Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
2 Material de laboratorio 8 – 12
5 Soluciones amortiguadoras 21 – 23
Introducción a las técnicas espectrofotométricas y
6 24 – 26
realización de una curva de calibración
7 División celular mitosis y meiosis 27 – 29
8 Genética 30 – 34
La asistencia a las sesiones del laboratorio para los alumnos matriculados por primera vez
en la asignatura. Cada sesión tendrá una duración de 2 horas. En la primera práctica se
asignará a cada alumno un lugar de trabajo en la mesa, que deberá mantener durante
todo el curso.
2. PREPARACIÓN TEORICA
Cada práctica exige una preparación teórica adecuada. Se recomienda el estudio previo
de la parte correspondiente en un libro de texto así como el estudio del guion con su
protocolo experimental.
1
- Lancetas y hojas de bisturíes: Son de un solo uso y se tirarán en recipientes destinados
a tal fin (el guardián).
- Debe tenerse especial cuidado con las pipetas automáticas, pues su mecanismo es frágil.
Su utilización se explicará más adelante.
4. NORMAS DE SEGURIDAD
Los peligros existentes en cualquier laboratorio son numerosos y variados por lo que deben
observarse una serie de normas básicas de seguridad y seguir estrictamente las
recomendaciones del profesor de prácticas de cada caso. Está prohibido fumar, beber o
comer en el laboratorio. El alumno debe tomar precauciones frente a los posibles riesgos
que pueden encontrarse durante el desarrollo de las prácticas y que se enumeran a
continuación.
5. OTRAS CONSIDERACIONES
Es obligatorio la utilización de una bata siempre que se trabaje en el laboratorio. Así mismo,
es aconsejable que el alumno venga provisto de regla y calculadora para la realización
de los cálculos.
Los aparatos se utilizarán de forma adecuada, por tanto, no debe usar nunca un aparato
sin asegurarse antes de que se sabe utilizar. Si no es así, pregunte.
2
NORMAS GENERALES EN CASO DE ACCIDENTE
La cosa más importante cuando sucede un accidente es la de tener calma, para poder darse
inmediatamente cuenta de la causa y de los efectos (consecuencias).
La ducha de emergencia o el chorro de agua hay que usarla solamente cuando el incendio
de la ropa sea grave, de lo contrario es mejor quitárselo o apagarla con una cobija o algo
por el estilo. En el caso de intoxicaciones se debe llamar en seguida al médico y no hacer
nada si no se está completamente seguro del veneno ingerido. Antes de que llegue el medico
se debe:
- Eliminar el contacto con el agente nocivo
- Cubrir el accidentado para que no se sienta frio
- Acostarlo siempre e impedir con un torniquete la pérdida de sangre
- Estar listos para darle respiración artificial
- El accidentado no se debe abandonar ni siguiera para advertir al médico
- No se le debe dar de beber si está desmayado o semi-inconsciente
- En caso de envenenamiento no se debe administrar sustancias alcohólicas. En algunos
casos el alcohol favorece la absorción de ciertas sustancias tóxicas.
Hay que usar el extinguidor más adecuado después de que se esté seguro del compuesto
químico que ha producido el incendio. Si esta aumenta y piensa que puede alcanzar otros
productos químicos, hay que usar una máscara y la indumentaria de protección del caso
antes de empezar a combatir el fuego.
3. QUEMADURAS
Si éstas son leves el dolor se puede aliviar introduciendo la parte lesionada en agua fría o
helada, después se puede hacer un emplasto con una solución de bicarbonato de sodio al
5% en agua. Si se tiene una solución saturada de ácido pícrico también se puede usar.
Luego se debe proteger el sitio de la curación con un vendaje ligero.
Si las quemaduras son muy graves o extensas no se debe mover el quemado después de
que se elimina la causa de la quemadura. Hay que tratar de quitarle la ropa que está en
contacto con la parte quemada, aunque si ésta está adherida no debe tratar de retirarla;
es mejor cortar la ropa alrededor de la herida y ponerle un emplasto de gasa humedecida
con la solución de bicarbonato al 5%. En espera de que llegue el médico no se debe
masajear ni aplicar pomadas.
3
4. QUEMADURA QUÍMICAS
En casos de este tipo conviene quitar la sustancia que produjo la contaminación con un
pedazo de gasa seca y después de haber limpiado el área contaminada lavar la herida.
En estos casos no es aconsejable el empleo de la solución del bicarbonato, ni la aplicación
de aceites, grasas o pomadas, aunque produzcan un alivio pasajero. Esto porque, se podría
aumentar la velocidad de penetración de la sustancia que produjo la contaminación a través
de la piel. El jabón se debe usar solamente cuando se trata de sustancias de tipo fenólico.
5. ENVENENAMIENTOS
Si la persona está consciente hay que obligarla a que se meta dos dedos en la boca y que
estos le lleguen hasta la garganta, también se puede usar eméticos. El emético más simple
y también el más común es el agua caliente y salada, la operación se debe repetir hasta
que el vómito sea un líquido limpio, mientras tanto hay que tratar de identificar el veneno
para poder administrar el antídoto adecuado, si es posible de debe conservar una muestra
de vómito para los análisis del caso. Cuando se trata de envenenamientos producidos por
hidrocarburos del petróleo, ácidos o bases fuertes, cuando la persona pierda el sentido o
tenga convulsiones, hay que tratar de evitar el tratamiento con el emético.
