AMINOÁCIDOS

Docente: Dr. Pablo Herrera Valdivieso, Mgs

 AMINOÁCIDOS

➢En la naturaleza
existen alrededor de:
 300 aminoácidos,
➢La unión de pero solo 20 son
aminoácidos forma: importantes para la
 Péptidos, formación de
➢Compuesto químico polipéptidos, proteínas.
formado por: proteínas por lo que
1 o más grupos son las unidades
amino (Básicos) y monoméricas que
uno o + grupos forman las proteínas.
carboxilo (Acido).
 ESTRUCTURA
➢Formado por 2
grupos que son
disociados o
ionizados:

 Grupo amino Grupo

carboxilo
 (NH2)
(COOH)

Es básico,
tiene capacidad Es ácido porque
de captar capta protones.
electrones.
 CLASIFICACIÓN
Alanina, fenilalanina,
 No solubles en
NO POLARES glicina, isoleucina,
H2O, carácter de
(Hidrófobos) leucina, metionina,
hidrocarburo.
prolina y valina.
De acuerdo a sus Asparagina, cisteína,
propiedades físico glutamina, serina,
🢩 Neutro
químicas tirosina, treonina y
s triptófano.
POLARES Solubles en H2O
Ácidos:
(Hidrófilos) o ionizables.
 Ac. Aspártico y Ac.
Glutámico.
🢩 Cargado
s Básicos:
 Arginina, histidina y
lisina.
 CLASIFICACIÓN
🢩 Isoleucina, Leucina,
🢩 No
🢩 Metionina, Fenilalanina
🢩 polare
🢩 y Valina.
s
AMINOÁCIDOS 🢩 Polares Treonina
ESENCIALES neutros  Triptófano

🢩 Polar
Lisina
🢩
básico
Polares Arginina
De los 20 aminoácidos que básicos Histidina
constituyen las proteínas
10 no son sintetizados. Cistina
AMINOÁCIDOS Polares Tirosina
Deben suministrarse SEMIESENCIALES neutros
Serina
preformados en las
proteínas de los No
alimentos. Glicina
polar

🢩 No 🢩 Alanin
🢩 polare a
s Prolina
AMINOÁCIDOS NO Polares 🢩 Asparagin
ESENCIALES neutros a
Glutamina
Polares 🢩 Ac. Aspártico
ácidos 🢩 Ac.
Glutámico
 C ➢ AMINOÁCIDOS
ALIFÁTICOS
➢ Cadena  No  Glicina, Alanina,
Valina, Leucina e
➢ larga  polares Isoleucina.
L AMINOÁCIDOS CON Átomos Polares  Serina

A GRUPOS HIDROXILO
(OH)
de OH neutros  Treonina
 Tirosina

S No
polar
 Metionina
Átomos
I AMINOÁCIDOS
AZUFRADOS de azufre
Polar
 Cisteína
O F neutro

T I  Polar
 básico
 Histidina

R. C No
 Fenilalanina
A A AMINOÁCIDOS Cadena
polar

AROMÁTICOS en anillo
S. C Polar
neutro
 Tirosina

I
 Polar  Triptófano
O
N ➢IMINOÁCIDOS ➢Tienen un grupo
amino secundario
No
polar
 Prolina

E Unión
CISTINA Se forma por la unión
S de 2 cisteínas oxidativa
  Homocisteína  Biosíntesis de la
metionina.

 Ac. Cisteinsulfínico  Catabolismo cisteína.

Metabolismo de
 Ornitina treonina, aspartato y
metionina.

Intermediario en el
➢AMINOÁCIDOS QUE NO ➢PERO SON ESENCIALES metabolismo de la
FORMAN PARTE DE LAS  Homoserina
EN EL METABOLISMO. treonina, aspartato, y
PROTEÍNAS
metionina.

 Citrulina  Biosíntesis de la urea.

 Ac. argininosuccínico  Biosíntesis de la urea.

Dopa (3,4  Precursor de la

dihidroxifenil –
melanina.
alanina)

OTRAS
CLASIFICACIONES

 3,5-  3,5,3`-  b alanina  Acido g-

Taurina (ácido 2 –  Acido b-
 3- Diyodotirosin Triyodotironina  Tiroxina aminobutírico
a (T3)  (ácido 3- aminoetilsulfónico) (GABA) aminoisobutírico
Monoyodotirosina aminopropanoico)
Precursor de  (3,5,3`,5`  Neurotransmi  Catabolismo
Precursor de  Precursor de
hormonas Parte de la  Bilis. sores formados de las
las hormonas hormonas Tetrayodotironin
tiroideas. tiroideas. tiroideas. coenzima A y a partir del pirimidinas.
a T4).
vitamina panteteína. glutamato.
OTRAS CLASIFICACIONES
➢UNIÓN DE LOS ➢ ENLACE ➢ OBTENCIÓN DE LOS
AMINOÁCIDOS ➢ PEPTÍDICO AMINOÁCIDOS

➢ Es la unión del grupo

➢ Cuando se calienta a
amino de un aminoácido
110° C durante 18 horas
➢Se unen entre sí con el grupo carboxilo de
en un medio ácido – básico
formando el llamado otro, la unión de 2 o más
las uniones peptídicas se
enlace peptídico. aminoácidos forma el
destruyen liberándose los
llamado PÉPTIDO este es
aminoácidos.
enlace fuerte.

➢También con hidrólisis se

preparan los aminoácidos
estos puede ser por medio
de enzimas digestivas o
proteolíticas.
OTRAS CLASIFICACIONES
➢ Transformación ➢En la cual
➢Sea ➢Hasta obtener
química mediante la intracelular o intervienen aminoácidos
➢ HIDRÓLISI acción del H2O catalizadores
extracelular, libres, hay 3
S haciendo que las exógena o inorgánicos (ácido o tipos de
proteínas sufran una endógena álcali) y orgánicos hidrólisis.
fragmentación (enzimas)

 Se destruye
 Hidrólisis
ácida completamente
el triptófano.

 Sedestruye
 Hidrólisis
completamente los
aminoácidos
alcalina
cistina, arginina,
cisteína.

 No se destruyen
 Hidrólisis los aminoácidos ni
enzimática se producen
raceminaciones.
OTRAS CLASIFICACIONES
DETERMINACIÓN DE LAS SECUENCIAS DE LOS AMINOÁCIDOS
La insulina fue la primera proteína que se
estableció la secuencia de aminoácidos
(SANGER 1956), contiene dos: 1 de 21 y
otra de 30 residuos. La primera enzima fue
la RIBONUCLEASA
Con 124 aminoácidos.

La mayor cadena

secuenciada
simplemente ha sido la
b - Galactocidasa con
1170 residuos.
OTRAS CLASIFICACIONES
ESTRATEGIA PARA DETERMINACIÓN DE SECUENCIAS
Tener la proteína en estado puro y determinar su peso molecular.
Determinar los residuos
N terminal (Aminas NH2) y C terminal (Carboxilo COOH).
 PASO N terminal con flúor o nitrobenceno (FDNB)
1 C terminal con enzima CARBOXIPEPTIDASA.

Separación de las cadenas de polipéptidos constituyentes con ácido

PERFÓRMICO
 PASO
Que oxida las uniones disulfuro, aísla las cadenas por cromatografía.
2

Degradación a péptidos menores por hidrólisis con enzimas proteolíticas

PASO Como TRIPSINA Y QUIMOTRIPSINA se aísla por cromatografía.
3

Determinación de secuencias de aminoácidos a partir de péptidos pequeños

PASO Por degradación de EDMAN utilizando FENIL ISOTIOSIANATO.
4

PASO Deducción de la secuencia de aminoácidos.

5

PASO Establecer la ubicación de las uniones de disulfuro.

6
 OTRAS CLASIFICACIONES

MEDIO PARA TÉCNICAS DE

VISUALIZAR SEPARACIÓN DE ELECTROFORESIS
 CROMATOGRAFÍ
AMINOÁCIDOS AMINOÁCIDOS Separación de
Reacciones con A
aminoácidos
NINHIDRINA O 🢩 En papel.
polipéptidos y
FLUORESCAMINA 🢩 Capa fina.
🢩 Intercambio iónico. otros ANFOLITOS

Moléculas cuya
carga neta
depende del PH
de entorno.
 PÉPTIDOS
 Launión de 2 o más aminoácidos por enlaces peptídicos, la unión
•CONCEPTO de más de 10 aminoácidos se llama péptido. Polielectrolitos cuya
carga neta depende del pH del medio.

 ENDOCRINOLOGÍA. - Muchas de las hormonas son péptidos, ciertos

•IMPORTANCIA antibióticos son péptidos Ej. Valinomicina, gramicidina, agentes
antitumorales como bleomicina, ciertos péptidos y proteínas

BIOMÉDICA:
virales usadas en la producción de vacunas.

• La técnica de fase sólida de MERRYFIELD, puede ser sintetizada

por medios químicos o automatizados. En fase sólida (Merryfield
• TÉCNICAS 1964), síntesis de hormonas péptidas como bradiquinina,
angiotensina y oxitocina y antibióticos gramicidina, tirocidina y
USADAS PARA LA también la insulina, un ciclo de síntesis requiere 4 horas.

SÍNTESIS DE
 PROTEÍNAS

CONCEPTO
• Viene del griego PROTEOS que significa
primer lugar. Son polímeros de alto peso
molecular cuyas unidades monoméricas son
aminoácidos unidos por enlaces peptídicos,
formando una cadena larga de polipéptidos.
PROTEÍNAS
Propiedades Generales

Peso moléculas es elevado

desde 13.000 hasta varios
millones.
Los aminoácidos se pueden
obtener por hidrolisis de
proteínas.
La proteína no hidrolizada
produce algunas reacciones
de coloración.
 • Papel estructural: Carbono (C)
colágeno, elastina, COMPOSICIÓ
50 – 55 %. N DE LAS
queratina PROTEÍNAS
• Transporte: Oxígeno (O)
hemoglobina (oxigeno)
20 – 23 %
albumina (bilirrubina)
• Mantenimiento del Nitrógeno (N)
equilibrio liquido :
IMPORTANCIA albumina sérica 12 – 20 %.

DE LAS • Genética: Hidrogeno (H)

PROTEÍNAS
Nucleoproteínas, histonas
• Papel hormonal: 6–7%
Insulina Azufre ( S )
• Contración: Actina y
Miosina 0,2 – 3 % .
• Defensa o protección :
Fósforo ( P )
Fibrina, inmunoglobulina,
infección 0–6%.
PROTEÍNAS
Clasificación General

Van a ser simples

❖ Formadas solo por aminoácidos

Conjugadas
❖ Compuestas por aminoácidos y
otros componentes (GRUPO
PROSTETICOS)
• Nucleoproteínas (A.
NUCLEICOS)
• Glicoproteínas (HIDRATOS DE
C)
• Lipoproteínas (LIPIDOS)
• Metaloproteinas (METALES)
• Fosfoproteínas (FOSFORO)
• Hemoproteinas
Clasificación por solubilidad
• Albumina
• Globulina
• Protaminas
• Histonas
• Escleroproteinas
Clasificación por sus proporciones axiales
• Proteínas globulares (INSULINA,ALBUMINA,GLOBUL)
• Proteínas fibrosas (QUERT,MIOSINA,COLAG,FIBRINA)
Por su función
• Estructura
• Catalítica
• Transporte
Por su propiedad física
•Lipoproteínas de diferente función:
QUILOMICRONES, VLDL, LDL, HDL
Por su estructura tridimensional
• Primaria-Secundaria-Terciaria-Cuaternaria
 ESTRUCTURA PRIMARIA
Aminoácido unido a una cadena polipeptidos
Enlaces peptídicos y disulfuro

ESTRUCTURA SECUNDARIA
Aminoácidos con forma especial
Hélice
Lamina plegada En espiral

• Terciaria
• Modo en que la cadena polipeptídica
se pliega en el espacio.
• Interacciones hidrofóbicas.
• Interacciones fuerzas de van der Waals y de puentes disulfuro.
• Dos tipos globular y fibrosa
• Cuaternaria
• Deriva de la conjunción de varias cadenas peptídicas.
• Interacciones no covalentes.
Desnaturalización de las
proteínas
▶ Pérdida de las estructuras de
orden superior.
▶ La desnaturalización provoca
diversos efectos en la proteína:
▶ Cambios en las propiedades
hidrodinámicas.
▶ Disminución de su solubilidad.
▶ Pérdida de las propiedades
biológicas.
Determinación de las
▶ Agentes desnaturalizantes: proteínas
▶ Físicos
▶ Químicos ▶ Cristalografía con rayos x.
▶ Untracentrifugacion.
▶ Tamizado molecular.
▶ Filtración en gel.
▶ Electroforesis.
▶ Fotocrogafia electrónica.
 ¿hidrolisis proteíca?
• La hidrólisis de proteínas es la ruptura de la estructura primaria, es
decir la ruptura de la secuencia de la proteína y termina por
fragmentar las proteínas en aminoácidos. Se pueden hidrolizar
con soluciones diluidas de ácidos minerales
 Unión Peptídica
▶ Es la unión de dos o mas aminoácidos.
▶ Se realiza entre grupos COOH + grupos NH2
▶ Cada unión forma una molécula de H2O

