iSperm bovino

Manual de instrucciones

Versión 2.1
Contenido
Hardware 03
Especificaciones 04
Componentes 05 - 06
Instalación 07 - 16
Muestreo 17
Principios básicos 18 - 22
Método de la pipeta 23 - 24
Método cuentagotas 25 - 26
Método de inmersión 27 - 28
Software 29
Análisis de semen 30 - 34
Envasado de Semen 35 - 37
Centro de datos 38 - 40
Informaciónn / Configuración / Ayuda 41 - 42
Nube 43 - 45
Transferencia de videos 46 - 50
Preguntas más frecuentes (FAQ) 51 - 57
Validación 58 - 60
Certificado 61 - 64
Hardware

3
 Especificaciones
Hardware
1. Magnificación óptica: equivalente a 200x en un microscopio tradicional
2. Resolución óptica: 1-1.5 µm
3. Peso: 350 g (excluyendo el Apple iPad mini)
4. Energía y batería: LR44 x 3, hasta 45 horas.
5. Color: negro
6. Especificaciones de la cámara para iPad mini4
● 8MP
● Grabación Full HD 1080p / 30 Fps
● Grabación de 720p / 120 Fps HD

Software
Rango de Análisis:
1. Concentración:
10-100 millones / ml (optimizado en 30-60 millones / ml) , error ± 5%
100-500 millones / ml, error de ± 10%
500 millones / ml, para la detección rápida solamente
2. Motilidad:
0% -100% para cualquier concentración (optimizado en 30-60 millones / ml)
3. Motilidad progresiva:
0% -100% para cualquier concentración entre 10-100 millones / ml
(Optimizado a 30-60 millones / ml)
Tiempo de análisis: Concentración y Motilidad <20seg;
La motilidad progresiva ~ 30 seg
Modo de análisis: Modo muestra descongelada y modo muestra fresca

Semen Sample
1. Semen fresco:
● Medición directa del semen para una valoración rápida..
● Semen diluido (diluyente no lácteo) a 36-37 ℃
2. Semen descongelado:
● Semen diluido (diluyente no lácteo) a 36-37 ℃

04
 Componentes del producto
Colector de Llave hexagonal (0,89 mm)
la muestra
Baterías LR44 X3
Calentador Vasos de medición

iPad Mini
Cable de alimentación Base de chips
Adpatador corriente Cubierta de chips
(Chips microfluídicos)
Lente óptica de alta resolución

05
 Chips microfluídicos
para muestras

500 parejas de Chips por caja;

50 Chips por bolsa

06
Instalación App iSperm - Paso 1/3

Buscar y DESCARGA “ISperm bovino” en la App Store

07
Instalación App iSperm - Paso 2/3

Abrir la aplicación iSperm. Siga los pasos para

ACTIVAR la aplicación.

ADE4 **** ****

****

08
Instalación App iSperm - Paso 3/3

CREAR UNA NUEVA CUENTA en la Nube de iSperm

09
 Instalar la carcasa con
lente óptica del iSperm

Inserte la carcasa
comenzando por lla parte
superior derecha (donde
se encuentra la lente) a
continuación, inserte la
esquina de abajo a la derecha

Presionar las otras dos

esquinas contra el iPad

Seguir el orden inverso cuando se quiera quitar

la carcasa. Esto evitará que la carcasa se rompa
en la esquina de la lente.

10
El uso del colector de la muestra

Pulse para encender / apagar la luz

Luz apagada Luces encendida

11
 Alineación óptica - Paso 1/3

Es necesario el ajuste del soporte de la lente de 3 ejes

para la alineación óptica es necesario para una medición
precisa.

3 tornillos de tope
sostienen el soporte de la
Lens lente en su lugar

Utilice una llave

hexagonal para ajustar
los tres tornillos de tope

12
 Alineación óptica - Paso 2/3

➡
Encender la luz Atornillar el colector
del colector

Abrir la App iSperm Utilizar la llave hexagonal

para ajustar los tres
tornillos de tope

Página siguiente muestra EJEMPLOS DE AJUSTES.

