PRACTICA No 6 Extracción de ADN

INFORME DE LABORATORIO No 6.
TEMA:
EXTRACCIÓN DE ADN
INTEGRANTES:
MARIO ALBERTO ORZCO PADILLA.
DOCENTE:
ROGER RABELO
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
CCVA- COROZAL
(ECISA) ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
4-05-2019
1. Imagen toma de: https://www.lifeder.com/wpcontent/uploads/2018/06/ADNestructura.png

2. Imagen tomada de: http://4.bp.blogspot.com/-
o1cFh3XEwU/VxLqo9igcQI/AAAAAAAAAcA/qRX_YfN8XoAr8YpH4SFg4-
aKhJTE99LRACK4B/s1600/ddf.gif
INTRODUCCIÓN
Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de
DNA. Entre las cuatro biomoléculas principales que componen a los seres vivos,
encontramos a los ácidos nucleicos. Entre ellos, el ADN o Ácido desoxirribonucleico, es el
material genético que comprende las instrucciones que determinan todas las características
y funciones de un organismo y se puede transmitir a su descendencia (heredabilidad).
Razón por la cual, la extracción de ADN es un paso obligado hacia el ejercicio y práctica de
la biología molecular.

OBJETIVO
Extraer ADN a partir de células animales y vegetales.

MATERIALES
 100 ml de agua embotellada (sin gas)

 100 g de espinacas frescas
 1 vaso de precipitado de 200 ml
 1 vaso de precipitado de 100 ml
 1 vaso desechable nuevo y limpio.
 Jabón líquido para lavar los platos
 25 g de NaCl
 100 ml de alcohol isopropílico
 Colorante líquido de color rojo o azul.
 Enzimas (también puede obtenerse del jugo natural y puro, de una
 porción de piña, recién licuada y colada).
 1 cuchara o espátula
METODOLOGÍA
Obtención de ADN a partir de células animales
1. Mezclar el vaso desechable, el agua embotellada con NaCl. Agitar hasta disolver
completamente.
2. Uno de los estudiantes, deberá beber un sorbo de la solución salina preparada y beber
(sin tragar) para removerla en la boca durante un minuto, haciendo buches (esto se hace
para desprender células epiteliales de la boca y así poder extraer el ADN de ellas).
3. Escupir la mezcla en un vaso de precipitado.
4. Añadir una gota del detergente líquido para platos en la mezcla y remover con la espátula
o cuchara, despacio para no hacer burbujas (Así rompemos las membranas celulares y
podemos extraer el ADN de estas).
5. Dejar reposar por 10 minutos.
6. Pasar la muestra a un tubo de ensayo, esto no debe superar la tercera parte del tubo.
7. Añadir 2 gramos de enzimas (si es en polvo) o 1 mL de jugo de piña.
8. Una vez tapado y asegurado el tubo, agitar suavemente girando el tubo 180º sobre su eje
vertical, repitiendo el giro 5 veces.
9. En otro vaso de precipitado, mezclar los 50 ml de alcohol isopropílico con tres gotas de
colorante.
10. Con cuidado verter el contenido del vaso con alcohol y colorante en el tubo de ensayo
que contiene la muestra, inclinando el tubo para que el alcohol genere una capa sobre la
muestra.
11. Esperar 5 minutos, extraer los grumos y cadenas blancas con un palillo.
Obtención de ADN a partir de células vegetales
12. En un mortero, macerar las espinacas por 2 minutos e ir adicionando poco a poco 50 ml
de agua embotellada.
13. Colar en un vaso de precipitado y reservar
14. Adicionar 8 ml de detergente líquido lavaplatos y remover con la espátula o cuchara,

despacio para no hacer burbujas (así rompemos las membranas celulares y podemos extraer
el ADN de estas).
Repetir los pasos del 5 al 11 del procedimiento anterior.

MARCO TEORICO
El ácido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un ácido nucleico que contiene las
instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos
vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria" )a función
principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información"
.muchas veces, el ADN es comparado con un plano o una receta, o un código, ya que
contiene las instrucciones necesarias para construir otros componentes de las células, como
las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta información
genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos
estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética. El ADN
está presente en los indicios biológicos como sangre, semen, saliva, hueso, pelo, etc.
Fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher, biólogo suizo, en los
núcleos de las células del pus obtenidas de los vendajes quirúrgicos desechados y en el
esperma del salmón. El llamó a la sustancia nucleína, aunque no fuere conocida hasta 1943
!gracias al experimento realizado por Oswald Avery.

RESULTADOS
Dibujar la estructura molecular del ADN y explicar brevemente sus características.
Es una molécula de ácido desoxi-ribonucleico, esto significa que está conformada por las
bases nitrogenadas; además tiene una azúcar pentosa llamada desoxi-ribosa. La función del
ADN está directamente relacionada con la transmisión de la herencia; es decir, el ADN
contiene los caracteres genéticos hereditarios que pasan de generación en generación. es
importante porque cada especie tiene su propia codificación.

ANALISIS DE RESULTADO
Se evidencio que en la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay
fragmentos de ARN. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado de la
célula. El alcohol además de permitirnos ver el ADN, este separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa y así el ADN se
precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto.

