MICROBIOLOGIA

PROTOCOLO DE LABORATORIO

Estudiantes:
José David Prieto Viveros
Codigo:1.054.556.191

Grupo: 151006_57

Tutor(a):
Diego Mauricio Gutiérrez Meneses

Mariquita-Tolima
Junio 20 del 2020

1
 PROTOCOLO DE LABORATORIO
CURSO MICROBIOLOGÍA
Código 151006

Claudia Patricia Jiménez Forero

Directora de curso

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Bucaramanga, mayo 2020

2
 Contenido

Pág.

Introducción................................................................................................................5
Actividad práctica 1. Medios de cultivo, métodos de siembra y características
macroscópicas de cultivos bacterianos.....................................................................7
Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos bacterianos: Coloración
de Gram...................................................................................................................18
Actividad práctica 3. Siembra de Microbiota normal...............................................22
Actividad práctica 4. Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos: difusión en disco.
.................................................................................................................................26
Actividad práctica 5. Caracterización macroscópica y microscópica de hongos....30
Actividad práctica 6. Parásitos de importancia en salud.........................................35
Bibliografía...............................................................................................................40

3
 Lista de tablas

Pág.

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas condiciones del medio

ambiente....................................................................................................................7
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios sólidos...............10
Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en cultivos sólidos.11

4
 Lista de figuras

Pág.

Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo.........................................................9

Figura 2 Características microscópicas observables en la coloración de Gram.. . .18
Figura 3 Árbol filogenético de la vida.......................................................................22
Figura 4 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos filamentosos,
levaduriformes y bacterias.......................................................................................30

5
 Introducción

La Microbiología es la ciencia que estudia aquellos organismos vivos cuyo tamaño se

encuentra por debajo del poder resolutivo del ojo humano, desde luego, ciencia
precedida por la invención del microscopio, con sus principios estructurales tal como
ahora se le conocen, alrededor del año 1620. Un siglo después, la experimentación en
animales, el descubrimiento de los cultivos bacterianos, la relación entre patógeno y
patología, el perfeccionamiento de técnicas microbiológicas, entre otros, abrió los
canales para constituir el cuerpo de conocimientos de esta ciencia.

Fue así como resultado de la observación y análisis, aquel otro reino diminuto y antes
inexistente por descubrir, trajo consigo nuevas ciencias como la inmunología y la
virología, afianzando la relación estrecha con la Medicina. Hecho que no quedó allí
puesto que estudios posteriores sobre microbiota del suelo han resaltado la gran
diversidad fisiológica de los microorganismos y su ubicuidad, generando la necesidad
de que otras ciencias biológicas entraran a apoyar el estudio de microorganismos, tales
como la genética y la bioquímica, dando así paso a la biología celular y molecular.
Por las atribuciones de esta ciencia, el amplio campo de acción y el propósito de la
comprensión cabal por parte del estudiante, especialmente desde el punto de vista
práctico, de lo que se debiese hacer y cómo se debiese hacer, el curso de Microbiología
de la Escuela de Ciencias de la salud de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia
UNAD, está diseñado para que los estudiantes, a través de actividades prácticas, lleven
a cabo procesos para comprender, aplicar y desarrollar nuevo conocimiento en el
estudio de la Microbiología.
El objetivo propuesto aquí se divide básicamente en cuatro partes, una que involucra
aplicar conceptos en la resolución de problemas por parte del estudiante, mediante el
análisis de la información; otra que desarrolla un pensamiento crítico y de análisis a
través de la discusión; una más, explicando los conceptos de microbiología con el
lenguaje técnico apropiado en los ejercicios académicos y, otra que contiene los
elementos generales para desarrollar habilidades en el estudiante, las cuales les
permitan la identificación de posible causalidad, factores de riesgo y medidas
preventivas en los eventos infecciosos en salud.
Por último, es bueno resaltar que esta guía no tiene la pretensión de ser un profundo
estudio teórico, ni una guía exhaustiva para el desarrollo de prácticas, sino que
principalmente se centra en interpretar lo mejor posible a términos prácticos algunos
aspectos propios de la Microbiología, de modo que se facilite su manejo por parte de
los interesados.

6
 Actividad práctica 1. Medios de cultivo, métodos de siembra y características
macroscópicas de cultivos bacterianos

Introducción

Los medios de cultivo son una preparación compuesta de biomoléculas conformadas

por macronutrientes tales como carbono, oxígeno, hidrogeno, nitrógeno, fósforo y
azufre, y de micronutrientes como el magnesio, cobalto, entre otros; cuyo fin es lograr el
crecimiento, transporte o mantenimiento de microorganismos. Su clasificación se puede
observar en la Figura 1.

Sin embargo, los medios de cultivo no son los únicos necesarios para generar
multiplicación y desarrollo de microorganismos, se hacen necesarias condiciones físicas
tales como el pH, temperatura, luz, presión, entre otras, su conocimiento permite el
diseño de métodos para control o destrucción de poblaciones de estos organismos.
Según sean estas condiciones, se desarrollarán algunos microorganismos y otros no,
por ello se han establecido clasificaciones para cada condición (Tabla 1).

Tabla 1 Clasificación de los microorganismos según algunas condiciones del

medio ambiente

Clasificación de los
Condición Definición Significado
microorganismos
Indica la Crecen entre
Acidófilas
concentración de H+ pH 0 y 5.0 pH
en una solución e Crecen entre
pH Neutrófilas
interfiere en el pH 5.0 y 8.0
funcionamiento de Crecen entre
Alcalófilas
biomoléculas pH 8.5 a 11.5
Pueden crecer
Magnitud que mide
a 0°C, pero su
el calor de un objeto Psicrófilas
temperatura
Temperatura e influye en la
optima es 15°C
velocidad de las
Se desarrollan
reacciones químicas Mesófilas
25-40°C
en los
Se desarrollan
microorganismos Termófilas
45-60°C
El oxígeno es un Se desarrollan
Aerobias
gas incoloro e en 20% de O2
Concentración
inodoro que Se desarrollan
de Oxígeno Anaerobias
interviene en en presencia o
facultativas
procesos de ausencia de O2
crecimiento Se desarrollan
Anaerobias
bacteriano en <2% de O2
Disponibilidad Se expresa como Osmófilos Viven en

7
 Clasificación de los
Condición Definición Significado
microorganismos
actividad de agua medios
(aw) que es una hipertónicos y
de agua medida del agua se subdividen
disponible para el en halófilos y
microorganismo sacarófilos.
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Conjunto a la creación de medios de cultivo y al descubrimiento de las condiciones de

crecimiento de los microorganismos, se han creado métodos de siembra para cultivar y
separar las diversas poblaciones de microorganismos provenientes de las muestras a
estudiar. La acción de sembrar (o inocular) implica poner una porción de la muestra (ej.
Agua, alimentos, sangre, etc) en un medio de cultivo e incubarlo en condiciones
adecuadas. Según sea el medio de cultivo, se pueden emplear instrumentos tales
como: asas bacteriológicas, hisopos, pipeta o asa de Drigalsky, teniendo en cuenta que
todos ellos deben estar estériles a la hora de hacer uso de ellos.

8
Figura 1 Clasificación de los medios de cultivo.

Fuente: Rojas (2011). Conceptos y práctica de Microbiología general. Manual.

En un medio líquido, el método de cultivo es relativamente sencillo, consiste en agregar

parte de la muestra al recipiente en dónde se encuentra el medio; esa muestra puede
agregarse con una pipeta o un asa estéril. Mientras que, para los medios de cultivo
sólidos, se han generado diversos métodos (Tabla 2).