13
 Alineación óptica - Paso 3/3
PRECAUCIÓN: Use la llave hexagonal con suavidad
Ejemplo de ajuste 1:

➡
➡

➡
Original Alineación

Ejemplo de ajuste 2:
➡

➡
➡

Original Alineación

Ejemplo de ajuste 3:
➡

➡
➡

Original Alineación

14
Instalar el calentador (opcional)
(1)

➡ (2)

⇨
➡

(3)

(4)

(1) instalar el calentador en el soporte de la lente óptica

(2) Utilizar la llave hexagonal para la fijación del calentador
(3) Conectar el cable de red al calentador
(4) Conectar el cable de red al adaptador de alimentación

Una vez que el calentador

está conectado a la red, se
encenderá el indicador LED.
Cuando el LED comienza a
parpadear, la temperatura
llega a 37 ± 0,5 ℃.

15
¿Cómo reemplazar las baterías?

➡
⇨

Presione el anillo y el Vuelva a colocar tres

tornillo de la tapa en nuevas pilas LR44
el sentido contrario a con el ánodo (+) hacia
las agujas del reloj arriba. Enroscar la tapa
en sentido horario.

16
Muestreo

17
Elección de una muestra de calidad

Baja Concentración (О) Alta Concentración (О)

↖
Suciedad ↖
↖

↖
↖

Burbujas

(Χ) (Χ)

Aglutinación Diluyente Lácteo

(Χ) (Χ)

18
 Dilución del semen
Rango de análisis:

Parámetro Rango completo Rango óptimo

Concentración 10-500 millones / ml 30-60 millones / ml

0% -100% entre 0% -100% entre

Motilidad
10-500 millones / ml 30-60 millones / ml

Motilidad 0% -100% entre 0% -100% entre

Progresiva 10-500 millones / ml 30-60 millones / ml

Ejemplo Dilución:

Diluyente a 37ºC
Semen puro

Extender
Semen fresco (~ 500 -2000 M / mL)
#1
1 : 5 Primera dilución 1:5
(se recomienda añadir el semen al diluyente)

Extender
D1 Semen (~ 80-300M / mL)
#2
1 : 4 Segunda dilución 1:4
(si es necesario)

D2 Semen (~ 20-60M / mL)

#3

19
 Preparación del material

iSperm
(iPad Mini/ Lente/Calentador)

Colector Apoyo

Base del chip Eppendorf Pipeta Pasteur

Cubre-chip Vaso Micropipeta y puntas

20
Preparación del área de Trabajo y
montaje de la base del chip

Este paso es necesario firme / estable

para todos los métodos de Mesa
muestreo.

●● Encontrar una superficie

firme y estable (ej: mesa)

●● Limpiar la superficie de la mesa

●● La suciedad puede
contaminar los cubre-chip y (Χ)
esto interfiere en la medida.
Vista de iSperm con
presencia de polvo /
fibra en el cubre-chip
Este paso es necesario
para todos los métodos de Base del chip
muestreo.

●● Montar una base de chip en

el colector

●● Colocar los cubre-chip en

la mesa

Colector Mesa firme, estable

21
 Tres métodos de muestreo

① Método de pipeta
●● Volumen de la muestra: 7.5μL
●● El mejor cuando se
conoce el uso de
micropipeta y la cantidad
de semen es limitada

② Método Pipeta Pasteur 70 µL

●● Volumen de la muestra: 70μL
●● El mejor cuando no se conoce el
uso de micropipeta y la cantidad
de semen no es limitante

③ Método de inmersión
●● Para las pruebas rápidas o
para semen fijado

22
 Método de Pipeta (Paso 1/2)

1.1 Usar la pipeta para mezclar el

semen suave y completamente.
●● 10-15 veces en general para
tener una muestra de semen
bien mezclada y uniforme
●● velocidad suave para prevenir burbujas.

1.2 Pipetear 7.5µL sobre la zona

centro de la base del chip

1.3 Darle al colector un suave

golpe en la mesa para
extender la gota.
●● Una gota plana es crucial para
reducir la variabilidad

Gota plana

Antes Después
El truco es un *Vaya al paso siguiente, tan
golpe suave pronto como sea posible

23
 Método de Pipeta (Paso 2/2)

2.1 Colocar el cubre-chip, boca arriba sobre una mesa

firme y limpia.

2.2 Colocar el colector hacia abajo.

●● La gota permanecerá en la base del chip

2.3 Presionar la base dentro del cubre-chip verticalmente.

Se oirá un “clic” ; después de eso, seguir presionando
durante otros 1-2 segundos.

