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OBJETIVO
La causa es desconocida, pero su desarrollo parece estar relacionado con agresiones y lesiones
múltiples. Los factores de riesgo son:
- de la pareja
-Tabaquismo
CUADRO CLINICO
En pacientes con enfermedad pre maligna del cérvix uterino involucra síntomas generales y
pocos específicos, pero el sangrado postcoital, la dispareunia y la secreción uterina anormal
son los que mas frecuentes se refieren. En el caso del cáncer invasor, el sangrado uterino,
dolor pélvico crónico, obstrucción urinaria y perdida de peso.
DIAGNOSTICO CITOLOGICO
1. Recolección de la muestra
2. Fijación
3. Coloración
4. Interpretación citológica
RECOLECCION DE LA MUESTRA
La recolección de la muestra debe de realizarse antes del tacto ginecológico y antes de una
exploración colposcópica.
La papeleta de solicitud del examen debe incluir: Nombre, edad, para (partos),
grava(embarazos), A (Abortos), cesáreas, cirugías ginecológicas previa, FUM, Terapia
hormonal, terapia por radiaciones y Dx clínico.
MATERIAL E INSTRUMENTAL
Guantes estériles
Espéculos estériles
Láminas de vidrio (portaobjetos)
Espátulas de Aire
Torundas de algodón
Envases de boca ancha para fijar laminas.
Preferentemente de vidrio.
Alcohol al 96% suficiente para cubrir las laminas
Papel para embalaje
Solicitudes de examen citológico cérvico –uterino
Cito cepillo
Pinzas
Etiquetas para rótulos.
MATERIAL E INSTRUMENTAL
INSTRUMENTAL PARA TOMA DE MUESTRA
El sitio variara de acuerdo a los fines del estudio, pudiendo ser la muestra vaginal, Exocervical,
endocervical y endometrial
MUESTRA DEL TERCIO SUPERIOR DE PARTE LATERAL DE LA VAGINA
Las muestras son útiles para evaluación hormonal y evaluación de posible reacción
inflamatoria de la vagina
MUESTRA DE EXOCERVIX
Es la mas habitual en campañas de detección masivas del cáncer genital femenino. El material
citológico debe ser tomado mediante raspado con espátula de Ayre, con el objetivo de tener
una buena muestra representativa del total de exfoliación del Exocervix, en especial del orificio
externo y de las erosiones visibles.
MUESTRA DE ENDOCERVIX
MUIESTRA DE ENDOMETRIO
Este tipo de muestra no es muy frecuente, es útil en el Dx. Citológico del adenocarcinoma de
endometrio. Las muestras son obtenidas mediante cepillos o mediante la técnica del Jet wash
o por aspiración al vacío la succión se crea con una bomba eléctrica (aspiración del vacío
eléctrica o con EVA) o una bomba manual (aspiración del vacío manual o MVA). Ambos
métodos usan el mismo nivel de la succión, y tan se pueden considerar equivalentes en
términos de eficacia y seguridad.
OBTENCION DE LA MUESTRA
RESULTADOS
Se obtendrán así las laminas con material adecuado y fijado, listas para ser teñidas y
observadas al microscopio
FIJACION
La fijación es el proceso mediante el cual los elementos constitutivos de las células son
mantenidos estables en cuanto a su estado físico y, parcialmente también a su estado químico.
De manera que puedan resistir al tratamiento sucesivo con varias reactivos sin perdida,
distorsión importante o descomposición; por tanto una vez se ha realizado el extendido, se
procede inmediatamente a la fijación, sumergiendo el portaobjetos en el alcohol etílico al 95
porciento o una mezcla de alcohol y éter a partes iguales por un tiempo mínimo de 15
minutos.
El proceso de fijación debe ser bastante rapido , debido a que la delgada capa de células se
seca fácilmente al aire, lo que provoca variaciones en la reacción tintórea de las células
pudiendo dar lugar a resultados falsos, sobre todo en estudios de evaluación hormonal.
