COLORIMETRIA

¿Qué es colorimetría?

La colorimetría es una técnica instrumental que tiene por

objeto determinar la absorción de la luz visible por una
muestra, que puede ser una sustancia pura o bien una
mezcla o disolución, con lo cual se pretende establecer el
valor de la concentración de dicha sustancia en disolución,
mediante la comparación del color de la misma con el de
un patrón o referencia, sea ésta líquida o sólida.
Técnica colorimétrica

Las técnicas colorimétricas se basan en que las moléculas

absorben las radiaciones electromagnéticas, en función de su
longitud de onda y a su vez que la cantidad de luz adsorbida
depende de forma lineal a la concentración.

Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula

puede absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen
de la estructura atómica y de las condiciones del medio (pH,
temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica).

• La adsorción de la luz depende de la intensidad del rayo

• A mayor intensidad de la luz incidente mayor seria la
intensidad de la luz trasmitida.
Para llevar a cabo las mediciones colorimétricas es necesarios tomar como punto de comparación la
llama curva espectral codificada. Que permite asignar valores numéricos a la respuesta de estímulos de
colores.

La región UV se define como el rango de

longitudes de onda de 195 a 400 nm. Es una
región de energía muy alta. Provoca daño al ojo
humano así como quemadura común.

En la región visible apreciamos el color visible de

una solución y que corresponde a las longitudes
de onda de luz que transmite, no que absorbe. El
color que absorbe es el complementario del
color que transmite. Por tanto, para realizar
mediciones de absorción es necesario utilizar la
longitud de onda en la que absorbe luz la
solución coloreada
Transmitancia y Absorbancia
Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad I o incide perpendicularmente sobre
una disolución de un compuesto químico que absorbe luz o cromóforo, el compuesto absorberá una parte de la
radiación incidente (Ia) y dejará pasar el resto (It), de forma que se cumple: Io = Ia + It

  transmitancia (T) de una sustancia en solución es la

La
relación entre la cantidad de luz transmitida que llega al
detector una vez que ha atravesado la muestra, It, y la
cantidad de luz que incidió sobre ella, Io, y se representa
normalmente en tanto por ciento:

La transmitancia nos da una medida física de la relación de

intensidad incidente y transmitida al pasar por la muestra.

La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la

muestra puesto que nos indica la cantidad de luz absorbida
por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en
consecuencia:
 La ley de lambert-Beer
  de Beer Es una relación empírica que relaciona la absorción de luz con las propiedades del material
Ley
atravesado. La ley de Beer- Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad
saliente después de que en dicho medio se produzca absorción. La relación entre ambas
 

 
Donde
A: absorbancia o densidad
: coeficiente de absorción (propio de cada sustancia a una determinada longitud de onda)
: espesor de la cubeta de medición expresada en centímetros
: concentración de analito
 
La absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración –a mayor número de
moléculas mayor interacción de la luz con ellas-; también depende de la distancia que recorre la luz por la
solución –a igual concentración, cuanto mayor distancia recorre la luz por la muestra más moléculas se
encontrará.
El colorímetro
El funcionamiento del Colorímetro es bastante simple, a
través de una muestra de luz; puede ser por reflexión o por
emisión, se podrá determinar el valor tomando en cuenta
una iluminación estándar.

En términos generales, el colorímetro tiene la capacidad de

cuantificar el color y compararlo con otro, el resultado que
se genera como valor numérico asignado al color, permite
que el color sea clasificado adecuadamente en la escala de
colores

Funciones del colorímetro El colorímetro tiene tres

funciones específicas, que son:
1. Determinar el valor numérico de un color.
2. Llevar a cabo una comparación entre colores.
3. Establecer la intensidad y los matices del color estudiado.
Espectrofotómetro
sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación
entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos
haces de radiaciones y la concentración o reacciones químicas que
se miden en una muestra. Estos instrumentos constan:

1. Una fuente de energía radiante: lámpara de deuterio y

tungsteno.
2. Un monocromador para la selección de radiaciones de una
determinada longitud de onda: filtros, prismas, redes de difracción.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente
(cubetas o tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio,
cuarzo o plástico transparente. Para medir en UV se deben usar las
de cuarzo o sílice fundido, porque el vidrio no transmite la
radiación UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las señales
luminosas en señales eléctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.
Técnica de calibración del espectrofotómetro S 20 
1. Conecte el espectrofotómetro al circuito eléctrico. 
2. Seleccione la longitud de onda con el botón selector de longitud de
onda. 
3. Encienda el aparato con el botón de encendido. 
4. Deje calentar el aparato durante 10 0 15 minutos. 
5. Con el mismo botón de encendido 0 de ajuste al aire, lleve la aguja de la
escala al valor de 0% de T. 
6. Llene una celda con el blanco o testigo. 
7. Introduzca la celda en el compartimiento de la muestra. 
8. Ajuste a 100% T 0 de A con el botón de ajuste de ajuste con el blanco 

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de

luz y longitud de onda a la que se va a realizar la medida. Hay
espectrofotómetros de un solo haz (con una sola celdilla para alojar la cubeta
con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas); en
nuestro caso se trabajará con los de un solo haz.
Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al
que se le asigna el valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que
la intensidad incidente y transmitida sean iguales (Io = It), y por tanto la
absorbancia es cero. A continuación se pone en la celdilla la cubeta con la
muestra y se lee la absorbancia de ésta.
Practica de colorimetría

• ¿Qué finalidad tiene la

colorimetría?

• ¿Que podemos determinar con

la colorimetría?

• ¿Como interviene de ley de

lambert-Beer?