En los laboratorios químicos una de las causas más comunes de ingestión de sustancias
tóxicas es la burbuja de aire que se forma cuando se usa la pipeta o se pone a funcionar
un sifón. Por lo tanto hay que usar pipetas mecánicas o que tengan un aspirador de caucho
siempre que se trasvasa en líquidos tóxicos. Si a pesar de las precauciones, se presentara
el problema en espera del médico hay que hacer lo siguiente:
4
- Si se trata de la ingestión de ácidos o bases fuertes hay que darle de beber a la persona,
como emoliente, claro de nuevo con agua o con una cucharada de aceite de vaselina o
un vaso de leche
- Si se trata de ácidos hay que darle después gel de alúmina o leche de magnesia, si en
cambio la ingestión es de bases hay que darle vinagre diluido (1 – 5 %) o ácido acético
al 1% o jugo de limón
- En el caso de ingestión de cianuros se debe obrar como se explica en las normas
generales, provocando inmediatamente el vómito y dando respiración artificial si es
necesario cuando se note el primer síntoma de dificultad para respirar
6. PELIGROS BIOLÓGICOS
Los peligros encontrados en la manipulación del material biológico no son obvios como los
que se han mencionado anteriormente.
Todos los microorganismos deben tratarse como si fueran potencialmente peligrosos, pero,
quizás, uno de los peligros biológicos más grandes es el riesgo de contraer hepatitis sérica,
la infección se efectúa principalmente a través de la sangre, pero se puede transmitir
también a través de otros fluidos corporales. Además personas aparentemente sanas
pueden ser portadoras de la enfermedad y, por lo tanto, los materiales contaminados con
sangre y orina deben ser esterilizados inmediatamente después de usarlos. Todos los
líquidos corporales, por lo tanto, deben usarse con mucho cuidado y tomando precauciones
muy estrictas para su manejo.
5
PROCEDIMIENTOS GENERALES EN EL LABORATORIO
Por lo general, los estudiantes de Medicina son más organizados que la mayoría de los
demás estudiantes, ya que la naturaleza del trabajo en el laboratorio exige que haya
limpieza y orden. Algunas de las razones son las siguientes:
1. APARATOS
Es posible realizar algunos tipos de trabajos biológicos sin necesidad de utilizar muchos
instrumentos, sin embargo, los estudiantes de Medicina van a comprobar que para observar
ciertos organismos vivos es necesario disponer de varias clases de equipos.
Es necesario aprender a usar correctamente éstos, desde los más simples, como tubos de
ensayo y beakers, hasta balanzas analíticas y microscópicas.
2. MATERIAL VIVO
En los trabajos de laboratorio de biología no se concibe una práctica sin organismos vivos.
Esto plantea algunos problemas especiales en el cuidado de ellos.
Estos se les deben tratar con cuidado, tenerlos en recipientes adecuados los cuales deben
mantenerse limpios y mantener suministro adecuado de agua.
6
3. CUADERNO DE DATOS
a. Como el tiempo de la práctica es corto se deben tomar los datos empleando frases
cortas.
b. Se pueden hacer esquemas, que ayuden a recordar con más precisión las palabras.
c. Los datos se pueden expresar en términos numéricos.
7
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 2 Páginas
MATERIAL DE LABORATORIO 8 - 12
TECNICAS DE ESTUDIO DE LA LLAMA
1. OBJETIVO
El objetivo de esta práctica antes de iniciar los trabajos prácticos propiamente dichos, es el
de poseer un mínimo de conocimientos sobre el manejo de instrumentos, equipos y cristalería
de uso más común, así como las medidas de control y de protección e higiene que deben
observarse en el laboratorio.
2. INTRODUCCIÓN
En general el estudiante debe ser extremadamente cuidadoso, estar atento al trabajo que
realiza, dominar la técnica a desarrollar, el funcionamiento y manipulación de los equipos
y las propiedades de los reactivos que se utilizan, y ante cualquier duda no obrar por su
cuenta sin previa consulta al profesor que lo atiende.
8
Las observaciones de estas reglas le proporcionarán al alumno los hábitos de seguridad y
disciplina que le serán de inestimable valor no sólo en el laboratorio sino en cualquier sitio.
Por otra parte, durante el desarrollo de los diferentes trabajos prácticos en este laboratorio
podremos observar que en el mismo se usan gran variedad de equipos, utensilios, cristalería
y otros accesorios.
Los equipos más usados son: El fotocolorímetro, las centrífugas y los Ph metro.
9
3. MATERIAL
4. PROCEDIMIENTO
Las pipetas se llenan succionando con la boca y mediante una pera de goma cuando se
trabaja con líquidos volátiles, venenosos, o cáusticos, hasta que el nivel del líquido esté por
encima del aforo, se seca la punta con el papel del filtro y luego se lanza dejando que el
mismo descienda lentamente para evitar errores de escurriendo. La punta de la pipeta se
aproxima a la pared del recipiente que ha de recibir su contenido para que el líquido
retenido en la misma fluya.