ROTULADO
Se puede rotular con una etiqueta de papel del tamaño de la lamina portaobjeto, escribir con
lapiz y letra de imprenta los nombres y apellidos de la paciente o codigo asignado por el
establecimiento, o numero de historia clinica y la fecha de obtencion de muestra, luego
sujetarlo con un clip a la lamina por la cara opuesta al extendido de la muestra;
alternativamente se puede colocar la lamina en un sobre pequeño con los datos d la paciente.
Las laminas con las muestras fijadas de frotis cervico-uterino, solo requieren ser protegidas del
polvo.
EMBALAJE Y TRANSPORTE
REMISION DE MUESTRAS
1. Cada lamina rotulada debe enviarse con una solicitud o ficha de examen citológico
correctamente llenada.
2. Las laminas conteniendo frotis deben ser remitidas en un plazo no mayor de 15 días.
TECNICAS DE COLORACION
OBJETIVO
FUNDAMENTO TEORICO
TINCIÓN
• TINCIÓN PAPANICOLAOU:
Método de tinción que permite hacer distinción celular por la diversidad de colores con las que
se pueden observar las células (Policromía) y permite observar las células sobrepuestas al jugar
con el micrométrico (Transparencia).
TINCIÓN DE PAPANICOLAOU
La tinción de papanicolaou modificada se basa en la reacción química de los colorantes con los
elementos celulares, y su captación varia de acuerdo al pH vaginal.
1. Citospray en aerosol
2. Alcohol del 96°
Hematoxilina de Harris
La membrana nuclear y la cromatina se tiñe de color azul oscuro o rojizo púrpura y el nucléolo
de color rojo, rosado o naranja.
Orange G (OG-6)
Se usa para teñir el citoplasma (ácido) tiñe el citoplasma de color naranja es una solución de
alcohol.
7. Todos los recipientes, sobre todo los que contienen alcohol y xilol deben estar tapados.
FIJADORES
RESULTADOS DE LA TINCIÓN DE PAPANICOLAOU
Con la técnica de Papanicolaou las células epiteliales, presentan el núcleo de color azul,
citoplasma rosado o verde azulado, los glóbulos rojos de color rojo brillante y ocasionalmente
de color verde, los leucocitos se tiñen de azul pálido, el citoplasma y núcleo azul oscuro, las
bacterias se observan de color gris – violeta, verde o rosado y el mucus se tiñe de color Azul.
CÉLULAS INTERMEDIAS
Evitar efectuar pases demasiados enérgicos que puedan ocasionar perdida celular.
Drenar bien cada portaobjetos en los pasajes a diferentes soluciones, pero no permitir
que el material se seque.
Controlar cuidadosamente, los límites de tiempo en la coloración tal como indica la
técnica.
La permanencia por mayor tiempo del material citológico en los colorantes
generalmente no es dañina, pero tampoco es recomendable.
Controlar la calidad de los colorantes, la acción de la hematoxilina puede prolongarse,
mediante adicciones diarias de pequeñas cantidades de colorantes frescos.
Los colorantes citoplasmático pierden su poder de coloración en menos tiempo, por
tanto será necesario reemplazarlo cada semana o de acuerdo al número de muestras
que han sido procesadas.
Es necesario filtrar diariamente la hematoxilina antes de utilizarla, disminuir el tiempo
recomendado cuando se emplea hematoxilina nueva; la intensidad de la cloración
nuclear será regulada mediante examen microscópico; un aspecto opaco y grisáceo de
las células, así como una falta de contraste indica que las soluciones de colorantes
deben ser reemplazadas.
El reemplazo del agua, acido clorhídrico, solución de hidróxido de amonio, así como la
filtración o reemplazo de alcoholes y xilol reducirá el riesgo de transferencia celular de
un portaobjetos a otro y dará un aspecto claro a las células.
La hidratación debe efectuarse en forma gradual, empleando alcoholes de densidad
descendente, pues el paso directo del alcohol de fijación al agua, puede ocasionar
distorsión celular.