Tipos de hidrolisis

ACIDA BASICA ENZIMATICA

• Se usa soluciones • Forma racemato • Se usa enzimas

fuertes (HCI, • NaOH y BaOH Proteoliticas
H2SO4)
• Destruye
completamente
el triptófano y
parte de la serina
y la treonina
Hidrolisis de la Gelatina
 Tipos de Titulación
▶ Acido-Base (Acidimetría – Alcalimetría)

▶ Oxidación-Reducción (Redox)

▶ Titulación sin Indicador

Marcha experimental
1. Colocar en un vaso de precipitación. 50 ml de
GELATINA al 5% (proteína) y 10 ml de pancreatina al
2% (enzima proteolítica).
2. Añadir 2 ml de fenolftaleína al 1% (indicador).
3. Luego poner bicarbonato de sodio hasta que
aparezca un color rosado (indicador en medio
alcalino).
4. Coloque la solución en el baño de maría a 37 grados
centígrados. Aquí debe dejarse durante todo el
tiempo que dure la experiencia. Controle el tiempo.
Este es el tiempo 0 de la reacción.
Marcha experimental
5. Antes de poner en baño maría.
a) Tómese 10 ml de la solución.
b) Hiérvase los 10 ml por 2 minutos. No hasta que
tome color rosado oscuro.
c) Enfríese
d) Añadir a la mezcla hervida 15 ml. De la solución
de FORMALINA NEUTRA.
e) Titúlese la mezcla con NaOH 0.02 N hasta punto
final rosado. Anótese el valor de NaOH gastado en
la titulación como tiempo cero de la reacción.
6. Luego de 15, 30, 45, 60 y 90 minutos repetir lo dicho
en el quinto paso (literal a).
 INTRODUCCIÓN
Péptido compuesto por 3 aminoácidos
1. Glicina
2. Alanina
3. Valina
Se van a unir por enlaces peptídicos COHN.
Introducción

• A determinado pH del medio, el número de cargas (+) va a ser igual al

número de cargas (-) isoelectricidad.
• La carga neta = 0

• Al pH del medio en que la proteína tiene el mismo número de cargas

(+) y (-) se llama punto isoeléctrico.
Propiedades de una proteína en su
punto isoeléctrico

1. El número de cargas (+) igual al número de cargas (-).

2. La carga neta de la proteína es igual a cero.
3. Puesta la proteína en un campo eléctrico no migra ni al
ánodo ni al cátodo.
4. En el punto isoeléctrico la proteína se hace menos
soluble (precipitación de la proteína en el P.I)
5. Cada proteína posee un punto isoeléctrico distinto, lo
que se puede aprovechar para extraerla de una
solución con diversas proteínas: precipitándola y luego
extrayéndola.
 CUADRO DEL PUNTO
ISOLECTRICO DE
ALGUNAS PROTEINAS

PROTEINAS PUNTO ISLOELECTRICO

FIBRONA DE LA SEDA 2 - 2.4
CASEINA 4.6
GELATINA 4.8 - 4.85
OVO ALBUMINA 4.64 - 4 .90
SEROALBUMINA 4.88
ALFA 2 GLOBULINA 4.9
ALFA GLOBULINA 5.2
FIBRINOGENO 5.3
INSULINA 5.30 - 5.35
BETA GLOBULINAS 5.40 - 6.30
GAMMA GLOBULINAS 6.30 - 7.30
HEMOGLOBINAS 6.79 - 6.83
FACTORES QUE MANTIENEN LA SOLUBILIDAD
PROTEICA
ENVOLTURA ACUOSA:
• A no ser que se las deshidrate,
las proteínas están rodeadas
por una capa de agua, l cual
impide a su agregación
(precipitación).
Una proteína tiene 18 aminoácidos, de los
cuales 4 tienen cargas (-) y las 14 cargas (+).
¿Cuál es la carga neta de las proteínas .
REPULSION DE CARGAS ELECTRICAS
IGUALES:
• Se basa en el hecho de que las
proteínas se cargan de acuerdo al
pH del medio o sea la carga netas
de las proteínas (+) o (-) . Las
cargas iguales se repelen,
manteniendo su máxima
solubilidad.
R= + 10 si este tipo de proteína está
en un medio, no precipitan.
EMULSOIDES
• Son coloides hidrófilos, es decir que sus partículas tienen una
fuerte afinidad por el disolvente.

EMULSOIDES DESCARGADOS
• Es la forma como está la proteína en su punto isoeléctrico.
Tiene un solo factor de solubilidad.

EMULSOIDES CARGADOS
• Es la forma como se encuentran las proteínas en un medio
ácido o alcalino. Tienen presentes los dos factores de
solubilidad.
En nuestro organismo, en la sangre, cuyo pH es
ligeramente alcalino, las proteínas están como
emulsoides con carga (-).
SUSPENSOIDES
• Son coloides que han perdido su envoltura acuosa.

SUSPENSOIDES DESCARGADOS
• Si en un punto isoeléctrico se agrega a una proteína alcohol, se la
somete a calor moderado, pierde su envoltura acuosa y
desaparece el único factor que impide su precipitación.

SUSPENSOIDES CARGADOS

• Si se agregan agentes deshidratados a proteínas cargadas (en

medio acido o alcalino), éstas se mantienen solubles sólo por
repulsión de cargas igual.
 Marcha experimental
REACTIVOS Y APARATOS
1. Albumina al 5%
2. Buffer ph 4,8
3. Ácido acético
4. Etanol
5. CLH 1N
6. NAOH 1N
7. Leche
8. Mediadores zonales de ph
9.Tubos de ensayo, centrifugas y pipetas
10.Baño María
 Reactivos 1 2 3

CLH
3ml -- --
PH = 0

Buffer
-- 3ml --
PH = 4,8

NAOH 0,1
-- -- 3ml
PH = 13

Albumina al 5
1ml 1ml 1ml
%
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

NOCIONES PRELIMINARES
• El plasma sanguíneo contiene en solución coloidal 8gr de
proteínas por cada 100cc
• Estas proteínas tienen diferente composición y se
encuentran en distintos estados de estabilidad e
hidratación
• El primer método que demostró la presencia de estos
elementos fue “FRACCIONAMIENTO SALINO”,
partiendo de que la primera proteína que precipita es el
FIBRINÓGENO
 LAS PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
1. ALBUMINA
SON:
• Peso molecular de 64 000 a 69 000
• Punto isoeléctrico de 4.90
• Formada en su mayor parte en el hígado. Las hepatopatías ocasionan
generalmente una Hipoalbuminemia
• Puede también formarse en otros órganos
• Interviene en:
• Equilibrio acuoso (por su poder coloidosmótico)
• Equilibrio acido base
•Transporte de sustancias de carácter toxico- farmacológico o fisiológico Función nutritiva o
de recambio en las proteínas tisulares
Existe en la sangre normalmente cifras de 4 a 5.2gr
2. GLOBULINAS
Son de 3 tipos:
• Alfa (Alfa 1 y 2)
• Beta
• Gamma
PESO MOLECULAR:
• Alfa 1: 200 000

• Alfa 2: 300 000

• Beta: 90 000
• Gamma: 156 000
PUNTO ISOELÉCTRICO: 4.9 a 6.3 para los alfa y beta
6.3 a 6.4 para las
gamma FRACCIONES PARCIALES:
• Alfa 1: unidas a glúcidos / unidas a lípidos
• Alfa 2: unidas a enzimas, hormonas, hemoglobina / unidas al cobre
• Beta: Unidas a glúcidos / unidas a lípidos / unidas al hierro / Plasminógeno /
protrombina /
componente C1 del complemento / Unidas a enzimas yhormonas
• Gamma : Fracción 1ª o Beta –Z-A / Fracción 1M o Beta –M / Fracción 2 o
globulina gamma propiamente dicha
SUBGRUPO DE INMUNOGLOBULINAS:
• Fracción G o IgG
• Fracción A o IgA
• Fracción M o IgM
• Fracción D o IgD
• Fracción E o IgE
Las globulinas gamma se forman a partir de células del SER (LINFOCITOS,
CÉLULAS PLASMÁTICOS)
• Intervienen en: las globulinas Alfa y beta como transportadoras de sustancias
• Las globulinas gamma en función inmunológica humoral
• Inmunoglobulina A (IgA): se encuentra en los recubrimientos de las vías
respiratorias y del sistema digestivo, así como en la saliva, las lágrimas y la leche
materna.
• Inmunoglobulina G (IgG): es el tipo de anticuerpo que más abunda en el
cuerpo. Se encuentra en la sangre y en otros fluidos, y brinda protección contra
las infecciones bacterianas y víricas. La IgG puede tardar un tiempo en formarse
después de una infección o vacunación.
• Inmunoglobulina M (IgM): se encuentra principalmente en la sangre y en el
líquido linfático; este es el primer anticuerpo que fabrica el cuerpo para
combatir una nueva infección.
• Inmunoglobulina E (IgE): normalmente se encuentra en pequeñas cantidades
en la sangre. Se puede encontrar en cantidades superiores cuando el cuerpo
reacciona de una manera exagerada a los alérgenos o cuando está combatiendo
una infección provocada por un parásito.
• Inmunoglobulina D (IgD): existe en pequeñas cantidades en la sangre y es el
anticuerpo que menos se conoce.
 Sus alteraciones pueden el del origen de :

• Macro globulinas (Walderstrom)

• Globulinas anormales (mieloma múltiples: vence jones)
• Elevación de globulinas en sangre (procesos infecciosos)
• Proteína C reactiva que aparece en infecciones a cocos (neumococos)
• Normalmente hay en la sangre de 1.9 a 2.7gr de globulinas totales
• 3. FIBRINÓGENO
• Peso molecular de 300 000 500 000
• Punto isoeléctrico de 5.3
• Formado en parte en el hígado y en parte en medula ósea u otros órganos del
sistema retículo endotelial (SER)
• Participa activamente y como elemento estructural final en la coagulación
ALTERACIONES
• Afibrinogenemia
• Hipofibrinogenemia
• Fibrinostenia
 Normalmente en la sangre hay de 200 a 400 mg de fibrinógeno.

PROTEINOGRAMA NORMAL FRACCIONES DE GAMMA = GLOBULINAS

• Albumina de4 a 5.2gr • En promedio 11.9mg/ml

• Globulinas de 1.9 a 2.7gr • En promedio 3.8mg/ml
• Alfa 1 de 0.2 a 0.4gr • En promedio 1.9 mg/ml
• Alfa 2 de o.4 a 0.7gr • En promedio 1.9,g/ml
• Beta de 0.7 a 0.9gr
• En promedio 0.3 mg/ml
• Gamma de 0.7 a 1.4gr
• Fibrinogeno de 0.2 a 0.4gr
• Bajos y pocos
• Cociente de 1.5 a 2.7 gr estudiantes
Significación Clínica
 Significación
Funciones: Clínica
Permitir el transporte de
Acidos
grasos
Hormonas
esteroideas,
Bilirrubina,
Catecolamina

Condiciones Patológicas
de la Albumina

-Desnutrición
-Endocarditis

-Mieloma Múltiple
 Fundamento

Los enlaces peptídicos de las

proteínas reaccionan con el
ion cúprico, en medio alcalino,
para dar un complejo color
violeta con máximo de
absorción de 540nm, cuya
intensidad es proporcional a la
concentración de proteínas Determinación de
totales en la muestra
Albumina
La Albumina reacciona
específicamente sin separación previa
con la forma anicónica de la Bromo
Cresolsulfoo taleina(BCF), en
presencia de un exceso de colorante
en medio taponado de ph 3.8. El
aumento de absorbancia a 625nm
respecto del blanco de reactivo, es
proporcional a la cantidad de
albumina presente en la muestra.
 Proteinurias
Nociones
preliminares
• Se designa con el nombre de proteinurias a toda aparición visible de
proteínas especialmente albumina y globina, en concentraciones anormales
en la orina. Es mas frecuente la aparición de albumina debido a su bajo peso
molecular lo que motiva que en defecto de la membrana de filtración
glomerular, filtre exageradamente esta proteína.

Hay que diferenciar

entre:
• Proteinurias verdaderas en que las proteínas pasan a través de los
glomérulos, obedeciendo a trastornos funcionales anatómicos.
• Proteinurias falsas, en que la orina una vez formada se mezcla con
secreciones proteicas procedentes de supuraciones-sangre o secreción
vaginal.
 Las proteinurias patológicas
pueden agruparse así:
• Prerrenales, cuando las causas primarias son factores que operan antes de que la sangre
llegue a los riñones.
• Renales, cuando la lesión es intrínseca del riñón
• Post-renales cuando la proteinuria se debe a inflamación de las porciones bajas de las
vías urinarias.

El mecanismo de proteinurias
renales radica en:
• Aumento de la filtración.
• Disminución de la reabsorción de proteínas en el
tubo, sin aumento de la permeabilidad.
• Combinación de ambos mecanismos.
Etiología de las
proteinurias Orgánicos:

Pre renales • Estado febril.

