ESPECTROFOTOCOLORIMETRIA

Laura Ariza1
María Paula Gómez1
Robinson Martínez2
Juliana Valero1

1
Universidad de La Salle, Departamento de ciencias básicas, Facultad de ingeniería ambiental, Fisicoquímica, grupo 5

Universidad de La Salle, Departamento de ciencias básicas, Programa de biología, Fisicoquímica, grupo 5

2
 • Estudiar las leyes de la espectrofotometría y sus
leyes de aplicación al análisis cuantitativo y la
estandarización de métodos.
• Reconocer el adecuado funcionamiento del
espectrofotómetro.
OBJETIVOS • Determinar experimentalmente la longitud de onda
óptima de la solución coloreada por medio de la
realización de la curva espectral.
• Comprobar experimentalmente las leyes de
absorbancia Lambert y-Beer.
¿Que es la Espectrofotocolorímetria?

se define como la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe

un sistema químico en función de la longitud de onda sobre una sustancia coloreada

se basa fundamentalmente en la medida directa de absorción de la radiación

electromagnética, puede decirse que es un método óptico de análisis que mide la cantidad de
luz absorbida por una sustancia coloreada

https://fisica.laguia2000.com/wp-content/uploads/2010/11/ELECTROM1.png
 Absorbancia: Transmitancia :
Es la cantidad de energía radiante
La cantidad de luz que atraviesa un
absorbida por una sustancia pura o en cuerpo, en una determinada longitud de
solución. onda.

fig 2. transmitancia
fig 1. Absorbancia elespectrofotometro.com/transmitancia-y-absorbancia/
elespectrofotometro.com/transmitancia-y-absorbancia/

La absortividad es característica de cada sustancia

y depende de la longitud de onda incidente.

• La absortividad específica es la absorbancia por

gramo de sustancia (ae).
• La absortividad molar por mol de sustancia.
equipamientocientifico.com (am)
 Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolución se utiliza:

Fig 3. medición de absorbancia y transmitancia

www.qfa.uam.es/labqui/practicas/practica4.pdf

Una fuente de radiación que suele ser una lámpara de filamento de wolframio
● Un monocromador que permite seleccionar una longitud de onda determinada
originando un haz monocromático.
● Un recipiente para contener la muestra denominado cubeta
● Un detector que convierte la energía radiante en una señal eléctrica.
● Una pantalla de visualización
 Ley de Lambert.
• Esta ley establece que cuando pasa luz monocromática por un medio homogéneo, la
disminución de la intensidad del haz de luz incidente es proporcional al espesor del
medio
• lo que equivale a decir que la intensidad de la luz transmitida disminuye
exponencialmente al aumentar aritméticamente el espesor del medio absorbente

La siguiente relación matemática da cuenta de esta ley:

P / P0 = e –kb

• Po : Intensidad de la luz incidente

• P : Intensidad de la luz transmitida
• b : Espesor del medio absorbente
• k : Constante
Fig 4. Ley de Lambert

(Yevenes et al., 2011)

 Ley de Beer
• La intensidad de un haz de luz monocromática disminuye exponencialmente al
aumentar aritméticamente la concentración de la sustancia absorbente, cuando
este haz pasa a través de un medio homogéneo.

La relación matemática que da cuenta de esta ley se

muestra a continuación

P / P0 = e -k’c

• Po : Intensidad de la luz incidente

• P : Intensidad de la luz transmitida
Fig 5. Ley de Beer • c : Concentración de la solución
• k : Constante

(Yevenes et al., 2011)

 Ambas leyes se combinan en una sola,
generando la Ley de Lambert-Beer -Bouger.

Hay una relación exponencial, entre la transmisión de la

luz a través de una sustancia y la concentración de la
sustancia , así como también entre la transmisión y la
longitud del cuerpo que la luz atraviesa.

DONDE :
- I: Distancia que la luz atraviesa en un
cuerpo
- C: Concentración de la sustancia
absorbente en el medio
- α:coeficiente de absorción (absorción
molar de la sustancia). Fig 6. absorción de un haz de luz ,
atravesando una cubeta de tamaño I

https://es.slideshare.net/JuanPesantes/capitulo-1-coeficiente-de-absorcin-dispersin-y-extincin
 Las radiaciones electromagnéticas
se caracterizan por su frecuencia
(Vi) o por su longitud de onda (λ).

