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16
Tutor:
Programa Zootecnia
2021
Introducción
mercado.
especie, la aplicación de las técnicas al momento de la colecta de los embriones, los medios
Es importante conocer que también se pueden producir embriones de forma invitro, para lo
cual se requiere tecnología, e inversión, pero son técnicas que siempre dejaran mejor
Bovinos
Yeguas
1. Indique cuáles son los pasos o etapas para la técnica de transferencia de
Algunos estudios muestran que la técnica inicia con la estimulación hormonal de la hembra
Crio preservación
Existen otros pasos de estudio que en los últimos años viene ganado desarrollo como son:
o El sexado
o La micro manipulación
o La fertilización invitro
o La donación
justifique su respuesta.
El proceso convencional de superovulación para te en bovinos utiliza ocho aplicaciones de
hormona folículo estimulante (FSH) con intervalos de 12 horas; este procedimiento aumenta
la manipulación y el estrés de los animales, lo que hace que incida negativamente en los
resultados. El objetivo de esta revisión es compilar los progresos más marcados de las dos
últimas décadas en las investigaciones que han centrado su interés en la reducción del número
de aplicaciones de FSH, habiendo utilizado para ello estrategias que van desde la simple
sanguínea.
que causa estrés excesivo y aumenta tanto la mano de obra involucrada en el trabajo como la
horas. (Esquerdo J)
Los protocolos más comunes requieren seis a ocho aplicaciones de FSH con intervalos de
doce horas, a fin de que varios folículos se desarrollen y pueda ocurrir una ovulación
a suero anti-pmsg.
FSH-P, cuyo tratamiento es realizado con la aplicación de dos dosis diarias, durante
Otras hormonas que pueden causar superovulación, aunque son poco utilizadas, son la epe
un porcentaje de éxito muy elevado. Uno de los inconvenientes que puede influir en lo
galas)
3. Indique cuáles son los parámetros para tener en cuenta en el proceso de selección
proceso.
Donantes; Deneb tener una historia reproductiva excelente, además el proceso de donantes
el estrés el cual maneja, amamantamiento de los terneros, periodos que mantienen con la vaca
entre otros factores de interés como cuando los animales son llevados a un centro de
Al llegar la vaca al centro, se deberán tomar todos los datos posibles tales como día,
hora, nombre del propietario y del transportista, tipo de animal, número de caravana o
Se hará una revisación completa del animal ya que, si bien el tracto genital es de
Suele ocurrir que se envían vacas preñadas por descuido o por simple
propietario.
asimismo que los animales necesitan más energía en tiempo frío y húmedo que en
animal, numero y facilidad del parto, habilidad materna, pesos de crías al nacimiento,
destete al año.
Los animales deben estar en excelentes condiciones corporales, con una calificación
disponible
Receptoras: Las buenas receptoras son costosas a demás del excelente mantenimiento por el
Una buena receptora es la hembra capaz de recibir un embrión y llevarlo a término. Más aún,
la receptora deberá ser capaz de parir sin grandes dificultades y luego alimentar al ternero de
manera que le permita expresar su potencial genético. En consecuencia, deberá ser de buen
Las características corporales de las receptoras deben ser de acuerdo a la línea a trabajar,
carden deben ser fuertes y grandes, las de leche, son características diferentes. La edad en las
si las novillas son mejores o las vacas viejas, la realidad es que algunos se inclinan por vacas
de segundo parto en adelante, esto tiene ventajas en la maternidad y crianza del ternero.
hembra gestará y amamantará a los terneros de mayor valor del establecimiento. Criará
terneros que son mayores a los que hubiera producido y deberá proveer nutrientes en forma
suficiente para que se exprese el potencial genético del ternero. Ante estas consideraciones, la
receptora preñada no debe ser tratada como cualquier otra vaca de cría sino, al menos, como
El historial reproductivo es de gran importancia en las receptoras. Para este proceso se deben
Una vez conseguidos los animales, éstos serán sometidos a un exhaustivo examen clínico
(Albeiro)
Tener en cuenta si son (leche o carne), sistema mamario y características para el parto
adecuado.