• Coma acidotico.
Funcional: • Neoplasia.
• Insuficiencia cardiaca congestiva.
• Proteinuria • Sindroma acidotico.
ortos tatica • Compresión tumoral o no de venas
• Frio intenso renales.
• Toxemia gravídica.
• Emocional
• Hipertensión esencial.
• Fatiga • Trastorno neuro-psiquiatricos.
• Gravidez • Procesos alérgicos o inmunológicos.
• Ictericias parenquimatosas graves.
• Estado • Froteinuria orgánica.
premenstrual

Renales
Etiología de las
Nefropatías quirúrgicas:
Nefropatías medicas: proteinurias • Litiasis renal.
• Glomerulonefritis difusas. • Piolitis pielonefritis.
• Nefritis focales. • Tuberculosis renal.
• Cáncer renal.
• Síndrome nefrótico. • Riñón poli quístico.
• Esclerosis renal.
 Etiología de las
proteinurias
Post renales
• Afecciones de genitales externos
y uretra.
• Traumatismos uretrales.
• Prostatitis.
• Cistisis.
Rango de proteinuria
Rango de proteinuria
• Cuando hablamos de proteinurias humorales nos referimos a la eliminación renal de proteínas
circulantes que normalmente no se encuentran en la sangre.
• La proteína mas frecuente es la anormal para proteína de bence jones que se elimina en
enfermedades de discrasia de células plasmáticas.
• La proteína de bence jones es una cadena normal de gamma globulina.
• Aparece en la orina y tiene la propiedad de precipitar hacia los 50ºC y redisolverse entre 80ºC y
100ºC.

PRUEBA DE ROBERTS
• Los componentes de reactivos de Roberts desnaturalizan las proteínas coagulándolas.
• El reactivo de Roberts es muy denso y por eso la orina se deposita sobre el mismo
formándose entre ambos una interface.
• Se interpretara semicuantitativamente la cantidad de proteinurias de acuerdo al grosor del
anillo de la interface de acuerdo a los valores anteriormente indicados, es decir indicios, una
cruz ,dos cruces ,etc.
 Prueba de Roberts
Reactivos y aparatos
• Reactivo de Roberts (solución de
sulfato de magnesio y acido nítrico ).
• Orinar al azar de 24 horas.
• Tubo de ensayos.
Método de las tirillas reactivas
• Introducir la zona reactiva de la tirilla
en la orina y retirar inmediatamente
• Dara una reacción de color debido a
que con las proteínas el amortiguador
del área reactiva dará lugar a una
reacción visualizable por el cambio
de amarillo hasta verde amarillento y
aun verde azul antes cantidades de
proteínas.
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES
En tres tubos colocar: B S D

Agua destilada 50 ul -- --

Suero Patrón -- 50 ul --

Muestra -- -- 50 ul

Reactivo EDTA/Cu 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla; incubar durante 15 minutos a 37º C. retirar los

tubos de baño y dejar enfriar. Leer en espectrofotómetro a 540 nm,
llevando a cero con el blanco de reactivo.
 DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
En tres tubos colocar: B S D

Suero Patrón -- 10 ul --

Muestra -- -- 10 ul

Reactivo BCF 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28º C durante 10

minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm, llevando a cero con el
blanco del reactivo.
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES
En tres tubos colocar: B S D

Agua destilada 50 ul -- --

Standard -- 50 ul --

Muestra (Suero) -- -- 50 ul

Reactivo A 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla; incubar durante 15 minutos a 37º C. retirar los

tubos de baño y dejar enfriar. Leer en espectrofotómetro a 540 nm,
llevando a cero con el blanco de reactivo.
 DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
En tres tubos colocar: B S D

Standard -- 10 ul --

Muestra (Suero) -- -- 10 ul

Reactivo B 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28º C durante 10

minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm, llevando a cero con el
blanco del reactivo.
 DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES
En tres tubos colocar: B S D
Agua destilada 50 ul -- --
Standard -- 50 ul --
Muestra (Suero) -- -- 50 ul
Reactivo A 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
Mezclar con varilla; incubar durante 15 minutos a 37º C. retirar los
tubos de baño y dejar enfriar. Leer en espectrofotómetro a 540 nm,
llevando a cero con el blanco de reactivo.
DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
En tres tubos colocar: B S D
Standard -- 10 ul --
Muestra (Suero) -- -- 10 ul
Reactivo B 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28º C durante 10
minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm, llevando a cero con el
blanco del reactivo.
 CALCULO DE RESULTADOS
PROTEÍNAS TOTALES:

• Proteínas totales (g/dl) = D x f

•
𝑓= 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎𝑠𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠𝑔/𝑑𝑙 𝑆 VALORES DE REFERENCIA:

• f (proteínas totales) = 12 • Proteínas totales = 6,1 a 7,9

g/dl
ALBÚMINA:
• Albúmina = 3,5 a 4,8 g/dl
• Albúmina (g/dl) = D x f

• 𝑓= 𝐴𝑙𝑏𝑢𝑚𝑖𝑛𝑎𝑔/𝑑𝑙
𝑆

• f (Albúmina) = 17
 La constante investigación
encaminada a mejorar y
simplificar y las técnicas de
La cuantificación de dosificación, han
actividades enzimática ha contribuido a determinar
formado en los últimos que una cifra cada vez
tiempos una gran mayor de patología se
importancia como auxilio caracterizan por un déficit
diagnóstico. enzimático
 Enzimología Clínica

La cuantificación de actividades enzimáticas ha tomado importancia como auxilio de

diagnostico

Estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas.

Proporcionan información directa a los mecanismo de la reacción catalítica y especifidad

del enzima

La medida se realiza siempre en las condiciones óptimas de pH, temperatura, presenciade

cofactores.

Seutilizan concentraciones saturantes de sustrato.

Enzima: Proteína con actividad catalítica muy
específica que aceleran considerablemente la
velocidad de reacción.

Sustrato: Es la sustancia sobre la cual actúa una

enzima como catalizador.
Centro Estructuras indispensables que tiene
Activo un enzima para combinar con el sustrato

Es una menor cantidad de energía

Energía de para que las moléculas se pongan en
activación contacto

• Es cualquier factor que permita

Activadores atraer el sustrato al centro de
activación .

• Son proteínas o
enzimas que se llevan
a cabo en una reacción
catalítica con diferentes
Isoenzimas propiedades físicas ,
químicas y
estructurales .
 CLASIFICACIÓN
• Intervienen en la oxido reducción biológicas y en los procesos
OXIDO REDUCTASAS de respiración yfermentación.

• Realizan el traspaso que grupos químicos entre dos sustratos,

TRANSFERASAS a exclusión delH+.

• Tienen la capacidad de introducir los elementos: H+ y OH- en

HIDROLASAS el sustrato atacado

• Catalizan partición reversibles, por mecanismos no

LIASAS hidrolíticos de los grupos químicos desprendidos del sustrato.

ISOMERASAS • Catalizan isomerización óptica, geométrica y funcional.

• Permiten la unión de dos o más moléculas lo que sucede

LIGASAS simultáneamente a la degradación deATP.
Intervienen en la oxido reducción
biológicas y en los procesos de respiración
y fermentación

Realizan el traspaso de grupos químicos

entre dos sustratos, a exclusión de H+

Tienen la capacidad de introducir los

elementos: H+ y OH- en el sustrato
atacado.(practicas)

Ruptura de enlaces mediante mecanismos

distintos a la hidrolisis

Catalizan isomerización óptica,

geométrica, funcional

Permiten la unión de dos o mas

moléculas, lo que sucede
simultáneamente a la degradación del ATP
• La velocidad inicial de una reacción mono molecular, manteniendo constante la
concentración de la enzima depende de la concentración del sustrato, habrá
mayor concentraciónde complejo enzima sustrato, al haber mayor sustrato.

• Al seguir incrementando sustrato, el aumento de velocidad se va haciendo cada

vez menor

• Por más que se lleva sustrato, no se altera la velocidad manteniéndose

activamente constante

• En este momento se ha alcanzado la velocidad máxima de la reacción para esa

cantidad deenzima.

• Saturación de la enzima significa desde un punto de vista práctico que toda la

encimase encuentra como enzima sustrato.
Al mantener una
concentración de sustrato
lo suficientemente alta
para mantener saturada a
la enzima, fácil es pensar
que toda esta se
encontrará en forma de
complejo Enzima –
Sustrato (E – S), y por
consiguiente, la velocidad
de la reacción (velocidad
inicial), va a depender en
forma directa de la
concentración de la
enzima.
 EFECTO DEL PH SOBRE LA
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
ENZIMÁTICA
Las enzimas requieren para efectuar
Los cambios de ph puede también
con máxima eficacia una
influir en la estabilidad de la enzima,
determinada concentración de iones
así la actividad reducida de una
de H+ en el medio, dependiendo de
enzima a determinado ph puede ser
la influencia del ph en la ionización
una manifestación de
de proteínas, de los grupos
desnaturalización parcial.
prostéticos del sustrato o de todos.

Los siguientes factores pueden

afectar la actividad de una enzima:
Se considera a que 0° c inhibe casi por completo la
actividad enzimática

Se incrementa la actividad que alcanza al máximo

alrededor de los 40 grados y 50 grados centígrados

A temperaturas elevadas se comienza inactivar las

enzimas y en una mayoría se inactiva o se desnaturalizan
por completo a 100 grados

Esta inactivación es un proceso Irreversible a causa de la

desnaturalización y coagulación de las proteínas que
resulta por rotura o pérdida de las estructuras secundarias
y terciarias
Una reacción enzimática
durante un prolongado
puede suceder en el primer
instante de la velocidad de
la reacción se mantiene
constante a pesar de que
va disminuyendo la
concentración del sustrato
pero después de cierto
tiempo comienza a
disminuir hasta sernula
 Son enzimas que cumplen una importante función
metabólica
Se encuentran en el interior de las células de
órganos como:
▪ el hígado
▪ el corazón
▪ los riñones
▪ los músculos

La concentración de estas transaminasas en el plasma sanguíneo

se eleva en diversas enfermedades. En ocasiones, el tipo
específico de aminotransferasa elevada sugiere el órgano afectado
por su relativa abundancia en él.
▪ La alanina amino transferasa (ALT o GPT), es producida en el
citosol (unilocular)
▪ Aspartato aminotransferasa (AST o GOT), es producida en la
mitocondria
y el citosol (bilocular)

Cuando un análisis de sangre detecta niveles elevados de estas

moléculas puede indicar que existe una lesión de las células
hepáticas.

Es la relación de GOT/GPT
• Si es inferior a 1 expresa una
lesión leve del hígado
• Si es superior a 1 o 2 denota una lesión grave
La elevación de las transaminasas no es una enfermedad en sí, sino
un síntoma que advierte de que podríamos tener un problema de
salud, o una secuela pasajera debido a una alimentación
inadecuada o a la exposición a tóxicos o ciertos fármacos.
 ENFERMEDADES RELACIONADA CON LA ELEVACION DE LAS TRANSAMINASAS

➢ Hepatitis B o C crónicas.
➢ Esteatosis hepática (hígado graso).
➢ Mononucleosis infecciosa.
➢ Alcoholismo.
➢ Citomegalovirus.
➢ Enfermedades sistémicas, como las que afectan a la tiroides.
➢ Hemocromatosis. VALORES NORMALES DE TRANSAMINASAS
EN SANGRE
Además una dieta rica
Los valores normales Los valores normales
en grasas, el consumo
de ALT en de AST en
de alcohol, tomar
sangre (aunque sangre (aunque
determinados
fármacos, e incluso un
pueden variar pueden variar
esfuerzo físico ligeramente ligeramente
excesivo o un dependiendo del dependiendo del
traumatismo muscular laboratorio) son: laboratorio) son:
•Hombres: 10 a 40 UI/L •Hombres: 8 a 40 UI/L
•Mujeres: 7 a 35 UI/L •Mujeres: 6 a 34 UI/L
 DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS
TUBOS B D
Sustrato (GOT – GPT)
0.5 ml 0.5 ml
(Reactivo A)
Colocar en baño de agua a 37° C + 0.5° C unos minutos (2 minutos).
Suero --- 100 ul
Agua Destilada 100 ul ---
Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 30 minutos y agregar

Reactivo 22,4 – DNFH

0.5 ml 0.5 ml
(Reactivo B)
Mezclar, dejar 10 minutos a 37° C Luego Agregar
Diluyente para enzimas
5 ml 5 ml
(Reactivo C)

Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 2 minutos leer la absorbancia
en fotocolorímetro con filtro verde (500 – 550 nm); en espectrofotómetro a 505 nm
o Hg 546, llevando el aparato a cero D.O con agua destilada.
 CALCULO DE
RESULTADOS

VALORES DE REFERENCIA:

• GOT – AST: 5 -37 U/L

• GPT – ALT: 10 - 41 U/L

• GGT 11 – 50 U/L
 FOSFATASA ALCALINA Y AMILASA
es una enzima ampliamminete distribuida en el organismo
hidroliza los monoesteres del ácido ortofosforicoen medio
alcalino
proviene del hígado y en parte del hueso (adulto)
alcanza su mayor actividad en niños en edad de crecimiento

Patologias relacionadas con la actividad serica de la fosfatasa alcalina

Carcinomas metastasicos en hígado y huesos.