9
Tabla 2 Métodos para el cultivo de microorganismos en medios sólidos

Método Proceso
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma vertical
Siembra en
y en el centro del tubo con medio de cultivo.
picadura o punción
4. Saque el asa rápidamente y evite tocar las
paredes del tubo.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica recta y dejar enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Introducir el asa –con el inoculo- de forma
vertical, en el borde inferior del tubo con medio de
Siembra en estría
cultivo inclinado.
4. Sacar, lentamente el asa, e inmediatamente
realizar estrías (líneas en zigzag) en la superficie
del medio, hasta su borde superior.
5. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar enfriar.
2. Tomar la muestra con el asa estéril.
3. Suspender la muestra en un extremo de la caja
con medio de cultivo, realizando estrías –no
superpuestas- sobre una tercera parte de la caja.
Siembra por
4. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar enfriar.
agotamiento
5. Realizar estrías en dirección perpendicular a las
estrías antes hechas, comenzando en la última
estría.
6. Repetir el paso 4 y 5.
7. Esterilizar asa.
1. Esterilizar asa bacteriológica curva y dejar enfriar.
2. Poner volumen de muestra en caja con medio de
cultivo, usando pipeta automática.
3. Distribuir la muestra con el asa, en forma de línea
recta por el centro del medio de cultivo.
Siembra en 4. Hacer estrías de lado a lado del medio de cultivo
cuadricula y en sentido contrario a la línea recta antes
hecha.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías de lado a lado del medio y en sentido
contrario a las estrías hechas antes.
6. Esterilizar asa.
1. Destapar el hisopo estéril.
2. Introducir el hisopo en la muestra.
Siembra con hisopo
3. Sacar el hisopo y escurrirlo en las paredes del
recipiente dónde está la muestra.

10
 Método Proceso
4. Hacer estrías estrechas de lado a lado de la caja
con medio de cultivo, desde el borde superior
hasta el borde inferior.
5. Girar el medio de cultivo 90°grados y hacer
estrías estrechas de lado a lado del medio y en
sentido contrario a las estrías hechas antes.
6. Repetir el paso 5, tres veces más.
7. Arrojar el hisopo en Guardián de desechos.
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Hecho esto, posterior a la siembra de microorganismos, se espera obtener crecimiento

de microorganismos, el cual tendrá unas características macroscópicas y
microscópicas.

Las características macroscópicas de un microorganismo son todos aquellos detalles

observables a simple vista en los medios de cultivo sembrados; en medios de cultivo
líquidos se puede observar enturbiamiento u opacidad (ligera, media o nula),
precipitados o sedimentos (compacto, polvoriento, granuloso, viscoso) o formación de
película. En los medios sólidos se pueden observar diversas características de la
morfología de las colonias, entre ellas la hemólisis, la producción de pigmentos y las
que se exponen en la tabla 3.

Tabla 3 Características macroscópicas de colonias bacterianas en cultivos

sólidos.

Características
Tamaño Grande >1mm
Mediano 1mm
Pequeño <1mm
Forma Puntiforme

Circular

Filamentosa

Irregular

Rizoide

11
 Características
Lanceolada

Borde Continuo

Ondulado

Lobulado

Espinoso, dentado o
lacerado

Filamentoso

Elevación Plana o aplastada

Convexa
Mamelonada
Pulvinada

Umbilicada

Superficie Lisa
Rugosa
Consistencia Blanda
Dura
Mucoide
Aspecto Brillante
Opaco
Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de Rojas 2011.

Objetivos

 Clasificar los diferentes tipos de medios de cultivo que se manejan en el laboratorio

de microbiología.
 Practicar los métodos de siembra de microorganismos en diferentes medios de
cultivo.
12
Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Gelatina de cualquier color (simulará el medio de cultivo), palillos largos
(simulará el asa bacteriológica), recipientes redondos (simulará cajas de
Petri) y un vaso angosto o tubo de vidrio (simulará tubo de cultivo inclinado).
 Ver vídeo introductorio en: https://www.youtube.com/watch?v=30htD86TWzE

Procedimiento-Ejercicio trazo de siembra

1. Preparación de un medio de cultivo simulado (en gelatina): Prepare en casa gelatina

de cualquier color, póngala en 3 moldes redondos del tamaño de su mano,
preferiblemente transparentes y de una profundidad aproximada de 3 a 4
centímetros. Ponga gelatina en un tubo o vaso con tapa, déjelo en la nevera con una
inclinación aproximada de 45° de tal manera que la gelatina coagule haciendo una
superficie inclinada respecto al tubo.
2. En uno de sus cultivos redondos, pase uno de los palillos haciendo una siembra
simulada por método de agotamiento. Recuerde no romper la gelatina sólo
evidenciar el trazo.
3. En otro de sus medios de cultivo redondo, pase uno de los palillos haciendo una
siembra simulada por método de estría.
4. El que le queda haga el mismo ejercicio y siembre en rejilla.
5. En el medio de cultivo simulado con inclinación, siembre por estría.
6. Tome fotografías de la ejecución de cada uno de los puntos anteriores y anéxalas
como evidencia en la pregunta 2 del cuestionario.

Cuestionario y resultados
1. Complete la siguiente tabla:

Utilidad (para qué sirve,

Nombre del medio de que grupo de bacterias
Componentes del agar
cultivo ayuda a identificar o
crecen en él)
Agar MacConkey  Digerido pancreático de es un medio de cultivo
gelatina 17,0 g. selectivo que se utiliza
 Digerido pancreático de para el aislamiento de
caseína 1,5 g. bacilos Gram negativos
 Digerido péptico de tejido de fácil desarrollo, los
animal 1,5 g. cuales, a partir de
 Lactosa 10,0 g. muestras clínicas, agua y

13
  Mezcla de sales biliares
1,5 g.
 Cloruro de sodio 5,0 g. alimentos permiten la
diferenciación sobre la
 Agar 13,5 g.
base de la fermentación
 Rojo neutro 30,0 mg.
de la lactosa.
 Cristal violeta 1,0 mg.
 Agua destilada 1.000 Ml.
 0,5% de peptona.  es un medio de
 0,3% de extracto de cultivo usado
carne/extracto de normalmente como
levadura. rutina para
 1,5% de agar. todo tipo de bacteria.
 0,5% de cloruro de sodio.  Es muy útil porque
 agua destilada. permanece sólido
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C. incluso a
relativamente altas
temperaturas.
 Además, el crecimiento
bacteriano en
este agar lo hace en la
Agar Nutritivo superficie, por lo que se
distinguen mejor
las colonias pequeñas.
 sirve para el subcultivo
de especies,
mantenimiento de
cepas, contaje de
colonias, como base
para preparar agar
sangre, entre otras.
 Escherichia coli
 Staphylococcus
aureus
 Enterococcus faecalis
Agar SIM Está compuesto por  es un agar semisólido y
tripteína, peptona, sulfato de diferencial,
hierro, sulfato de amonio, especialmente diseñado
tiosulfato de sodio y agar. para ayudar a la
identificación de
algunas bacterias,
principalmente de la
familia
Enterobacteriaceae.
 Tiene como ventaja

14
 que en un mismo tubo
pueden observarse
tres características
esenciales en la
identificación de las
enterobacterias.
 es un medio
semisólido y
diferencial utilizado en
la confirmación
presuntiva de
miembros de la familia
Enterobacteriaceae,
especialmente de
Salmonella y Shigella.

15
 2. Complete la siguiente tabla con los medios de cultivo empleados y el esquema del tipo de siembra que
realizó.

Medio de cultivo (preparado en gelatina) Tipo de Siembra Esquema o fotografía de la siembra que realizó

estría

agotamiento

16
rejilla

estría

17
 3. Averigüe 3 microorganismos diferentes que puedan cultivarse en al
menos 2 de los medios de cultivos tratados en la pregunta 1 e indique:
En qué condiciones de temperatura y tiempo se realiza la incubación.

