QUÍMICA ANALÍTICA Y ANÁLISIS INSTRUMENTAL

SESIÓN 10: Métodos espectrofotométricos

Mg. Ing. Javier Chumán López

Al término de la sesión, el
estudiante comprende y aplica las
LEY DE BEER LAMBERT en
soluciones coloreadas.
ESPECTROFOTOMETRÍA

Es una técnica analítica utilizada para medir cuánta luz absorbe una sustancia
química, midiendo la intensidad de la luz cuando un haz luminoso pasa a
través de la solución muestra
TEORÍA ELECTROMAGNÉTICA
Teoría corpuscular. Propiedades corpusculares de la radiación electromagnética
La radiación electromagnética es considerada como paquetes discretos de
energía llamados fotones o cuantos.
Dualidad onda-partícula:
Un fotón es una partícula de radiación electromagnética con masa cero y energía
E proporcional a la frecuencia de la radiación ϑ
La energía de un fotón: E = h ϑ
•E = energía del cuanto de radiación: Cal mol-1
•ϑ = frecuencia de la radiación : hertzio (Hz) = ciclos s-1
•h = constante de Planck = 6,624 • 10-27 erg s
Velocidad de la luz : v = ϑ λ
Velocidad de la luz en el vacío: c = 3,00 • 1010 cm s-1
Energía de un fotón :E = h ϑ = h c /λ
➢Cuando λ aumenta, disminuye la energía y frecuencia del fotón
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

• Abarca un intervalo muy amplio de

longitudes de onda o energías.

• Según su λ recibe diferentes

nombres.

• La luz visible, que es la única

perceptible por el ojo humano,
representa solamente una
pequeña parte del espectro, desde
350-380 a 750-780 nm.
 FUNDAMENTO DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
UV-VISIBLE
➢Método instrumental óptico basado en la medida directa de la
absorción de radiación electromagnética UV-Visible, por las
moléculas del analito contenido en la muestra.
• La región ultravioleta comprende entre 10 y 400 nm y la
región visible comprende entre 350 y 750 nm.
FUNDAMENTO DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
UV-VISIBLE
FUNDAMENTO DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
UV-VISIBLE
FUNDAMENTO DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
UV-VISIBLE
TEORÍA DEL COLOR
• La sensación de color se produce cuando disminuye apreciablemente una o más zonas de la
región visible.

• Si el ojo recibe luz de todas las λ de la región visible el efecto es luz blanca.

• El color aparente siempre es el color complementario del que ha sido eliminado.

• Los colores complementarios son útiles para predecir la λ de absorción de los compuestos
coloreados: una disolución amarilla, absorberá luz azul 450-480 nm, para analizarla debemos
usar luz con esta λ seleccionada con el monocromador o bien usar un filtro azul, que
transmite esta luz azul
TEORÍA DEL COLOR
complementario
λ (nm) Color absorbido λ (nm) Color observado
380-420 violeta 520 - 550 amarillo-verde
420 - 440 azul-violeta 550 - 580 amarillo
440 - 470 azul 580 - 620 anaranjado
470 - 500 verde-azul 620 - 680 rojo
500 - 520 verde 680 - 780 púrpura
520 - 550 amarillo-verde 380 - 420 violeta
550 - 580 amarillo 420 - 440 azul-violeta
580 - 620 anaranjado 440 - 470 azul
620 - 680 rojo 470 - 500 verde-azul
680 - 780 púrpura 500 - 520 verde
Una disolución se observa de color azul cuando se ilumina con luz policromática, porque absorbe λ
Absorción de compuestos orgánicos
Absorción de compuestos
orgánicos

Cromoforos: sustancia que

tiene electrones capaces de
absorber energía y excitarse,
a diferentes longitudes de
onda.
Espectros de absorción de
compuestos orgánicos
Absorción de
compuestos
inorgánicos
Solventes
Aplicaciones cuantitativas
 ¿Cómo cuantificar especies no
absorbentes?
Muchos analitos no absorbentes se
determinan mediante fotometría al
hacer que reaccionen con agentes
cromóforos para obtener productos
que absorben en las regiones
ultravioleta y visible.
El ion tiocianato para el hierro,
cobalto y molibdeno; el anión del
peróxido de hidrógeno para el
titanio, vanadio y cromo. y el ion
yoduro para el bismuto, paladio y
telurio.
¿Cómo cuantificar especies no absorbentes?

También se aplican quelantes

orgánicos, que forman complejos
coloreados estables con los cationes:
FUNDAMENTO DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
UV-VISIBLE
Sus electrones más exteriores o electrones de enlace
Especie pueden ser elevados a niveles de E más altos al incidir
absorbente sobre ellas una radiación electromagnética apropiada
• Grupo atómico presente en una molécula que lleva
asociada una banda de absorción electromagnética:
C=C; C=O; C=N.
Grupo
• Especies con grupos funcionales con enlaces π.
cromóforo
• Grupos cromóforos →dobles y triples enlaces.
• Bandas en el UV cercano y visible.
• Etileno, carbonilo, éster, amida, nitro…

Grupos que no producen por sí mismos bandas de

Grupo absorción, pero intensifican la de los grupos
auxocromo cromóforos: C-Br; C-OH

Bandas de Responsables del color de muchos iones y compuestos de

campo ligando metales de transición que poseen orbitales d y f

21
LEY DE BEER & LAMBERT
Establece que la absorbancia es proporcional al número de moléculas absorbentes.
LEY DE BEER & LAMBERT

T = 25% A = -LOG (0.25)

A =0.602
Curvas de calibración
LEY DE ADITIVIDAD
-Disoluciones que contienen varias especies absorbentes:
Para cada λ: Atotal =∑Ai = A1 + A2 + .... + An
Como A =  · b · c
A = 1 · b · c1 + 2 · b · c2 + …. +n · b · cn
Siendo 1, 2, …, n los componentes absorbentes.
DESVIACIÓN DE LA LEY DE BEER
Taller #8

Resolver los ejercicios de

Lambert