Colestasis biliar
Fenómenos osteoblasticos
Transtornos de mala absorción (DEFICIENCIA DE VIT B) –OSTEOMALCIA-
Infarto al miocardio
Infarto renal o pulmonar
 Raquitismo
El raquitismo es un trastorno de la
mineralización ósea del hueso en
crecimiento, y, por tanto, típico de la
infancia. Su causa más frecuente es el déficit
de vitamina D
La mineralización ósea depende del
metabolismo calcio-fósforo.
Fundamentos del método
La fosfatasa El fenol liberado se El color desarrollado
alcalina desdobla determiná por es directamente
el fenilfosfato de reacción con 4- proporcional a la
sodio en medio aminotrapina y actividad
alcalino ferricianuro como enzimatica y se
tamponando con agente oxidante mide a 530nm
aminometil
propanol(AMP)

Buffer: 4-aminoantipirina 29mmol/1 en solución de

aminometil propanol 33 mol/1 pH 10 (a 37C)
REACTIVOS NaFF: fenilfosfato de sodio 1,4 mmoles
PROVISTOS Reactivo de color: ferricianuro de
potasio, 10 mmol/l
Standard: solución de fenol equivalente a 200 ul/l
 AMILASA
• Significación Clínica
• Producida en el páncreas exocrino y en las glándulas salivales, incide
en los enlaces 1-4 glucosídicos (almidón y glucógenos)
• Se encuentra elevada en el suero de pacientes con pancreatitis
aguda, alcanzando los valores más elevados entre 24 y 30 horas
posteriores al ataque, declinando para volver luego a los valores
normales entre las 24 y 48 horas.
• Significación clínica
• También se ve aumentada en el caso de excreción urinaria de la
enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 días, luego de que la
actividad sérica ha alcanzado los niveles normales.
• También es posible encontrar valores aumentados en cualquier caso
de “abdomen agudo” o intervención quirúrgica en regionespróximas
al páncreas.
• Las parotiditis bacteriana y paperas se asocian también con
elevaciones en niveles de amilasa sérica.
FUNDAMENTOS DEL
El sustrato, almidón tamponado, se incuba con la
muestra, produciéndose la hidrolisis enzimática.
Esta se detiene por el agregado de reactivo de yodo, que al
mismo tiempo produce color con el remanente es la almidón
METODO

no hidrolizado
La disminución de color respecto de un sustrato color es la
medida de la actividad enzimática, que se expresa en unidades
amioliticas.
REACTIVOS PROVISTOS

*Sustrato 1: Solución de almidón 500 mg/L, tamponada a pH 7, buffer

fosfatos 0,1 mol/l en CLNa 0,15 mol/L

*Reactivo de lodo 2: Solución 0.01 ew/L de yodo en ácido clorhídrico

0,02 mol/L.
 DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ALCALINA
B S D

Sustrato (Reactivo A) 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Preincubar en baño de agua a 37 C durante 2 min luego agregar:

Muestra (Suero) ---- ---- 50 ul

Estándar ---- 50 ul ----

Mezclar, imcubar exactamente 10 min ( cronometro) y agregar:

Reactivo color (Fosfatasa 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml

alcalina)
Mezclar de inmediato cada tubo, retirar los tubos del baño y lee en espectrómetro
a 520 nm o en foto colorímetro con filtro verde, llevando el aparto a cero de
absorbancia con agua destilada.
 DETERMINACIÓN DE AMILASA
C D

Sustrato 1 (Reactivo A) 1 ml 1 ml

Dejar dos minutos en baño de agua de 37° C y agregar

Muestra (Suero) ---- 20 ul

Incubar a 37° C a los 7 minutos y medio agregar

Reactivo de Yodo (Reactivo B) 1 ml 1 ml

Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del baño y agregar

Agua destilada 8 ml 8 ml
Mezclar por inversión. Leer en foto colorímetro con filtro rojo o en
espectrofotómetro alrededor de 640 nm, llevando a cero el aparato con
H2O Dest.
 DETERMINACIÓN DE FOSFASA ALCALINA
B S D
Sustrato (Reactivo A) 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Preincubar en baño de agua a 37 C durante 2 min luego agregar:

Muestra (Suero) ---- ---- 50 ul
Estándar ---- 50 ul ----

Mezclar, imcubar exactamente 10 min ( cronometro) y agregar:

Reactivo color (Fosfatasa alcalina) 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Mezclar de inmediato cada tubo, retirar los tubos del baño y lee en espectrómetro a 520 nm o en foto
colorímetro con filtro verde, llevando el aparto a cero de absorbancia con agua destilada.

DETERMINACIÓN DE AMILASA
C D
Sustrato 1 (Reactivo A) 1 ml 1 ml
Dejar dos minutos en baño de agua de 37° C y agregar
Muestra (Suero) ---- 20 ul
Incubar a 37° C a los 7 minutos y medio agregar
Reactivo de Yodo (Reactivo B) 1 ml 1 ml
Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del baño y agregar
Agua destilada 8 ml 8 ml
Mezclar por inversión. Leer en foto colorímetro con filtro rojo o en espectrofotómetro alrededor de 640
nm, llevando a cero el aparato con H2O Dest.
 FOSFATASA ALCALINA
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS
Fosfatasa alcalina (U/I) = factor x (D – B)
Dónde: 𝑓𝑎 𝑟= 200 𝑈𝑙/
𝑐𝑡𝑜 (𝑆−𝐵)
factor: 890,07
VALORES DE REFERENCIA
Adultos: 68 – 240 UI/l
Niños: 100 – 400 UI/l
AMILASA
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS
Amilasa 𝑈𝐴/𝑑𝑙= 𝐶−𝐷 𝑋1000
𝐶

VALORES DE REFERENCIA:
SUERO ORINA
CONDICIÓN CLÍNICA (UA / dl) (UA /hora)
Normal 120 <260
Pancreatitis Aguda 300 a 12.00 mas de 900
Pancreatitis Crónica hasta 200 mas de 300
Parotiditis 200 a 350 350 a 750
Parotiditis / Complicación Pancreática mas de 350 mas de 750
Procesos abdominales normal normal
agudas (sin pancreatitis)
 Lipasa
La lipasa es un tipo de proteína producida por el páncreas, un
órgano que está cerca del estómago.
Esta ayuda al cuerpo a digerir las grasas. En normal tener una
pequeña cantidad de lipasa en la sangre. Pero un nivel de lipasa
alto puede significar que usted tiene pancreatitis (inflamación) u
otro tipo de enfermedad del páncreas.

Las pruebas de sangre son la manera más común de medir la

lipasa.
 La prueba de lipasa se puede usar para:
•Diagnosticar pancreatitis u otra enfermedad del
páncreas
•Averiguar si hay una obstrucción en el páncreas
•Detectar enfermedades crónicas que afectan al
páncreas, como fibrosis quística
Resultados normales
En general, los resultados normales son 0 a 160
unidades por litro (U/L) o 0 a 2.67 microkat/L (µkat/L).

Un nivel alto de lipasa podría indicar:

Pancreatitis
Obstrucción en el páncreas
Enfermedad de riñón
Úlcera péptica
Un problema con la vesícula biliar
 es una enzima ampliamminete distribuida en el organismo
hidroliza los monoesteres del ácido ortofosforicoen medio alcalino
proviene del hígado y en parte del hueso (adulto)
alcanza su mayor actividad en niños en edad de crecimiento

Patologias relacionadas con la actividad serica de la fosfatasa

alcalina
Carcinomas metastasicos en hígado y huesos.

Colestasis biliar

Fenómenos osteoblasticos

Transtornos de mala absorción (DEFICIENCIA DE VIT B) –OSTEOMALCIA-

Infarto al miocardio

Infarto renal o pulmonar

raquitismo
 Fundamentos del método
La fosfatasa alcalina desdobla el
fenilfosfato de sodio en medio
alcalino tamponando con
aminometil propanol(AMP) El fenol liberado se determiná por
reacción con 4- aminotrapina y
ferricianuro como agente oxidante

El color desarrollado es directamente

proporcionala la actividad
enzimatica y se mide a530nm

Buffer: 4-aminoantipirina 29mmol/1 en solución de

REACTIVOS aminometil propanol 33 mol/1 pH 10 (a 37C)
PROVISTOS NaFF: fenilfosfato de sodio 1,4 mmoles
Reactivo de color: ferricianuro de
potasio, 10 mmol/l
Standard: solución de fenol equivalente a 200 ul/l
 AMILASA

• Significación Clínica

• Producida en el páncreas exocrino y en las glándulas salivales, incide

en los enlaces 1-4 glucosídicos (almidón y glucógenos)

• Se encuentra elevada en el suero de pacientes con pancreatitis

aguda, alcanzando los valores más elevados entre 24 y 30 horas
posteriores al ataque, declinando para volver luego a los valores
normales entre las 24 y 48 horas.
 AMILASA

• Significación clínica

• También se ve aumentada en el caso de excreción urinaria de la

enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 días, luego de que la
actividad sérica ha alcanzado los niveles normales.

• También es posible encontrar valores aumentados en cualquier caso

de “abdomen agudo” o intervención quirúrgica en regionespróximas
al páncreas.
• Las parotiditis bacteriana y paperas se asocian también con
elevaciones en niveles de amilasa sérica.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El sustrato, almidón tamponado, se
incuba con la muestra, produciéndose la
hidrolisis enzimática.

Esta se detiene por el agregado de

reactivo de yodo, que al mismo tiempo
produce color con el remanente es la
almidón no hidrolizado

La disminución de color respecto de un

sustrato color es la medida de la
actividad enzimática, que se expresa en
unidades amioliticas.
 REACTIVOS PROVISTOS

• Sustrato 1: Solución de almidón 500 mg/L, tamponada a pH 7, buffer

fosfatos 0,1 mol/l en CLNa 0,15 mol/L

• Reactivo de lodo 2: Solución 0.01 ew/L de yodo en ácido clorhídrico

0,02 mol/L.
 DETERMINACIÓN DE FOSFATASA ALCALINA
B S D

Sustrato (Reactivo A) 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Preincubar en baño de agua a 37 C durante 2 min luego agregar:

Muestra (Suero) ---- ---- 50 ul

Estándar ---- 50 ul ----

Mezclar, imcubar exactamente 10 min ( cronometro) y agregar:

Reactivo color (Fosfatasa 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml

alcalina)
Mezclar de inmediato cada tubo, retirar los tubos del baño y lee en espectrómetro
a 520 nm o en foto colorímetro con filtro verde, llevando el aparto a cero de
absorbancia con agua destilada.
 DETERMINACIÓN DE AMILASA
C D

Sustrato 1 (Reactivo A) 1 ml 1 ml

Dejar dos minutos en baño de agua de 37° C y agregar

Muestra (Suero) ---- 20 ul

Incubar a 37° C a los 7 minutos y medio agregar

Reactivo de Yodo (Reactivo B) 1 ml 1 ml

Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del baño y agregar

Agua destilada 8 ml 8 ml
Mezclar por inversión. Leer en foto colorímetro con filtro rojo o en
espectrofotómetro alrededor de 640 nm, llevando a cero el aparato con
H2O Dest.
 DETERMINACIÓN DE FOSFASA ALCALINA
B S D
Sustrato (Reactivo A) 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Preincubar en baño de agua a 37 C durante 2 min luego agregar:

Muestra (Suero) ---- ---- 50 ul
Estándar ---- 50 ul ----

Mezclar, imcubar exactamente 10 min ( cronometro) y agregar:

Reactivo color (Fosfatasa alcalina) 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Mezclar de inmediato cada tubo, retirar los tubos del baño y lee en espectrómetro a 520 nm o en foto
colorímetro con filtro verde, llevando el aparto a cero de absorbancia con agua destilada.

DETERMINACIÓN DE AMILASA
C D
Sustrato 1 (Reactivo A) 1 ml 1 ml
Dejar dos minutos en baño de agua de 37° C y agregar
Muestra (Suero) ---- 20 ul
Incubar a 37° C a los 7 minutos y medio agregar
Reactivo de Yodo (Reactivo B) 1 ml 1 ml
Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del baño y agregar
Agua destilada 8 ml 8 ml
Mezclar por inversión. Leer en foto colorímetro con filtro rojo o en espectrofotómetro alrededor de 640
nm, llevando a cero el aparato con H2O Dest.
 FOSFATASA ALCALINA
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS
Fosfatasa alcalina (U/I) = factor x (D – B)
Dónde: 𝑓𝑎 𝑟= 200 𝑈𝑙/
𝑐𝑡𝑜 (𝑆−𝐵)
factor: 890,07
VALORES DE REFERENCIA
Adultos: 68 – 240 UI/l
Niños: 100 – 400 UI/l
AMILASA
CÁLCULOS DE LOS RESULTADOS
Amilasa 𝑈𝐴/𝑑𝑙= 𝐶−𝐷 𝑋1000
𝐶

