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Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas que estan básicamente
constituidas por Carbono, Hidrógenos y Oxígeno, aunque este último elemento se encuentra en
proporciones mucho más bajas que los dos primeros, son insolubles en agua, se encuentran en
los tejidos adiposos y en otras partes del cuerpo animal y humano. Además, pueden contener
Fosforo, Nitrógeno y Azufre, son solubles en disolventes orgánicos como el benceno, bencina y
cloroformo. Constituyen un grupo de sustancias muy heterogéneas con características químicas
diversas, pero con algunas propiedades físicas comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej: hexano),
benceno, acetona y alcoholes.
saponificables).
insaponificables.
Describir el proceso de identificación cualitativa de lípidos por medio del Reactivo Sudán III.
3. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA
El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque es
insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se
disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
4. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA
4.3. ,METODOLOGÍA
4.4. PROCEDIMIENTO
PARTE I
CONOCIMIENTOS DE LAS PROPIEDADES BIOQUÍMICAS
PARTE II
4.4.2. LABORATORIO EXPERIMENTAL MÉTODO SUDAN III
4.4.3. PREGUNTAS
a. Indique lo que ocurre con la mezcla de aceite – Sudan III y Agua y Sudan III.
b. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?
c. ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las diferencias observadas
PARTE III
MÉTODO DE SAPONIFICACIÓN
4.4.4. Para el procedimiento adicionaron a un tubo de ensayo 2mL de aceite vegetal y 2mL de
una solución de hidróxido de sodio (NaOH) al 20%, agitaron vigorosamente y llevaron a
incubación en baño maría durante 30 minutos a 37°C, una vez terminado el tiempo de
incubación el resultado obtenido fue el que se muestra a continuación en la Figura 3
3ml de NaOH
Aceite Vegetal 3ml (1N)
Saponificación
NaOH
Saponificación KOH
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*Fuente: Laboratorio Bioquímica CEAD Acacías 16 de Abril de 2019.
* También puede observar el siguiente video https://www.youtube.com/watch?
v=TdV4OD5eGns&t=37s que indica el paso a paso del método de saponificación como
complemento a las imágenes del registro fotográfico.
a. ¿Qué tipo de reacción química ocurre con los lípidos cuando se realiza el proceso de
saponificación?
b. Identifique las tres fases hidróxido de sodio, aceite y lípido saponificado en la imagen (se
deben señalar en un dibujo o imágen) resultado del proceso de saponificación.
5. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Las grasas y aceites son compuestos derivados de los ácidos grasos, estos son ácidos carboxílicos
con cadenas hidrocarbonadas de cuatro hasta 36 carbonos.
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Figura 4. TRIACILGLICEROLES
El
Glicerol es una molécula de tres carbonos, seguido de ácidos libres, los cuales se van a unir
formando una estructura que se le conoce como Triacilgliceroles, que son moléculas
energéticas muy importantes.
En los ácidos grasos saturados se presenta una cadena larga de carbonos y hay enlaces
sencillos.
Otras estructuras que hacen parte de las hormonas como los Esteroides (Ver Figura 8)
Figura 8. Estructuras de Esteroides
Los Fosfolípidos son moléculas muy importantes que se encuentran presentes en las
estructuras de la membrana celular. (Ver Figura 9)
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Un Fosfolípido es una molécula con dos ácidos grasos y un grupo fosfato modificado unido a un
esqueleto de glicerol.
Es una prueba para identificar ácidos grasos, por lo tanto, general para los lípidos que los
contengan. Los jabones se definen químicamente, las sales metálicas de los ácidos grasos
superiores.
Figura 10. Prueba de Saponificación
Es una reacción química que cuando un aceite vegetal o una grasa animal como los
triacilgliceroles u otros éster se mezclan con un base fuerte como un NaOH (Hidróxidos de
Sodio), o KOH (Hidróxido de Potasio), estos van a producir unas reacciones que son una sal del
ácido graso y glicerol en forma libre.
El tratamiento con NaOH (Hidróxido de Sodio) da como resultado un jabón duro mientras los
jabones que se realizan con KOH (Hidróxido de Potasio) son conocidos como jabones suaves
debido a que permiten la mayor solubilidad.