Agar MacConkey:
Escherichia coli
Klebsiella sp
Salmonella
Shigella 

Para un litro de agar MacConkey se debe pesar 50 gr del medio deshidratado,

luego se coloca en una fiola y se disuelve en un litro de agua destilada. Después
de 10 minutos de reposo se calienta mezclando constantemente hasta dejar
hervir por 1 minuto.

Luego se coloca la fiola en el autoclave y se esteriliza a 121°C por 20 minutos.

Culminado el tiempo, se saca del autoclave y se deja enfriar hasta alcanzar una
temperatura de 45°C, para posteriormente servir en placas de Petri estériles
dentro de una campana de flujo laminar o frente al mechero de Bunsen.

Dejar solidificar y guardar en un portaplaquero de forma invertida y refrigerar en

nevera a 2-8°C hasta su uso.

Agar Nutritivo
Streptococcus pyogenes
Escherichia coli
Staphylococcus aureus

Rehidratar 23 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15

minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante
1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs
de presión) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC. Vaciar en
cajas de Petri estériles. Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC.
4. Describa las características macroscópicas de las colonias resultantes
de siembra en los medios de cultivo usados en el siguiente video de la
Universidad de Salamanca.
https://www.youtube.com/watch?v=6hfS1XbPfQk

18
Medio de Agar nutritivo
cultivo cepa sembrada: E. Coli
Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño Mediano
Forma Elevación convexa, con bordes ondulados
Superficie lisa
Consistencia blanda
Aspecto opaco
Color Blanco hueso o amarrillo claro

Medio de Agar MacConkey

cultivo cepa sembrada: E. Coli
Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño pequeño
Forma Una elevación mamelonada y borde filamentoso
Superficie Rugosa
Consistencia Dura
Aspecto Brillante
Color turquesa

Medio de EMB levine

cultivo cepa sembrada: E. Coli
Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Tamaño Grande
Con una elevación convexa, bordes espinosos,
Forma
dentado o lacerado
Superficie rugosa
Consistencia Mucoide
Aspecto Brillante

19
 Medio de EMB levine
cultivo cepa sembrada: E. Coli
Características
Descripción de la cepa
macroscópicas
Color Verde metálico

Recuerde: 1. Ver el video, indicar la cepa sembrada en cada Agar. 2. Describir las
características de la cepa en el cuadro respectivo y tomar la fotografía del vídeo o
dibujar lo que ve. 3. Si desea ampliar su observación puede buscar en los
siguientes Atlas microbiológicos la cepa sembrada en el agar correspondiente.

Atlas disponibles para ampliar visualización:

Atlas de Socalemi: http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia (en

este atlas puede revisar los microorganismos por su clasificación)

Atlas de microbiología Online: https://www.microbiologyinpictures.com/atlas%20de

%20bacteriologia.html (en este atlas debe hacer click sobre las fotos del
encabezado de la página para ver todos los recursos, hacer la búsqueda y ampliar
la visualización)

Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada:_________________

Características Dibujo o fotografía tomada
Descripción de la cepa
macroscópicas del vídeo

Tamaño pequeña

20
Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada:_________________
Características Dibujo o fotografía tomada
Descripción de la cepa
macroscópicas del vídeo

Forma Lanceolada

Superficie Rugosa

Consistencia Dura

Aspecto opaco

21
Medio de cultivo Agar MacConkey cepa sembrada:_________________
Características Dibujo o fotografía tomada
Descripción de la cepa
macroscópicas del vídeo

magenta oscura o fucsia

Color
fuerte

Agar nutritivo cepa

Medio de cultivo
sembrada: E. coli
Características Descripción de la Dibujo o fotografía tomada del
macroscópicas cepa vídeo

Tamaño Mediano

Crema opaca, con

Forma
bordes ondulados

22
Superficie Lisa

Consistencia Cremosa

Aspecto Brillante

Color Ligeramente amarilla

23
5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

https://www.probiotek.com/productos/reactivos/medios-de-cultivo-

reactivos/agar-nutritivo/

http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia

https://www.microbiologyinpictures.com/atlas%20de%20bacteriologia.html

https://www.youtube.com/watch?v=6hfS1XbPfQk

https://mdmcientifica.com/agar-macconkey-2/

https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_MacConkey

24
 Actividad práctica 2. Caracterización microscópica de cultivos
bacterianos: Coloración de Gram

Introducción

Dentro de las técnicas de diagnóstico directo en enfermedades infecciosas se

emplea frecuentemente el examen microscópico, con el propósito de observar las
características de los microorganismos de la muestra a estudiar. Dicho examen
puede hacerse a través de la realización de una preparación en fresco de la
muestra o se puede realizar coloreando la misma. Dentro de las coloraciones más
empleadas en la Microbiología se encuentra la coloración de Gram, la cual fue
fruto de la curiosidad del médico Danés Hans Christian Joachim Gram, en 1884,
cuando este examinaba tejido pulmonar obtenido de un paciente fallecido por
neumonía, observando que las bacterias presentes en la muestra tomaban
diferentes coloraciones cuando se les colocaban distintos colorantes.

Pero ¿para qué hacer coloración? Los microorganismos no solo son invisibles
para el ojo humano, sino que también son semitransparentes; esto hace que su
visualización a través del microscopio sea aún más difícil. Por lo anterior, la
coloración de Gram permite revelar tamaño, forma, agrupación y afinidad tintorial
(Figura 1), características que hacen posible la clasificación de microorganismos.

Figura 2 Características microscópicas observables en la coloración de

Gram.

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017)

Con la coloración de Gram se pueden establecer dos grandes grupos de
bacterias: Gram positivas y Gram negativas. Las bacterias Gram positivas se
observarán moradas, debido a que retienen el complejo cristal violeta-lugol, a
pesar de la exposición a la solución de alcohol-acetona; mientras que las bacterias
Gram negativas se observaran rojas, debido a que no retienen el complejo cristal
25
violeta-lugol y por lo tanto dejan el espacio al colorante de contraste: la safranina.
Esta diferencia en la afinidad tintorial está dada por la pared celular bacteriana,
compuesta de peptidoglicano o mureína, que para las bacterias Gram positivas es
más gruesa y forma más entrecruzamientos que en las bacterias Gram negativas.

En conclusión, esta coloración es un gran aporte al estudio de las enfermedades

infecciosas; técnica sencilla, rápida y que aporta información valiosa a la hora de
apoyar un diagnóstico, ya que no sólo permite identificar el microorganismo sino
que esta puede sugerir antimicrobianos efectivos para tratar el mismo.

Objetivos

 Conocer la coloración de Gram en las muestras a estudiar.

 Clasificar las bacterias por su afinidad tintorial, su morfología y agrupación.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Hojas blancas y colores, o uso de Word con herramientas para gráficos
con colores.
 Ver vídeo de coloración de Gram de la Universidad de Navarra en:
https://www.youtube.com/watch?v=nqzDzuwOvXo
 Revise la clasificación de las bacterias con tinción de Gram en el
simulador de tinción de bacterias en
http://glencoe.mheducation.com/sites/dl/free/0078802849/383941/BL_06
.html (Recuerde habilitar en su computadora adobe flash para visualizar
el simulador)

26
Cuestionario y resultados

1. Describa el paso a paso de la realización de una tinción de Gram, por

medio de un esquema gráfico (o flujograma) que incluya dibujos y
colores acorde con dicho procedimiento. Puede realizarlo a mano o en
Word.

TINCION DE GRAM

GRAM + PASO A PASO GRAM –

Se fija la muestra
Recogida

Se añade el colorante principal

(cristal violeta Por 1 minuto)
Se lava con agua

Mordiente de Lugol por 1

Minuto

Se realiza Decoloración de la muestra con

Alcohol/acetona

Se le agrega el Colorante de
Contraste: Safranina

27
2. tinción de Gram a cada lámina. 3. Ponga cada lámina en el microscopio. 4. Visualice
en la pantalla el microorganismo) Con cada lámina tome pantallazo de lo que
visualiza y registre los resultados de las 3 muestras en la Tabla de datos que debe
diligenciar (Data Table). Para finalizar el ejercicio, tome pantallazo de su tabla de
datos con los resultados de las 3 láminas.