VALORES DE REFERENCIA:
SUERO ORINA
CONDICIÓN CLÍNICA (UA / dl) (UA /hora)
Normal 120 <260
Pancreatitis Aguda 300 a 12.00 mas de 900
Pancreatitis Crónica hasta 200 mas de 300
Parotiditis 200 a 350 350 a 750
Parotiditis / Complicación Pancreática mas de 350 mas de 750
Procesos abdominales normal normal
agudas (sin pancreatitis)
DR. JUAN PABLOHERRERAVALDIVIESO
 COAGULACIÓN DE LA SANGRE
OBJETIVOS
1. Demostrar la importancia del ion calcio en el mecanismo de la
coagulación.
2. Conocer la actividad enzimática de la trombina a través de la
conversión del fibrinógeno en fibrina, la cual constituye el retículo del
coágulo.
NOCIONES PRELIMINARES:
• La sangre se mantiene líquida mientras circula por el sistema vascular,
reteniendo su facultad de coagularse cuando se lesiona este sistema.
• En la detención de la hemorragia, la contracción vascular y la
formación del tapón trombocítico son de decisivo significado
etiológico.
• En la trombogénesis intravasal, deben considerarse las alteraciones de
la íntima y las condiciones circulatorias.
• La coagulación sanguínea, es decir, la formación de fibrina, representa
entre otros tan solo uno de los factores causales.
 MATERIA BÁSICA:
• Aunque se ha estudiado todavía no conocemos los medios
que la originan.
• Se han descubierto más de 30 sustancias diferentes que
afectan la coagulación de la sangre, presentes en ella y en
otros tejidos;
• Otras inhiben la coagulación y se llaman anticoagulantes.
• Que la sangre coagule o no coagule depende de un
equilibrio entre estos dos grupos de sustancias.
• Normalmente predominan los anticoagulantes, y la sangre
sigue sin coagular, cuando se repone un vaso la actividad
de los pro coagulantes en la zona lesionada es mayor y se
desarrolla un coágulo.
 MATERIA BÁSICA:
La coagulación sanguínea ocurre en tres etapas principales:
1. Se forma una sustancia en respuesta a la rotura del vaso.
2. Se cataliza la conversión de protrombina en trombina.
3. La trombina actúa como enzima para convertir el
fibrinógeno en hilos de fibrina, que incluyen glóbulos
rojos y plasma, para formar su propio coagulo
La coagulación de la sangre puede producirse de dos
maneras:
1. Mezclando un extracto tisular de tejidos lesionados con
sangre.
2. Por lesión física inferida a ciertos componentes de la
propia sangre. Es decir, que la coagulación de la sangre
puede iniciarse por sistema extrínseco y un sistema
intrínseco.
 TROMBOPLASTINA
• El sistema extrínseco interviene cuando la pared de un vaso y
parte del tejido son lesionados.
• La lesión origina un extracto tisular que es liberado hacia los
líquidos tisulares y en contacto con la sangre causan su
coagulación en plazo de 15 segundos.
• Las sustancias activas en el extracto tisular reciben el nombre de
tromboplastina, la cual está formada básicamente de una
lipoproteína que contiene uno o más fosfolípidos.
• Particularmente cefalina, muy activo para iniciar la coagulación.
• La tromboplastina tisular actúa con los pro coagulantes
plasmáticos, factor V. Factor VII, factor X e iones de calcio para
producir activador extrínseco en protrombina.
• En cambio, cuando la superficie de un vaso se vuelve áspera o si
la sangre sufre traumatismo en alguna forma, se produce
coagulación de la misma sin adicción de extracto tisular.
 TROMBOPLASTINA
• Dos pro coagulantes, los factores XI y XII. Intervienen iniciando la
llamada "reacción en cascada" Cuando entran en contacto con una
superficie rugosa o que se moja como la pared de 'vidrio de un tubo
de ensayo, produciendo un producto de activación de contacto
que luego dará el activador intrínseco de protrombina.
• Además, intervienen los factores VIII, ipso IX, ipso X, iones de calcio
y factor 3 de plaquetas. La cantidad de activador intrínseco de
protrombina formada es directamente proporcional al número de
plaquetas disponibles.
• El sistema extrínseco es muy eficaz y puede lograr la coagulación de
la sangre en unos pocos segundos, mientras que el sistema
intrínseco es relativamente débil y suele necesitar varios minutos
para iniciarla.
• Por lo tanto, la tendencia de la sangre a coagular dentro de los
vasos es mínima en relación con la tendencia de la sangre a
coagular rápida y firmemente cuando sale de un vaso sanguíneo.
 CONVERSIÓN DE PROTROMBINA EN TROMBINA
• La protrombina es una globina circulante del plasma alfa 2
que se forma continuamente en el hígado.
• Siendo necesario para ello la presencia de vitamina K.
• Es una proteína inestable que por influencia del activador de
protrombina y los iones de calcio se convierte en trombina.
• La intensidad de formación de trombina es casi
directamente proporcional a la cantidad del activador
disponible.
• A su vez, la rapidez de coagulación es proporcional a la
cantidad de trombina formada, por lo tanto, la falta de
vitamina K o cualquier enfermedad hepática que impida la
normal formación de protrombina pueda disminuir la
concentración de ésta hasta valores tan bajos que haya
tendencia hemorrágica.
 CONVERSIÓN DE FIBRINÓGENO A FIBRINA
• El fibrinógeno es una proteína de alto peso molecular,
producida en su mayor parte en el hígado, está presente en
el plasma en cantidad de 100 a 700 mg por dl.
ACCIÓN DE LA TROMBINA SOBRE EL FIBRINÓGENO:
• La trombina es una enzima proteolítica que actúa sobre el
fibrinógeno suprimiendo dos péptidos de peso molecular
bajo de cada molécula de éste, y formando moléculas de
fibrina activada, que también se denominan monómero de
fibrina.
• Estas moléculas rápidamente se polimerizan constituyendo
largos hilos de fibrina QUE FORMAN EL RETÍCULO DEL
COAGULO.
• Durante el proceso de polimerización, iones de calcio y otro
factor denominado factor de estabilización proteínica
aumentan la ligazón entre las moléculas de fibrina e
incrementan así la estabilidad de los hilos de fibrina.
• Estas se adhieren a las superficies lesionadas de los vasos
sanguíneo impide la pérdida de sangre.
ACCIÓN DE LA TROMBINA SOBRE EL FIBRINÓGENO:
• Pocos minutos después de formado el coágulo empieza a
retraerse y suele exprimir la mayor parte del plasma en
plazo de 30 a 60 minutos.
• El plasma eliminado por el coágulo recibe el nombre de
suero; todo su fibrinógeno y gran parte de los demás
factores de la coagulación han sido suprimidos.
• Por lo tanto, el suero no puede coagular.
• Cuando el coágulo se retrae los bordes del vaso sanguíneo
desgarrados se reúnen, contribuyendo así a la hemostasia
fina.
• La acción proteolítica de la trombina le permite actuar sobre
varios factores de la coagulación además del fibrinógeno, tal
como la protrombina, tendiendo a transformarla en
trombina y así establece un círculo vicioso y prosigue hasta
que interviene algo que interrumpe el fenómeno.
 INHIBICIÓN DE LA COAGULACIÓN:
• Probablemente los dos factores más importantes para evitar
la coagulación en el sistema vascular normal, sea la lisura del
endotelio que impide la activación del sistema intrínseco y
en segundo lugar una capa mononuclear de proteína
cargada negativamente adsorbida a la superficie del
endotelio que repele los factores de coagulación en las
plaquetas, con lo cual impide la activación de la coagulación
 ANTITROMBINA Y ACCIÓN ANTITROMBÍNICA DE LA FIBRINA:

• Entre los anticoagulantes más importantes de la

sangre se hallan los que extraen trombina de la
misma, siendo los más poderosos los hilos de
fibrina formados durante el proceso de
coagulación y una globina alfa, la antitrombina.
• Los hilos de fibrina adsorben del 85% al 90% de la
trombina producida excluyendo la difusión
excesiva del coágulo.
• La trombina que no es adsorbida por los hilos de
fibrina se combina con la antitrombina y es
inactivada durante los 10 a 20 minutos siguientes.
 HEPARINA
• Anticoagulante poderoso, polisacárido conjugado, se encuentra en
cantidades elevadas en el citoplasma de células cebadas, que liberan
pequeñas cantidades de heparina hacia el plasma.
• Gran número de estas células existe en el tejido que rodea los
capilares del pulmón y en menor grado los del hígado donde llegan
muchos coágulos embólicos cuando la sangre venosa circula
lentamente.
• Las células basófilas funcionan igual que las células cebadas pero por
su número pequeño no tienen importancia en la producción de
heparina.
La heparina interviene así:
1. Impide la formación del activador intrínseco de protrombina.
2. Con un cofactor de albúmina inhibe la acción de la trombina sobre el
fibrinógeno en anillos de fibrina.
3. Aumenta la rapidez con la cual la trombina actúa con la antitrombina
inactivándose.
4. Aumenta la cantidad de trombina adsorbida por fibrina.
 SISTEMA FIBRINOLÍTICO
• En la sangre además existe un sistema que ayuda a la lisis del coágulo;
el sistema fibrinolítico.
• Coagulación y fibrinólisis están en íntima relación y equilibradas bajo
condiciones fisiológicas y patológicas, cada sistema está compensado
por la acción de activadores e inhibidores.
• En el plasma y el suero existe una euglobulina llamada plasminógeno
o profibrinolisina que es activada por una sustancia llamada
fibrinocinasa y convertida en fibrinolisina que es la enzima que lisa el
coágulo.
• También se ha descubierto un activador llamado uricinasa en la orina.
• Algunas bacterias como los estreptococos liberan una sustancia
activadora la estreptocinasa que transforma el plasminógeno en
plasmina permitiendo la disolución de los líquidos coagulados de los
tejidos y la difusión de la infección.
• Quizás la función más importante del sistema fibrinolítico sea suprimir
coágulos muy pequeños de los millones de vasos periféricos que
quedarían ocluidos si no existiera un sistema de limpieza.
 FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA COAGULACIÓN SANGUÍNEA
NÚMERO NOMBRE CARACTERÍSTICAS FÍSICAS CONOCIDAS
Migra entre globina beta y gamma Lábil al calor y establece al almacenamiento.
Factor I Fibrinógeno
Se encuentra en plasma y plasma absorbido.
Glucoproteína que migra con globulinas 2.
Estable al calor y almacenamiento.
Factor II Protombina
Presente en el plasma.
Ausente en plasma adsorbido y suero.
Factor III Tromboplastina Formada durante la coagulación
Factor IV Calcio
Globulina aún no purificada
Lábil al calor y almacenamiento
Factor V Proacelerina
Presente en el plasma y plasma adsorbido
No se encuentra en suero
Factor VI Acelerina Este factor ya no se considera dentro del esquema de coagulación.
Proconvertina Globina Beta
Factor estable, acelerador de Estable al calor y al almacenamiento
Factor VII
conversión de protrombina sérica Presente en plasma y suero
(ACPS) Autoprotrombina. Ausente en plasma adsorbido
Factor antihemofílico (Fan) Globulina Globina Beta
antihemofílica (GAH) Estable al calor y lábil al almacenamiento
Factor VIII
Tromboplastinógeno Cofactor de Presente en plasma y plasma absorbido
plaquetas I Ausente en el suero
Globina Beta
Componente tromboplástico (CTP)
Lábil al calor y estable al almacenamiento
Factor IX Factor Cristmas Cofactor I y
Presente en plasma y suero
Autotrombina II
Ausente en plasma adsorbido
Globina alfa
Lábil al calor y bastante estable al almacenamiento
Factor X Factor Stuart Power
Presente en plasma y suero
Ausente en plasma adsorbido
Globulina beta 2
Alfa lábil al calor y aumentada al almacenamiento
Factor XI Antecedente tromboplástico (ATP)
Presente en plasma y suero; y en plasma y suero adsorbido
Adsorbidos por celita.
Migra entre globulina beta y gamma
Destruidos por calor a 60° C y estable al almacenamiento
Factor XII Factor Hageman (FH)
Presente en plasma y suero; y plasma y suero absorbidos
Adsorbidos por celita
Globina termolábil
Factor XIII Factor estabilizador de Fibrina (FFF) Presente en plasma
Ausente en suero
 DETERMINACIÓN DE TPT
TUBO

Calentar a 37 ° C los reactivos y la muestra

Mezclar bien los reactivos sin agitarlos y pipetear

Plasma citratado 100 ul

R1 100 ul

Mezclar bien e incubar exactamente 5 min a 37° C (tiempo de activación)

R2 100 ul

Mezclar
Poner en marcha el cronómetro o el controlador de tiempo del
coagulómetro y medir el tiempo de formación del coágulo, a partir de la
adición del R2 iniciador
 DETERMINACIÓN DE TP

TUBO

Calentar a 37 ° C los reactivos y la muestra

Mezclar suavemente por inversión y pipetear

RT 200 ul

Incubar exactamente 5 min a 37° C (tiempo de activación)

Plasma citratado 100 ul

Poner en marcha el cronómetro y medir el tiempo de formación del
coágulo, inmediatamente después de la adición del reactivo
 DETERMINACIÓN DE TPT
TUBO
Calentar a 37 ° C los reactivos y la muestra
Mezclar bien los reactivos sin agitarlos y pipetear
Plasma citratado 100 ul
R1 100 ul
Mezclar bien e incubar exactamente 5 min a 37° C (tiempo de activación)
R2 100 ul
Mezclar
Poner en marcha el cronómetro o el controlador de tiempo del
coagulómetro y medir el tiempo de formación del coágulo, a partir de la
adición del R2 iniciador
DETERMINACIÓN DE TP
TUBO
Calentar a 37 ° C los reactivos y la muestra
Mezclar suavemente por inversión y pipetear
RT 200 ul
Incubar exactamente 5 min a 37° C (tiempo de activación)
Plasma citratado 100 ul
Poner en marcha el cronómetro y medir el tiempo de formación del
coágulo, inmediatamente después de la adición del reactivo
 VALORES DE REFERENCIA

TPT: 24 – 36 segundos
TP: 11,1 – 14,3 segundos
DR. JUAN PABLOHERRERAVALDIVIESO, MGS.
 Nociones preliminares

• Obtenidos del metabolismo de las proteínas pueden expresarse

en términos de nitrógeno, por razones que saltan a la vista.