Deben ser vacas de entre uno y dos partos, deben estar en un periodo posparto no
menor a 90 días.
Los animales deben estar en excelentes condiciones corporales, con una calificación
Ausencia de preñez.
genética.
suplementos minerales.
En síntesis, el manejo de las receptoras incluye la elección de hembras de buena calidad que
sean reproductivamente aptas, que tengan un buen nivel de alimentación y estén libres de
enfermedades. Los sistemas para conseguirlas son tan variados como oportunidades
aparezcan. No olvidar que las receptoras constituyen uno de los puntos clave de la TE exitosa
Para la colecta de embriones por medio de la técnica no quirúrgica en bovinos incia con la
sonda vía cérvix, hasta su ubicación en el útero, con un medio de cultivo apropiado para los
uterino y transferencia no quirúrgicos (vía transcervical), los que han permitido la difusión de
la técnica.
dicho cuerpo con el medio de cultivo. Una vez se ha terminado un cuerno, se saca la
o Las sondas de recogida son: sondas de recogida de dos vías, de tres vías, y tipo Foley.
o Lavado del útero: Debe conectarse la bolsa o botella que contiene el medio de lavado
(flushing) a la sonda de recogida y dejar pasar el líquido por gravedad hasta el útero
fondo; se elimina el resto del líquido, dejándose 100 ml y se vuelca en una caja de
petri.
que son filtros que retienen los embriones de mayor diámetro que, al no traspasar el
filtro, pueden ser colectados para luego ser colocados en una caja de petri.
Sin embargo, no todo el líquido debe de salir y ser desechado. Es importante controlar que el
embriones. Por ello, la salida es controlada por medio de un clamp que abre o cierra el paso
del líquido bajo el filtro. Hoy en día existen diferentes modelos de filtro en el mercado (filtros
o Filtro para sonda Soley: Una vez colocados en las cajas de petri se llevan a una lupa
evaluación embrionaria.
Se inicia con el protocolo de super ovulación.
discontinuo.
técnicas no quirúrgicas.
- Diagnóstico de gestación.
Las receptoras son localizadas en un brete, desinfectándose la zona perineal y valvar. Los
embriones son cargados en la pajilla según el procedimiento descrito por Palma (2008). La
pajilla se colocó dentro de la pistola de cámara profunda para T.E. y esta se puso dentro de la
La hembra se ubica en una camilla con la cabeza hacia abajo, se rasura y se desinfecta el
ubre.
En ovinos antes de recuperar los embriones se debe realizar una exteriorización de los
se realiza con con una sonda, la cual dispone de una aguja (50/20), con punta no traumática y
con dos perforaciones laterales y uno central. Se realiza una cirugía (punsion) en la unión
útero tubárica y se enhebra la sonda en el interior de la luz del cuerno uterino de (1 cm)
de los cuernos uterinos, se realiza una segunda cirugía para la inyección de 20 cm de PBS a
37ºC, se produce una corriente de arrastre que influye hacia el oviducto que sale por la sonda
hasta un Erlenmeyer de colecta previamente entibiado. La recuperación embrionaria finaliza,
Pregunta 5. Indique cuáles son los medios para la colecta y evaluación de los embriones.
estadios de mórula y blastocisto, estos son más estables que los demás estadios, lo que hace
Días de vida
6. Mórula.
7. Blastocito.
8. Blastocito expandido.
9. Blastocito eclosionado.
Pregunta 6. Indique cómo se realiza la evaluación morfológica y cómo se clasifican los
colecta.
