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TEMA: METABOLISMO NITROGENADO Gracias a este complejo, podemos producir amoniaco. Este utiliza mucha energía
y e-.
Muchos de los compuestos imprescindibles para nuestro cuerpo contienen nitrógeno, como
los AA, hormonas, vitaminas, coenzimas, porfina (forma el grupo hemo de la BALANCE ENERGETICO:
hemoglobina), pigmentos y neurotransmisores.
N2 + 8e- + 16ATP + 10H+ -> 2NH4+ + 16ADP + 16Pi + H2
Muchos organismos tienen limitaciones para obtener el nitrógeno y así utilizarlo, ya que
están limitados a una forma del nitrógeno. Los componentes de este complejo son:

Nosotros utilizamos el amoniaco (NH3) para sintetizar compuestos orgánicos nitrogenados,
pero no todos los organismos pueden sintetizar amoniaco a partir de su forma en gas (N2)
o ion nitrato (NO 3 -), este ultimo limita el crecimiento de las plantas y esta fijado en el
suelo.
Esta fijación del nitrógeno atmosférico o el nitrato solo pueden hacerlo las bacterias, las
plantas y algunos hongos.
1. FIJACIÓN BIOLOGICA DEL NITRÓGENO
Esta fijación biología, solo pueden hacerla unos microorganismos llamados
DIAZOTROFOS, que es la reducción del N2.
- Ferredoxina
- Dinitrogenasa reductasa (Fe-S) -> Es un dímero y una metaloproteina,
COMPLEJO II. Se ocupa de transferir e - y protones al complejo I, todo ello
acoplado a la hidrolisis de 2 ATP. Contiene grupos hierro-azufre.
- Dinitrogenasa (Mo-Fe) -> Cataliza la reducción del nitrógeno gas, se llama
también milirdemohierro, es un tetrámero y una metaloproteinasa,
COMPLEJO I. Contiene molifideno y grupos hierro-azufre.
Requiere la hidrolisis de 2 ATP por cada e- que reacciona. Estos e-provienen de la
ferredoxina y flavodoxina (transportadores de potencial bajo).

Fijar este nitrógeno atmosférico al suelo hace que haya mayor fertilidad en los
suelos y por ello vida. Este triple enlace del N 2 tiene muchísima energía y es muy
difícil de romper, pero los diazotrofos son capaces de hacerlo gracias a encimas.

Necesitamos hacer el ciclo 8 veces, por

Esta fijación también se hace industrialmente mediante el proceso THE HABBER
eso el 8 delante, además, siempre deben
BOSS, que es un Hidrogenación catalítica de bajo rendimiento que se realiza a T y
haber acumulados 3 electrones en
P altas. Se utiliza para hacer fertilizantes de NH3.
complejo I y a la vez salen H2. Cuando ya
tenemos 5 electrones, se rompe el enlace
Se intenta que se pueda llevar a cabo esta fijación, pero en condiciones más
triple y se libera una molécula de NH 4+,
suaves, gastando menos energía.
luego 3 electrones más y se libera la
segunda.
ORGANISMOS DIAZOTROFOS:

Bacterias simbiontes Bacterias marinas Bacterias de suelo

(rhizobium) (cianobacterias) (azotobacter)

Como vemos, aunque el N2 sea un 80% del contenido total que hay en la
atmosfera, se reduce a un número limitado de organismos capaces de crear
amoníaco. 3. NITRIFICACIÓN

2. COMPLEJO NITROGENASA Aunque la forma más abundante del nitrógeno sea en la atmosfera, parte del
NH 4 + proviene mayoritariamente (un 99%) del nitrógeno orgánico, es decir, a
partir de la nitrificación que se da en el suelo y los océanos.
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Esta capacidad es propia de las plantas, hongos y bacterias. En cambio, las células animales se usan en los dos sentidos y predomina el
de glutamato a α-cetoglutarato ya que las concentraciones de nitrógeno
Pasamos de nitrato a amoniaco gracias a un encima llamada NITRATO suelen ser bajas. En este encontramos que la KM es muy alta, por lo tanto, se
REDUCTASA que lo hace en 3 pasos: necesitan altas concentraciones de amoniaco para que forme glutamato.