Nitrógeno de los alimentos

• El nitrógeno excede de las demás formas de nitrógeno de los
alimentos.
• Se ingiere cantidades pequeñísimas de nitrógeno inorgánico en
formas de nitrato y nitritos.
• Así mismo en los alimentos hay pequeña cantidad de nitrógeno
orgánico proteico (NH2), que incluye ácidos nucleicos y sus
derivados y aminoácidos y péptidos.
 Nitrógeno del organismo
• En los tejidos y líquidos corporales hay muchos compuestos
nitrogenados.
• A las proteínas corresponde en promedio 20% del peso húmedo de
casi todos los tejidos.
• En la sangre, además de proteínas hay varios tipos de NNP
(nitrógeno no proteico).
• La urea se forma en el hígado y pasa por la sangre a los riñones para
ser excretadas.
• La creatina sanguínea pude estar en camino hacia el musculo para
la síntesis de fosfocreatina o puede haber salido de los músculos,
compuesto de desecho formado por fosfocreatina y creatina. El
producto terminal del catabolismo de las purinas es el ácido úrico.
• En la sangre también se observan aminoácidos libres, se hallan en
camino de un órgano a otro para fines de síntesis o de degradación.
 Nitrógeno del organismo
• Otros componentes de nitrógeno no proteico de la sangre incluyen
Polipéptidos, Glutatión, Purinas y Pirimidinas, ATP y Ergotioneina.
• La orina vía principal para la excreción de nitrógeno
• El total de la orina es de 18 gr/día todo lo cual suele ser NNP (En
estado normal no se descubre cantidades importantes de la
proteína de la orina.
• La urea (85%) y el amoniaco (3%) varia en razón directa con la
cantidad de proteína de la dieta.
• La excreción de creatinina (5%) guarda relación con la masa
muscular y es bastante constate en cada sujeto En los varones
adultos normales y en casi todas las mujeres, no se excreta.
• La excreción de ácido úrico (1%) varía según la cantidad de Purinas
de la dieta de nitrógeno excretado por la orina, 5% poco más o
menos consiste en compuestos que no suele analizarse.
 Nitrógeno del organismo
• El nitrógeno de las materias fecales representa en su
mayor parte un producto de descamación intestinal o de
la flora bacteriana, la excreción diaria de N fecal es de 1 - 2
gramos.
• Balance nitrogenado: la determinación de nitrógeno
dietético y nitrógeno urinario y fecal se deriva del
concepto de balance de nitrógeno porque la mayor parte
del nitrógeno de la dieta corresponde a proteínas, y la
mayor parte de los productos nitrogenados de excreción
provienen del catabolismo proteínico; en consecuencia, es
patente que el balance entre los dos factores revelara
caracteres muy importantes del metabolismo de las
proteínas.
UREA
• Compuesto químico cristalino e incoloro; de fórmula CO(NH2)2. Se
encuentra en mayor proporción en la orina, en el sudor y en la
materia fecal.
• Es el principal producto terminal del metabolismo de las proteínas
en el humano y en los demás mamíferos.
• La orina humana contiene unos 20 g por litro, un adulto elimina de
25 a 39 g diariamente.
• La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más
importante en la mayoría de los líquidos biológicos.
UREA
• Representa el 85% del nitrógeno urinario.
• Una elevación de la concentración sérica de urea, se interpreta
como una posible disfunción renal
• La reabsorción de la urea en los túbulos renales es dependiente de
la velocidad del flujo urinario, siendo mayor cuando el flujo es lento
y menor cuándo aumenta la diuresis.
• Los valores séricos de urea están relacionados con la dieta y el
metabolismo proteico,
• La ureasa descompone específicamente a la urea produciendo
dióxido de carbono y amoníaco; este reacciona con fenol e
hipoclorito en medio alcalino produciendo azul de indofenol
 USOS DE LA UREA
• Fertilizante: Se aplica al suelo y provee nitrógeno a las plantas,
como fertilizante de uso foliar, proporcionar un alto contenido de
nitrógeno, esencial en el metabolismo de las plantas.
• Industria química plásticos: en adhesivos, plásticos, resinas, tintas,
productos farmacéuticos y acabados para productos textiles, papel,
metales y tabaco.
• En resinas en la industria, como la producción de madera
aglomerada.
• Suplemento alimenticio para el ganado: aporta nitrógeno, que es
vital en la formación de las proteínas.
• Producción de drogas: para la fabricación de metanfetamina.
• Como aditivo: se utiliza para reducir las emisiones de óxidos de
nitrógeno causadas por los escapes de los motores a diésel.
• Industria cosmética: propiedad hidratante (5-20%) y sus
propiedades exfoliantes o queratolíticas (30-50%), ayuda a la
remoción de células muertas y callosidades.
 DETERMINACIÓN DE UREA
B S D

Standard ------ 20 ul ------

Suero o Plasma ------ ------ 20 ul

Ureasa 1 gota 1 gota 1 gota

Mezclar por agitación suave e incubar 5 minutos a 37° C

Reactivo 1 (A) 1 ml 1 ml 1 ml

Reactivo 2 (B) 1 ml 1 ml 1 ml

Mezclar por agitación suave e incubar 5 minutos a 37° C

Agua Destilada 10 ml 10 ml 10 ml
Mezclar por inversión. Después de 10 minutos leer en fotocolorímetro con
filtro verde (510 a 550 nm) o en espectrofotómetro a 540 nm. Llevando a
cero con el blanco
 CALCULO DE RESULTADOS (UREA)
Suero o Plasma:
• Urea g/dl = D x Factor
60𝑔/𝑑𝑙
• Factor = 𝑆𝑡

VALORES NORMALES DE
UREMIA
• En suero: 40 - 50 mg/dl
• En Orina: 25 - 35 g/dl en 24 horas
DR. JUAN PABLO HERRERA VALDIVIESO
 La creatina está formada
Creatina vs. por tres aminoácidos
Creatinina llamados arginina,
metionina y glicina.

Producto de desecho
Quéeslacreatinina? que los músculos
producen a una
velocidad constante
como parte de la
Es una especie de basura metabolica que actividad normal diaria.
resulta del consumo constante
Después de swr generada la creatinina es
lanzada hacia la corriente sanguínea
siendo los riñones los encargados de su
metabolismo o desecho
Análisis de El análisis de creatinina en la orina
creatinina mide la cantidad de creatinina
presente en la orina

Los riñones sanos filtran la sangre para deshacerse

Por qué se de los productos de desecho que el
cuerpo no puede utilizar.
realiza?
El análisis de depuración de
creatinina mide el nivel de
creatinina en la sangre así como
cuánta creatinina se elimina en la
orina durante varias horas.
 Existen diferentes técnicas de laboratorio para
la determinación de
creatinina en el organismo:

▪ Creatinina en suero
▪ Creatinina en orina

Creatinina en suero

Se utiliza para evaluar el funcionamiento renal.

Un valor normal es de 0.8 a 1.4 mg/dL.

Las mujeres generalmente tienen niveles de creatinina

más bajos que los hombres, debido a que ellas
normalmente tienen menor masa muscular.
Significado de los resultados anormales

Los niveles superiores a lo normal pueden ser indicio de:

▪Necrosis tubular aguda
▪Deshidratación
▪Nefropatía diabética
▪Eclampsia (una afección del embarazo que incluye
convulsiones)
▪Glomerulonefritis
▪Insuficiencia renal Distrofia muscular
▪Preeclampsia (hipertensión inducida por el embarazo)
▪Pielonefritis
▪Reducción del flujo de sangre renal (shock, insuficiencia
cardíaca congestiva)
▪Rabdomiólisis
▪Obstrucción de las vías urinarias
Los niveles inferiores a lo
normal pueden ser indicio de:
• Distrofia muscular
(etapa avanzada)
• Miastenia grave

Depuracion de
creatinina
La capacidad de eliminación de la
creatinina es una medida de la tasa de
filtración glomerular, es decir, del
volumen de filtración realizado por los
riñones por minuto.
La creatinina se emplea
para este propósito,
debido a que está
normalmente presente en
el cuerpo y porque muy
poca creatinina es
reabsorbida después de
ser filtrada.
 La cantidad de filtración realizada en los riñones depende de la
cantidad de sangre que pasa a través de los glomérulos y a la capacidad
de éstos para actuar como filtros.
Valores normales

▪ Hombres: 97 a 137 ml/min. Significado de los resultados

▪ Mujeres: 88 a 128 ml/min.
anormales:
▪Necrosis tubular aguda
▪Insuficiencia cardíaca congestiva
▪Deshidratación
▪Glomerulonefritis
▪Isquemia renal (deficiencia de sangre)
▪Shock
▪Uropatía obstructiva aguda bilateral
▪Síndrome nefrítico agudo
▪Insuficiencia renal aguda
▪Insuficiencia renal crónica
▪Enfermedad renal en estado terminal
▪Glomerulonefritis rápidamente progresiva
(semilunar)
▪Tumor de Wilms
Resumiendo:
• Proteínas ingeridas
• Producción de creatina fosfato por el hígado
• Consumo de creatina
• Producción de creatinina
• Eliminacion de la crearinina por medio de los
riñones
 DETERMINACIÓN DE CREATININA
DESPROTEINIZACIÓN DEL SUERO:
• A 0,7 ml de suero agregar 3,5 ml Reactivos 1. Mezclar por inversión.
• Dejar Reposar 10 minutos y centrifugar a 3000 r.p.m durante 5 minutos como
mínimo

B S D

Desproteinizado - - 3 ml

Standard - 0.5 ml -

Agua destilada 1 ml 0.5 ml -

Reactivo 1 2 ml 2 ml 2 ml

Reactivo 2 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml

 CALCULO DE RESULTADOS (CREATININA)

• Corregir las lecturas S y D restándoles el

blanco (B)
• Creatinina en suero (mg/dl) = D X F
20 𝑚𝑔/𝑙
• Factor =
𝑆

VALORES NORMALES DE CREATININA

• Suero: 8 a 14 mg/l
• Orina: 0.9 a 1.5 g/24 horas
• D.C.E.: 80 a 140 ml/min (promedio 125
ml/mim) = Adultos hasta 60 años.
DR. JUAN PABLO HERRERA VALDIVIESO, MGS.
 ÁCIDO ÚRICO
• El acido úrico es el resultado final del catabolismo de las purinas ácidos nucleicos y
nucleoproteínas en el ser humano.
• Su concentración plasmática normal es de 3.5 a 7.0 mg/dl en los hombres y de 2.5 a
6.0 mg/dl en mujeres, en condiciones normales.
 FORMACIÓN DEL ÁCIDO ÚRICO
• El acido úrico llega a la sangre por dos vías: una gran parte
proviene de la producción propia del organismo como producto
final del metabolismo proteico y una parte más pequeña se
forma a partir de la ingesta de alimentos ricos en purina y su
metabolismo
• Al metabolizar los alimentos o las propias células del
organismo, se forma acido úrico, el cual en el organismo sano es
transportado hasta los riñones y eliminado a través de la orina.
• Las principales fuentes de purinas son el ADN y el ARN, a través
de sus bases adenina y guanina.
• La carne, especialmente la carne roja y los mariscos son ricos en
purinas porque las células musculares contienen muchas
mitocondrias, que tienen su propio ADN y ARN.
FORMACIÓN DEL ÁCIDO ÚRICO
 HIPERURICEMIA
•La hiperuricemia puede estar causada por:
•Aumento de la síntesis de purinas.
•Aumento de la renovación de ácidos nucleicos, como en las
neoplasias , lesión tisular o inanición.
•Una función renal disminuida.
•La hiperuricemia es un factor de riesgo de la gota, que
ocurre cuando se depositan cristales de urato en los tejidos.
•La hiperuricemia se agrava con una dieta con elevado
contenido en purinas y etanol
 HIPERURICEMIA - MECANISMOS
POSIBLES
1. AUMENTO DE LA SÍNTESIS DE ÁCIDO ÚRICO
• Alteraciones enzimáticas
• Déficit de hipoxantina – guanina – fosforribosil - transferasa: sustrato de la
enfermedad de Lesch-Nyhan.
• Aumento de la actividad de 5 – fosforribosil – 1 – pirofosfato - sintetasa.
• Glucogenosis tipo I (Enfermedad de Von Gierke) Aumento del
catabolismo de ácidos nucleicos: mas frecuente
Síndromes mieloproliferativos crónicos, en relación con metaplasia
mieloide extramedular.
Mieloma múltiple y macroglobulinemia de Waldenstrom. Otros
tumores.
Otras enfermedades de alto recambio – turnover - celular: anemias
hemolíticas, anemia perniciosa, hemoglobinopatías, psoriasis extensas.
Tratamiento con citostaticos, por la elevada destrucción de células
tumorales.
 HIPERURICEMIA - MECANISMOS
POSIBLES
2. DEFECTO DE EXCRECIÓN RENAL DE ÁCIDO ÚRICO
• Insuficiencia renal: por déficit de filtración glomerular
• Inhibición farmacológica de la eliminación renal: diuréticos de tipo tiazida (causa
identificable común de hiperuricemia), ácido acetilsalicílico en dosis bajas,
pirazinamida, ácido nicótico, etambutol, ciclosporina, α-metildopa.
• Consumo excesivo de alcohol
• Hipotiroidismo, hiperparatiroidismo e hipoparatiroidismo.
• Situaciones de acidosis: Cetoacidósis diabética, alcohólica y láctica. En ellas, la
competición con el ácido úrico para su excreción explica la uricemia.
• Hiperuricemia primaria, en la que no se identifica un factor concreto, aunque
si se sabe que estos pacientes tienen mayor dificultad para la excreción de
ácido úrico
 SÍNDROME DE LESCH-NYHAN