No se debe sacudir ni soplar la pipeta para tratar de expulsar todo el líquido contenido
en la misma. Cuando se descarga en un recipiente que contenga ya una sustancia, la pipeta
no debe tocar con su punta el líquido.
Utilizando las pipetas adecuadas pipetean las siguientes cantidades de H2O destilada.
a. 5.2 ml
b. 0.1 ml
c. 3.5 ml
d. 2.75 ml
e. 1.0 ml
f. 0.3 ml
4.1. VOLUMETRICA
Uno de los métodos más generales, teniendo en cuenta el grado de aplicación en los
laboratorios, es la volumetría. El campo de aplicación de este método abarca las reacciones
de neutralización, redox, precipitación y formación de complejos entre otros.
V1 X E1 = V2 X E2
10
- Pipetear 10 ml de la disolución patrón 0.1 mol – L de carbonato de sodio en dos
Erlenmeyer de 250 ml.
- Agregue dos gotas del indicador fenolftaleína.
- En la bureta se llena con el HCL.
- Valore agregando lentamente el HCL sobre la disolución de carbonato de sodio,
agitando constantemente hasta el cambio de coloración del indicador.
- Lea el volumen en cada titulación si el proceso se ha realizado con el cuidado requerido
la diferencia no excede de 0.1 ml.
- Sustituya los datos en la fórmula dada y calcule la concentración molecular en
equivalencia de HCL.
Existen diferentes maneras para calentar el material, según el instrumento por elaborar. En
todos ellos conviene hacerlo colocando en la zona más externa del mechero. Donde la
temperatura es mayor (zona de oxidación), zona media del mechero la temperatura es
media (zona de mezcla).
5. CUESTIONARIO
11
1. Cuál es el fundamento del espectrofotómetro.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
12
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 3 Páginas
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES Y DILUCIONES 13 - 16
1. OBJETIVOS
2. INTRODUCCIÓN
Soluciones
Para esta práctica nos vamos a restringir a soluciones líquidas formadas por la mezcla de
un sólido (soluto) y un líquido (solvente). Cuando por las diferencias en polaridad no son
posibles las interacciones entre el solvente y el soluto, no se forma una solución y el soluto
se precipita.
13
- Separación de las moléculas del solvente
- Separación de las moléculas del soluto
- Interacción entre las moléculas de solvente y soluto
Las etapas uno y dos requieren energía para las separaciones por lo tanto son
endotérmicas, la tercera puede ser endotérmica o exotérmica. Si la atracción solvente-soluto
es mayor que la atracción solvente-solvente y soluto-soluto, el proceso de disolución será
favorable o exotérmico. Si la atracción solvente-soluto es menor que la atracción solvente-
solvente y soluto-soluto, el proceso de disolución será endotérmico.
Expresado de otra manera, una solución con una concentración 1 molar, equivale a disolver
la masa en gramos de 1 mol de soluto en un litro de solución. La molaridad se expresa con
M (mayúscula). Una solución de cloruro de potasio 1 M en agua, corresponde a disolver 1
mol o su equivalente en gramos en un litro de solución. Una solución de cloruro de potasio 1
mM (milimolar), corresponde a disolver 10-3 moles de cloruro de potasio en un litro de
solución.
14
Para hacer diluciones de una solución, se utiliza la fórmula:
Advertencia, las unidades que debe utilizar para concentración 1 y 2, y para volumen 1 y
2 deben ser las mismas, es decir, M, mM, uM, l, ml o ul.
- Balanza
- Espátulas
- Pipetas
- Agua
- Cloruro de sodio
- Cloruro de potasio
- Cloruro de magnesio
4. PROCEDIMIENTO
5. EJERCICIOS:
15
¿Cuántas umoles necesita para preparar 10 ml de una solución 1 mM y en que volumen
están?
Haga los cálculos para preparar 10 ml de una dilución que tenga una concentración 500
pM.
- Hacer los cálculos para preparar una solución de NaCl al 7%. Decir la concentración de
esta solución en molaridad.
16
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 4 Páginas
DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ ACTIVA DE UNA 17 - 20
SOLUCIÓN
1. OBJETIVO
2. FUNDAMENTO
La acidez activa de una solución está determinada por la concentración de iones H+ libres
en ella y depende del grado de disociación de los ácidos presentes u otras sustancias que
reaccionan como ácidos.
pH = -log (H+)
pH + pOH = 14
Muchos procesos bioquímicos ocurren a valores del pH específico. Las enzimas que son
catalizadores biológicos son sensibles a los cambios de pH. Por ejemplo, la pepsina, enzima
que interviene en el metabolismo de las proteínas segregada por la mucosa gástrica, tiene
la particularidad de que sólo actúa en un medio muy ácido de pH 2, mientras que la tripsina,
enzima proteolítica producida por el páncreas, actúan en medio alcalino a pH 8.5, cerca
de la neutralidad.