1) Reducción del nitrato a nitrito: La encima contiene FAD, de manera que los
electrones del NADPH se transfieren al FAD, que los transferirá al citocromo
B5, que los pasará al molibdeno y finalmente, este o pasará al substrato
obteniendo así NO 2-.
NO3- + NADPH + H+ -> NO2- + NADP+ + H2O
En células animales se controla alostéricamente, inhibe con ATP o GTP y se
activa con ADP (por lo tanto, se activa a baja energía).
2) GLUTAMINA SINTETASA:
A partir del glutamato, podemos incorporar una molécula de NH3 gracias a la
GLUTAMINA SINTETASA que sintetiza glutamina con ayuda de ATP.

2) Donación de electrones para formar amoniaco: Con ayuda de la ferredoxina
se donan 6 electrones para pasar a NH 4+ con la NITRITO REDUCTASA.
NO2- -> NO- -> NH2OH -> NH4+
3) Asimilación del nitrógeno: Incorporación de nitrógeno a moléculas orgánicas.
De manera que nos conducen a las reacciones de:
- GLUTAMATO -> Quien hace que el nitrógeno llegue a los AA y
compuestos nitrogenados. El α-amino fuente primaria de nitrógeno para
rutas de biosíntesis.
En los animales la glutamina sintasa sirve para poder hacer que el amoniaco
sea menos toxico cuando se forma por el catabolismo de los AA. Además,
que es muy importante para el sistema inmunitario de los animales. Por lo
tanto, esta está regulada por 2 mecanismos:
o Regulación alostérica por retro inhibición acumulativa por
compuestos nitrogenados:
Esta está compuesta por 9 retro inhibidores que son los productos
finales metabólicos de la glutamina o indicadores de otro tipo como
Alanina, Glicina y Serina. Estos por separado inhiben muy poco, pero
una mezcla de algunos de ellos produce casi la inhibición completa.

- GLUTAMINA -> Igual que glutamato. El nitrógeno amida de la cadena La Glutamina Sintetasa tiene distintos lugares de unión para cada
lateral fuente primaria de nitrógeno par rutas de biosíntesis. inhibidor, sustrato o producto.
o Modificación covalente reversible a través de una cascada
- ASPARAGINA reguladora:

- CARBAMOIL FOSFATO -> Únicamente usado para la biosíntesis de Se produce mediante una cascada reguladora que actúa por
arginina, urea y nucleótidos de pirimidina. adenililacion, que inactiva el lugar catalítico del encima.

Lo que ocurre es que un residuo de tirosina especifico de la encima

reacciona con el ATP dando así lugar a un éster entre el grupo
hidroxilo fenólico y el fosfato del AMP resultante.

Este encima es la ADENILIL TRANSFERASA (AT) que puede

4. REACCIONES DE ASIMILACIÓN DEL NITROGENO (5
activarse o desactivarse.
REACCIONES):
1) GLUTAMATO DESHIDROGENASA: 3) ASPARAGINA SINTETASA:

Es una aminación reductora del α-cetoglutarato (entra al ciclo de Krebs en Concretamente es una amidación que es muy comparable con la reacción de
células animales). la glutamina sintetasa solo que su contribución es mucho menor.

Las bacterias que tienen como única fuente de alimentación el nitrógeno usa Esta utiliza NH3 o glutamina para catalizar la conversión de aspartato a
esta reacción como principal ruta, la GLUTAMATO SINTASA. asparagina.
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4) CARBAMOIL FOSFATO SINTETASA:

Es importante para crear un intermediario muy importante para el ciclo de la
urea, el carbamoil fosfato.

Se puede formar con CO2 + N2 + ATP.