• Un trastorno genético que debe destacarse es el síndrome de Lesch

– Nyhan, un trastorno ligado al cromosoma X y causado por la
deficiencia de hipoxantina – fosforribosiltransferasa, una enzima
que participa en la recuperación de bases purinicas para la
resíntesis de nucleótidos purinicos.
• El síndrome se caracteriza clínicamente por una producción
excesiva de ácido único, hiperuricemia y problemas
neurológicos que incluyen automutilación y retraso mental.
 GOTA (ENFERMEDAD DE LOS REYES)
• Es un síndrome clínico que se caracteriza por hiperuricemia y artritis aguda
recurrente.
• La gota aguda se desencadena por el deposito tisular de cristales de
urato de sodio, que causan una respuesta inflamatoria. En el cuadro
crónico, se pueden formar depósitos de urato de sodio en forma de
tofos en los tejidos. La gota se ve exacerbada por el etanol.
• El motivo de esto es doble. El etanol incrementa la
renovación del ATP y la producción de urato.
• El exceso de etanol puede causar la acumulación de ácidos orgánicos que
compiten con la secreción tubular de urato.
• Trastorno como la intoxicación etílica, la cetoacidosis diabética y la
inanición conducen a elevación del acido láctico, el β-hidroxibutirato y el
aceto – acetato, y producen hiperuricemia.
GOTA
GOTA
 TRATAMIENTO DE LA GOTA
• Los síntomas de la gota aguda responden a los fármacos antiinflamatorios como la indometacina
• Probenecid, que favorecen la excreción de urato.
• Alopurinol, efectivo para reducir la concentración de urato, un inhibidor especifico de la enzima xantina –
oxidasa que cataboliza la oxidación de la hipoxantina a xantina y acido úrico.
• Colchicina: antigotoso.
DIETA PARA EVITAR HIPERURICEMIA
 ENFERMEDAD RENAL E HIPERURICEMIA
•Es una complicación frecuente de la hiperuricemia:
nefropatía por urato que es causada por el depósito de
cristales de uratos en el tejido renal o el tracto urinario
para formar cálculos renales.
•Puede asociarse con hiperuricemia crónica.
•La insuficiencia renal aguda puede estar producida por la
precipitación rápida de cristales de ácido úrico que suele
ocurrir durante el tratamiento de pacientes con leucemias
y linfomas.
•En el síndrome de lisis tumoral aguda se liberan ácidos
nucleicos como resultado de la degradación de células
tumorales y se metabolizan rápidamente a ácido
úrico.
 URATO EN EL EMBARAZO

• La concentración de urato en el
plasma tiene valor en la
monitorización del bienestar
materno en la hipertensión asociada
con el embarazo (preeclampsia),
junto con otros marcadores como la
presión arterial, la excreción de
proteínas en la orina y el
aclaramiento de creatinina.
 HIPOURICEMIA
Se puede producir por los siguientes mecanismos:
• Por hemodilución: en casos de administración de sueros parenterales, secreción
inadecuada de hormona antidiurética, etc.
• Por producción disminuida: déficit de xantino – oxidasa, forfiria aguda
intermitente.
• Por eliminación renal aumentada:
• Aumento del filtrado glomerular: diuresis osmótica, gestación, crecimiento.
• Trastorno tubular: aislado para el ácido úrico y calcio o generalizado
(Síndrome de Fanconi, Enfermedad de Hartnup, Enfermedad de Wilson,
galactosemia, cistinosis).
• Efecto uricosorico de mecanismo no precisado:
• Farmacológico (probenecid, pirazolonas, esteroides y ácido acetilsalicilico
en dosis elevadas, diazepoxidos), que representa la causa mas frecuente.
• Contrastes yodados.
• Algunos tumores malignos solidos, linfomas.
• Ictericia obstructiva.
• Anemia perniciosa.
 ÁCIDO ÚRICO
• También existen otros desordenes que transcurren acompañados de
hiperuricemia, tales como leucemia, polisemia, policitemia, mieloma
múltiple, intoxicación plúmbica, incluyendo alteraciones
medicamentosas en los tratamientos con citostáticos o con tiazidas,
en cuyo caso el trastorno es secundario.

FUNDAMENTO
• El ácido úrico de la muestra desproteinización con ácido túngstico
preformado, reacciona en medio alcalino de carbonato de sodio con
el reactivo fosfotúngstico, produciendo un color azul (azul de
tungsteno) que es proporcional a la concentración de ácido úrico de
la muestra y se mide colorimétricamente.
 DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
DESPROTEINIZACIÓN:
• En un tubo de centrifuga colocar 4 ml de agua destilada, 0,5 de ácido túngstico y 0,5 ml de suero agitar
vigorosamente, esperar 5 minutos y centrifugar.
B S D

Desproteinizado ------ ------ 2.5 ml

Agua Destilada 2.5 ml 5 ml ------

Standard ------ 50 ul ------

Reactivo 1 0,5 ml 1 ml 0,5 ml

Reactivo 2 0,5 ml 1 ml 0,5 ml

Mezclar por inversión y colocar en baño de agua entre 22 y 28° C. Entre 30 y 45 minutos, después leer en
espectrofotómetro a 660 nm, llevando a cero con el blanco.

ESTABILIDAD DE LA MUESTRA:
• La absorbancia debe ser leída entre 30 y 45 minutos de colocar el tubo de reacción en el baño.
 CALCULO DE RESULTADOS (ÁCIDO ÚRICO)
Suero:
• Ácido úrico mg/dl = D x F
• Factor = 10.0
𝑆𝑡

VALORES NORMALES DE ÁCIDO ÚRICO

• Hombres: 3.5 a 7.0 mg/dl

• Mujeres: 2.5 a 6.0 mg/dl
DR. JUAN PABLOHERRERAVALDIVIESO
 OBJETIVOS
1. Estudiar los mecanismos para la
regulación de la glicemia
2. Conocer los métodos para la
determinación de la glicemia
3. Utilizar distintos procedimientos para la
determinación de la glicemia
4. Aplicar estos conocimientos en el
manejo
La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6.3
Es una hexosa, es decir, contiene 6 átomos de carbono,). Es una
forma de azúcar que se encuentra libre en las frutas y en la miel.
Su rendimiento energético es de 3,75 kcal/g en condiciones
estándar. Es un isómero de la galactosa, con diferente posición
relativa de los grupos -OH y =O.
 LA GLICEMIA Y SU REGULACIÓN
• Se define como GLICEMIA al nivel de glucosa sanguínea
circulante, cuyos varios valores normales en ayunas fluctúan
entre 60 y 100 mg por 100 ml.
• La glicemia es un índice importante y su nivel depende de un
balance entre la entrada y la salida de la glucosa en la sangre.
La glucosa que ingresa a la sangre circulante proviene de:
a) La absorción digestiva o parenteral (inyección
endovenosa)
b) La glucosa del líquido intersticial
c) La formación de glucosa en el hígado
 GLICEMIA BASAL (EN AYUNAS):
• La determinación de la glicemia después de una noche de ayuno (8
a 12 h) es la prueba más sencilla y usada para diagnosticar una
diabetes mellitus.
• Un valor de 120 mg % es claramente sugestivo uno de 130 mg % es
casi diagnóstico.
• Una glicemia basal elevada nos indica la existencia de una
deficiencia absoluta o relativa de insulina para los requerimientos
basales, razón por la cual no es necesaria la realización de ninguna
otra prueba
• La enfermedad más común en relación con el metabolismo de los
carbohidratos es la DIABETES, la cual se caracteriza por niveles
bajos de insulina activa.
 GLICEMIA BASAL (EN AYUNAS):
• Debiéndose utilizar otros grupos de sustancias con fines energéticos como los
lípidos y las proteínas, cuya intensa degradación conduce a la excesiva
formación de cuerpos cetónicos y de urea respectivamente.
• En la población existe un 1% de diabéticos, dando una prevalecía global del 2
% (2 de cada 100 ecuatorianos) esto es 200.000 de los 10 millones de
habitantes.
• En ayunas, la glucosa sanguínea es repuesta por el hígado gracias a la
degradación del GLUCÓGENO en la GLUCOGENÓLISIS
• Poseen la enzima, glucosa 6 fosfatasa, necesaria para convertir la glucosa 6
fosfato en glucosa libre. El musculo estriado, aunque almacena glucógeno,
carece de esta enzima y no puede liberar glucosa hacia la circulación.
 HIPERGLICEMIA:
• Glucosa sanguínea en ayunas mayor de 60 a 110 mg/dl.
a) Causas Fisiológicas: Por incremento de la adrenalina circulante como en el
ejercicio extenuante, stress y grandes emociones.
b) Causas Patológicas: Por incremento de la adrenalina circulante como en el
shock, feocromocitoma, tirotoxicosis, quemaduras extensas.
▪ Diabetes Mellitus: Deficiencia de insulina o resistencia a la misma.
▪ Desordenes pituitarios y adrenales: gigantismo o acromegalia (exceso
de STH) enfermedad de Cushing (exceso de ACTH): tumores
corticosuprarrenales.
▪ Administración de ACTH
▪ Desordenes pancreáticos: pancreatitis aguda, algunos carcinomas
pancreáticos.
▪ Deficiencia de vitamina B1: encefalopatía de Wernicke.
▪ Asociada a hipokalemia, durante la hemodiálisis peritoneal
 FORMULA PARA CALCULAR LA DOSIS DE
INSULINA:
• Según el hemoglucotest: al valor le
restamos 100 y lo dividimos para 40
• Ejemplo:
▪ glucosa = 480 mg/dl
▪ 480 – 100 = 380
▪ 380 / 40 = 9,5
▪ Al paciente se le administra 9,5
unidades de insulina rápida

Jeringa de 100 U de insulina equivale a 1 ml

 HIPOGLICEMIA:

• Se conoce como tal a la disminución de los niveles de glucosa sanguínea por

debajo de 60 mg/dl.
a) Causas Fisiológicas: Durante el embarazo y en los recién nacidos, ayuno,
ejercicio violento.
b) Causas Patológicas: Mala absorción: vomito, estenosis pilórica, diarrea,
esprúe
▪ Homeostasis hepática deficiente: Hepatectomía, afecciones hepáticas,
enfermedad de Von Gierke.
▪ Hiperinsulinismo: por secreción excesiva de insulina no regulada,
insulinoma, sobredosis de insulina.
▪ Enfermedades endocrinas: insuficiencia hipofisiaria o suprarrenal.
CALCULO DE RESULTADOS (GLUCOSA)
• Glucosa g/l = D x f

100 𝑚𝑔/𝑙
• Factor (f) =
𝑆

VALORES NORMALES DE GLUCOSA

• Suero o plasma: 70 -110 mg/l
• Sangre total: 60 -100 mg/dl
• LCR: 40 -74 mg/dl
OBJETIVOS Cetocemia, valores normales.
Estructura química de los
Analizar el papel que cuerpos cetonicos, vía de la
juegan los cuerpos síntesis y degradación.
cetonicos en el Localización tisular,
metabolismo importancia.

Exponer cuales son las Condiciones fisiológicas que

condiciones que pueden favorecen la síntesis de
conducir a una cuerpos cetonicos: el ayuno,
cetoacidosis dietas pobres en
carbohidratos.
QUÉ SON LOS CUERPOS CETÓNICOS
 METABOLISMO DE ÁCIDOS GRASOS Y
PROTEÍNAS
Ácidos grasos:
• Son tomados por tejidos periféricos
para ser oxidados y utilizados como
fuente de energía o por el hígado
para formar cuerpos cetónicos.
Proteínas:
• Los aminoácidos pueden ser
glucogénicos, cetogénicos o ambos
• Los glucogénicos son los que
generan piruvato o intermediarios
del ciclo de Krebs como α-
cetoglutarato o oxalacetato.
• Los cetogénicos (lisina y leucina)
generan sólo acetil CoA o
acetoacetil – CoA.
 CETOGÉNESIS
• Es el proceso mediante el cual se originan los
cuerpos cetónicos en el organismo.
Pueden producirse:
• En condiciones normales
• En condiciones anormales
• Acumulación excesiva
• Cuando la cetosis es muy intensa, el carácter
acido, en estos cuerpos causa disminución del
pH sanguíneo, entonces hablamos de
cetoacidosis, que es una forma de acidosis
metabólica.
 CETOGÉNESIS
• Grupo de compuestos de bajo peso molecular que incluyen:

β-hidroxibutirato

Aceto-acetato

Acetona
VENTAJA DE LA FORMACIÓN DE CUERPOS
CETÓNICOS
Hígado obtiene la energía
requerida para realizar ciertos
procesos, tales como
gluconeogénesis, de la oxidación
parcial de los ácidos grasos y
además forma cuerpos cetónicos

Otros tejidos usan estos cuerpos

cetónicos como combustible

Durante el ayuno, el cerebro

puede oxidar cuerpos cetónicos,
reduciendo las necesidades de
glucosa.
FUNCIÓN DE LOS CUERPOS CETÓNICOS

Energía para el cerebro,

musculo, corazón y riñón

Mantienen la glicemia

Tejidos que no consumen

los cuerpos cetónicos son
el hígado y los tejidos sin
mitocondrias
 SÍNTESIS DE CUERPOS CETÓNICOS

• En el hígado la Acetil CoA se transforma en acetato por

medio de la reacción tiolasa
• Irreversible en este órgano pero no en otros tejidos
• El acetato en el hígado se reduce a B hidroxibutirato y una
parte descarboxila espontáneamente en acetona
• La producción de Acetil CoA puede superar la capacidad
de utilización en el ciclo ce Kreps por los tejidos.
• El hígado utiliza la acetil CoA para forma cuerpos
cetónicos que pueden ser empleados por los tejidos extra
hepáticos.
 CETÓLISIS

proceso en el cual se
Músculos degradan los cuerpos
cetónicos, este proceso
de igual manera ocurre
Cerebro en las mitocondrias de
células de tejidos
extrahepáticos
Riñón

Corazón
La interpretación de las cetonas en sangre es la siguiente

•Menor de 0,6 mmol/L: Normal o negativo. (Cetonemia)

•0,6 – 1,0 mmol/L: Ligeramente elevado.