17
TABLA 1. Escala de pH
ph (H+) (OH)
14 10 -14 10 -0 ALCALINIDAD
13 10 -13 10 -1
12 10 -12 10 -2
11 10 -11 10 -3
10 10 -10 10 -4
9 10 -9 10 -5
8 10 -8 10 -6
7 10 -7 10 -7 NEUTRALIDAD
6 10 -6 10 -8
5 10 -5 10 -9
4 10 -4 10 -10
3 10 -3 10 -11
2 10 -2 10 -12
1 10 -1 10 -13
0 10 -0 10 -14 ACIDEZ
Los indicadores son compuestos orgánicos de estructura compleja que cambian de color en
una solución a medida que cambia el pH. La tabla No. 2 muestra algunos indicadores y su
cambio de color con respecto al pH.
TABLA 2. Indicadores
Indicador Color ácido Zona de viraje Color alcalino
Naranja del medio Rojo 3.1 – 4.5 Amarillo
Azul de bromofenol Amarillo 3.0 – 4.6 Azul
Verde bromofenol Amarillo 3.8 – 5.4 Azul
Rojo neutro Rojo 6.8 – 8.0 Amarillo
Fenoltaleina Incoloro 8.3 – 10.0 Rojo
3. MATERIALES Y REACTIVOS
18
4. PROCEDIMIENTO
Tome 8 tubos de ensayo. Coloque 2 ml. De las siguientes soluciones en cada uno de ellos.
Tubo 1 HCl
Tubo 2 CH3COOH
Tubo 3 H3PO4
Tubo 4 NaOH
Tubo 5 NH4OH
Tubo 6 NaHCO3
Tubo 7 H2O
Tubo 8 Solución problema
5. CUESTIONARIO
19
2. Compare los diferentes métodos utilizados para determinar el pH y diga cuál es el
más exacto.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
20
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 5 Páginas
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS 21 - 23
1. OBJETIVO
2. FUNDAMENTO
Entre los diferentes tipos de soluciones, uno de ellos se prepara fácilmente disolviendo en
agua un ácido débil y la sal del mismo ácido. Por ejemplo, un sistema amortiguador que se
prepara adicionando concentraciones relativamente altas de ácido acético y acetato de
sodio.
CH3COOH CH3COO + H+
Si se agregan pequeñas cantidades de ácido, los iones hidronio son consumidos por la
reserva de aniones provenientes de la sal y el cambio de pH es considerablemente menor
del que se produciría con una solución no reguladora.
CH3COO + H+ → CH3COOH
Si se adiciona una base, los iones OH, son neutralizados por los iones H+ disponibles y el
ácido acético libera más H + para mantener el pH:
H+ + OH → H2O
21
3. MATERIALES
- 2 Balones aforados de 50 ml
- 1 Balón aforado de 100 ml
- 1 Pipeta de 5 ml
- 1 Beaker de 100 ml
- 2 Beaker de 50 ml
- 1 Agitador de vidrio
- 1 Vidrio de reloj
- 1 Balanza analítica
- Potenciómetro
- Ácido acético concentrado
- Acetato de sodio
- Agua destilada
4. PROCEDIMIENTO
Realice los cálculos para preparar 50 ml. De una solución 0.5 M de ácido acético y 50 ml
de una solución de acetato de sodio de la misma concentración, utilice agua destilada,
almacene y rotule las dos soluciones.
Exprese los resultados obtenidos mediante tablas y en cada caso, realice una gráfica que
muestre la variación del pH con respecto al volumen de ácido o base adicionados.
5. CUESTIONARIO
23
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 6
INTRODUCCIÓN A LAS TÉCNICAS Páginas
ESPECTROFOTOMETRICAS Y REALIZACIÓN DE 24 - 26
UNA CURVA DE CALIBRACIÓN
1. OBJETIVO
2. FUNDAMENTO
24
Tabla 1. Longitudes de onda para los diferentes colores.
Longitud de onda Color transmitido
Color absorbido
absorbida, nm (complementario)
380 – 450 Violeta Amarillo – verdoso
450 – 495 Azul Amarillo
495 – 570 Verde Violeta
570 – 590 Amarillo Azul
590 – 620 Naranja Verde azulado
620 – 750 Rojo Azul verdoso
Espectrofotómetro
3. MATERIALES Y REACTIVOS
4. PROCEDIMIENTO
Para cada una de las soluciones de KMnO4 registre la concentración; determine mediante
el espectrofotómetro los correspondientes valores de trasmitancia y absorbancia. Grafique
concentración vs transmitancia y concentración vs absorbancia. Para la gráfica de
absorbancia, realice el ajuste de la recta por el método de mínimos cuadrados y determine
la concentración de la muestra problema.
25
5. CUESTIONARIO
26
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 7 Páginas
DIVISIÓN CELULAR MITOSIS Y MEIOSIS 27 - 29
1. OBJETIVO
2. INTRODUCCIÓN
Mitosis
Esta es una frase de significado evidente por sí misma. Los robles se reproducen y dan
origen a robles. Los conejos producen más conejos, en alguna forma las células de un roble
o de un conejo han recibido material hereditario que les suministra características de roble
o conejo de otro organismo.