Colector
boca-abajo

Presionar la base Después de que el

en el cubre-chip sonido de “clic”,
verticalmente mantenga durante
1-2 segundos.
Cubre-chip

24
 Método de Pipeta Pasteur o
cuentagotas (Paso 1/2)

1.1 Usar el gotero para mezclar el

semen suave y completamente.
●● 10-15 veces en general para
tener una muestra de semen Gotero o pipeta
bien mezclada y uniforme de 0,2 ml
●● velocidad suave para prevenir burbujas

1.2 Use el gotero para aplicar 70-100μL en el cubre-chip

●● En torno a 2 mm de altura (~ 100 µl) en el cubre-chip es
suficiente.
●● Más de 3 mm de altura (~ 150μL) dará lugar a rebosamiento
de la muestra cuando se ajuste a la base del chip

cubre-chip

Menos de Más de
Menos de 3 mm 3 mm
2 mm
2 mm es
suficiente

(Χ) (О) (Χ)

25
 Método de Pipeta Pasteur o
cuentagotas (Paso 2/2)
2.1 Colocar el cubre-chip, boca arriba sobre una mesa
firme y limpia

2.2 Colocar el colector hacia abajo.

2.3 Presionar la base dentro del cubre-chip verticalmente.

Se oirá un “clic” ; después de eso, seguir presionando
durante otros 1-2 segundos.

Colector
boca-abajo

Después de que el
Presionar la base
sonido de “clic”,
en el cubre-chip
mantenga durante
verticalmente
1-2 segundos.
Cubre-chip

26
 Método de inmersión (Paso 1/2)
Este método es para las pruebas rápidas o vistazo
rápido de calidad seminal

1.1 Utilizar una micropipeta o pipeta Pasteur de gran

volumen para mezclar el semen suave y completamente.

1.2 Esperar 30 segundos para que se asiente el flujo.

●● Un flujo rápido causa incertidumbre durante el muestreo

1.3 Mojar la base del Chip en el semen

●● Colocar la base del chip a unos 5 mm por debajo de la superficie
de semen .

superficie

5 mm por debajo de la superficie

27
 Método de inmersión (Paso 2/2)

2.1 Colocar el cubre-chip, boca arriba sobre una mesa firme y

limpia up.

2.2 Colocar el colector hacia abajo.

●● La gota permanecerá en la base del chip

2.3 Presionar la base dentro del cubre-chip verticalmente.

Se oirá un “clic” ; después de eso, seguir presionando
durante otros 1-2 segundos.

Colector
boca-abajo

Presionar la base Después de que el

en el cubre-chip sonido de “clic”,
verticalmente mantenga durante
1-2 segundos.
Cubre-chip

28
Software

29
 Análisis de semen - Paso 1/4

1.1 Colocar el iPad en el apoyo o soporte

No apoye el colector
contra la mesa

Apoyo

1.2 Abrir la aplicación, y elegir “muestra descongelada” o

“muestra fresca” según sea el caso

30
 Análisis de semen - Paso 2/4

2. Imagen de vista previa

(ver detalles en “Preferred Specimen”)

Advertencia muestra si
se detecta movimiento.

ajuste de
enfoque
manual

31
 Análisis de semen - Paso 3/4
Se recomienda realizar 3-4 capturas
3.1 Girar el colector hasta que el logo esté apuntando
hacia arriba. Tocar en “Iniciar análisis”

Girando
suavemente
colector

3.2 Comprobar el resultado analizado.

resultados
⇨
analizados Pulse en la imagen
para ver el video

Tocar en “mostrar todos los Tocar en “X” para

datos” para ver los detalles eliminar la medición

32
 Análisis de semen - Paso 4/4
4.1 Rotación del colector para completar el análisis de 4
capturas. Tocar en “Iniciar análisis” para cada dirección.

4.2 Comprobar la “mediana” de las repetidas pruebas en la

pantalla. Tocar “completar análisis” al final y concluir el
resultado de la prueba.

La App no restringe el número real de pruebas repetidas.

Se requiere 1 captura de prueba; se recomiendan 4
capturas (CV inferior).

33
 Resultados del Análisis

Advertencia Pulse el botón

aparece si de reproducción
se detecta para revisar el
movimiento. video.

La concentración,
la motilidad y
la motilidad Los parámetros
progresiva están detallados de
en la fila primera. motilidad están
en la segunda fila.

Escriba el animal Pulse “Envasado de

Nombre / ID. Semen” o deslice hacia
la izquierda para ir a la
página de envasado.

34
 Envasado de semen /
Guardar Resultado
Pulse el botón en la esquina
superior izquierda para
salir sin guardar los datos.
Pulse el botón en la
esquina superior derecha
para guardar el resultado.