La deshidratación, se efectúa con sustancias miscibles con el agua y que tengan
afinidad por ella, el mejor agente deshidratante es el alcohol también pueden
emplearse la acetona y el alcohol isopropilico siendo el proceso de deshidratación
gradual.
El Aclaramiento es una etapa de la tinción que además de eliminar el alcohol hace
transparente el preparado microscópico, con este objetivo se utiliza el xilol que es un
buen agente aclarante.
Cuando la deshidratación no es completa, este toma uun aspecto lechoso al
sumergirse la placa, constituyendo esto una dificultad.
El montaje permite obtener mejores resultados visuales, protege además el frotis
teñido, de las lesiones físicas y el blanqueamiento o deterioración del colorante.
El medio de montaje debe secar sin provocar alteraciones en el aspecto de las células, no debe
blanquear ningún colorante, así como tampoco deberá producir perdidas del color en periodos
prolongados.
Al realizarse el montaje de los frotis, debe evitarse la formación de burbujas de otro, si existen
muchas burbujas, lo más aconsejable es repetir el procedimiento, si existen una o dos, pueden
ser expulsadas por presión ligera sobre el cubreobjetos, utilizando una pinza.
INTERPRETACION CITOLOGICA
OBJETIVO
ANTECEDENTES
• Una vez realizada la tinción y montaje del frotis, este debe ser sometido a observación
microscópica para sus evaluaciones.
• El tamaño de la célula normal variar, es decir aumentar y disminuir respecto del prototipo ya
sea por influjos bioquímicos, bacterianos, factores biológicos y medidas terapéuticas.
• La forma de las células epiteliales normales es relativamente constante, pudiendo ser plana,
cilíndrica y cubica dependiendo del origen y función celular.
• La forma inicial de la célula puede cambiar por diferentes circunstancias como por ejemplo al
desprenderse del tejido primitivo o al desplazarse hasta el lugar de la toma de la muestra.
• El cambio puede tanto al medio extraño que las rodea como a influencias bacterianas y
bioquímicas.
Células intermedias
CITOPLASMA
Núcleo
• La forma del núcleo, depende de la forma celular, así las células isodiamétricas tienen
núcleos redondos, mientras que las demás presentan núcleos ovalados o irregulares.
• El número de núcleos puede variar en forma relativa, la mayoría de las células epiteliales
normales, presentan un solo núcleo pero en proceso inflamatorios o hiperplásicos, pueden
observarse fenómenos de binucleación y multinucleación, pudiendo observarse estos
fenómenos con gran frecuencia en procesos neoplásicos.
• El núcleo está rodeado por una cubierta denominada membrana nuclear; el contenido del
núcleo, está representado por material amorfo y cromatina, esta última es constituida
principalmente por DNA, el cual confiere al núcleo la coloración azul características que toma
con colorantes básicos como la hematoxilina.
• Los cromocentros, que están constiuidos por cromatinas condensadas, son basofilos debido
a su alto contenido en DNA
• El nucléolo es una formación redondeada, Eosinófila, compuesta por RNA, en casos atípicos
la forma del núcleo es irregular. Con excepción de algunos casos especiales, los
macronucleolos se presentan en células neoplásicas malignas
FONDO O DIÁTESIS
• En la práctica del diagnóstico citológico tiene especial importancia la evaluación del fondo
del preparado que se refiere una observación del medio en el que se encuentran las células,
por ejemplo las células de un Cáncer invasor se encuentran generalmente sobre un fondo
sucio, constituido por detritus celulares.
• Por otra parte la observación de células anormales sobre un fondo limpio, sugiere proceso
no invasivos, sin embargo es posible observar un fondo sucio en procesos inflamatorios como
ser: cervicitis y cervicovaginitis sin que exista una lesión maligna.
DETRITUS CELULARES.
INFORMACIÓN DE RESULTADOS
• Carcinoma invasivo
• Frotis insuficiente.
