Medios de cultivos

Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio (véase microbiología) que consta

de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en
condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus,
microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. Según lo
que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones.
Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de
ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en estado sólido, semisólido o
líquido.
Mucho antes de 1876, año en que Robert Koch por primera vez cultivó y propagó
Bacillus anthracis, el hombre ya había aprendido a cultivar los microorganismos.
Koch inicialmente desarrolló los medios líquidos y posteriormente incorporó la
gelatina como agente gelificante, logrando una nueva generación de medios
solidificados. El empleo del agar como agente solidificante revolucionó la práctica
de la preparación de los medios sólidos, convirtiéndolos en los más difundidos hasta
el momento.
A principios del presente siglo habían sido creados más de 2 000 medios de cultivo
artificiales, y en la actualidad, es prácticamente imposible determinar su cantidad.
Lo cierto es que de manera sistemática se están modificando los medios existentes,
o creando nuevos, que permitan mejorar el aislamiento y la diferenciación de los
microorganismos, o que posibiliten el crecimiento exuberante durante su cultivo
masivo.
Clasificación de los medios de cultivo
Los medios de cultivo pueden ser clasificados teniendo en cuenta criterios muy
diversos. Hasta el momento, no existe una clasificación única; sólo algunos autores
o casas comerciales coinciden en las clasificaciones más sencillas, basadas, por
ejemplo, en el estado físico (sólidos, semisólidos o semilíquidos y líquidos), o en la
escala en que se emplean (de laboratorio o industriales).
SEGÚN LA NATURALEZA DE SUS INGREDIENTES
◼ Proteicos: Contienen peptonas, hidrolizados o extractos, o sea, productos
de la lisis o hidrólisis parcial de las proteínas, cuya composición no se conoce
con exactitud.
◼ Sintéticos: No contienen en su formulación productos de naturaleza
proteica.
◼ Intermedios: Contienen compuestos nitrogenados de origen proteico, pero
de composición o estructura conocida, como los aminoácidos, conjuntamente
con otras sustancias orgánicas e inorgánicas conocidas.
SEGÚN LA PROMOCIÓN DEL CRECIMIENTO DE DETERMINADOS
MICROORGANISMOS
◼ De enriquecimiento: Por lo general son medios líquidos, pudiendo ser
semisólidos en algunos casos, que contienen sustancias que estimulan el
crecimiento de los microorganismos y permiten el desarrollo de la población
microbiana a partir de un número reducido de células de determinados
gérmenes que pueden encontrarse en presencia de otros que, hallándose en
condiciones favorables, pudieran frenar el desarrollo de los primeros.
◼ Selectivos: En su mayoría son sólidos, contienen sustancias que inhiben el
crecimiento de determinados microorganismos, o sea, previene el
crecimiento de especies acompañantes indeseables.
◼ Electivos: Toleran el crecimiento de varias especies de microorganismos y
a la vez facilitan la identificación de colonias de interés, garantizándoles los
nutrientes mínimos necesarios para su desarrollo.
SEGÚN SU FINALIDAD
◼ Comunes: Favorecen el desarrollo de la mayor parte de los microorganismos
sin satisfacer específicamente algún requerimiento nutricional de carácter
poco habitual en la generalidad de los mismos
◼ Especiales: Su composición cumple con los requerimientos nutricionales
vitales de un microorganismo determinado que sólo en ese medio encuentra
condiciones óptimas para su desarrollo.
◼ Diferenciales: Posibilitan la diferenciación entre microorganismos.
◼ Selectivos: Incluyen en su formulación ingredientes que inhiben el desarrollo
de determinados microorganismos y contienen otras sustancias que
promueven el crecimiento de otros.
Características de los medios de cultivo
Un microorganismo se puede sembrar en un medio líquido o en la superficie de un
medio sólido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van,
desde azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto
de caldo de carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una
muestra formada por muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo
sólido donde las células que se multiplican no cambian de localización; tras muchos
ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por escisión binaria una colonia
macroscópica compuesta por decenas de millones de células similares a la original.
Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como
cultivo puro de un solo tipo de bacteria.
La principal diferencia entre un medio de cultivo sólido y uno líquido es que el medio
de cultivo sólido contiene un 1,5–2% de agar-agar, mientras que el medio líquido no
contiene agar-agar.
Los medios de cultivo, para poder ser utilizados y garantizar que los resultados
obtenidos a partir de ellos sean confiables, deben cumplir con las siguientes
características:
◼ Disponibilidad de nutrientes.
◼ Consistencia adecuada del medio.
◼ Presencia o ausencia de oxígeno y otros gases.
◼ Condiciones adecuadas de humedad (mantener en frigorífico).
◼ Luz ambiental.
◼ pH adecuado.
◼ Temperatura.
◼ Esterilidad.
Composición del TSB y función
BD Tryptic Soy Broth (medio de digerido de soja y caseína) es un medio líquido
para enriquecimiento de uso general utilizado en procedimientos cualitativos para la
prueba de esterilidad y para el enriquecimiento y cultivo de microorganismos
aerobios no exigentes en exceso.
Es un medio nutritivo que favorece el crecimiento de una amplia variedad de
microorganismos, en especial las bacterias anaerobias facultativas y aerobias
comunes.
En BD Tryptic Soy Broth, los digeridos enzimáticos de caseína y harina de soja
proporcionan aminoácidos y otras sustancias nitrogenadas complejas. La glucosa
(dextrosa) es una fuente de energía. El cloruro sódico mantiene el equilibrio
osmótico. El fosfato potásico dibásico actúa como tampón para controlar el pH.

