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MANUAL DE TRABAJO
CUANTIFICA
MICROORGANISMOS
CONTENIDO PROGRAMÁTICO
PRIMER PARCIAL
Unidad I. APLICACIONES DE LA CUANTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Del 15 de febrero al
I.1 Importancia de la microbiología
19 de marzo 2021
I.2 Bases de microbiología
1.1.1 Ambiental
1.1.2 Alimenticia
1.1.3 Farmacéutica
1.1.4 Clínica
1.1.5 Procesos biotecnológicos y control microbiológico
SEGUNDO PARCIAL
Unidad II. MÉTODOS DE CUANTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS Del 22 de marzo al
1.1 Métodos directos
1.2 Métodos Indirectos 07 de mayo 2021
PRACTICA: Método indirecto de cuantificación de microorganismos: Diluciones en placa
TERCER PARCIAL
Unidad III. CUANTIFICACIÓN DE DIFERENTES MUESTRAS DE ACUERDO A LA Del 10 de mayo al
NORMATIVIDAD 09 de junio 2020
1.1 Legislación
1.2 Análisis de agua
1.3 Análisis de lácteos
1.4 Análisis de productos cárnicos
PLAN DE EVALUACIÓN
PRIMER PARCIAL
EVIDENCIA DEL IMPORTANCIA, BASES Y AREAS DE RÚBRICA 10%
TRABAJO EN CLASE APLICACIÓN DE LA CUANTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS
CUESTIONARIOS EN LÍNEA IMPORTANCIA, BASES Y APLICACIÓN CLAVE EN LÍNEA 10% c/u
REPORTE DE INVESTIGACIÓN PROCESO GENERAL MICROBIOLÓGICO RÚBRICA 20%
DOCUMENTAL
TOTAL 100%
TERCER PARCIAL
TOTAL 100%
1.- Solicitar a través de un vale los materiales, reactivos y equipo para cada práctica
considerando:
4.- El material deberá ser repuesto de la marca y capacidad del adeudo, en el lapso de
una semana, presentando ticket o nota de compra.
ACTIVIDAD 1.
CONTENIDO
I.1.1 Ambiental
I.1.2 Alimenticia
I.1.3 Farmacéutica
I.1.4 Clínica
III.1 Legislación
PRACTICAS
CONTENIDO TEÓRICO
Aunque son las formas más pequeñas de la vida, constituyen en conjunto la biomasa
mayor sobre el planeta y realizan muchos procesos químicos que son necesarios para
otros organismos. En ausencia de los microorganismos nunca podrían haber surgido
otras formas de vida ni podrían mantenerse en la actualidad. Incluso el mismo oxígeno
que respiramos es una consecuencia de la actividad microbiana del pasado. Ninguna
otra forma de vida tiene una importancia similar a la de los microorganismos para el
mantenimiento de la vida sobre la tierra. Los microorganismos existieron en la tierra
miles de millones de años antes de la aparición de las plantas y los animales y, la
diversidad microbiana supera con mucho a la de las plantas y animales. Esta
diversidad tan amplia explica alguna de las propiedades más espectaculares de los
microorganismos.
Virología Parasitología
Ramas de la
Microbiología
Bacteriología Micología
carnívoros, entrando en su dieta los alimentos vegetales al final del periodo. Así mismo
durante ese periodo, los alimentos fueron cocinados por primera vez.
El periodo de producción de alimentos comprende desde hace unos 8000 años hasta
hace 10000 años, y naturalmente, incluye la época actual. Se supone que los
problemas de la alimentación de los alimentos y de las intoxicaciones alimentarias se
presentaron al inicio de este periodo. Con la llegada de los alimentos preparados
hicieron su aparición los problemas de la trasmisión de enfermedades por alimentos y
la alteración más rápida causada por su conservación inadecuada.
Parece que la alteración de los alimentos preparados data de alrededor del año 6000
a.C. Se cree que las primeras marmitas para cocinar tuvieron su origen en el Oriente
Próximo hace unos 8000 años.