Se usa la glutamina y el NH3 para obtener el nitrógeno y poder sintetizar el

carbamoil fosfato.
Cuando se ha asimilado el nitrógeno del glutamato se utiliza la síntesis de
otros AA mediante la transaminación.
La transaminación está dada por enzimas transferasas o aminotransferasas.
Estas lo que hacen es transferir el grupo α-amino a un α-cetoácido con la
formación del correspondiente AA y su derivado cetoácido que en el caso del
glutamato es el α-cetoglutarato.
Tenemos aminotransferasas especificas los animales para cada AA, excepto
la LISINA y la TREONINA que se tienen que obtener mediante la dieta. Estas
no pueden sintetizarse porque no tenemos las enzimas que pueden sintetizar
sus esqueletos carbonatados, es decir, α-cetoácidos.
Como podemos ver algunos provienen de intermediarios glucolíticos (azul), otros
del CAC o piruvato (verde) y otros que son esenciales (rojos) que se sintetizan en
plantas y baterías.
Necesitaremos una transaminación con la LPL para el piruvato – alanina;
Oxalacetato – aspartato – asparagina; α-cetoglutarato – glutamato – glutamina.
Para pasar de 3-fosfoglicerato necesitamos NAD+ que pasara a ser 3-
fosfohidroxipiruvato, una transaminación con LPL tendremos 3-fosfoserina y
finalmente agua y obtenemos serina.
RUTA DEL ÁCIDO SÍKIMICO:

Además, hay que destacar las coenzimas que participan en el metabolismo

del nitrógeno:

o PIRODOXAL FOSFATO (PLP): Cofactor de la transaminación derivado

de la vitamina B6.

o ÀCIDO FOLICO: Cofactor que transfiere grupos funcionales de 1 solo

carbonilo a la síntesis de nucleótidos y determinados AA.

o COENCIMA B12 O COBALAMINA: participa en la síntesi de metionina.

5. BIOSÍNTESIS DE AA

Tenemos distintas familias de AA según su precursor estas son:

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Los AA que los animales deben proporcionar desde la dieta se llaman AA

esenciales.
Para poder sintetizar anillos aromáticos a partir de precursores que no son cíclicos
necesitamos este ciclo que está limitado en plantas y bacterias con la excepción CASO ESPECIAL: La Metionina y Arginina, se consideran esenciales porque parte
de la hidroxilación de la fenilalanina a tirosina. de ellos deben obtenerse en la dieta para rutas de biosíntesis, pero tenemos
maquinaria para fórmalos y usarlos únicamente para el ciclo de la urea y grupos
metilos.
7. METABOLISMO DE COMPUESTOS NITROGENADOS (AA Y
ÁCIDOS NUCLÉICOS)

Como que la mayoría de los organismos no pueden almacenar nitrógeno, nos

SÍNTESIS DE LA HISTIDINA:
encontramos que constantemente tienen que estar sintetizando o aportando AA
con la dieta.

Cuando las proteínas de la alimentación no son suficientes empezamos a usar las

que se han sintetizado para otra finalidad como las musculares (y ya no se
reparan).

En condiciones óptimas los animales consumen y sintetizan una cantidad

equivalente de compuestos nitrogenados.

Podemos encontrarnos con un balance positivo (se sintetiza más de lo que se

gasta) o negativo (se gasta más de lo que se sintetiza).

Las proteínas endogenasas pueden ser degradadas para obtener energía, de

manera que estas están sujetas a una biosíntesis y degradación continua
(recambio proteico). Aquellas que se necesita una concentración determinada
constante, hace falta una síntesis a una velocidad constante para obtener esta
concentración continua.

Muchos de los AA liberados durante los procesos de síntesis de proteínas

presentan mucha variabilidad en los tiempos de vida (puede ser de minutos a
meses).

El RP nos sirve para eliminar las proteínas que han sido alteradas u oxidadas y
hasta como fuente de AA en determinadas circunstancias. Además, también para
regular la expresión génica para eliminar factores de transducción o como
respuesta una agresión ambiental.