Fórmula por litro de agua purificada:

• Bacto Tryptone (digerido pancreático de caseína) ………… 17,0 g
• Bacto Soytone (digerido péptico de harina de soja) ……….. 3,0 g
• Glucosa (dextrosa) …………………………………………….. 2,5 g
• Cloruro sódico ………………………………………………….. 5,0 g
• Fosfato dipotásico de hidrógeno ……………………………... 2,5 g
 Medios selectivos
Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los que crece y se
multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto de aislar diferentes
especies bacterianas, con el din de identificarlas y realizar estudios
complementarios.
Pueden clasificarse según su:
• Consistencia
• Origen
• Composición
• Utilización
Consistencia:
• Líquidos: contienen nutrientes a los cuales se les adicionan sustancias con
la capacidad de mantener estables un pH, entre ellos podemos encontrar el
caldo nutritivo y caldo peptona.
• Solidos: se obtienen agregando agar (sustancia de tipo polisacárido que se
obtiene de algas marinas) a un medio liquido determinado. Al tener un medio
sólido, nos facilita obtener colonias bacterianas aisladas.
• Semisólidos: similares a los medios sólidos, la única diferencia es que a
estos se les disminuye la cantidad de agar, lo que permite conservar cepas
bacterianas y la observación y registro de bacterias móviles.
Bibliografías:

◼ Rodríguez. C & Zhurbenko. R. (2018). MANUAL DE MEDIOS DE CULTIVO.

Mayabeque, Cuba: BioCen.
◼ Schlegel, El crecimiento de los microorganismos (1976). «6.2». Medios de
cultivo y condiciones de crecimiento. Ediciones Omega S.A. p. 196.
◼ Enfermedades infecciosas 6. Ed. Escrito por Angela Restrepo M., p. 14
◼ Becton. D. (2008). BD Tryptic Soy Broth (TSB). 30/03/2022, de Becton
Dickinson France SA Sitio web:
https://legacy.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/HB/CE/BA/ES-BA-
257107.pdf
◼ Soto. A. (2019). Medios de cultivo. 30/03/2022, de EduLabC Sitio web:
https://edulabc.com.mx/tag/medios-selectivos/