La siguiente imagen muestra las principales áreas por las que se conforma un
laboratorio para el análisis de muestras microbiológicas.
procesos
biotecnológicos y
de control
microbiológico
Análisis
microbiológico alimentos
en áreas
Áreas de determinación
clínicas
y cuantificación de
microorganismos
farmacéutica
ambiental
Ilustración 1 Streptococcus
pyogenes
Ilustración
GBM/RILC 3 Staphylococcus
2021 CBTIS 203 aureus Ilustración 2 Mycobacterium tuberculosis
SUBMÓDULO 3: CUANTIFICA MICROORGANISMOS
12
Hasta el siglo XX, el estudio de los microorganismos del aire sufre grandes altibajos y
no es hasta mediados de siglo, cuando hay uno de los dos principales resurgimientos
de la época. El primero, fue en el estallido de la Segunda Guerra Mundial en donde
hubo un gran interés en conocer cómo se propagaban las infecciones respiratorias,
especialmente en instalaciones militares estadounidenses y se realizaron numerosos
estudios sobre Streptococcus pyogenes. El segundo, fue en los años setenta, con la
aparición de una enfermedad respiratoria llamada la «enfermedad de los legionarios»
y el conocimiento posterior de una nueva bacteria (Legionella pneumophila), como
agente etiológico y de su transmisión por aerosoles procedentes del aire
acondicionado. Ello supuso un resurgimiento del estudio de los microorganismos que
se transmiten por el aire.
Así mismo, en estos años se observa una mayor preocupación por el control del aire
de los ambientes cerrados, principalmente en los hospitales, industrias farmacéuticas y
alimentarias. Así como también, en otros ambientes cerrados, como fábricas de
aparatos electrónicos, escuelas y edificios de oficinas.
Este último caso, se debe a que, en los últimos años, se ha descrito una nueva
enfermedad «el síndrome del edificio enfermo», que se produce en los ocupantes de
determinados edificios. El origen de los síntomas, irritación de las membranas
mucosas, dolor de cabeza, erupciones y dificultad respiratoria, no está aún muy claro,
pero entre las posibles causas se citan factores ambientales (temperatura, humedad),
químicos (adhesivos, pinturas) y microorganismos.
TIPOLOGÍA
SUPERVIVENCIA
Los ambientes muy húmedos favorecen el desarrollo de los hongos, de las bacterias y
de los ácaros del polvo doméstico. El movimiento del aire contribuye al transporte,
mantenimiento y paso al aire de los contaminantes biológicos procedentes del exterior
o contenidos en un reservorio del interior. El grado y tipo de luz también pueden
favorecer o inhibir el desarrollo de los microorganismos. Por ejemplo, la luz ultravioleta
inhibe dicho crecimiento y la ausencia de luz impide la formación de esporas de
algunos hongos (Altemaria sp.). Los organismos vivos precisan de nutrientes para su
supervivencia y desarrollo; éstos son muy variados pero resumiendo, se podría decir
que el agua y la materia orgánica son los dos recursos principales de que se sirven
estos organismos para vivir. Por lo tanto, todos aquellos materiales y estructuras en
las que se reúnan esas dos condiciones pueden ser considerados como substratos
colonizables por los microorganismos.
Los microorganismos del aire proceden del suelo, del agua, de las plantas, de los
animales y de otras fuentes. En el aire de ambientes exteriores predominan los
microorganismos del suelo. En los interiores, la concentración de microorganismos es
considerablemente más alta, especialmente en lo que respecta a los que derivan del
tracto respiratorio humano.
ACTIVIDAD
Legionella pneumophila)
Bacterias y hongos.
Un sitio cumple con la norma de PST para el promedio de 24 horas cuando el valor del
percentil 98, calculado como se indica en la sección 5.4.5.1., es menor o igual a 210
ìg/m3
Un sitio cumple con la norma de PM10 para el promedio de 24 horas cuando el valor
del percentil 98, calculado como se indica en la sección 5.4.5.1., es menor o igual a 120
µg/m3
Un sitio cumple con la norma anual de PM10 cuando el promedio anual de los valores
diarios, calculado como se indica en la sección 5.4.5.2., es menor o igual a 50 µg/m3
Un sitio cumple con la norma anual de PM2.5 cuando el promedio anual de los valores
diarios, calculado como se indica en la sección 5.4.5.2., es menor o igual a 15 µg/m3
IMPORTANCIA
Mesófilos aerobios
Hongos y levaduras
Coliformes totales
Coliformes fecales
E- coli
Enterococos
Cl. Perfringens
Grupo 1
Microorganismos que no implican riesgo para la salud, pero si para la vida útil
del producto
Grupo 2 INDICADORES
Grupo 3 PATÓGENOS
temperatura
de alimentos
Coliformes
Enterobacterias
Contaminación postratamiento térmico
Staphylococcus aureus coagulasa +
Streptococos fecales
Mesófilos aerobios
Hongos
Los hongos tienen potencial para crecer en valores de pH extremos (1-11), mientras
que las levaduras lo hacen en pH (2-9).