Dentro del núcleo de cada célula se encuentran los cromosomas en donde están localizados
los genes. La interacción de los genes da por resultado los caracteres hereditarios.
Meiosis
27
El proceso de unión de los gametos masculinos y femeninos se denomina fertilización y el
resultado es la formación del zigoto.
3. MATERIALES
4. PROCEDIMIENTO
Mitosis
- Mantener las raíces de cebolla por 24 horas en la solución fijadora. Una parte de ácido
acético y tres partes de alcohol de 95%.
- Colocar las raíces en solución hidrolítica (una parte de HCL y una parte de alcohol de
95%) por 5 – 10 minutos.
- Colocar las raíces en solución de carnoy (tres partes de cloroformo, una parte de ácido
acético, dos partes de alcohol de 95%) por 5 – 10 minutos.
- Lavar las raíces en agua destilada.
- Colocar las raíces en alcohol de 70% por 5 minutos.
- En un portaobjeto colocar una gota de aceto - carmín para cubrir las raíces, utilice
únicamente la parte terminal de cada una de ellas.
- Haciendo uso de un bisturí oxidado, macere las raíces.
- Coloque sobre el preparado una laminilla y ejerciendo cierta presión sobre ella, aplaste
las raíces maceradas.
- Observación al microscopio.
Meiosis
28
5. LABORATORIO
2. ¿Por qué cree que se colorean los cromosomas y no el citoplasma con acetato-carmín?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
5. En un mamífero, ¿qué clase de células producen meiosis? ¿Qué importancia tiene esto
para los seres vivos que se reproducen sexualmente?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
29
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 8 Páginas
GENÉTICA 30 - 34
PARTE A
1. OBJETIVO
2. INTRODUCCIÓN
Cuando más de dos alelos son identificados en el locus de un gen, tenemos una serie de
alelos múltiples. Existen muchas características genéticas que son determinadas mediante
una serie de alelos múltiples. Entre estos están los diferentes grupos sanguíneos en el hombre,
por ejemplo, los grupos A, B, AB, O, siendo A y B igualmente dominantes. La clasificación se
basa en la presencia de ciertos antígenos y anticuerpos en la sangre según el cuadro
adjunto.
30
GRUPO SUERO
SANGUINEO ANTI A ANTI B
A + -
B - +
AB + +
O - -
Existe otra serie de alelos múltiples en el sistema Rh, que determinan la presencia de
antígenos D, C, E, e, c, en los glóbulos rojos. El suero anti D aglutina todos los Rh+, en anti
C los Rh y el anti c todos aquellos que carecen del antígeno C.
3. MATERIALES
- Algodón - Palillos
- Lancetas estériles - Lápiz marcador
- Alcohol - Suero anti A, anti B, anti D
- Porta objetos - Microscopios
4. PROCEDIMIENTO
PARTE B
3. MATERIALES
- Hojas de papel
- Seres humanos
4. PROCEDIMIENTO
31
1. Color del pelo: el pelo negro, N es dominante sobre el rubio o claro n.
2. Pelo Rojo: el pelo rojo es recesivo r y el no rojo es dominante R cuando el pelo es
oscuro N y también rojo, entonces el fenotipo es oscuro con brillos rojizos. Estos genes
son distribuidos independientemente.
3. Pico de Viuda: examine la disposición del cabello en su cabeza el pico de viuda, P
es dominante sobre la disposición derecha o curvada del cabello en la frente.
4. Mechón blanco (estilo Miguel Aceves Mejía): el mechón blanco, Q es dominante sobre
el pelo de un solo color.
5. Enrollamiento de la lengua: la habilidad para enrollar la lengua longitudinalmente,
R es dominante sobre la carencia de esta habilidad.
6. Pestañas largas: pestañas de 1 centímetro o más de longitud, S es dominante sobre
pestañas cortas s de menos de 1 centímetro de longitud.
7. Doblamiento de lengua: el doblamiento de la lengua T es dominante sobre la
carencia de esta habilidad. Para calificarse como poseedor de la lengua que se
doble, usted debe ser capaz de sostener la lengua afuera sin tenerla con los dientes
y doblar la punta fuertemente hacia atrás. Este es un rasgo extraordinario raro. La
probabilidad es de 5.1 que usted no encuentra individuos en su salón de clase.
Anote todas sus observaciones. Compare sus datos con los de su compañero de clase y
calcule el porcentaje de acuerdo si usted tiene 10 rasgos iguales con su compañero, entonces
el porcentaje de acuerdo será 10/20 X 100 = 50. Haga lo mismo con varios miembros de
su clase y asegúrese de comparar los rasgos. Sería muy interesante compararlos con algún
familiar.
Escoja un rasgo particular y obtenga todos los datos posibles de su familia por las
generaciones que más pueda y trate de determinar cuál de los principios o leyes de la
genética se aplican al rasgo escogido.
La incidencia (porcentaje de cada rasgo entre los miembros del laboratorio) es un dato
importante que debe consignarse en el tablero para su análisis.
2. Dedos meñiques.
Coloque ambas manos delante de su cara con las palmas hacia usted, colocando los
dedos meñiques lado con lado y presione el uno contra el otro. ¿Quedan paralelos
en toda su longitud o las falanges terminales se separan? Falanges separadas B es
dominante sobre derechas b.
