Universidad Nacional Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

Carrera de Biología.

Laboratorio de Investigación Formativa II.

Informe 1.AISLAMIENTO DE SUSTANCIAS

ORGÁNICAS A PARTIR DE FUENTES
NATURALES, MEDIANTE EXTRACCIÓN
SÓLIDO-LÍQUIDO Y LÍQUIDO-LÍQUIDO

Equipo 4.
Danzos Ortiz Mariana Nicte.
Diaz Puente Brenda Ximena.
Flores Vargas Arantza.
Gauffeny Cabrera Sharon Alondra.
Resumen.
En este experimento se aplicaron técnicas de extracción para aislar sustancias orgánicas y
obtener pigmentos de estas.

Introducción.
En este experimento se usaron técnicas de extracción con solventes basadas en la
diferencia de solubilidad y para aislar los componentes orgánicos de sus fuentes naturales.
Estos métodos constituyen una de las técnicas más utilizadas en el laboratorio químico.

También para este se aplicó la teoría leída acerca de las técnicas de separación utilizando
betabel y espinacas como materia orgánica, de igual manera se eligieron los solventes
correctos para realizar una extracción satisfactoria.

Se usó la técnica de extracción líquido-líquido en donde la materia orgánica entra en

contacto con dos fases líquidas, en la fase uno se dispersa para aumentar la superficie y
como consiguiente aumentar la cantidad de materia orgánica recuperada. La importancia
de este procedimiento radica en la recuperación de compuestos orgánicos, el método
líquido-líquido se emplea cuando los componentes de los compuestos de la materia
orgánica a emplear son sensibles a las temperaturas, cuando los componentes son
volátiles

También se usó la técnica de extracción sólido-líquido para extraer componentes solubles

con ayuda de un disolvente, en este proceso el soluto se distribuye en una matriz sólida, la
fase sólida que contiene el soluto se dispersa en el solvente, el soluto extraerá de la fase
sólida al disolvente y se retirará la fase sólida por filtración.

Marco teórico.
Extracción: Es la separación de un componente de una mezcla o de una solución por
medio de un disolvente. El proceso consiste en agitar una solución acuosa o una
suspensión acuosa con un disolvente orgánico inmiscible.

Extracción sólido-líquido: La extracción sólido-líquido suele ser mucho más eficiente

cuando se hace de manera continua con el disolvente de extracción caliente en un sistema
cerrado, utilizando una metodología similar a la comentada para la extracción
líquido-líquido continua, basada en la maceración con disolvente orgánico.

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Extracción líquido-líquido: Es el procedimiento de extracción más utilizado en el laboratorio
químico, se suele utilizar siempre que el reparto del compuesto a extraer en el disolvente
de extracción es suficientemente favorable. Cuando eso no es así, y la solubilidad del
compuesto a extraer en los disolventes de extracción habituales no es muy elevada se
suele utilizar otro procedimiento que implica una extracción continua de la fase inicial
(normalmente una fase acuosa) con porciones nuevas del disolvente orgánico de
extracción.

Método Soxhlet: Es la técnica de separación sólido-líquido comúnmente usada en la

industria alimentaria y no alimentaria para la determinación del contenido graso en
muestras de diferente naturaleza. De igual modo, puede ser usada como técnica
preparativa de muestra como paso previo al análisis mediante otra técnica instrumental.

Volátil: Es el término que caracteriza a los líquidos que se volatilizan rápidamente al estar
en recipientes destapados, por lo que se reducen a gas o vapor.
Una sustancia volátil es un producto que tiene la propiedad de evaporarse en temperatura
ambiente, pasa finalmente del estado líquido a gaseoso al estar en contacto con el aire,
como por ejemplo el alcohol, la acetona o la gasolina.

Analito:Analito es un termino utilizado sobre todo en la química analítica, análisis químico,

etc, donde hace referencia a una sustancia, la cual puede ser un ion, un elemento, o
incluso un compuesto determinado, que posee un interés en nuestra muestra, pues es la
parte que deseamos analizar.

Betabel: El nombre científico del betabel es Beta Vulgaris. Es una especie herbácea
perteneciente a la subfamilia Betoideae de la familia Amaranthaceae. El betabel contiene
betacarotenos que son una fuente de vitamina A, también tienen propiedades
antioxidantes que protegen a las células contra los radicales libres.

Espinacas: El nombre científico de la espinaca es Spinacia Oleracea. Es una planta que

cumple todo su ciclo de vida a lo largo de un año, pertenece a la familia de
Amaranthaceae. Las epenicas como muchos vegetales verdes le deben su color a la
clorofila, este pigmento ayuda para que la fotosíntesis pueda llevarse a cabo y absorbe la
luz exceptuando la de color verde, gracias a esto podemos ver el color caracteristico de las
espinacas.

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Pigmentos: Los colorantes naturales obtenidos de plantas, invertebrados o minerales. La
mayor parte de los colorantes naturales son colorantes vegetales provenientes de plantas
como las raíces, las bayas o las hojas y otras fuentes orgánicas como los hongos y los
líquenes.

Caroteno: Los carotenos son pigmentos fotosintéticos, contienen átomos de oxígeno,

absorben la luz ultravioleta, violeta, azul, dispersan la luz naranja o roja y en bajas
concentraciones la luz amarilla. El β-caroteno está compuesto por dos grupos retinilo y se
descompone en la mucosa del intestino delgado humano por el β-caroteno
15,15'-monooxigenasa a retinal, una forma de vitamina A. El β-caroteno puede
almacenarse en el hígado y la grasa corporal y convertirse en retina según sea necesario,
lo que lo convierte en una forma de vitamina A para los humanos y algunos otros
mamíferos.