• Aspergillus
• Rhizopus
• Fusarium
• Penicillium
• Mucor
• Alternaria
Levaduras
Cándida
Sacharomyces
Rhodotorula
Coliformes totales
Son coliformes que fermentan la lactosa con producción de gas a una temperatura de
44 a 44.5 °C, de vida libre y se transmiten por los malos hábitos de manipulación en
los alimentos. En este grupo se incluye el 90% de las colonias de E. coli y algunas
cepas de Enterobacter, Citrobacter y Proteus. En el género de Enterobacter están dos
grupos importantes, el de Salmonella y el de Shigella. Su presencia en el alimento
brinda información sobre las condiciones higiénicas del producto y la eventual
presencia de patógenos.
Los microorganismos son agentes muy importantes del deterioro de los alimentos,
También incluyendo unos cuantos que son patógenos para el hombre, colonizan y
viven en los alimentos más corrientes. La alteración de los alimentos es cualquier
Los alimentos frescos resultan alterados por una amplia variedad de bacterias y
hongos. Las propiedades químicas de los alimentos son muy diversas y cada tipo de
alimento fresco suele ser colonizado y alterado por un grupo de organismos
relativamente pequeño. Los organismos que causan la alteración son aquellos
capaces de tener acceso al alimento y que pueden usar los nutrientes disponibles.
Por ejemplo, las bacterias entéricas como Salmonella, Shigella y Escherichia, que son
patógenos potenciales que se pueden encontrar en el intestino de los animales,
contaminan y alteran con frecuencia la carne. En el matadero, el contenido intestinal
que contiene las bacterias vivas puede dejar escapar bacterias que contaminan los
productos cárnicos. Ocasionalmente, estos organismos también pueden contaminar
los productos por contaminación fecal de los sistemas de suministros de agua. De
modo similar, las bacterias lácticas, que son los microorganismos más frecuentes en
los productos lácteos, estropean la leche y sus derivados. Las especies de
Pseudomonas se encuentran en el suelo y en los animales y pueden causar el
deterioro de alimentos frescos y de todo tipo.
Los organismos señalados son los agentes más frecuentes de deterioro de alimentos
frescos perecederos y los géneros marcados en negritas incluyen especies que son
posibles patógenos para el hombre.
a) Frío
b) Acidez
c) Secado y deshidratación
d) Calor
e) Procesado aséptico de los alimentos
f) Conservación química
FRÍO.- Uno de los factores más importantes que afecta el crecimiento bacteriano
es la temperatura. Una temperatura baja ocaciona menos crecimiento y alteración. Sin
embargo hay varios microorganismos psicrotolerantes (tolerantes al frío) pueden
crecer aunque sea muy lentamente a la temperatura de un refrigerador de 3-5°C. Así
que guardar alimentos por largo tiempo solo es posible a temperatura por debajo de la
congelación, no obstante que altera la estructura física del alimento no es
recomendable éste método de conservación. Los congeladores que más se utilizan
son los que proporcionan una temperatura de -20°C. A esta temperatura es posible
mantener alimentos por semanas y meses, pero los microorganismos todavía pueden
crecer en burbujas de agua líquida atrapadas en la masa congelada. Para un
mantenimiento a largo plazo se necesitan temperaturas de -80°C (la temperatura del
CO2 sólido, nieve carbónica o “hielo seco”). El mantenimiento a temperaturas tan bajas
es caro y, en consecuencia, no se utiliza en el almacenamiento rutinario de los
alimentos.
ACIDEZ.- Otro factor que afecta el crecimiento microbiano sobre los alimentos
en el pH. El pH de loa alimentos es algo variable, pero la mayoría de ellos neutros o
ácidos. Los microorganismos difieren en su capacidad para crecer en condiciones
ácidas, aunque un pH de 5 o inferior inhibe el crecimiento de la mayoría de los
organismos que actúan en el deterioro. Por ésta razón, se utilizan a menudo ácidos
débiles en la conservación de alimentos mediante el proceso llamado encurtido. El
vinagre, que es ácido acético diluido, y a su vez un producto de la fermentación de las
bacterias acéticas, se añade en el método de encurtido. En este proceso se mezcla
normalmente el vinagre con grandes cantidades de sal o de azúcar para disminuir la
disponibilidad de agua e inhibir aún más el crecimiento microbiano. Alimentos
encurtidos típicos son los realizados con pepinillos (dulces o amargos), pimientos,
carnes, pescados y frutas.