Los informes expedidos por el laboratorio deben llevar la firma del citólogo y el sello del
laboratorio que avalen el diagnóstico.
Las láminas deberán ser archivadas para realizar el seguimiento de los casos positivos o para el
estudio de correlación citohistológica
• Negativo para la lesión Intraepitelial o malignidad, incluye los frotis « dentro de los limites
normales» y aquellos con cambios celulares benignos.
• Otros, ausencia de anormalidades morfológicas en las células , sin embargo pueden existir
indicadores de incremento de riesgo, por ejemplo presencia de células endometriales en
mujeres mayores de 40 años
• SIL de alto grado.- Evolucionaría hacia carcinoma invasor corresponde CIN II y III
• Esta clasificación refleja los datos morfológicos de lesiones rscamosas pre invasivas y la
relación con la infección por VPH.
DIAGNOSTICO DESCRIPTIVO
En esta categoría, se consideran los cambios celulares que pueden relacionarse con varios
factores etiológicos, pero que no se logra determinar una causa definitiva sobre la base de los
hallazgos citológicos. Estos cambios pueden reflejar una reacción exuberante de tipo benigno
o constituir una lesión potencialmente grave, los cuales no permiten concluir con un
diagnostico definitivo. Nota.- las siglas CEASI son las equivalentes a ASCUS, las cuales podrán
ser utilizadas al referirse a este tipo de anormalidades citológica.
CRITERIOS CITOLÓGICOS
Agrandamiento nuclear dos y media a tres veces el tamaño del núcleo de una célula
escamosa intermedia, con un ligero incremento en la relación núcleo/ citoplasma.
Variación del tamaño y forma de los núcleos , con eventual binculación.
Leve hipercromasia, aunque la cromatina es uniforme y granular.
Los bordes nucleares usualmente son lisos o regulares, aunque pueden observarse
eventuales irregulares.
indeterminado( CEASI)
Atipias en células escamosas de significado incierto (ASCUS)
DEFINICIONES
NEOPLASIA
DISPLASIA
• Células que parecen anormales bajo un microscopio, pero que no son cancerosas.
• Las células normales se pueden convertir en cancerosas antes de que se formen las células
cancerosas en los tejidos del cuerpo, estas pasan por cambios anormales que se llaman
hiperplasia y displasia. En la hiperplasia, hay un aumento del número de células en un órgano o
un tejido, que parecen normales al microscopio. En la fisplasia, las células tienen aspecto
anormal al microscopio, pero no son cancerosas. Es posible que la hiperplasia y la displasia se
conviertan o no en cáncer.
CONDILOMA PLANO
• Los condilomas o verrugas genitales son causadas en el 100% de los casos por el Virus del
• Papiloma Humano (VPH), del que existen más de 100 serotipos, y que tiene como célula
diana
• el queratinocito.
• Dentro de este amplio grupo de serotipos existen algunos claramente relacionados con
ciertos
• tipos de cáncer, como el 16 y 18 que están relacionados con el cáncer de cuello uterino, pene
ano y carcinoma escamoso orofaríngeo.
• El 90% de los condilomas son debidos a los serotipos 6 y 11 que, aunque son de bajo riesgo
oncogénico, en algunos casos pueden dar lugar a lesiones precancerosas. Otros serotipos
• causantes de condilomas, aunque con mucha menos frecuencia son: 30,42-44, 45, 51, 54, 55
y 70.
Condilomas cervicales
CRITERIOS CITOLOGICOS
• Hay agrandamiento nuclear por lo menos tres veces el tamaño del núcleo de una célula
normal intermedia, dando como resultado un incremento en la relación núcleo/ citoplasma.
• Las células tienen las características de LEIAG pero además contienen prominente
macronucleolo y marcada irregularidad de la cromatina con grumos que alteran con áreas mas
claras.
Criterio citológico
Fondo de diátesis tumoral y células mesenquimales atípicas con citoplasma ausente o escaso
(Papanicolau X 400)