La clasificación según el estado de desarrollo va desde el estadio “1” (ovocito sin fecundar)
hasta el número “9” (blastocisto expandido eclosionado); mientras que el estado cualitativo se
1. Sin fecundar. Tan solo se observa una célula ocupando el espacio embrionario, por lo
llevado a cabo alrededor de los 5 días tras el celo, por lo que si lo encontramos en
hembras donde la recogida ha sido en los días 6-8 suele indicar muerte o
degeneración.
diferenciarlos entre ellos por la superposición que hay, de modo que ocupan gran
parte del espacio peri vitelino. Este estadio se puede considerar para la transferencia
4. Mórula compacta. Los blastómeros están aglomerados, ocupando alrededor del 60-
70% del espacio peri vitelino, por lo que resulta imposible diferenciarlos.
liberado de la zona pelúcida como en proceso de estarlo. Los embriones aquí ya son
3. Malo. Tan solo el 25% de las células embrionarias son adecuadas, y las
pigmentación citoplasmática.
Ecógrafo.
Varios. Guantes de palpación, gel usado como lubricante, papel de limpieza, jeringas y
Catéter de Folley Es un tipo de sonda que permite la entrada de medio de lavado al cuerpo
del útero y las trompas de Falopio; al igual que permite el drenaje del medio, haciendo una
Filtro. Es un recipiente de boca ancha y fondo angosto, posee una tapadera con dos orificios;
uno pequeño que es para la entrada de aire, necesario al momento de drenar el medio y otro
que va conectado a la manguera que viene de la conexión con el catéter de Folley y el medio
de lavado.
Medio de lavado. Se usa entre uno o dos litros de Suero Fetal Bovino (SFB) al 1% de
albúmina como medio de lavado. Al momento de hacer el lavado la bolsa que contiene el
suero debe estar en una parte alta, ya que todo el sistema trabaja por medio de la fuerza de
gravedad.
Pregunta 8. Indique cómo se realiza el proceso de criopreservación y cuáles son los tipos
citoplasma y así evitar que durante la congelación se formen cristales de hielo en el interior
de la célula.
Este proceso es uno los principios más importantes dentro de la crio preservación de
agua antes de su congelamiento, con lo cual se evita la formación de hielo. Dentro de los
mantener el equilibrio entre los factores que pueden causar daño celular, como la formación
de cristales de hielo, la fractura del embrión, el daño tóxico y osmótico, así como las
alteraciones de las organelas intracelulares y del cito esqueleto. Durante este procedimiento,
los embriones normalmente van a ser equilibrados dentro de bajas concentraciones de crio
protectores, en pajillas de inseminación de 0,25 ml, con tasas de enfriamiento entre 0,3 y
1°C/min, hasta alcanzar los -30 a -35°C, para posteriormente poder ser sumergidos en el
gelificación de un líquido, producida no por la cristalización, sino por una extrema elevación
(≈2500°C/ min) y necesita de la presencia de crio protectores más concentrados, que permitan
la formación del llamado “estado vítreo”, que disminuye los daños químicos y mecánicos
causados por el paso entre los puntos críticos de congelación. La formación del estado vítreo
evita tales daños, al promover la distribución iónica del líquido e impedir la formación de
cristales de hielo.
Pregunta 9. Indique cómo se realiza la transferencia de los embriones en las especies
bovina, ovina y equina. Señalando las etapas o pasos desde el montaje de la pajilla hasta
La transferencia de embriones tiene 2 protocolos. Hay uno en fresco, donde los embriones se
extraen de las donantes 7 días después de la fertilización. Mientras que el proceso in vitro se
obtiene los ovocitos, que son fecundados en el laboratorio y luego se vuelven a introducir en
la receptora.
En el primer protocolo, se administran hormonas a las vacas donantes que estimulan los
ovarios para que ovulen más y produzcan en promedio 6 ovocitos. Cuando entran en celo, se
inseminan para fecundar los óvulos dentro del oviducto, se incuban durante 7 días y luego se
extraen.