Indicar la
proporción de Pulse el botón
semen y diluyente. para decidir qué
(1) concentración de
(Por ejemplo, 1: 1 (2) la cálculo debe
significa que los (3) utilizar.
semen se diluye a
(Basado en la relación
la mitad) de dilución indicada,
habrá dos clases de
concentración:. La
concentración original
(antes de la dilución)
y la concentración
medida)
Indicar:
(1) El volumen total de semen antes Cuando se rellenen todos
de su envasado. los campos, el resultado
(2) ¿Cuántos espermatozoides móviles del cálculo se mostrará
deben existir en cada dosis. automáticamente a
(3) Volumen de cada dosis después continuación
del envasado.

35
Ajuste manual de morfoanomalías
(Opcional)
Durante el paso de “Análisis
de Semen”, pulsar el icono
para hacer un zoom para
comprobar la morfología de
los espermatozoides.

Seguir los pasos:

(1) Utilizar la barra de enfoque (1)
manual para ajustar el enfoque
(2) Pulsar el botón “Pausa” para
congelar la imagen
(3) Rellenar el porcentaje estimado
de anomalías en el campo de
texto
(4) Pulse el botón “OK” para salir (3) (4) (2)

36
 Ajuste manual de la motilidad
(Opcional)
En caso de ser necesario, la motilidad es ajustable manualmente.

Presione el botón de edición

Arrastre la barra para ajustar

la motilidad manualmente.

37
 Centro de Datos - Cuadros Online

Un gráfico que ayuda a visualizar todo el historial de análisis

Tocar para Tocar para

cambiar Eje X: cambiar el Eje Y:

Tocar para descargar el

historial de mediciones
en formato Excel.
Tocar para
cambiar Ordenar:

Tocar para ver los resultados detallados

38
 Centro de Datos - Lista de Animales

Vista del historial de un animal o ID específico.

Tocar para
cambiar Ordenar:

Tocar Animal ID para ver

todo el historial del animal

Los datos muestran la media de

parámetros para todo el historial

39
Centro de Datos – Historial de análisis

Una lista de los resultados de la medición almacenada en el iPad local.

Tocar en cualquier BO-7

MEASUREMENT para ver BO-6

los resultados detallados.

Se pueden ver los videos se
BO-5

puede ver si se almacenaron BO-4

durante el análisis. La
BO-3
identificación de los
animales y el nombre de la BO-2

granja se pueden editar. BO-1

Deslizar hacia la izquierda y pulsar para “Borrar” análisis indeseados

BO-7
➡

40
 Información / Configuración / Ayuda

Información de Crear una cuenta;

propietario Login/Logout
Número de serie;

Aplicación y
Contacto: Correo sistema de
electrónico, información.
teléfono, y Skype

Version de
aplicacion

41
Información / Configuración / Ayuda

Ajustes a medida para (1)

(1) Guardar video en el álbum
(2)
(2) Número de dosis
(3) parámetros de movilidad (3)

Ajustar los valores de

corte de espermatozoides
progresivos

Ajustar los valores de

corte de espermatozoides
móviles

42
Nube

43
 Identificarse y elegir las especies
animales
iSperm en la nube permite a los usuarios ver el historial de análisis
mediante el navegador web (Chrome, Safari, etc.) en ordenadores,
ordenadores portátiles y teléfonos móviles.

1. Iniciar sesión (Login) en la cuenta iSperm

https://ispermcloud.aidmics.com/

2. Elegir especies animales

44
 Visualización de datos

Todas las funciones y la interfaz de usuario son

casi idénticas a la “Data Center” de la App iSperm.

45
Transferencia de vídeos

46
 Pasar videos del iPad - Mac
1. Conectar el iPad a un Mac con un
cable USB. Es posible que aparezca
un mensaje en el dispositivo iOS
pidiéndole que confíe en este
equipo. Tocar “Trust” para continuar.

2. Abrir la App Fotos. La App Fotos muestra una pantalla

de importación con todas las fotos y videos que se
encuentran en el dispositivo conectado.
(Si la pantalla de importación no aparece automáticamente, haga clic en
la pestaña Importar, situada en la parte superior de la aplicación Fotos,
o haga clic en el nombre del dispositivo en la barra lateral de fotos.)