32
3. Condición del pelo.
El pelo rizado CC presenta dominancia completa sobre el pelo liso C´C´, en el
heterocigoto el pelo es ondulado CC´.
4. Hoyuelos en la mejilla.
Los hoyuelos en la mejilla es un rasgo dominante, estos se pueden presentar más de
uno por mejilla o el hoyuelo puede aparecer en una mejilla pero no en la otra.
Presencia de hoyuelos D es dominante sobre la ausencia d.
5. Orejas Darwin.
La eminencia de la oreja de Darwin E es dominante sobre su ausencia.
6. Pecas.
La presencia de pecas P es dominante sobre su ausencia p.
7. Lóbulo de la oreja.
El lóbulo libre G, es dominante sobre el lóbulo pegado.
9. Grupo sanguíneo.
Represente el gene de tipo sanguíneo o como L, que es además un gene recesivo. LA
y LB presentan dominancia incompleta mutuamente pero ambos son dominantes sobre
LL: determine su genotipo tanto como sea posible. Los tipos O y AB pueden
determinarse completamente.
33
5. CUESTIONARIO
5. Calcule el porcentaje de cada uno de los cuatro grupos A, B, AB, O, Rh+, Rh-
6. ¿Por qué es importante conocer el tipo de sangre del donante y del receptor en caso
de transfusión de sangre?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
34
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 9 Páginas
FRACCIONAMIENTO QUIMICO DE UN TEJIDO 35 - 36
1. OBJETIVO
2. INTRODUCCIÓN
El esquema que acompaña esta práctica es que todo tejido debe ser homogenizado para
hacer más fácil su fraccionamiento. Este proceso debe ser diferente según el tejido
empleado. Si es blando como el presente caso (hígado) es suficiente macerarlo en un
mortero con ayuda de arena lavada.
La centrifugación es una operación indispensable que permite separar la fase sólida de una
líquida sin peligro de perdida de materiales o contaminación como podría suceder con la
filtración. Un aspecto importante en todo trabajo de este tipo es el procesar la muestra a
baja temperatura con ayuda de baños de luelo.
3. MATERIALES
- Centrifugas
- Baño maría
- Tubos de centrifuga
- Mortero
- Arena lavada
- TCA al 5% y al 10%
- Etanol
- Tubos de ensayo con tapa rosca
- Hígado
4. PROCEDIMIENTO
- Diseque el hígado del animal. Con ayuda de una tijera redúzcalo a pequeños trozos.
Añada una cucharadita de arena lavada, macere el tejido y agregue 8ml T.C.A. al 10%
hasta obtener una pasta homogénea.
- Centrifugue por 5 minutos. Recoja el sobrenadante en un tubo de ensayo. Márquelo como
glicógeno y colóquelo en hielo.
35
- El precipitado traspáselo con ayuda de 7ml de éter – etanol. Coloque el tubo en baño
maría a 40 grados centígrados durante 15 minutos, agitando. Centrifugue por 5 minutos
recolectando el sobrenadante en un tubo de ensayo e identifique (lípidos).
- El precipitado traspáselo a un tubo de ensayo. Con ayuda de 10 ml de TCA al 5%
caliente por 15 minutos agitando en el baño de maría a 90 grados centígrados, deje
enfriar y centrifugue por 5 minutos. Recoja el sobrenadante en un tubo, identifíquelo
como ácidos nucleicos.
- Conserve el precipitado, identifíquelo como proteínas, cada una de las fracciones
claramente identificada colóquelas en la nevera para su posterior identificación.
5. CUESTIONARIO
2. Además del fraccionamiento químico que se hace en esta práctica, indique otros
métodos y diga su aplicación en el estudio de la cédula.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
36
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 10 Páginas
RECONOCIMIENTO DE CADA UNO DE LOS 37 - 38
COMPUESTOS EXTRAIDOS (Continuación Guía 9)
1. OBJETIVO
2. INTRODUCCIÓN
3. MATERIALES
- Almidón
- Yodo/Lugol
- Aceite
- Cloroformo
- Albumina
- Reactivo de Biuret
- Ribosa
- Reactivo Bial
- Agua destilada
4. PROCEDIMIENTO
Para los siguientes ensayos prepare una serie de tubos que contengan las cantidades
indicadas de patrón (control positivo) y problema, incluya otro con agua destilada como
blanco (control negativo). Observe y anote los resultados.