Fuente: Fotografía tomada del Simulador Virtual lab. (2020).

Bordetella pertussis

28
streptococcus mutans

Sarcina sp

29
 Tabla de resultados

3. Explique ¿Por qué las bacterias Gram positivas no se decoloran cuando se les
agrega la solución de alcohol-acetona?

No se decoloran a causa de sus paredes celulares son más espesas (tienen más
Peptidoglicano y menos lípido), son impermeables al disolvente ya que éste
deshidrata la pared celular y cierra los poros, disminuyendo así el espacio entre las
moléculas y provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado
dentro de la pared celular.

4. Según el video de la coloración de Gram, diligencie la siguiente tabla.

Características
Gram positivas Gram negativas
microscópicas
Están compuestas por una
Están compuestas por
membrana externa,
Morfología peptidoglicano y una
peptidoglicano y membrana
membrana
interna.
Afinidad tintorial Son de color violeta Son de color rojo
Agrupación Al final del proceso su Al final del proceso su
agrupación se caracteriza agrupación se caracteriza
por tener un tomo violeta el por tener un tomo rojo o
cual las diferencia a las rosado el cual las diferencia

30
 Características
Gram positivas Gram negativas
microscópicas
demás y se agrupan con las a las demás y se agrupan
células epiteliales que se con las células epiteliales
escaman de la boca que se escaman de la boca

Dibujo o fotografía de
las bacterias y el color
que toman con la
tinción de Gram
finalizada

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

http://cienciaenunitolima.blogspot.com/2017/08/blog-post.html

http://glencoe.mheducation.com/sites/dl/free/0078802849/383941/BL_06.html

https://es.slideshare.net/rosaber14/prctica-7-tincin-gram

https://www.google.com/search?q=realizaci

%C3%B3n+de+una+tincion+de+gram&sxsrf=ALeKk02Vl99oe4XicRe2NTt3w8Y-

tC2xWA:1592521589428&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwii2YmdvYzqAh

XPVN8KHdVVB1cQ_AUoAXoECAwQAw&biw=1242&bih=597#imgrc=G2_5AYAQ0pKx7

31
 Actividad práctica 3. Siembra de Microbiota normal.  

Introducción

El árbol filogenético de la vida consta de tres dominios: Bacteria, Archaea y Eukarya,

siendo un dominio el rango taxonómico más alto de los organismos. Muchos miembros
de los dos primeros dominios mencionados viven una vida simbiótica dentro de
nosotros.

Figura 3 Árbol filogenético de la vida.

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2017). Modificado de Woese, 1996.

El cuerpo humano aloja comunidades microbianas complejas cuya población supera a

nuestras propias células en al menos un factor de 10. Con el fin de caracterizar la
ecología de las comunidades microbianas asociadas con el hombre, los Institutos
Nacionales de Salud lanzaron en 2007 el Proyecto Microbioma Humano y en el 2012 se
publicaron los siguientes resultados: 4.788 muestras analizadas de 33 hábitats, tanto
femeninos como masculinos, que representaban cinco áreas principales del cuerpo
(cavidad oral y orofaringe, piel, fosas nasales, tracto gastrointestinal y vagina) de 242
adultos sanos. Las comunidades encontradas en cada uno de los hábitats del cuerpo
poseían una fuerte especialización en su sitio, tanto dentro de este como entre
individuos. Así mismo, se observó que, dentro de los hábitats, la variabilidad
interpersonal es alta, mientras que los individuos presentan una variabilidad temporal
mínima.

Los análisis de la diversidad taxonómica asociada con la microbiota humana -colección

de microorganismos que están presentes en una comunidad de un hábitat corporal

32
definido- se han convertido en tema de gran importancia, ya que estudiar los taxones
comúnmente compartidos, en comparación con los menos prevalentes, permite
establecer un elemento de base para comparar personas sanas o enfermas.

La microbiología médica moderna se centró en microorganismos patógenos,

considerando a la microbiota normal como una población de microbios vasta y
desconocida. Sin embargo, esta visión ha ido cambiando, el estudio de esta ha
emergido como un importante factor en la fisiología y la enfermedad en humanos.

Las relaciones entre los cerca de 100 trillones de simbiontes microbianos y el cuerpo
humano nos han facilitado la extracción de energía de los alimentos, proporcionado
factores de crecimiento, promovido la diferenciación y función de la mucosa, estimulado
el sistema inmune y proporcionado resistencia a la colonización por patógenos. Si la
microbiota afecta la fisiología humana, los cambios de su composición pueden alterar la
homeostasia del huésped y, por tanto, incrementar el riesgo a enfermar. De hecho, en
enfermedades como el asma, la obesidad, la vaginosis bacteriana y la enfermedad
inflamatoria intestinal se han encontrado comunidades microbianas alteradas. Lo
anterior, también sugiere que se si se conoce la composición de la microbiota normal,
se pueden generar intervenciones para su restablecimiento y, por lo tanto, se puede
superar la situación de enfermedad.

Objetivo

 Evidenciar la diversidad de microorganismos existentes en las diferentes zonas del

cuerpo humano en estado de salud.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Ver vídeo de microbiota humana de la Universidad de Sevilla en:
https://www.youtube.com/watch?v=TVVfAEdpj7I

33
Cuestionario y resultados

1. Complete ¿qué géneros de microorganismos pueden encontrarse en las

siguientes zonas anatómicas?

Zona Microorganismos Morfología y afinidad tintorial

Piel Staphylococcus spp. Coco-Gram positivo

Boca Lactobacillus Gram positivas y

Actinobacillus gramnegativos.
Staphylococcus
Streptococcus

Tracto respiratorio Estreptococos bacilos gramnegativos

superior Estafilococos
Micrococos
Neisserias
Moraxella catarrhalis
Corinebacterias
Haemophilus spp
Porphyromonas
Prevotella
Fusobacterium
Veillonela
Peptostreptococcus
Actinomyces
pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Cryptococcus
Tracto Clostridium Gram positivas y gran negativa.
gastrointestinal Eubacterium
Faecalibacterium
Bacteroides
Bifidobacterium
Streptococcus

34
 Escherichia coli
enterobacteriacae
Tracto genital Chlamydia trachomatis Gram positivas y gran negativa.
Neisseria gonorrhoeae
Treponema pallidum
Ureaplasma
urealyticum
Mycoplasma
lactobacilos (L.
crispatus, L. iners
Pseudomonas
Acinetobacter
Vagococcus
Sphingobium

2. Reporte en la siguiente tabla, 3 microorganismos diferentes entre sí, que

pertenezcan a nuestra microbiota humana y que haya listado en la tabla anterior.
Explique en qué medio de cultivo los pondría crecer y porqué.

Nombre del Porque escoge este

Medio de cultivo medio de cultivo
Microorganismo

Se utiliza usualmente en
cualquier tipo de
bacterias,Es muy útil
porque permanece sólido
Estreptococos incluso a relativamente
Agar nutritivo altas temperaturas.
Además, el crecimiento
bacteriano en este agar lo
hace en la superficie, por lo
que se distinguen mejor
las colonias pequeñas.
el cual permite evidenciar
Escherichia coli un buen crecimiento de
Agar MacConkey bacterias ácido lácticas
Gram positivas; tales como
los lactobacillus.
Agar Sabouraud Cryptococcus es un medio de cultivo que
por sus características
funciona como medio de

35
 enriquecimiento para
hongos y que en caso de
contener cloranfenicol u
otro antibiótico, se
convierte en un medio
selectivo para los mismos.

