar nunca las heces o aguas servidas como fertilizantes de
las huertas.
 Cocinar adecuadamente los alimentos y mantenerlos en áreas
limpias y fuera del alcance de insectos, roedores y otros
animales.

2. Observe las siguientes fotografías y complete la tabla:

A. B.

C. D.

48
Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest, Wikipedia e imágenes de
google de acceso libre.

Tipo de
parasito
Nombre
Nombre (protozoari Características Patología con
del
del o, helminto observadas para la que se
organis
organismo (huevo- su tipificación relaciona
mo
adulto),
artrópodo)
A. Trichuris Nematodo Huevos de La tricuriasis
trichiura aphasmidia trichuris trichiura. (tricurosis o
Nótese su tricocefalosis)
características
forma de barril y
sus tapones
mucoides
polares, su
contenido es
granulado y fino.
B. Sifonápter artropodo Las pulgas son Tifus peste
os (pulga) invertebrados bubónica
pequeños (de 1,5
a 3,3 mm de
largo) carecen de
alas, muy
angiles, de color
generalmente
oscuro.
C. Guardia protozoario Ovalada hasta giardiasis
lamblia elipsoidal y
miden de 11 a 14

49
 Tipo de
parasito
Nombre
Nombre (protozoari Características Patología con
del
del o, helminto observadas para la que se
organis
organismo (huevo- su tipificación relaciona
mo
adulto),
artrópodo)
Um (largo: 8 a
19 um). Los
quistes maduros
presentan 4
núcleos y en los
2 quistes
inmaduros, se
observan fibrillas
intracitoplasmatic
as.
D. Tripanoso protozoario Es un organismo Tripanosomia
ma brucei unicelular sis africana
alargado de 20 (o
um de largo y 1- enfermedad
3 um de ancho, del sueño)
cuya forma
estructura de
membrana varia
a lo largo de su
ciclo de vida.

3. De acuerdo a lo observado en el vídeo y lo que ha consultado ¿qué

características hacen que los parásitos sean exitosos infectando
poblaciones? Explique, brevemente, su repuesta.
Las principal características que ayudad a los paracitos a ser exitosos
para infectar a cualquier población, es que son organismos
unicelulares y microscópicos, los cuales son de difícil avistamiento
para los seres humanos, también otra característica es que se
encuentran en nuestro entorno como lo son nuestros alimentos, en el
agua en el lugares húmedos, en el suelo o viene como huésped como
lo podemos ver en nuestros animales, por estas características en los
parásitos son tan latentes en la infección de la población.

50
4. Registre las referencias citadas, usando norma APA

 https://es.wikipedia.org/wiki/trichuris_trichiura
 https://es.wikipedia.org/wiki/giardia_lamblia
 https://es.wikipedia.org/wiki/Ctenocephalides_canis
 https://es.wikipedia.org/wiki/trypanosoma_brucei
 https://www.lifeder.com/trypanosoma-brucei/·morfologia

51
 Bibliografía

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Interamericana. Cápitulo 2. Recuperado de
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Capparis spinosa L. leaf extract and their antibacterial activity,
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