Carbohidratos
Prepare tres tubos de la siguiente manera:
TUBO #1 #2 #3
Control + Almidón 2ml
Muestra Glucógeno 2ml
Control - H2O destilada 2ml
Reactivo Yodo 2 gotas 2 gotas 2 gotas
37
Lípidos
Prepare tres tubos de ensayo de acuerdo al siguiente cuadro, observe y anote los
resultados:
TUBO #1 #2 #3
Control + Aceite 1ml
Muestra Lípidos 1ml
Control - H2O destilada 1ml
Reactivo Cloroformo 1ml 1ml 1ml
Proteínas
Preparar tres tubos de ensayo de acuerdo al siguiente cuadro:
TUBO #1 #2 #3
Control + Albumina 2ml
Muestra Proteínas 2ml
Control - H2O destilada 2ml
Reactivo R. Biruet 1ml 1ml 1ml
Ácidos Nucleicos
Prepare tres tubos de ensayo de acuerdo al siguiente cuadro, observe y anote los
resultados:
TUBO #1 #2 #3
Control + Ribosa 1ml
Muestra Ácidos nucleicos 1ml
Control - H2O destilada 1ml
Reactivo R. Bial 1ml 1ml 1ml
5. CUESTIONARIO
38
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 11 Páginas
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE 39 - 42
CARBOHIDRATOS
1. OBJETIVO
Toda vez que los glúcidos representan una muy importante clase de compuestos que sirven
como sustrato para la producción de energía celular, es importante el familiarizarse con sus
propiedades físicas y químicas y tener algunas ideas acerca de la forma como pueden
identificarse, en el laboratorio. Desde el punto de vista médico, el azúcar más importante
es la glucosa, aunque existe un método perfectamente específico para su determinación e
identificación en el cual se utiliza una enzima, la glucosa oxidasa, los reactivos necesarios
no se encuentran disponibles en el comercio y además requieren el uso de refrigeración.
Esto los hace imprácticos en nuestro medio, excepto en las grandes ciudades. Por otro lado,
una abrumadora proporción del azúcar presente en los líquidos corporales es glucosa y por
esta razón, métodos menos específicos que se basan en las propiedades reductoras del
hidroxilo hemiacetálico de los azúcares simples, son perfectamente aceptables para
cuantificar glucosa en estos líquidos. Tienen para nosotros la ventaja de que los reactivos
son relativamente baratos, no requieren refrigeración y teniendo las sustancias sólidas, un
recipiente y unas pipetas, pueden utilizarse en los más remotos lugares.
2. INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son un grupo de sustancias de gran importancia biológica, pues son tanto
una fuente primaria de energía como elementos indispensables en la función de estructura
biológicos como la pared celular.
39
Los grupos reductores libres pueden ser detectados mediante la reducción de cobre en
soluciones alcalinas, lo cual pueden valorarse calóricamente. En medio ácido la reducción
del cobre es dependiente del tiempo y cetonas en solución concentrada de HCL se
deshidratan formando furfurales los cuales forman complejos coloreados con el resorcinol.
3. RECURSOS
4. PROCEDIMIENTO
Para los siguientes ensayos prepare una serie de tubos que contengan las cantidades
indicadas de patrón (control positivo). Tendrán un tubo con una muestra problema e incluya
otro tubo con agua destilada como control negativo.
Reacción de Molisch
Coloque 1ml de la solución en patrón y muestra problema en cada tubo. Agregue a cada
tubo dos gotas de solución de alfa naftol por las paredes del tubo y cuidadosamente
agrégueles 1ml de H2S04 concentrado. No agite el tubo, observe los resultados.
Reacción de Benedict
Coloque 1ml de las soluciones, patrones y muestra problema en cada tubo. Agregue 1 ml
de reactivo de Benedict. Lleve los tubos al baño de agua hirviendo por cinco (5) minutos.
Observe y anote los resultados.
Coloque 1ml de solución patrón y muestra en cada tubo. Agregar dos gotas de solución de
lugol. Observe y anote los resultados.
40
Reacción de Bial
Coloque en cada tubo 1ml del patrón y muestra problema, y añada 1.0 ml de reactivo de
Bial. Caliente los tubos suavemente hasta la aparición de las primeras burbujas. Diluya la
solución a 5ml con agua destilada, agregue 1,5 ml de Butanol y agite los tubos. Observe y
anote los resultados.
Reacción de Seliwanoff
Coloque en cada tubo 1.0 ml de solución patrón y muestra problema, 1.0 ml de reactivo de
selivanoff. Caliente los tubos a baño maría en punto de ebullición durante 5 minutos.
Observe y anote los resultados.
Reacción de Barfoed
Coloque en cada tubo de ensayo 1.0 ml de los patrones y muestra problema, y agregue
1.0 ml de reactivo de barfoed. Lleve los tubos al baño de agua hirviendo. Observe los
tubos a los 5 y a los 12 minutos. Anote los resultados.
Llene la siguiente tabla, indicando para cuales reactivos la reacción fue positiva. Sea lo mas
descriptivo posible y registre todo cambio en las condiciones iniciales de cada una de las
muestras.
5. CUESTIONARIO
41
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
42
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 12 Páginas
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA Y CON SALES BILIARES 43 - 45
DE LOS LÍPIDOS DE LA LECHE
1. OBJETIVOS
2. INTRODUCCIÓN
La lipasa cataliza la hidrólisis de los enlaces de tipo éster de los acilgliceroles. Esta enzima
se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos animales y vegetales, recibe también el
nombre de esterasa. Es especialmente importante en el tracto gastrointestinal porque
interviene en la digestión y absorción de grasa. En este sitio del sistema digestivo existen
las condiciones para transformar los lípidos de la dieta en emulsiones, pues allí se encuentran
los ácidos biliares (cólico, litocólico, quenodesoxicólico, desoxicólico), las sales biliares
(glicocolatos y taurocolatos) que son grasa y disminuyen bruscamente la tensión superficial
en el contacto de las fases, lo que se traduce en un aumento en la estabilidad de la emulsión.