3. Registre las referencias citadas, usando norma APA

https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_MacConkey

https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_nutritivo

https://muysaludable.sanitas.es/salud/dental/que-bacterias-tenemos-en-la-boca/

https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiolo

gia/seimc-procedimientomicrobiologia23.pdf

https://www.biocodexmicrobiotainstitute.com/es/intestinal

https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-

75262014000300010#:~:text=Entre%20las%20bacterias%20involucradas

%20en,debido%20a%20su%20presencia%20en

https://scielo.conicyt.cl/fbpe/img/rchog/v79n3/art10-tabla01_1.jpg

https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-

75262014000300010#:~:text=Entre%20las%20bacterias%20involucradas

%20en,debido%20a%20su%20presencia%20en

https://es.slideshare.net/luisandresjaimetorreblancagodinez/resumen-escherichia-

coli#:~:text=Medios%20de%20Cultivo%20En%20el,especies%20fermentadoras%20de

%20la%20lactosa.

file:///C:/Users/lexiz/Downloads/1177_es_1%20(1).pdf

36
 https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8776#:~:text=BD%20Sabouraud%20Glucose

%20Agar%20se,a%20partir%20de%20muestras%20cl%C3%ADnicas.

Actividad práctica 4. Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos: difusión en

disco.

Introducción

37
Los antimicrobianos son compuestos que hemos empleado para combatir los
microorganismos causantes de infecciones. Entre estos se encuentran los
antiprotozoarios, los antivirales, los antimicóticos o antifúngicos y los antibacterianos.
Pero en este perpetuo combate, algunos microorganismos han desarrollado
adaptaciones que los hacen resistentes a la acción de estos compuestos, mientras que
otros permanecen siendo sensibles, esta manifestación determinará el efecto
terapéutico de un antimicrobiano.

Las pruebas de susceptibilidad a antivirales, antiprotozoarios y antihelmintos son

complejas, costosas y no suelen realizarse en el laboratorio clínico; mientras que las
pruebas de susceptibilidad a antibacterianos –denominadas también antibiogramas-
son las mejores estandarizadas y las más empleadas. Por su parte, las pruebas que se
hacen para antimicóticos aún están en estandarización.

A pesar de lo expuesto, las pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos tienen por

objetivo tratar de predecir el efecto terapéutico de un antimicrobiano y aunque han sido
realizadas tanto in-vitro como in-vivo, en los laboratorios clínicos se lleva a cabo la
primera modalidad, bajo recomendaciones emitidas por entidades internacionales o
nacionales. Sin embargo, estas pruebas in-vitro sólo contemplan el antimicrobiano y el
microorganismo, mas no las variables en ser humano (ej. interacción con proteínas,
variación de concentración con el tiempo, distribución del antimicrobiano en los tejidos),
que es en dónde se da la enfermedad infecciosa.

La susceptibilidad a los antibacterianos esta categorizada en tres grupos: sensible,

intermedio, resistente. Una bacteria es sensible si esta es inhibida por una
concentración de un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad de éxito
terapéutico. Por otro lado, una bacteria es resistente si es inhibida por una
concentración de un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad de fracaso
terapéutico. Mientras que, en la categoría de susceptibilidad intermedia, se encuentra la
bacteria que es inhibida in vitro por una concentración de un antimicrobiano que se
asocia a un efecto terapéutico incierto.

Existen diversos métodos para evaluar la susceptibilidad a antibacterianos, pero dentro

de los más usados se encuentra el método de Kirby-Bauer o difusión en disco. Este
consiste en que se siembra el microorganismo en estudio, de manera masiva, en un
agar estandarizado y posteriormente se colocan discos de papel impregnados con una
concentración dada de antibacteriano, que corresponde a niveles que pueden
obtenerse si el antimicrobiano se administra sistémicamente. A medida que los
antibacterianos se difunden en el medio van matando el microorganismo en estudio-si
este es sensible-, y de esta manera se van generando unas zonas sin crecimiento
microbiano, cuyo diámetro se corresponde con la categoría de susceptibilidad del
microorganismo.

Objetivos

38
 Conocer la prueba de susceptibilidad a antibacterianos por difusión para
microorganismos determinados.
 Interpretar la zona de inhibición para los microorganismos en estudio.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio simulado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Ver vídeo Bacterias, Antibióticos y Resistencia de Medlineplus en:
https://www.youtube.com/watch?v=ODgdIVu1xac

Cuestionario y resultados

1. Ingrese a Educaplay, y realice el crucigrama Resistencia a los antibióticos

alojado en: https://es.educaplay.com/recursos-educativos/4992454-
resistencia_a_antibioticos.html de este crucigrama, tome captura de pantalla
cuando lo haya completado.

2. Investigue y defina los siguientes conceptos:

Betalactámicos: Los antibióticos betalactámicos, cuyo mecanismo de acción

es la inhibición de la última etapa de la síntesis de la pared celular bacteriana,
constituyen la familia más numerosa de antimicrobianos y la más utilizada en
la práctica clínica. Se trata de antibióticos de acción bactericida lenta, con

39
 actividad dependiente del tiempo, que en general tienen buena distribución y
escasa toxicidad. Algunas modificaciones de la molécula original han dado
lugar a compuestos con mayor espectro antimicrobiano, pero la progresiva
aparición de resistencias limita su uso empírico y su eficacia en determinadas
situaciones.

Resistencia microbiana: La resistencia a los antimicrobianos

(farmacorresistencia) se produce cuando los microorganismos, sean
bacterias, virus, hongos o parásitos, sufren cambios que hacen que los
medicamentos utilizados para curar las infecciones causadas por ellos dejen
de ser eficaces.

La resistencia antimicrobiana es un problema continuo y en aumento. Se

hace aún mayor cuando un microorganismo presenta más de un mecanismo
de resistencia y cuando tiene la facultad de transmitirlo, no sólo a su
descendencia, sino también a otras bacterias de su misma o diferente
especie
Antibióticos: se denomina antibiótico a la sustancia que tiene la capacidad
de eliminar o de interrumpir el crecimiento y la proliferación de
diversos microorganismos patógenos. Esto se debe a que los antibióticos
pueden actuar como bactericidas o desarrollar una acción bacteriostática.

amplio espectro: es el campo o poder de acción de efectivada y eficiencia

que poseen los antibióticos, con relación a la eliminación total de la bacteria o
microorganismo que se quiera atacar. A mayor especto de antibiótico es
mayor la probabilidad de eliminar el microrganismo, pero así también es
mayor la exposición que tendrá nuestro cuerpo o para ser más exactos
nuestros riñones que son los encargados de sintetizar y eliminar los residuos
que quedan de los antibióticos utilizados.

3. Observe la siguiente fotografía y registre el resultado obtenido y su

interpretación en el siguiente cuadro.
Resultado e Interpretación
Interpretación (Describa
Resultado (Sensible o
porque es sensible o
Fotografía Resistente a cada
resistente según lo que puede
antibiótico)
observar)
1.resistente Con relación a la imagen
2.resistente observamos que el radio de
3.sensible acción de la muestra 1 y 2 es
4.sensible superada por la bacteria de la
E.COLI, lo cual nos hace
entender que esta bacteria es
resistente a estos antibióticos y
su poder de acción no se vio