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En la Figura 10 se tiene un triglicérido, en un tratamiento con el Álcali NaOH (Hidróxido de
Sodio) nos da como resultado la producción del Jabón + el Glicerol, esa reacción se ve reflejada
en el tubo de ensayo al margen derecho inferior donde el jabón se puede precipitar o en ese caso
con una solución fuerte de Cloruro de Sodio (Una Sal)
5.3. EMULSIFICACIÓN
Una emulsión es una mezcla de dos líquidos inmiscibles de manera más o menos
homogénea. Un líquido (la fase dispersa) es dispersado en otro (la fase continua o fase
dispersante).
Figura 11. Emulsificación
En el primer tubo de ensayo (de izquierda a derecha en la Figura 10) se le agrega 10 gotas de
aceite vegetal de cocina a 5 ml de agua, en el tubo de ensayo dos (de izquierda a derecha de la
Figura 10) vemos como el aceite permanece en la superficie del agua, pero después de un
tratamiento mecánico fuerte, podemos observar que el aceite está totalmente mezclado con el
agua, luego después de un tiempo podemos ver dos fases y gran cantidad de micelas.
Industrialmente las emulsiones son muy importantes porque hacen parte de procesos como la
elaboración de mantequilla, margarina, leche, crema de leche, el expreso, la mayonesa; en el
caso de la mantequilla y la margarina la grasa está rodeada de gotas de agua, para el caso
concreto de esta micela, vemos que ese aceite queda dentro de la gota de agua y hay otras
estructuras, unas son hidrofílicas (aceptan el agua) y otras son hidrofóbicas (repelen el agua) y
estas estructuras conforman lo que llamamos micela (Ver Figura 11).
5.4. Indique lo que ocurre con las siguientes mezclas del Laboratorio Experimental
MATERIALES
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Una gradilla pudiera pasar de estado sólido a
Muestra
REACTIVOS
Aceite Vegeral (con una pipeta Pasteur) Reactivo Indicador Rojo Escarlata o
Sudan III
METODOLOGÍA
menos 2 a 3 ml, luego le agregamos unas cinco gotas de nuestro reactivo indicador Sudan III
que es el rojo escarlata, posteriormente se agita el tubo de ensayo, y vamos a observar ¿Cuál
Preparación de la Muestra Positiva: se toma una muestra de aceite vegetal con una pipeta
Pasteur que no es de vidrio porque se pueden ensuciar muy fácil, agregamos la misma
cantidad que utilizamos de agua destilada (de 2 a 3 ml), luego le agregamos las cinco gotas
5.5. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?
observamos como el aceite permaneció en la superficie del agua, pero después de un tratamiento
mecánico fuerte (agitación), se pudo observar que el aceite está totalmente mezclado con el agua,
luego después de transcurridos unos minutos de reposo se poder ver dos fases y gran cantidad de
micelas.
5.6. ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las diferencias
5.6.1. Preparación del Tubo de ensayo con la leche: pipeteamos con la jeringa
agregamos cinco gotas de reactivo SUDAN III, agitamos la muestra y se anotaron las
observaciones en la Tabla 2.
5.6.2. Preparación del Tubo de ensayo con Mantequilla: En un tubo de ensayo se agregó
gotas del reactivo SUDAN III, se agitó la muestra y se anotaron las observaciones en la
Tabla 2.
Tabla 2. Prueba Cualitativa de Lípidos con el Reactivo SUDAN III analizando las muestras
de Leche y Mantequilla previamente derretida
MEZCLA DE LECHE – SUDAN III MEZCLA DE MANTEQUILLA EN
ESTADO LÍQUIDO – SUDAN III
Podemos observar que en la capa superior Es de anotar que es importante que la
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de la leche se formaron unas pequeñas mantequilla esté previamente derretida
amalgamas que indican presencia de para agregar el reactivo SUDAN III,
lípidos, pero no en tanta composición podemos observar que el patrón de
como en el aceite. Así mismo podemos coloración cambia de amarillo a naranja y
observar que la coloración cambia de en la parte superior se observa un naranja
blanco a rosado, pero en la parte superior más rojizo, así mismo la formación de
es un rosado más intenso donde se burbujas o micelas que encapsulan a la
encuentran las amalgamas, siendo esta una mantequilla, lo que nos indica que esta
Prueba Cualitativa Positiva para presencia prueba es Positiva para presencia de
de Lípidos. Lípidos de forma cualitativa.