• Vi: c / λi
• Donde
C:velocidad de la luz

Fig 6. Onda electromagnética

https://fisica.laguia2000.com/wp-content/uploads/2010/11/ELECTROM1.png

Las radiaciones llevan a ella una determinada cantidad de energía

E=h x V
• Donde
• h : Constante de Planck (6,62x10^-27 erg-s)
Max Planck
https://tse2.mm.bing.net/th?id=OIP.e
WkWqSftnaY0m70oyYLwGwHaKV&
• h.v : Energía de un fotón
pid=15.1&P=0&w=300&h=300
• Si el objeto es transparente
la radiación puede
transmitirse total parcial
• La energía que es absorbida I 0 I t

es proporcional al número de
centros que absorben y a la
intensidad que incide (I).
• Si la radiación de intensidad
(I) incide sobre la solución
• la intensidad I disminuye en
Di por cada variación en el dl
número de centros dx
Pérdidas por
Fig 7. Relacion entre absorbacia y trasnmitancia reflexión

(Hernández & Ruiz, 2005)

 El espectro electromagnético

se define como la incidencia de diferentes

radiaciones electromagnéticas en un
sistema.

Las radiaciones permiten identificar

sustancias partiendo de las escalas
organizadas según la longitud de onda.

Fig 8. Espectro electromagnético

https://www.astrofisicayfisica.com/2012/06/que-es-el-espectro-electromagnetico.html
Sí el número de centros por unidad es C, entonces la variación en el número
de centros será cdx.
dI α cdx
dI K cdx
K= constante de proporcionalidad
Integrando los límites:
Sí K/2.303 = a, por
I0
log = (K*C*b) / 2.303 consiguiente:
T
A= a*b*C (Ley BBL)
A = (K/2.303) *b*C Donde a: absortividad

b = espesor de la celda
 Absorbancia
Curva de calibración de
absorbancia vs lambda

Condiciones: A

★ λmáx.
★ Cumplir la ley B-B-L

Graficar A vs C

λmáx.
 Transmitancia

Curva de calibración de
La intensidad transmitida %T
transmitancia vs lambda
que se puede expresar como
porcentaje:
I0
log =A
T

A = log I0 - log t

A = 2 - log T λmáx.
 Curva patrón
A

m=ab

Si el sistema es una
línea recta entonces
se cumple la ley de
Lambert- Beer así: C

Fuente :Guías de Laboratorio universidad de La

Salle.
Fuente : Autores
 Procedimiento
Añadir a cada una:
● 1ml de HCl (1N)
● 20 ml de agua Completar el
volumen con Determinar la
● 0.5 ml de solución curva
Se toman alícuotas agua, agitar y
hidroxilamina (H3NO) espectral del
de 0 a 7 ml. dejar en reposo
● 2.5 ml de la solución de sistema, entre
o-fenantrolina 15min
%T y ; A vs
● 2.5 ml de acetato de
sodio

Tomar 10ml de Seleccionar la

la muestra, Graficar la
Calcular el error longitud de
acidificarla y curva patròn
relativo de las onda máxima
calcular el A vs C y T%
concentraciones de Absorbancia
contenido de Fe vs C
Tabular %T, A,
en ppm C
 Preguntas de investigación
¿Cuales son los principales espectros en que se divide el
espectro electromagnético?
Colores que componen el espectro visible con su longitud de onda
 3. Defina el color blanco y el color negro.

Se puede definir como

Se puede definir como un
las percepción máxima
color acromático,
de la oscuridad.
consecuencia de una
Consecuencia de la
fotorrecepción alta. Es
inexistencia de
decir, una alta incidencia
fotorrecepción. Es decir
de una gran cantidad de
una nula incidencia de
luz
luz.
video
BIBLIOGRAFÍA
● Montaña, V. H., & Arandia, M. V. (2005). Guía teórica y experimental de fisicoquimica para programas de
ingenieria. Bogotá: Universidad de La Salle.

● Yevenes, I., Díaz, M., Neira, M., & Covarrubias, C. (2011). Guía de trabajos prácticos y seminarios química II.
Santiago: UNIVERSIDAD DE CHILE.

● Transmitancia y absorbancia - espectrofotometría .Obtenido de

https://elespectrofotometro.com/transmitancia-y-absorbancia/

● Práctica 4 Colorimetría. Ley De Lambert-Beer .Fundamento Teórico Espectrofotometría.Obtenido de

http://www.qfa.uam.es/labqui/practicas/practica4.pdf