3. Haga clic en los vídeos que desea importar.

4. Haga clic en Importar seleccionadas.

(4)

(3)

47
 Nombre y formato de archivo de
vídeo
Este enfoque generará automáticamente el nombre con
el formato “iSperm- <especies> _ <Animal ID> _ <fecha y
hora> .mov”.
Ejemplo:
iSperm-Bovine_BO45_2012-09-14_12-09-14.mov

iSprm Bovine: BO45 2012-09-14_12-09-14

La información del vídeo también está incrustada en la parte inferior.

48
 Pasar videos de iPad - Windows
1. Conectar el iPad a un ordenador
personal de Windows con un
cable USB. Es posible que
aparezca un mensaje en el
dispositivo iOS pidiéndole que
Confiar en este equipo. Tocar
Fiduciario para continuar.

2. En el ordenador, hacer clic en “Abrir dispositivo para

ver archivos”.

49
 Pasar videos de iPad - Windows
1. Los videos se encuentran en la carpeta “iPad>
Almacenamiento interno DCIM>> 100APPLE”.

2. Copiar vídeos en la carpeta

de destino. La información del
vídeo está incrustada en la
parte inferior. Si se necesita un
formato de nombre de archivo
como “iSperm- <especies> _
<Animal ID> _ <fecha y hora>
.mov”, tratar de transferir
vídeos desde un Mac.

La información del está incrustada

en la parte inferior. iSprm Bovine: BO45 2012-09-14_12-09-14

50
Preguntas más frecuentes
(FAQ)

51
 ¿Se pueden analizar todos los tipos
de semen congelado?
En general, hay tres tipos de semen congelado. Las
muestras congeladas en diluyentes lácteos NO PUEDEN ser
analizadas por iSperm.

diluyente de diluyente semen

base de yema base de leche sexado

USA 11HO11432 USA 1JE576 USA 511HO11314

iSperm
Microscope
CASA

(О) (Χ) (О)

52
 Si el cubre-chip está sucio ...
Si el cubre-chip está sucio, es apropiado el uso de papel de
seda para limpiar suavemente la superficie del cubre-chip.

Recordatorio:
Se recomienda mantener los cubre-chips y las
bases de chips en una superficie limpia y firme.

Vista microscópica de polvo /

fibra en el Cubre-chip.

53
 Si se ven burbujas ...

Se requiere tomar un nueva muestra si las burbujas

son visibles. (Las burbujas obstaculizan el análisis
significativamente.)

A menudo, las burbujas están asociadas con el proceso

de mezcla.

Recordatorio:
Mezclar el semen suavemente puede prevenir la formación de burbujas.
(Se necesita algo de práctica para ser experto en mezcla libre de
burbujas.)

Vista microscópica de burbujas

54
 Si la imagen es borrosa ...

• Compruebe si el chip y el colector están intactos y en la

posición correcta.
• Compruebe si el cubre chip está limpio.
• Si la imagen es borrosa en todas las muestra, es
posible que la lente se haya ensuciado.
➡ Contacte con su distribuidor para el servicio técnico.

Vista microscópica de una imagen borrosa

55
 Si los espermatozoides no son
distinguibles

Dos posibilidades
(1) La muestra podría estar demasiado concentrada y se
requiere una dilución adicional.
(2) Base y cubierta del chip no están bloqueados en la
posición correcta, lo que conduce a la presencia de
varias capas de espermatozoides en lugar de una capa
delgada. Rehacer la muestra.

Espermatozoides Espermatozoides
en una sola capa en múltiples capas

56
 Causas de variación
(1) Uniformidad de la mezcla
Es muy importante asegurarse de que la muestra de
semen es uniforme antes del muestreo.

Ejemplos de semen no
uniforme. Mezclado
adicional requerido.

Mezclar elsemen a fondo antes de cada toma de muestras.

(2) El tiempo (retardo) en tapar el chip

Es importante tapar el chip tan pronto como se ponga la
muestra. Los experimentos muestran desviaciones de
los resultados cuando se tarda 10 segundos o más.

Después de colocar el semen, cubrir la muestra tan

pronto como sea posible.

57
Validación

58
Validación de la concentración con
hemocitómetro iSperm vs. CASA

59
 Validación de la motilidad
iSperm vs. CASA
La motilidad se compara en un rango de concentraton
de 20-60M / ml.

60
Certificado

61
CE

62
FCC

63
FDA

64
 www.aidmics.com
service@aidmics.com
+886-2-2368-5358
Skype ID: Aidmics