Clorofila: Son una familia de pigmentos de color verde que se encuentran en las
cianobacterias y en todos aquellos organismos que contienen cloroplastos o membranas
tilocoidales en sus células, lo que incluye a las plantas y a las diversas algas. La clorofila
es una biomolécula indispensable y crítica en la fotosíntesis.

Hipótesis.
Si se realizan los procesos de separación correctamente para la extracción líquido-líquido
y para la extracción sólido-líquido con los solventes adecuados para cada uno de los
analitos, entonces se obtendrán extracciones con mayor cantidad de pigmentos.

Objetivos.
Objetivos generales:
● Aislar sustancias orgánicas mediante técnicas de extracción sólido-líquido y
líquido-líquido
Objetivos particulares:
● Realizar técnicas de extracción para sólido-líquido con el solvente adecuado para
obtener muestras más puras.
● Realizar la extracción de carotenos de betabel con técnica de extracción sólido-líquido
discontinua
● Realizar la extracción de clorofilas de las espinacas con técnica de extracción
líquido-líquido continua.
Método.
Extracción sólido-líquido discontinua.

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Para comenzar el experimento se coció el betabel, después se maceró con 10mL de
cloruro de metilo, se dejó reposar durante diez minutos, pasado este tiempo se maceró de
nuevo y se dejó reposar durante 30 minutos. Luego se colocó un poco de la maceración en
la manta de cielo, se colocó sobre un vaso de precipitados y se exprimió para recuperar
únicamente los pigmentos, este procedimiento se repitió con todo el betabel. Después se
colocaron los pigmentos extraídos en el embudo de separación y se le agregó unos
milímetros más de cloruro de metilo, se agitó lentamente para que se mezclaran y se abrió
la llave para dejar salir el gas, se repitió esto hasta que la salida de gas fue mínima.
La mezcla de los pigmentos y el cloruro de metilo se dejó reposar en el soporte universal
hasta que se pudo apreciar claramente la separación de las dos fases, se repitió el
proceso una vez más. Después se abrió la llave para extraer la fase inferior, siendo esta el
pigmento de caroteno, en un frasco oscuro, se etiquetó y se resguardó.

Extracción líquido-líquido continua.

Para comenzar la extracción se formó un cartucho de papel filtro, dentro se colocaron las
espinacas, el cartucho se introdujo en el soxhlet. Después se colocaron aproximadamente
100 mL de éter de petróleo en el matraz bola, se armó el equipo soxhlet, la placa de
calentamiento se colocó debajo del matraz de balón y se conectaron las mangueras al
recirculador situado en una palangana con agua y hielos. Todo el equipo ya conectado se
puso en funcionamiento y se dejó hasta que el sifón se activó.
Los pigmentos extraídos se depositaron en un frasco oscuro, se etiquetó y se resguardó.

Resultados.
Extracción sólido-líquido discontinua.

Figura 1. Betabel cocido, sin macerar.

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Figura 2. Betabel macerado con cloruro de metilo para extraer pigmentos.

Figura 3. Pigmentos de betabel para colocarnos en el embudo de separación.

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Figura 4. Pigmentos de betabel con cloruro de metilo en proceso de destilación.

Figura 5. Recolección de los pigmentos extraídos después de dos lavados.

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Extracción líquido-líquido continua.

Figura 1. Cartucho de papel filtro con espinacas en equipo soxhlet.

Figura 2. Equipo de extracción soxhlet completamente conectado.

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Figura 3. Extracción de pigmentos de espinacas.

Figura 4. Activación del sifón.

Discusión de resultados.
Extracción sólido-líquido discontinua.
La extracción de pigmentos de betabel fue satisfactoria, se recuperó una cantidad

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considerable de pigmentos, tenía una consistencia un poco espesa y no era translúcida.
Se hizo un uso correcto del disolvente elegido, ya que para los carotenos es más
apropiado usar uno de baja polaridad, debido a que estos están constituidos por carbono e
hidrógeno, por lo cuál el cloruro de metilo con un índice de polaridad de 3.4 fue adecuado.

Extracción líquido-líquido continua.

Durante la extracción se pudo notar que los pigmentos que liberó la espinaca eran muy
claros, esto debido a que se encontraban marchitas y oxidadas, esto pudo afectar la
concentración del pigmento que se extrajo, otro suceso que pudo afectar la extracción fue
que tardó más de lo planeado por fallas en las placas de calentamiento que se usaron.

Contrastación de la hipótesis.
La hipótesis se cumplió satisfactoriamente solo para la técnica de extracción sólido-líquido,
el disolvente y la correcta metodología permitió obtener una muestra adecuada de
pigmentos de betabel. Sin embargo para la técnica de extracción líquido-líquido existieron
deficiencias en el material usado y la materia orgánica (espinacas) no estaban en el punto
de maduración correcto para obtener una muestra concentrada de pigmentos.

Conclusiones.
En base a todo lo realizado se concluye que para realizar la extracción correcta de
pigmentos de materia orgánica se necesita tener una conocimiento básico de técnicas de
extracción, también se deben de usar materiales que estén en buenas condiciones para
evitar los retrasos y las sustancias orgánicas deben de estar en las mejores condiciones
para que la extracción de pigmentos sea de buena calidad y pueda usarse para técnicas
de cromatografía. Los factores críticos que determinan la eficacia de la extracción por
maceración son: la elección del disolvente, la cantidad de disolvente empleada y el tiempo
de extracción, y para la extracción soxhlet son la naturaleza del vegetal, su composición
química y el tiempo de extracción.

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