3. MATERIALES
43
4. PROCEDIMIENTO
Repetir el experimento 4.2 pero usando 2ml de taurocolato en vez de extracto pancreático
para facilitar la emulsificación de los lípidos. Preparar igualmente un blanco o testigo y
comparar.
5. CUESTIONARIO
1. Compare los resultados obtenidos para el extracto pancreático con los del ácido
taurocólico. ¿En cuál de los casos hubo mayor hidrólisis y por qué?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
44
3. ¿Cuál es la temperatura óptima de la lipasa?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
45
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A.
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA
GUIA 13 Páginas
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE 46 - 50
AMINOÁCIDOS Y PROTEINAS
1. OBJETIVO
2. INTRODUCCIÓN
Existen varias pruebas tanto cuantitativas como cualitativas para valorar e identificar las
proteínas: Reacción de la Ninhidrina, reacción de Biuret, método de Kjeldhl, método de Folin
Cicolteau, electroforesis, cromatografía, reacción de millón, reacción xantoprotéica,
reacción de Sakaguchi, reacción de Pauly, prueba de nitroprusiato, reacción del ácido
glioxílico para triptófano y reacción de Ehrlich.
Reacción Xantoprotéica
Reacción de la Ninhidrina
La ninhidrina es un agente oxidante poderoso, reacciona con todos los alfa aminoácidos a
un pH entre 4 y 8 para dar un compuesto de color purpura. Esta reacción también se efectúa
con aminas primarias y amoniaco, pero sin desprendimiento de CO2, los aminoácidos
prolina e hidroxiprolina también reaccionan con la ninhidrina, pero en este caso se obtiene
un color amarillo en vez de púrpura.
Reacción de Millon
Los compuestos que contienen el radical hidroxibenceno reaccionan con el reactivo de Millon
formando compuestos rojos. Los únicos aminoácidos fenólicos son la tirosina y sus derivados
y solamente ellos dan una reacción positiva.
46
Prueba del Nitroprusiato
Los grupos tioles reaccionan con el nitroprusiato de sodio (Na2 Fe (CN)5 NO) en presencia
de un exceso de amoniaco para dar un color rojo.
Reacción de Sakaguchi
Se trata de una prueba para arginina libre o combinacional en proteínas. Consiste en tratar
la solución de la muestra con alfa-naftol e hipoclorito o hipobromito de sodio, lo que
produce lentamente aparición de color rojo intenso.
Reacción de Biuret
Las proteínas al reaccionar con una solución fuertemente alcalina de sulfato de cobre
producen un compuesto de color violeta. Esta reacción es propia de los grupos CO-NH2
unidos directamente por un átomo de carbono o de nitrógeno. Los aminoácidos no dan la
reacción de Biuret.
Desnaturalización
3. MATERIALES Y REACTIVOS
4. PROCEDIMIENTO
Tome cinco tubos de ensayo y adicione las sustancias indicadas en los esquemas para cada
una de las pruebas.
47
Reacción Ninhidrina
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 1ml
Fenilalanina 1ml
Albúmina 1ml
Caseína 1ml
M. Problema 1ml
Sin Ninhidrina 8 gotas 8 gotas 8 gotas 8 gotas 8 gotas
Reacción Xantoprotéica
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 1ml
Triptófano 1ml
Albúmina 1ml
Caseína 1ml
M. Problema 1ml
(HNO3) 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
Mezcle bien y caliente los tubos en un baño de agua hirviendo 10 minutos. Enfríelos con
agua del grifo y añádales 4 ml de NaOH al 36% a cada uno. Observe y anote los
resultados.
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 1ml
Tirosina 1ml
Albúmina 1ml
Caseína 1ml
M. Problema 1ml
R. Millon 8 gotas 8 gotas 8 gotas 8 gotas 8 gotas
Calentar en baño de maría a ebullición durante 10 minutos. Deje enfriar y agregue 5 gotas
de NaNO2. Observe y anote los resultados.
48
Prueba de Nitroprusiato
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 1ml
Cisteina 1ml
Albúmina 1ml
Caseina 1ml
M. Problema 1ml
Nitroprusiato de Na 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
NH4OH 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Reacción de Sakaguchi
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 2ml
Arginina 2ml
Albúmina 2ml
Caseína 2ml
M. Problema 2ml
NaOH 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
Alfa-naftol 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
NaCIO 5 gotas 5 gotas 5 gotas 5 gotas 5 gotas
Prueba de Biuret
Tubos 1 2 3 4 5
H 2O 1ml
Arginina 1ml
Albúmina 1ml
Caseína 1ml
M. Problema 1ml
R. Biuret 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml
Desnaturalización:
49
Posteriormente caliente 2ml de clara de huevo en baño de maría por 5 minutos. Tome 5ml
de leche en un tubo de ensayo y adicione ml de HCL al 25%. ¿Qué observa?
5. CUESTIONARIO
50