6. METABOLISMO DE AA
8. UBIQUINITIZACIÓN DE PROTEINAS
Los organismos presentan amplias diferencias a la hora de sintetizar Y DEGRADACIÓN EN EL
AA, ay que por ejemplo plantas y bacterias, son capaces de sintetizar
todos los metabolitos nitrogenados a partir de NH 4+ o nitrato, pero en
PROTEOSOMA
cambio los animales solo son capaces de sintetizar la mitad de los AA y
La ubiquitinación sirve para marcar las
en las proporciones necesarias para su crecimiento y mantenimiento de
proteínas que deben ser degradadas, de forma
balance de nitrógeno.
que la ubiquitina es una proteína muy pequeña
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y estable térmicamente, de manera que forma enlaces covalentes con estas conectados por los intermediarios comunes como el: aspartato, oxalacetato y
proteínas celulares que deben degradarse con ayuda de ATP (que esto hace que fumarato.
se condense el grupo carboxiterminal de la ubiquitina con grupos amino de Nos encontramos con las siguientes reacciones:
lisinas de la proteína diana).
1) Separación del grupo amino del α-cetoácido.
Tenemos 3 proteínas (E1, E2 y E3) que serán las encargadas de transferir la
ubiquitina a los residuos de lisina de la proteína diana, aquella que queremos Este se produce mediante una transaminación con la síntesis simultanea de
marcar para que sea degradada por el proteosoma cuando la reconozca. glutamato a través del α-cetoglutarato, es decir se transfiere el grupo amino
del AA al glutamato que es quien se va a procesar para obtener NH 4+. Por lo
Los pasos que seguir son: tanto, seguidamente participara el glutamato deshidrogenasa para
desaminar el α-AA al cetoácido correspondiente y NH4+.
1) Se da la formación de un ATP a partir de un enlace tioéster que se forma
entre el carboxiterminal de la ubiquitina y el grupo tiol de E1. 2) Eliminación del nitrógeno.

2) Se da la transferencia de la ubiquitina de E1 a E2. 3) Ciclo de la urea.

3) Se da la transferencia de la ubiquitina al residuo de lisina de la proteína

diana.
10. USO DE LOS α-CETOÁCIDOS

4) Tendremos cadenas de ubiquitinas unidas a los residuos de lisina de la El esqueleto carbonatado de estos puede oxidarse en el CAC, ser utilizado para la
proteína diana, la que va a ser degradada y esta será reconocida por el biosíntesis de HC (dependiendo del organismo) usando la gluconeogénesis ya que
proteosoma que es un barril por el cual pasaran estas proteínas marcadas se forma piruvato o oxalacetato, también puede ser usado para la cetogénesis
(entran y salen) y serán degradadas a péptidos pequeños. (crear cuerpos cetónicos) ya que se forma acetil CoA o acetoacetil CoA.

Los 20 AA se convierten en 7 intermediarios útiles para ser oxidados y utilizarse

en el CAC o en la síntesis de cuerpos cetónicos.
9. CATABOLISMO DE AA

En animales cuyo consumo de proteínas en alimentación supera las necesidades

para la síntesis de proteínas, ese exceso de nitrógeno es excretado en forma de
urea.
Los AA separados son NH 4+ y esqueletos carbonados.

Estos últimos se
catalizan en el CAC
(obtenemos CO2 + H2O
+ ATP o intermediarios
metabólicos) y el NH4+
una parte de este se
excreta en forma de
urea gracias al ciclo de
la urea y la otra parte
para síntesis de
compuestos que
contienen amonio.

Tenemos que el CAC y 11. ELIMINACIÓN DEL NITRÓGENO

el ciclo de la urea están
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Como ya sabemos un alto porcentaje de nitrógeno en el organismo es tóxico y por
ello cada ser vivo tiene su forma de expulsarlo con la misma rapidez que se
obtiene de los AA.
Dependiendo del hábitat la expulsión de este es distinta:
- Animales acuáticos: estos pueden captar y expulsar agua en cantidades
ilimitadas, de esta manera el NH4 + se disuelve en el agua y se secreta
directamente al exterior.
para formar la urea. Estos dos reaccionan todo ello catalizado por la ORNITINA
CARBOILASA para dar lugar a Citrulina.
El segundo nitrógeno que necesitamos proviene del aspartato que lo incorpora a
la Citrulina formando arginosuccinato que es catalizado por la ARGINO-
SUCCINATO SINTETASA para dar lugar a Arginina y Fumarato.
Entonces la Arginina se hidroliza para regenerar la Ornitina y generar urea (1
carbono y 1 nitrógeno del carbamoil y 1 nitrógeno del aspartato).