40
 disminuido en ningún momento,
a comparación de las muestras 3
y 4 las cuales evidencian la
eficacia y la eficiencia de del
antibiótico utilizado, ya que se
observa que tiene controlado el
campo de acción de la bacteria y
que la mismo es sensible a este
tipo de antibióticos.
Con relación a la imagen
observamos que el radio de acción
de la muestra 1 y 2 es superada por
la bacteria de la
STAPHYLOCOCCUS AUREUS , a
diferencia de la muestra con E.COLI,
podemos observar que el radio
1.resistente dispersión de la bacteria es menor y
2.resistente más compacta que el de E.COLI,
3.sensible pero sin embargo sigue habiendo
4.sensible una resistencia bacteriana al
antibiótico , a comparación de las
muestras 3 y 4 las cuales evidencian
la eficacia y la eficiencia de del
antibiótico utilizado, ya que se
observa que tiene controlado el
campo de acción de la bacteria y
que la mismo es sensible a este tipo
de antibióticos.
1.resistente Con relación a la imagen
2.resistente observamos que el radio de acción
3.sensible de la muestra 1 y 2 es superada por
4.sensible la bacteria de la
SALMONELLA TYPHIMURIUM  ,
podemos concluir que tanto en las
muestras anteriores con diferentes
bacterias los dos primeros ambiticos
no son antibióticos de amplio
espectro o que las bacterias son
resistentes a los mismos y por ello
sobrepasan su su campo de
efectividad, y sigue prevaleciendo la
eficiencia y la eficacia de los
antibióticos de la muestra 3 y 4 , ya
que se mantiene su estabilidad

41
 bactericida o bacteriostática contra
las bacterias estudiadas, Y siguen
siendo sensibles al antibiótico.
Observando esta última imagen
evidenciamos que hay un leve
cambio en las muestras 1 y 2 a
diferencia de las demás
imágenes ya vista anteriormente,
en esta vemos que el campo de
acción de la bacteria se ve un
poco disminuido a las otras
bacterias anteriormente
1.resistente estudiadas, esto nos puede dar a
2.resistente entender que la bacteria es algo
3.sensible sensible a estos antibióticos,
4.sensible pero no en su totalidad para
logarla eliminar por completo, y
sigue prevaleciendo la eficiencia
y la eficacia de los antibióticos de
la muestra 3 y 4 , ya que se
mantiene su estabilidad
bactericida o bacteriostática
contra las bacterias estudiadas,
Y siguen siendo sensibles al
antibiótico.
Fuente fotografías: F. Benakashani et al., (2016). Biosynthesis of silver nanoparticles
using Capparis spinosa L. leaf extract and their antibacterial activity, Karbala
International. Journal of Modern Science http://dx.doi.org/10.1016/j.kijoms.2016.08.004

4. Usted tiene que seleccionar 4 antibacterianos para hacer la prueba de

susceptibilidad a antimicrobianos de una cepa de S. aureus (Indique sus
nombres). En la siguiente tabla mencione 3 aspectos que tendría en cuenta
para hacer esta selección, explíquelos brevemente y con sus palabras.

 Antibióticos a utilizar: Oxacilina, Cefazolina, Vancomicina, Trimetoprim-

sulfametoxazol

Aspectos Explicación
Efectividad y eficacia Para poder controlar este tipo de bacterias debemos
primero que todo tener en cuenta cual es la efectividad
y eficacia, que tendrá el antibiótico para combatir la
bacteria y así mismo no causar una resistencia
bacteriana o eventos adversos debido a la utilización del
42
 Aspectos Explicación
antibiótico.
Debemos de conocer el tipo de S. aureus que se va a
tratar para si poder tomar una decisión en cuanto al
tratamiento a utilizar, debido a que esta familia de
bacterias genera resistencia a ciertos tipos de
Sensibilidad y resistencia.
antibióticos, para poder estar mas claro qué tipo de
antibiótico a utilizar es importante realizar un
antibiograma, para saber a qué es sensible o resistente
la bacteria a tratar.
Es muy importante conocer el espectro de acción del
antibiótico, ya que así podemos saber que tanta
exposición tendrá nuestro cuerpo y nuestros riñones al
antibiótico y que repercusiones podrá tener el mismo,
Espectro de acción
esto en cuento a pacientes con fallas renales, y lo otro
también podemos saber que efectividad tendrá nuestro
tratamiento y el tiempo, dosis frecuencia en la que se
debe administrar el antibiótico.

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2405609X16302159#fig7

https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-

28-articulo-antibioticos-betalactamicos-S0213005X08000323

https://definicion.de/antibiotico/

https://es.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus#Tratamiento

Actividad práctica 5. Caracterización macroscópica y microscópica de hongos.

Introducción

Los hongos son organismos conformados por células eucariotas y agrupados dentro del
dominio Eukarya, siendo diferentes de los protozoos, los animales y las plantas. De
estos se han identificado aproximadamente 200.000 especies, y sólo 100 generan
infección en el humano. Las infecciones causadas por estos hongos se denominan
micosis, es la micología médica quien se encarga de estudiarlas y a los hongos raíz de
la cadena causal.

43
Estos organismos no hacen fotosíntesis, son heterótrofos, saprofitos y pueden llegar a
ser parásitos. Adicionalmente, habitan diferentes entornos tales como las mucosas de
mamíferos, tierra, superficies abióticas, entre otros. Poseen una pared celular
constituida de polisacáridos, que en su mayoría son quitina, mananos y α glucanos.

De acuerdo a sus características morfológicas, los hongos pueden ser macroscópicos

(ej. Champiñones) o microscópicos. Los hongos microscópicos pueden presentar dos
estructuras fúngicas básicas: las Hifas (filamentos) que son filas de células que crecen
apicalmente y cuyo conjunto se denomina micelio; y las levaduras (blastoconidias) que
son estructuras ovaladas o esféricas unicelulares.

Figura 4 Diferencias morfológicas y de tamaño entre hongos filamentosos,

levaduriformes y bacterias

Fuente: *Mold (Filamentos), Yeast (levadura). Tomado de Wolfe (2014).

De acuerdo a lo anterior, desde una perspectiva clínica, los hongos se pueden agrupar
en filamentosos y levaduriformes. Sin embargo, hay unas especies de hongos que
pueden ser filamentosos en la naturaleza o en el laboratorio (a menos de 30 °C) y, en
cambio, presentarse como levaduriformes en los tejidos (a 37 °C). Estos son llamados
hongos dimórficos y algunos de ellos son: Candida albicans, Sporothrix schenkii,
Histoplasma capsulatum y Paracoccidioides brasiliensis.

Los cultivos de hongos pueden presentar dentro de sus características macroscópicas,

una apariencia cremosa –propia de los hongos levaduriformes-; o apariencias:
correosa, aterciopelada, algodonosa, polvorienta y granulosa –propias de hongos
filamentosos-.

Objetivo

 Identificar características macroscópicas y microscópicas de los hongos.

Materiales

44
 Materiales de la práctica de laboratorio simulado

 Guantes y tapabocas
 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Explorar el Atlas Socalemi, sección de micología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
 Ver vídeo Levaduras y Hongos en: https://www.youtube.com/watch?
v=rT5cFN0fOYY

Procedimiento

1. Deje a la intemperie una fruta o pan por al menos 5 días o busque en su hogar una
fruta, verdura o pan que tenga apariencia de estar contaminada con hongos.
Recuerde al tomarla y manipularla ponerse guantes y tapabocas con anterioridad.
2. Tómele fotos, obsérvela de cerca, describa lo que observa. recuerde durante la
observación no tocarla directamente, no respirar u oler la fruta, verdura o pan
seleccionado, no estornude, no sople o quite el nada de allí.
3. Deseche cuidadosamente los guantes, tapabocas, y elementos contaminados y
posteriormente lávese las manos adecuadamente.

1. Paso 2. Paso
3. Paso
Detecte cambio en Utilice todos los
elementos de Deseche lo
apariencia contaminado
bioseguridad
Colores blanco, café Continué con el
o negro Observe y describa
cuestionario

Fuente: Construcción propia equipo de docentes (2020)

Cuestionario y resultados

1. ¿Cuáles son los agares más usados para hongos?