CONCLUSIONES
Las membranas celulares son rotas por el detergente debido a que los detergentes rompen la
barrera lipídica solubilizando las proteínas e interrumpiendo la interacción lípido-lípido,
lípido-proteína y proteína- proteína. Los detergentes, al igual que los lípidos, se asocian
entre ellos y se unen a superficies hidrofóbicas. Se componen de una cabeza polar
hidrofílica y una cola no polar hidrofóbica. La sal ayuda para que el filamento de células se
unan; es decir evita la unión de las proteínas del ADN. Es indispensable el alcohol etílico
ya que el alcohol debe ser de una concentración establecida sino podría romper moléculas
de las células y entonces no se podría observar el ADN. El alcohol precipita (solidifica) el
ADN fuera de la solución y separa así los componentes de las células. El ADN es soluble
en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre
el alcohol y el agua. El alcohol forzó al ADN a agruparse en hebras las cuales subieron a la
parte superior del tubo de ensayo

RECOMENDACIONES
 Tener la posibilidad de más microscopios para que no hayan muchos estudiantes por
microscopios
 Que la práctica de microscopia sea en varios días, para tener la posibilidad de
aprender más detalladamente
 Tener la posibilidad de no trasladarnos a otra ciudad para realizar estas prácticas.

ANEXOS
1. ¿Para qué sirve extraer ADN?
El ADN es también conocido como la “huella genética” Sirve para la identificación de

cada ser vivo; para determinar los casos en los juzgados familiares y penales. La extracción
de ADN a menudo es un paso temprano en muchos procesos de diagnóstico utilizados para
detectar bacterias y virus en el medio ambiente, así como el diagnóstico de enfermedades y
trastornos genéticos.
2. ¿Describa brevemente cuál es la importancia del ADN para la vida?
Su importancia se debe a que es la encargada de mantener, a través del código genético, la

información genética necesaria para crear un ser vivo similar a aquel del que proviene.
Como hemos comentado anteriormente, El ADN es el portador de la información genética
necesaria para el funcionamiento y desarrollo del ser vivo.
3. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal?
Para romper las células y encontrar el ADN.
4. Dibuje o esquematice la acción del detergente sobre las células
El detergente es usado para romper la pared celular y por ende se conocerá su interior.
5. ¿Por qué se utiliza el alcohol?
Es para que genere una capa sobre la muestra luego Esperar 5 minutos, para extraer los
grumos y cadenas blancas con un palillo.

6. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas formando la cromatina
¿En qué etapa del experimento se separa el ADN de las proteínas?
ADN que se separará del resto de los componentes celulares al dejarlo precipitar en alcohol
7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN?
Necesitaremos precipitarlo (hacerlo no soluble) para poder verlo a simple vista y para ello
utilizamos alcohol. Veremos aparecer pequeños filamentos que son el ADN
8. ¿qué se deduce sobre la solubilidad de ADN en el agua salada y el etanol?
Precipitación con etanol helado. El ADN es soluble en alcohol, pero se torna insoluble en
presencia de sal (NaCl) porque el sodio neutraliza la carga negativa de los grupos fosfatos.
El etanol formará una capa en la superficie por ser menos denso que la solución acuosa.
9. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que requieren la
extracción de ADN? (Explique al menos 3 técnicas e incluya imágenes).
Métodos tradicionales: Los métodos tradicionales, desarrollados en los años 50’s, utilizan
solventes orgánicos para separar a las proteínas del ADN y, una vez suspendido en la fase
acuosa, aislarlo por precipitación con etanol y tiene estos pasos:
• Separación de proteínas y lípidos

• Precipitación del ADN
• Redisolución del ADN

Método de extracción con CTAB: El método es adecuado para extraer y purificar ADN de
vegetales y alimentos derivados de vegetales y está especialmente indicado para eliminar
los polisacáridos y los compuestos polifenólicos, que, de otro modo, alterarían la pureza del
ADN y, por tanto, su calidad.
Métodos comerciales: las columnas unen selectivamente el ADN, en presencia de sales

caotropicas. El AND es recuperado a partir de la matriz de silica mediante lavado con TE o
agua.

BIBLIOGRAFIA
• Freeman, Scott. (2009). Biología. Pearson Ediciones. 3 ediciones Pierce B.A. 2005.
Genética: Un enfoque conceptual. México. Editorial Médica Panamericana.
• Wayne N. Becker, Lewis J. Kleinsmith Y Jeff Hardin. (2006). El Mundo De La Célula.
Pearson Educación. 6 edición
• J.A. Lorente, M. Lorente, EL ADN y la indentificación en la investigación criminal y en
la paternidad biológica. 1995. Comares.
• J.D. Watson, J. Tooze y D.T. Kurtz. Labor.ADN recombinante. Introducción a la
ingeniería genética. 1983.


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Extraer ADN a partir de células animales y vegetales.

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 100 ml de agua embotellada (sin gas)

Obtención de ADN a partir de células animales

3. Escupir la mezcla en un vaso de precipitado.

7. Añadir 2 gramos de enzimas (si es en polvo) o 1 mL de jugo de piña.

Obtención de ADN a partir de células vegetales

13. Colar en un vaso de precipitado y reservar

14. Adicionar 8 ml de detergente líquido lavaplatos y remover con la espátula o cuchara,

Repetir los pasos del 5 al 11 del procedimiento anterior.

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Dibujar la estructura molecular del ADN y explicar brevemente sus características.

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1. ¿Para qué sirve extraer ADN?

El ADN es también conocido como la “huella genética” Sirve para la identificación de

2. ¿Describa brevemente cuál es la importancia del ADN para la vida?

Su importancia se debe a que es la encargada de mantener, a través del código genético, la

3. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal?

Para romper las células y encontrar el ADN.

4. Dibuje o esquematice la acción del detergente sobre las células

5. ¿Por qué se utiliza el alcohol?

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8. ¿qué se deduce sobre la solubilidad de ADN en el agua salada y el etanol?

• Separación de proteínas y lípidos

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Métodos comerciales: las columnas unen selectivamente el ADN, en presencia de sales

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