- Animales terrestres: estos expulsan el NH4+ de manera que no haya una El CO2 y el amonio se incorporan por las reacciones de la carbomoil fosfato
perdida de agua innecesaria, por ello lo transforman en una molécula que sintetasa y el glutamato deshidrogenasa.
pueda excretarse, urea.
REACCIONES DEL CICLO:
- Animales uricotélicos: excretan ácido úrico (purina oxidada) que es insoluble
y precipita, de manera que se excreta sin pérdida de agua y sin elevar la
presión osmótica. (Utiliza la ruta para la síntesis de nucleótidos de purina).
Marrón interior
- Animales uricotélicos: excretan urea. Esta es muy soluble y es neutra, por lo
mitocondria, blanco en el
tanto, no afecta al pH si se acumula.
citosol.
CURIOSIDAD: El perro dálmata excreta la mayor parte del nitrógeno en forma
de ácido úrico.
La Ornitina tiene que ser
transportada al interior de
la mitocondria y la Citrulina
12. CICLO DE LA UREA se tiene que exportar al
citosol.

CONEXIÓN CICLO DE KREBS Y

EL CICLO DE LA UREA:

Nos encontramos que el

La urea se sintetiza únicamente en el hígado y se transporta hasta los riñones aspartato necesario para el ciclo de la urea sale de una transaminación de
para su excreción. Oxalacetato, el cual es un intermediario del ciclo de Krebs, igual que el malato y el
fumarato.
Los primeros intermediarios que encontramos son la Ornitina que actúa como
transportador sobre el cual se ensamblan los átomos de carbono y nitrógeno que
finalmente construyen la urea y esta se sintetiza a partir del glutamato; y
La enzima CARBAMOIL FOSFATO SINTETASA I (CPSI), es quien cataliza la primera
también el carbamoil fosfato que es de donde proviene el carbono y el nitrógeno
reacción del ciclo de la urea y esta es activada alexitéricamente por el N-
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Acetilglutamato (que es sintetizado por el glutamato) que proporciona una regulación ¡GASTAMOS 4 ATP!
a corto plazo del flujo a través del ciclo de la urea.

La concentración de N-Acetilglutamato viene determinada por la concentración de

glutamato que será alta según la degradación de AA a través de transaminaciones. El amoniaco puede transportarse al hígado de 2 formas:

1) La GLUTAMINA SINTETASA convierte el amoniaco en un producto no toxico y

neutro eléctricamente gracias al glutamato, de manera que cuando sea
De forma que podemos decir que esta regulado por la degradación de AA y la transportado no haga cambiar el pH de la sangre. (MAYORIA DE LOS TEJIDOS).
concentración de Arginina. Entonces gracias a la GLUTAMINASA, la glutamina se hidroliza en el hígado.

2) Tiene lugar en el musculo y ahí se obtiene la mayoría de energía de la glucólisis.

13. CICLO DE LA GLUCOSA-ALANINA (EN EL MÚSCULO)

El glucolisis en el musculo genera piruvato, que se transamina con glutamato para dar Alanina y un α-cetoglutarato.

Esa alanina se transporta al hígado por la sangre, allí pierde su nitrógeno y produce amoniaco y en cambio el piruvato hace la gluconeogénesis para dar glucosa que será
transportada al músculo de nuevo o al cerebro.

Esto permite renovar los carbonos y eliminar el nitrógeno del musculo.

Entonces la urea ira a parar a los riñones donde será eliminada en forma de orina.
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