45
Agar Sabouraud
Agar Neopeptone-Glucose-Rose Bengal-Aureomycin
Agar Czapek  (Para Aspergillus, Penicillium Y Hongos Relacionedos
Agar Yeast Extract-Malt Extract-Glucose 
Agar Diamalt  (Para Levaduras)

Agar- Dextrosa-Patata (Pda)

Agar- Caldo De Guisantes Sacarosado
Agar-Harina De Avena (Oma)
Agar Agua (Aa)

46
 2. De acuerdo con el cultivo micótico de la fruta verdura o pan complete el siguiente cuadro.
Describa las Investigue que tipos de hongos Describa las Características
Fotografía de la Fruta,
Características pueden haber atacado la Fruta microscópicas del hongo que
Verdura o Pan contaminado
macroscópicas verdura o pan supone crece en él
Se observa El moho blanco es el que comúnmente El moho tarde en salir unos 4-5
aspecto suele aparecer en el tomate. El moho días, una vez que aparecen las
necrótico y blanco es una enfermedad causada por primeras motas, su crecimiento es
acuoso. el hongo Sclerotinia sclerotiorum. Este rápido y van aumentando hasta
Una película patógeno tiene una amplia distribución cubrir toda la superficie del tomate. 
grande de color a nivel mundial y afecta a numerosas Cuando el moho ya ocupa la
blanco. especies. superficie de la que dispone, deja
Se emite un de crecer (debido a que no tiene
olor a fétido más espacio) y por el peso que
como ocupa esa capa que se ha formado
fermentado. se va hundiendo, reduciendo la
Hundimientos cantidad de tomate.
en el fruto. Formas ovaladas o alargadas
Debilidad y unicelulares, son muy parecidas
flacidez del entre especies.
fruto. La mayor parte de ellos crecen
Se observa que como vellosidades en el sustrato,
el tomate formando colonias grandes y
perdió su concéntricas.
tonalidad roja y
brillante a un
tono más
opaco.

47
Se observa Antracnosis es causada Los Colletotrichum son parte del grupo
manchas generalmente por Colletotrichum de los hongos ascomicetos. Estos
oscuras en el gloeosporioides, aunque C. organismos se caracterizan por
fruto. acutatum también ha sido presentar una estructura reproductora
Se evidencia diagnosticado, y explica el ciclo de en forma de saco.
necrosis estos hongos. Las lesiones
abundante en causadas por Colletotrichum La reproducción sexual siempre
el fruto. acutatum generalmente se
involucra la producción de un asca
Tambien se desarrollan de forma más lenta y
observa una esporulan más abundantemente con dos o más ascosporas
decoloración que las causadas por C. haploides. Toleran temperaturas de
de la pulpa. gloeosporiodes.
entre 10 y 40 °C, pero su
Debilidad y Podredumbre del pedúnculo
flacidez del Diversos hongos han sido reportados temperatura óptima de desarrollo es
fruto. como causantes de la pudrición del de 28 ºC.
Se le siente un pedúnculo en diferentes regiones Durante el proceso de infección, las
olor a productora; muchos de los hongos
podredumbre. especies fitopatógenas del
causantes de la pudrición de pedúnculo
Manchas y se presentan como endófitos en los
género Colletotrichum inicialmente
hundimientos colonizan las células vivas de la planta
tejidos del pedúnculo. La infección
en la piel
también se puede dar en el momento rompiendo la pared celular, pero sin
externa.
de la cosecha, a través de la superficie penetrar la membrana plasmática de
de corte del pedicelo del fruto.
estas células (esto evita la muerte
progresiva de células).

48
3. Los hongos filamentosos pueden causar infecciones en humanos ¿Qué
condiciones debe tener un ser humano para ser infectado por estos hongos?
Si actualmente los hongos filamentosos son la causante de infecciones del
tracto respiratorio de los seres humanos,
Las alergias con hongos filamentosos son muy comunes. Son causadas por esporas de
moho transmitidas por el aire. Cuando las esporas ingresan al tracto respiratorio, el
sistema inmune responde a estas como si fueran microbios dañinos. Los síntomas
pueden incluir estornudos, tos y dificultad al respirar. Los síntomas pueden ser más
severos en las personas que tienen asma u otras enfermedades respiratorias. La
exposición a largo plazo a las esporas de moho también podría debilitar el sistema
inmune.
Los hongos filamentosos crecen tanto en interiores como exteriores. En
interiores, crecen en las duchas, sótanos y otros lugares húmedos, El moho
de interiores puede causar más problemas que el moho de exteriores, debido al
espacio cerrado y confinado. Además, la mayoría de las personas pasa más
tiempo en interiores que en exteriores. 

4. De las siguientes fotografías al microscopio, defina por sus características

que hongo cree ver:

A.- Aflatoxinas

B.- Levadura De Las Heces

49
 C. hongos del tomate
Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest e imágenes de google de acceso libre.

5. Registre las referencias citadas, usando norma APA

https://prezi.com/qcojujkyfj8d/medios-de-cultivo-para-hongos/

https://www.ck12.org/book/ck-12-conceptos-biolog%c3%ada/section/8.16/

https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-

28-articulo-formas-clinicas-tratamiento-infecciones-causadas-S0213005X1200105X

https://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0001-

60022004000400004

50
 Actividad práctica 6. Parásitos de importancia en salud.

Introducción

La parasitología es la división de la biología que tiene por objeto de estudio el

parasitismo generado por protozoarios, helmintos y artrópodos; siendo el parasitismo la
relación simbiótica en la cual un organismo (parásito) vive a expensas de otro
(denominado huésped) y le ocasiona daño.

Los protozoarios son organismos eucariotas, unicelulares, que no poseen pared celular,
heterótrofos -en su mayoría-, algunos móviles según el aparato de locomoción que
posean, con reproducción asexual y sexual. Los helmintos son organismos eucariotas,
pluricelulares que conforman gusanos que se pueden clasificar en tres filum:
platelmintos, nematodos y acantocéfalos; sin embargo, los parásitos de importancia
médica se encuentran en los dos primeros filum mencionados.

Los platelmintos son gusanos planos de simetría bilateral, que pueden ser de vida libre
o endoparásitos, no poseen sistema circulatorio, pero si un sistema digestivo. Estos
gusanos se clasifican en tres clases, siendo las clases Trematoda (duelas) y Cestoda
(tenias) en donde se localizan parásitos de humanos y animales. Los nematodos son
gusanos cilíndricos, no segmentados que mudan periódicamente su cutícula y se
reproducen sexualmente, depositando aproximadamente 200.000 huevos por día.
Poseen sistema digestivo completo (boca-ano) y su boca presenta estructuras
particulares adaptadas a su estilo de alimentación. Dentro de este grupo se encuentran
el oxiuro (Enterobius vermicularis), el trichuro (Trichuris trichiura), las uncinarias
(Ancylostoma spp. y Necator spp.), nematodo (Ascaris lumbricoides) y la triquina
(Trichinella spiralis).

Por otra parte, los artrópodos son animales invertebrados cuya característica principal
es la presencia de apéndices articulados. Así mismo, poseen simetría bilateral, ojos
compuestos, un exoesqueleto conformado por quitina y segmentación variable en
donde se pueden encontrar los apéndices articulados; por ejemplo, en insectos se
pueden identificar tres segmentos: cabeza, tórax y abdomen. En su mayoría son
ovíparos, pero en algunos grupos puede darse la ovoviviparidad y la viviparidad. Estos
animales se dividen en cuatro grupos: Quelicerados (arañas, ácaros), Crustáceos,
Hexápodos (insectos: moscas, mosquitos, pulgas, piojos), Miriápodos (ciempiés y
milpiés).  Su importancia radica en que estos pueden causar patologías directas
(parasitosis, reacciones alérgicas) o patologías indirectas, debido a que pueden actuar
como vectores o huéspedes intermediarios de microorganismos patógenos.

Finalmente, para que los protozoarios, helmintos y artrópodos lleguen a ser parásitos
tienen que existir ciertas condiciones tanto del parasito como del huésped, entre ellas
se encuentra la cantidad de parásitos inoculados, factores de virulencia, fase del
parásito y la susceptibilidad del huésped.

