Universidad Nacional de Asunción

Facultad de Ciencias Químicas

Ingeniería de Alimentos

Laboratorio de Microbiología de alimentos

Informe de la práctica N° 8: Análisis microbiológico de agua potable y de uso

industrial

• Alumnas:
- Liz Arévalos
- Leissa Espinola
- Romina Rivelli

• Fecha: 12/10/2021

• Día: Miércoles
1. Objetivos
- Determinar la presencia de microorganismos contaminantes utilizando la técnica de
filtración por membrana, la técnica número más probable y el método de vertido en
placa.
- Adquirir conocimiento sobre técnica utilizada en el análisis microbiológico de agua
- Realizar análisis microbiológico utilizando la técnica de filtración por membrana y la
técnica de número más probable.

2. Metodología
Para la determinación de presencia de coliformes fecales en el agua mineral en estudio
mediante la técnica de número más probable se siguió el siguiente procedimiento
(Martínez, 2020)
Observación: para la determinación de coliformes totales, el procedimiento fue el mismo, a
excepción de que el caldo utilizado fue el lauril sulfato, y la incubación se realizó a una
temperatura de 37°C.

Se prepararon 3 series de 5 tubos. La primera serie

conteniendo 10 mL de caldo verde brillante de
doble concentración. La segunda y la tercera serie
conteniendo 5 mL de caldo verde brillante de
simple concentración.

A todos los tubos de las 3 series, se les coloca una

campanita de Durham para observar la producción de
gas.

A la serie N°1 se le inocula 10 mL del agua en

estudio, a la serie N°2 se le inocula 1 mL del agua en
estudio y a la serie N° 3 se le inocula 0.1 mL de agua
en estudio.

La totalidad de los tubos se incuban a una

temperatura de 45°C durante 48 hs. La reacción es
positiva cuando se produce desprendimiento de gas
en la campana de Durham.

Los resultados obtenidos fueron tabulados

2
Para el método de vertido en placa se realizó el siguiente procedimiento (Martínez, 2020)

Se tomaron 1 mL del agua en estudio con la

micropipeta.

Inoculamos 1 mL del agua en estudio en 3 placas de

petri

Vertimos el agar PCA en las 3 placas que contenían

el agua en estudio realizando un movimiento en
forma de 8

Incubamos las placas en estufas a 37°C durante 48

hs.

Pasado el tiempo necesario se procede a realizar el

recuento de colonias y a tabular los datos obtenidos.

3
3. Cálculos
Organismo N° de colonias Cálculo

Aerobios mesófilos totales a 37°C MNP-35 35

= 35 ufc/mL
1𝑥1
y 48 h

4. Resultados
Técnica NMP

NMP / 100 mL
Medio N° de tubos + Límite máximo Resultado
Caldo lauril sulfato (C.T) 0 <1 2
0
1
Caldo verde brillante (C.F) 0 <1 0
0
0
Fuente: elaborado según NP 24 011 93 para agua mineral natural y agua mineral mineralizada

Método de vertido en placa y recuento

ufc/mL
Organismo N° de colonias Límite máximo Resultado
Aerobios mesófilos totales MNP-35 <25 35
a 37°C y 48 h
Fuente: elaborado según NP 24 011 93 para agua mineral natural y agua mineral mineralizada

4
5. Conclusión
De acuerdo a los procedimientos realizados, se puede observar que existe coherencia entre
los resultados para la determinación de presencia de coliformes en el agua de estudio ya
que hay presencia de coliformes totales en poca cantidad y no se observó la presencia de
coliformes fecales, sin embargo, no es posible determinar si esta presenta contaminación y
es apta o no para el consumo, ya que solo se realizó una determinación. Para definir
correctamente la calidad del agua es de gran importancia realizar la determinación de 5
parámetros principales; coliformes fecales, coliformes totales, aerobios mesófilos,
pseudomonas y E. coli.

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6. Bibliografía

• Martínez, K. (2020). Manual de laboratorio de Microbiología de Alimentos.

• Norma Paraguaya 24 011 93. Para agua mineral natural y agua mineral mineralizada