Actividad 2d: pega una imagen representativa
SECCION EXPERIMENTAL
ÍNDICE
PRÁCTICA No. 1
“MUESTREO DE AGUA PARA ABASTECIMIENTO HUMANO”
Objetivo
Que el alumno conozca el procedimiento para toma de muestra de agua para su
análisis microbiológico de acuerdo con los lineamientos establecidos en la NOM-230-
SSA1-2002.
Introducción
La vigilancia de la calidad del agua es fundamental para reducir los riesgos de
transmisión de enfermedades a la población por su consumo, como las de tipo
gastrointestinal y las producidas por contaminantes tóxicos; esta vigilancia se
ejerce a través del cumplimiento de los límites permisibles de calidad del agua y
complementariamente, inspeccionando que las características de las construcciones,
instalaciones y equipos de las obras hidráulicas de captación, plantas cloradoras,
plantas de potabilización, tanques de almacenamiento o regulación, líneas de
conducción, redes de distribución, cisternas de vehículos para el transporte y
distribución y tomas domiciliarias protejan el agua de contaminación. El resultado
de la verificación e inspección de las características mencionadas, se evalúa
comparando las condiciones que presentan los sistemas de abastecimiento, con
los requisitos sanitarios que permiten preservar la calidad del agua
Procedimiento
1. Forrar y esterilizar frascos de vidrio (hermético y capacidad de 125 ml o 250
ml), en autoclave a 121°C, 15 lb, 15 min.
2. Colocarse los guantes, cubreboca y bata.
3. Debe dejarse correr el agua aproximadamente 3 min. hasta asegurarse que el
agua que contenían las tuberías ha sido renovada o que la temperatura del
agua sea estabilizada antes de tomar la muestra.
4. Toma de muestra del grifo: Cerca del orificio de salida, en el caso de frascos de
vidrio con tapón esmerilado y protegidos con papel, deben quitarse
simultáneamente el tapón del frasco y el papel de protección, evitando
que se contaminen el tapón, el papel de protección, o el cuello del frasco.
5. Sostener el tapón hacia abajo.
6. Proceder a tomar la muestra sin pérdida de tiempo y sin enjuagar el
frasco.
7. Dejar el espacio libre requerido para la agitación de la muestra previa al
análisis (aproximadamente 10% de volumen del frasco).
8. Efectuada la toma de muestra, deben colocarse el tapón con el papel de
protección o la tapa al frasco.
Introducción
Investigación
Materiales y equipo
Diagrama de flujo
Resultados y observaciones
Conclusiones
Bibliografía
Cuestionario
1. Qué es muestreo y cuál es su importancia para un confiable análisis
microbiológico?
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2. ¿De acuerdo con la norma NOM-230-SSA1-2002, qué características debe
tener el agua para uso y consumo humano?
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3. ¿Qué datos debe incluir el etiquetado de las muestras de acuerdo con la NOM-
230-SSA1-2002?
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6. ¿Cuál es el equipo de protección del personal que debe portar la persona que
tome la muestra?
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1%
(lista de cotejo)
Investigación
1%
Diagrama de flujo Representa todos los pasos del proceso
Ordena la información de manera jerárquica
Presenta limpieza, ortografía e imágenes
2%
Resultados (producto) Se obtuvieron los resultados esperados
2%
Informe completo de la
práctica (Reporte)
Conclusiones 1%
Cuestionario 1%
Fuentes consultadas 1%
SI NO Punt.
Desempe
limpieza, disciplina, 2%
Utiliza el equipo: bata blanca, lentes.
(Guía responsabilidad. 2%
de Maneja el equipo y reactivos de laboratorio
obser adecuado, siguiendo las instrucciones para su
vació uso, cuidados y medidas de seguridad,
n participando activamente.
para 2%
el Interpreta correctamente las instrucciones
dese escritas de la técnica y realiza adecuadamente
mpeñ el trabajo de laboratorio, participando
o) activamente en todas las actividades. 2%
Mantiene siempre limpio y ordenado su lugar
de trabajo (mesa, piso, vertederos,
fregaderos, etc.) y cumple con las normas
disciplinarias básicas para el trabajo en el
laboratorio, las cuales son: no correr, no
gritar y no empujar. 2%
Total
BIBLIOGRAFIA