51
Objetivo

 Observar parásitos causantes de enfermedades de importancia en salud pública.

Materiales

Materiales de la práctica de laboratorio mediado

 Acceso a internet
 Protocolo de laboratorio
 Explorar el Atlas Socalemi, sección de parasitología en
http://www.socalemi.es/index.php/atlas-de-microbiologia
 Ver vídeo Parásitos en: https://www.youtube.com/watch?v=RTI1DB42BZ4

Cuestionario y resultados

1. ¿Qué son las geohelmintiasis? Mencione 5 medidas preventivas para estas

parasitosis.

Se refiere a la infección causada por ingestión de alimentos o bebidas

contaminadas con huevos de gusanos procedentes del suelo, o por penetración
de larvas o gusanos de estos parásitos a través de la piel cuando el suelo está
contaminado con materia fecal. Afecta más a los niños y niñas; el grupo de entre
5 y 14 años concentra el 80% de la carga parasitaria.

Los geohelmintos deben ser evitados y pueden ser controlados con medidas
como:

Lavar cuidadosamente las manos después de defecar, antes de comer o

manipular y preparar alimentos o luego de jugar.
Usar permanentemente botas, zapatos o tenis; no son aconsejables las
chanclas o las sandalias.
Hervir el agua durante al menos 10 minutos, si creemos que la calidad es
dudosa.
Lavar con agua potable las verduras y otros alimentos crudos antes de
consumirlos.
Cocinar adecuadamente los alimentos y mantenerlos en áreas limpias y
fuera del alcance de insectos, roedores y otros animales.
No usar nunca las heces o aguas servidas como fertilizante de las
huertas.
Participar en las jornadas de desparasitación masiva que llegarán a la
escuela y hacer desparasitar también a los niños en la consulta de
crecimiento y desarrollo, de forma rutinaria.

52
2. Observe las siguientes fotografías y complete la tabla:

A. B.

C. D.

Fuente: Fotografías tomadas de Pinterest, Wikipedia e imágenes de google de acceso

libre.

Tipo de
parasito
Nombre
(protozoari Características Patología con
del Nombre del
o, helminto observadas para la que se
organism organismo
(huevo- su tipificación relaciona
o
adulto),
artrópodo)
A. Trichuris Nematodo. Huevos  La tricuriasis
trichiura Aphasmidia de Trichuris (tricurosis o
trichiura. Nótese su tricocefalosis)
característica
forma de barril y
sus tapones
mucoides polares,
su contenido es
granuloso y fino.
B. Sifonápteros(pulga artropodo Las pulgas son  tifus
s) invertebrados peste bubónica

53
 Tipo de
parasito
Nombre
(protozoari Características Patología con
del Nombre del
o, helminto observadas para la que se
organism organismo
(huevo- su tipificación relaciona
o
adulto),
artrópodo)
pequeños (de 1,5
a 3,3 mm de largo)
carecen de alas,
muy ágiles, de
color generalmente
oscuro.
C. Giardia lamblia protozoario ovalada hasta giardiasis
elipsoidal y miden
de 11 a 14 µm
(rango: 8 a 19 µm).
Los quistes
maduros
presentan 4
núcleos, y en los 2
quistes inmaduros,
se observan
fibrillas
intracitoplasmática
s.
D.  trypanosoma brucei protozoario es un organismo tripanosomiasi
unicelular alargado s africana (o
de 20 μm de largo enfermedad
y 1-3 μm de ancho, del sueño)
cuya forma,
estructura y
composición de
membrana varia a
lo largo de su ciclo
de vida.

3. De acuerdo con lo observado en el vídeo y lo que ha consultado ¿qué

características hacen que los parásitos sean exitosos infectando poblaciones?
Explique, brevemente, su repuesta.

54
 Las principales características que ayudan a los paracitos a ser exitosos para
infectar a cualquier población, es que son organismos unicelulares y
microscópicos, los cuales son de difícil avistamiento para los seres humanos,
también otra característica es que se en encuentran en nuestro entorno como lo
son nuestros alimentos, en el agua, en el lugares húmedos, en el suelo o vienen
como huésped como lo podemos ver en nuestros animales, por estas
características es que los parásitos son tan latentes en la infección de la
población.

4. Registre las referencias citadas, usando norma APA

https://www.minsalud.gov.co/salud/publica/PET/Paginas/geohelmintiasis.aspx

https://es.wikipedia.org/wiki/Trichuris_trichiura

https://es.wikipedia.org/wiki/Giardia_lamblia

https://es.wikipedia.org/wiki/Ctenocephalides_canis

https://es.wikipedia.org/wiki/Trypanosoma_brucei

https://www.lifeder.com/trypanosoma-brucei/#Morfologia

55
 Bibliografía

Becerril,M. (2014).Parasitología médica.(4a. ed.) McGraw-Hill

Interamericana. Cápitulo 2. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2053/?il=416

Bonifaz,A. (2012).Micologia médica básica.(4a. ed.) McGraw-Hill

Interamericana. Página 23. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2053/?il=417

Brooks,G. (2011).Microbiología médica.(25a. ed.) McGraw-Hill

Interamericana. Cápitulo 5. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2053/?il=486

F. Benakashani et al., (2016). Biosynthesis of silver nanoparticles using

Capparis spinosa L. leaf extract and their antibacterial activity, Karbala

International. Journal of Modern Science

http://dx.doi.org/10.1016/j.kijoms.2016.08.004

Lloyd-Price, J., Abu-Ali, G., & Huttenhower, C. (2016). The healthy

human microbiome. Genome Med, 8(1), 51. doi:10.1186/s13073-016-

0307-y. Recuperado de

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4848870/

56
Manual de prácticas de laboratorio de microbiología I y II: diversidad y

estructura de los microorganismos. (2009). México, D.F., MX:

Universidad Autónoma de Guerrero. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2077/lib/unadsp/detail.action?

docID=10287166&p00=manual+pr

%C3%A1cticas+laboratorio+microbiolog%C3%ADa

Mendoza, Z. R. (2010). Antimicrobianos 2002. México, D.F., MX:

Instituto Politécnico Nacional. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2077/lib/unadsp/detail.action?

docID=10365809&p00=antimicrobianos+2002

Prescott, L. M., Harley, J. P., & Klein, D. A. (2004). Microbiología.

México, D.F., MX: McGraw-Hill Interamericana. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2077/lib/unadsp/detail.action?

docID=10515235&p00=prescott

Reynoso, M., Magnoli, C., Barros, G., Demo, M. (2015). Manual de

microbiología general (Primera). Río cuarto: UniRío. Recuperado

de https://openlibra.com/es/book/download/manual-de-microbiologia-

general

Rodríguez, P. E. G. (2013). Parasitología médica. México, D.F., MX:

Editorial El Manual Moderno. Recuperado de

http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2077/lib/unadsp/detail.action?

docID=10853474

57
Rojas Triviño, Alberto. (2011). Conceptos y práctica de Microbiología

general. Manual. Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira.

Recuperado de:

http://www.bdigital.unal.edu.co/4999/1/albertorojastrivino.2011.pdf

Santiago, Axel Rodolfo. (2003). Hans Christian Joachim Gram. Revista

de la Sociedad Venezolana de Microbiología, 23(2), 200-201.

Recuperado en 22 de junio de 2017, de

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-

25562003000200020&lng=es&tlng=es.

Woese, C. R. (1996). Whither microbiology? Phylogenetic trees. Curr

Biol, 6(9), 1060-1063. Recuperado de

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960982202706647

Wolfe, B. (2014, Julio 24). Techniques: Using a microscope to explore

fermented foods. Recuperado de http://microbialfoods.org/using-

microscopy-to-monitor-artisan-fermentations/

58