5.7. ¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente? (Nota: esta pregunta está
mal diseñada, ya que en la emulsión donde se agrega aceite (vegetal o animal) y una base
como el NaOH se produce detergente o jabón y a esta reacción química se le conoce como
saponificación)
La Saponificación es una reacción química que cuando un aceite vegetal o una grasa animal
como los triacilgliceroles u otros éster se mezclan con un base fuerte como un NaOH
(Hidróxidos de Sodio), o KOH (Hidróxido de Potasio), estos van a producir unas reacciones que
son una sal del ácido graso y glicerol en forma libre.
El tratamiento con NaOH hidróxido de Sodio da como resultado un jabón duro mientras los
jabones que se realizan con KOH (Hidróxido de Potasio) son conocidos como jabones suaves
debido a que permiten la mayor solubilidad.
PARTE III
MÉTODO DE SAPONIFICACIÓN
5.8. Para el procedimiento adicionaron a un tubo de ensayo 2mL de aceite vegetal y 2mL de
una solución de hidróxido de sodio (NaOH) al 20%, agitaron vigorosamente y llevaron a
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incubación en baño maría durante 30 minutos a 37°C, una vez terminado el tiempo de
incubación el resultado obtenido fue el que se muestra a continuación en la Figura 3
3ml de NaOH
Aceite Vegetal 3ml (1N)
Saponificación
NaOH
Saponificación KOH
*Fuente: Laboratorio Bioquímica CEAD Acacías 16 de Abril de 2019.
* También puede observar el siguiente video https://www.youtube.com/watch?
v=TdV4OD5eGns&t=37s que indica el paso a paso del método de saponificación como
complemento a las imágenes del registro fotográfico.
a. ¿Qué tipo de reacción química ocurre con los lípidos cuando se realiza el proceso de
saponificación?
La saponificación es una prueba que se utiliza para identificar ácidos grasos, por lo tanto,
general para los lípidos que los contengan. Es una reacción química que ocurre cuando un
aceite sea de origen vegetal o animal u otros ésteres se mezclan con una base fuerte como un
NaOH (Hidróxido de Sodio) o un KOH (Hidróxido de Potasio), estos van a producir
reacciones que son una sal de ácido graso y glicerol en forma libre.
b. Identifique las tres fases hidróxido de sodio, aceite y lípido saponificado en la imagen (se
deben señalar en un dibujo o imagen) resultado del proceso de saponificación.
Figura 12.
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El tratamiento con NaOH (Hidróxido de Sodio) da como resultado un jabón duro mientras los
jabones que se realizan con KOH (Hidróxido de Potasio) son conocidos como jabones suaves
debido a que permiten la mayor solubilidad.
Porque al mezclarse el ácido graso (sea de origen vegetal u animal) con una álcali o base fuerte
como lo son el Hidróxido de Sodio o el Hidróxido de Potasio, que absorben la humedad
fácilmente del aire, reacciona el Na(Sodio) o el K (Potasio) directamente con el ácido graso del
lípido produciendo en la fase acuosa una sal de ácido graso por lo tanto libera a la molécula de
glicerol que estaba inicialmente unida al ácido graso.
Es importante recordar que el glicerol es una molécula de tres carbonos, que en los lípidos se
encuentran unidos de los ácidos libres, los cuales se van a unir formando una estructura que se le
conoce como triacilgliceroles que son moléculas energéticas muy importantes
La enzima que permite que el aparato digestivo realice la hidrólisis de las grasas se conoce como
hidrolasa. La hidrolasa consiste en una enzima que es capaz de realizar la catalisis de la hidrólisis
de los enlaces químicos que contienen los lípidos y las grasas dentro del organismo
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1. CONCLUSIONES
Finalmente la enzima que permite que el aparato digestivo realice la hidrólisis de las
grasas se conoce como hidrolasa. La hidrolasa consiste en una enzima que es capaz
de realizar la catalisis de la hidrólisis de los enlaces químicos que contienen los
lípidos y las grasas dentro del organismo.
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5. REFERENTES BIBLIOGRÁFICOSs
Petrucci, R. H; Herring, F. G.; Madura, J D.; Bissonte, C. (2011). Química General. 10ª Edición.
Pearson Education.
Blankenberg, D., Kuster, G. V., Coraor, N., Ananda, G., Lazarus, R., Mangan, M., ... & Taylor,
J. (2010). Galaxy: a web‐based genome analysis tool for experimentalists. Current
protocols in molecular biology, 19-10.