Con in vitro, se hace una aspiración folicular por medio de una sonda ecográfica de los
óvulos. Estos se llevan a un laboratorio donde son evaluados y allí mismo se fecundan, para
quirúrgica.
flanco, se perfora la superficie usando una aguja y luego se agranda colocando un fórceps de
iris a través de la incisión hasta la luz uterina. El embrión contenido en un pequeño volumen
de medio (< 250 μl) en una pajuela o en otro tipo de capilar, es depositado en la luz uterina.
del abdomen y la pared abdominal es suturada con la técnica estándar. Debido a la movilidad
del embrión equino en el lumen uterino, este puede ser transferido en el cuerno uterino
3) pistola de inseminación de acero inoxidable reusable. En todos los casos se utiliza una
plástico estéril en el brazo y encima un guante de látex estéril. Se coloca gel lubricante estéril
en el dorso de la mano del operador y sobre la vulva de la yegua. La punta del instrumento de
adelanta hacia la luz del cuerpo uterino. El embrión puede ser depositado en el cuerpo uterino
transferencia es retirado lentamente de manera que la punta no sea obturada por la pared del
Ovinos A partir del 5to al 7mo día de detectado el celo, los embriones se obtienen por vía
quirúrgica o bajo control endoscópico. Los mismos pueden ser transferidos a las hembras
y posterior transferencia.
Se deben considerar los siguientes ítems antes de iniciar un programa de TE:
donante y receptora.
Colecta de embriones.
Búsqueda de embriones.
Clasificación de embriones.
Siembra de embriones.
Conservación de embriones.
Pregunta 10. Cuáles son las técnicas utilizadas para la obtención de folículos con fines
estéril de 50ml mediante una conducción de teflón. El equipo de aspiración se completa con
una bomba de vacío accionada por un pedal que aplicara una aspiración de 50 a 53 mm Hg
por medio de unos filtros especiales para la recolección, conteo y selección de los ovocitos
acuerdo con su morfología, los criterios de clasificación son de acuerdo con el número de
bovino vivo debe realizarse con una tranquilizarían del animal, además de una anestesia vía
epidural para minimizar los esfuerzos y mejorar la manipulación. Se lava la región perineal
para la eliminación de la contaminación luego se introduce el transductor hasta el fondo del
saco vaginal y con la ayuda de la palpación rectal se ubican los ovarios frente al transductor
para tener una buena vista de los folículos y poder comenzar la aspiración, se deben de
Pregunta 11. En qué consiste y cómo se realiza la técnica de aspiración folicular guiada
ecógrafo en hembras vivas (Pieterse et al., 1988; Denis et al., 2000; Bage et al., 2003). La
la vaca, mientras que la otra mano es introducida por el recto para fijar el ovario hacia la
cabeza del transductor visualizándose el ovario y los folículos en la imagen ecográfica, una
vez fijado el ovario, con movimientos suaves y cuidadosos se atraviesa la pared vaginal con
la aguja, puncionando los folículos, cuyo contenido es aspirado por la bomba de vacío y
vitro en la especie bovina, indique brevemente en que consiste cada una de ellas.
posterior fertilización in vitro, ofrece la posibilidad de obtener embriones a bajo costo para
“La maduración ovo citaría es un fenómeno complejo, durante el cual el ovocito progresa
retirado del folículo para llevar a cabo la maduración in vitro. Un periodo de 24h es necesario
para que el ovocito bovino complete la maduración nuclear, es decir, alcance el estadio de
MII, en el que permanece hasta el momento en que es fertilizado, que es cuando completa la
Maduración citoplasmática.
En este momento se prepara al ovocito para soportar la fertilización y aportar los nutrientes
De manera natural, la meiosis inicia en el ovario fetal, pero se detiene antes del nacimiento,
en la profase (PI) de la primera división meiotica; los ovocitos pasan entonces a la etapa
reticulada, que es un estado de reposo nuclear y que suele durar hasta que se ovula el primer
hasta la metafase de la segunda división meiotica en la que se detiene una vez más, dando
como resultado un primer cuerpo polar que es expulsado al espacio perivitelino. De la misma
manera en la que madura el nucleo se debe llevar a cabo la maduración del citoplasma.”
“Cuando los ovocitos son aspirados desde los folículos terciarios reanudan espontáneamente
la composición de los medios y el ambiente controlado por estufas de cultivo, deben brindar
un ambiente adecuado para que la maduración ocurra en 24hs de un modo similar a lo que
sucede in vivo durante más de dos ciclos estrales en el bovino. Las condiciones utilizadas en
la mayoría de los laboratorios para lograr este ambiente, involucra el uso de medios de
cultivo tales como el TCM-199 suplementado con hormonas (LH, FSH, estradiol, etc),
alta frecuencia permite visualizar tejidos internos, qué son representados cómo imágenes en
diferentes tonos de color gris, los tejidos que no réflex no mandaste ultrasonido se denominan
anna coja nico ( se vende color negro.) Y los densos, qué si reflejan ondas, se conocen como
Ultrasonografía y fertilidad del toro La evaluación reproductiva permite diferenciar los toros
detección de los reproductores potencialmente ineficientes antes de ser enviados con las
2009)
observación del tubérculo genital fetal en forma precoz, los sacos escrotales, el prepucio y la
exploración es por vía transrectal al igual que el tacto o la ecografía para diagnóstico de
sondas sectoriales o lineales que garanticen una excelente calidad de imagen, a partir de los
48 (+/-2) días de gestación es posible visualizar con certeza el tubérculo genital ubicándose
entre ambos miembros posteriores equidistante del cordón umbilical y de la región caudal, A
partir de los 58 - 60 días la ubicación del tubérculo genital cambia pudiendo observar en dos
áreas bien definidas, en el caso de ser macho se localizará en cercanías del cordón umbilical y
alto valor genético, campeona nacional de la raza, en tal sentido, quiere obtener varias crías
de esta. Con el fin de comercializar esta genética. Para ello quiere incorporar al hato la
Asimismo, el productor cuenta con una yegua Cuarto de Milla Americano, de 4 años, de alta
Siete días después se verificó la superovulación mediante control ecográfico de los ovarios.
sonda se dirige hacia el cuerno ipsilateral del ovario que presenta mayor número de cuerpos
cuernos uterinos y se infló el balón de la sonda de acuerdo con el tamaño del cuerno uterino.
Teniendo en cuanta que la técnica de aspersión folicular se realiza en vacas que presenten
nuestro caso.
Iniciando con sedación de las hembras que entran al proceso, algunos lo realizan con
Bomba de aspersión
el ovario para ser visualizado por el ecógrafo. Una vez ubicado el foliculoa aspirar, se
impulsa l aguja suavemente para que penetre la pared vaginal y luego la folicular; una
embriones o en el recipiente destinado para tal fin. Posterior a esto los ovocitos son
(Ward, 2000).
debe ser efectuada con intervalos de 12-15 días, esto permite que las donantes hasta el
regreso cíclico de una forma natural, no afectan la función ovárica. (Arias, 2010)
Entre los factores más importantes que pueden condicionar los resultados de un programa de
TE merecen destacarse:
Fertilidad de semental.
Conclusiones
Emplear la tecnología en la reproducción hace que sea eficiente en el empleo de los
protocolos diseñados y empleados mediante el uso de ultrasonografía y ecografía tanto en la
evaluación de los tractos reproductivos de las hembras y machos en el seguimiento en la
ovulación, desempeños reproductivos teniendo la completa certeza de tener calidad en las
explotaciones animales.
Conocer toda la dinámica folicular nos ayuda a tener claro toda la funcionalidad tanto
endocrina como fisiológica de los tractos reproductivos de los animales y poder entender los
medicamentos que se pueden utilizar tanto para un iatf como para llevar a cabo una súper
ovulacion y por ende tener embriones para hembras receptoras.
Referencias Bibliográficas
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Recuperado de:
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file:///C:/Users/ACER/Downloads/2570-Texto%20del%20art%C3%ADculo-6064-2-
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Recuperado de:
https://www.produccion-animal.com.ar/informacion_tecnica/ecografia_ultrsonido/36-
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