•1,1 – 3,0 mmol/L: Riesgo de cetoacidosis.

• > 3mmol/L: Cetoacidosis

Alimentado 0,1 (mM) Cuando la velocidad de

formación de cuerpos
Ayuno 12- 24 horas Hasta 0,3 (nM)
cetónicos es mayor que la de
Ayuno 48- 72 horas 2- 3 (nM) su utilización, sus niveles
comienzan a subir en la
Post- ejercicio Hasta 2 (nM) sangre (cetonemia) 90 mg/dl
Diabetes no controlada Hasta 25 (mM) y finalmente también en la
orina (cetonuria).
 Es una
descompensación
provocada por la
falta de insulina metabolizar
en el organismo la grasa para
la glucosa obtener
no está energía
disponible

Cuerpos
Cetónicos
disminución
del pH
sanguíneo
En cantidades
elevadas son
Deshidratación muy tóxicos y
Un aliento de provocan acidez
olor a fruta en
descomposición
 Fisiopatología
HIPERGLUCEMIA > 200
mg/dl Deficiencia de insulina
Aumento de las hormonas
CETONEMIA >3 mmol/L
contrareguladoras
ACIDOSIS pH<7.3 como el glucagon, cortisol,
DESHIDRATACIÓN y adrenalina
Lipólisis
pérdida de electrolitos

Causas:
•Sed.
• Hipotermia. Debut diabético
• Taquicardia, La omisión de la
hipotensión, dosis de insulina
shock.
Problemas
• Piel seca.
psicosociales
•Adelgazamiento
DR. JUAN PABLOHERRERAVALDIVIESO, MGS.
✓ La lipasa es una enzima que Para disgregar las grasas de los
se usa en el organismo alimentos

De manera que se puedan absorber

 FUNCION PRINCIPAL
✓ Esta enzima tiene como función
principal catalizar la hidrólisis de
✓ Las lipasas se encuentran en gran
variedad de seres vivos.

Triacilglicerol Triacilglicerol
a glicerol ácidos grasoys
libres.
 Esta enzima en humanos se
encuentra
✓ La leche materna ,
✓ según estudios bioquímicos, es idéntica

A la enzima colesterol esterasa

(o lipasa pancreática no
específica),

Por lo que se establece que es de origen

llega a las glándulas

pancreático mamarias a través de
la circulación
sanguínea
 la digestión de
✓ se encuentran presentes para grasas
✓ Las células vegetales las
producen
la reconstitución del
organismo y el
metabolismo
✓ para fabricar reservas de lipoproteico
energía.
 Las aplicaciones que tienen las lipasas

✓ En la industria actual son múltiples y van

desde la fabricación de detergente
 Las aplicaciones que tienen las lipasas

✓ La industria de la leche y los quesos

✓ panaderías para mejoramiento de

sabores

✓ Industria de bebidas

✓ Producción de productos químicos

de interés

✓ por medio de enlaces

éster, polimerización

E incluso se hacen investigaciones

para la producción de biodiésel.
ALGUNAS FUNCIONES EN NUESTRO
CUERPO

✓ Es responsable de descomponer
para formar componentes
(hidrolizar) grasas
más

pequeños

que puedan absorberse fácilmente a través de

los intestinos.
✓ Se que puede tomar una molécula de
triglicérido, la unidad básica de grasa
encontrada en la comida

✓ y extraer los ácidos

grasos dejando ninguno
✓
✓ uno o dos ácidos grasos
adheridos a la base de
glicerol
1
✓ La Lipasa no sólo nos ayuda a
descomponer las grasas, evitando el
sobrepeso y posiblemente hasta la
obesidad

✓ También tiene la habilidad de seguir

todo el proceso digestivo

3
✓ Ayuda también a incrementar el valor
nutricional de las grasas naturales que
obtenemos de alimentos buenos y
sanos.
 ✓ Puede mejorar ✓ Puede mejorar los
síntomas comunes de la síntomas de la
indigestión enfermedad Celíaca

✓Sirve para mantener las

enzimas pancreáticas a niveles
óptimos conforme
envejecemos
✓ Puede mejorar el Mejora la absorción de
estado nutricional vitaminas y minerales de
general de quienes los alimentos que
padecen fibrosis comemos
quística Apoya la función
inmunológica
✓ Apoya la digestión de grasas
y el control del peso
 Acción de la enzima lipasa
La enzima lipasa pancreática

Grasas (lípidos) que comemos

para

Tiene como función en el intestino ayudar

a descomponer

Que comemos para convertirlos en

ácidos grasos y glicerol.
✓ se necesita que la bilis
✓ Haga el proceso de emulsificaicion de las grasas en el
cual convierte

Gotas grandes de
grasa En unas mas pequeñas

Reduciendo su
tensión superficial
✓ luego de esto es donde entra la lipasa pancreática

Se encarga
De fragmentar los triglicéridos que se
encuentran en gotas mas pequeñas de grasa y
son convertidos

Ácidos grasos
Mono gliceroles
libres
 LA ACCIÓN DE LIPASA
• El páncreas por su secreción exocrina libera una enzima, la lipasa,
que hidroliza a las grasa neutras en la unión Ester para regenerar
glicerol y tres moléculas de ácidos grasos, si esta hidrolisis se
realiza en una medio alcalino se produce el desplazamiento del H
(COOH) ácidos por el metal más activo, esto es la saponificación,
lo que da lugar a la formación de jabones.
 LA ACCIÓN DE LIPASA
• Existen dos tipos de lipasa, sérica y tisular; la acción de la lipasa
tisular es disgregar a las sustancias grasa en los tejidos.
• La lipasa sérica es inespecífica, pues en su estimación se incluye:
di-esterasas, colinesterasa, estero-esterasas, lipoproteinlipasa
(heparin-clearing-factor) esta última produce la hidrolisis de los
quilomicrones, desdoblándose en glicerol y ácidos grasos, los que
conducen al aclaramiento del plasma razón por la cual se ha
denominado además factor aclarante.
 LA ACCIÓN DE LIPASA
• Se encuentran en la sangre en pequeñas cantidades de lipoproteinlipasa,
sin embargo, su concentración es abundante en ciertos tejidos musculo
cardiaco, tejido adiposo, y hasta cierto punto musculo esquelético.
• La absorción de grasas en el intestino es favorecida por la lipasa
pancreática, cuando hay deficiencia van aparecer las grasas en las
materias fecales que se conoce como esteatorrea.
LA ACCIÓN DE LIPASA
LAS CAUSAS DE ESTEATORREA PUEDEN CLASIFICARSE DE LA SIGUIENTE
MANERA:
1. Activación de la mucosa
2. Deficiencia de jugo pancreático (falta de lipasa)
3. Carencia de bilis
El valor de lipasa en el suero es de 0 -10 unit/ml. el valor de lipasa sérica esta
aumentado en:
1. Pancreatitis aguda
2. Cáncer de páncreas
3. Enfermedades biliares crónicas
4. Ulceras gástricas perforadas hacia páncreas
DR. JUAN PABLOHERRERAVALDIVIESO, MGS.
 COLESTEROL
✓Es una sustancia cerosa y
parecida a la grasa que se
encuentra en todas las células
de nuestro cuerpo.
✓Necesita algo de colesterol
para producir hormonas,
vitamina D y sustancias que le
ayuden a digerir los alimentos.
✓El colesterol también se
encuentra en alimentos de
origen animal, como yemas de
huevo, carne y queso.
 SU IMPORTANCIA CLÍNICA
✓Radica en el exceso
(hipercolesterolemia), junto con la
hipertrigliceridemia, son
importantes factores de riesgo de
aterosclerosis.
✓La ateroesclerosis es una forma
modular localizada de
arterioesclerosis, cuya manifestación
grave es la cardiopatía isquémica
(enfermedad coronaria o cardiopatía
arteriosclerótica).
✓Le sigue en importancia la
hemorragia y trombosis cerebral
(enfermedad cerebrovascular).
✓El descubrimiento de hiperlipidemias en
exámenes de laboratorio es muy útil ya que nos
permite predecir la aparición de ateroesclerosis
prematura y tomar medidas de prevención.
✓Un riesgo mayor de cardiopatía isquémica se
puede observar cuando el nivel de colesterol es
mayor a 200mg por decilitro.
✓Los incrementos se acompañan de elevación
en las concentraciones de lipoproteínas de baja
densidad (LDH).
✓Los incrementos de triglicéridos acompañan a
la elevación en las lipoproteínas de muy baja
densidad (VDLDL).
✓ HDL significa lipoproteínas de alta densidad. En
ocasiones sele llama colesterol "bueno" porque
transporta el colesterol de otras partes de sucuerpo de
vuelta al hígado. Suhígado luego elimina el colesterol de
su cuerpo
✓ LDL significa lipoproteínas de baja densidad. A veces
se le llama colesterol "malo" porque un nivel alto de LDL
lleva a una acumulación de placa en las arterias
✓Lipoproteína de muy baja densidad (VLDL). Algunos
también la califican como colesterol "malo" porque
contribuye a la acumulación de placa en las arterias.
Pero la lipoproteína de muy baja densidad y el LDL
son diferentes; la lipoproteína de muy baja densidad
transporta triglicéridos y el LDL principalmente lleva
colesterol
 Las lipoproteínas de altas densidad (HDL) transportan
cerca del 20% del colesterol plasmático total; se
consideran como factores antirriesgo de aterosclerosis;
la presencia de altos niveles de HDL.- colesterol, en el
liquido sobrenadante del plasma luego de la
precipitación de las otras lipoproteínas plasmáticas,
nos habla de un riesgo mucho menor de cardiopatía
isquémica y viceversa.
El colesterol también se relaciona con una frecuencia
elevada de cálculos biliares. El mecanismo mas
importante para la producción de bilis litógena
(formadora de cálculos) es la secreción biliar
aumentada de colesterol.
Es de importancia también la relación que existe entre
obesidad y colesterol elevado. Los estudios de
laboratorio sobre colesterol también nos permiten
diagnosticar hiperlipidemias familiares.
Fundamento del experimento:
El colesterol y sus esteres se liberan de las lipoproteínas por
acción de los detergentes, la esterasa de colesterol hidroliza los
esteres. El siguiente paso es la formación de H202 a partir de la
oxidación enzimática catalizada por la oxidasa de colesterol.
El H202 es convertido en una quinomina coloreada por una
reacción con 4 aminoantipirina y fenol catalizada por una
peroxidasa.
 DETERMINACIÓN DEL COLESTEROL

TUBOS B S D

Standard --- 20 ul ---

Muestra
--- --- 20 ul
(suero)

Reactivo de
2 ml 2 ml 2 ml
trabajo

Incubar 15 minutos en baño de agua a 37° C o 30 minutos de

temperatura ambiente (25° C) leer en espectrofotómetro 505
nm, llevando el aparato a cero con el blanco
 CALCULO DE RESULTADOS (COLESTEROL)
• Colesterol g/l = D x f

200 𝑚𝑔/𝑙
• Factor (f) =
𝑆

VALORES NORMALES DE COLESTEROL

• Deseables: > 240 mg/dl
• Moderadamente alto: 200- 239 mg/dl
• Elevado: > 240 mg/dl
 TRIGLICÉRIDO
S
• Es la forma más eficiente que tiene el organismo de almacenar energía.
• Lo que almacenan las células constituyentes del tejido adiposo, que
son las que conforman “la grasa”,son los triglicéridos.
• es un éster derivado de glicerol y tres ácidos grasos (de tri- y glicérido).
Los triglicéridos son los principales constituyentes de la grasa corporal
en los seres humanos y otros animales, así como la grasa vegetal.
También están presentes en la sangre para permitir la transferencia
bidireccional de grasa adiposa y glucosa en sangre desde el hígado
• Unión de tres ácidos grasos a una molécula de glicerina (o
glicerol).
¿DE DONDE SE OBTIENEN LOS
TRIGLICÉRIDOS?
• Proceden de los ácidos grasos que absorbemos a través del
intestino procedente de los alimentos y de los que el hígado es
capaz de elaborar. Los triglicéridos pasan a la sangre desde
ambos órganos, siendo transportados por unas proteínas
especialmente diseñadas para ello: las lipoproteínas.
• Se denominan quilomicrones a las lipoproteínas ricas en
triglicéridos originadas en el intestino tras una comida,
mientras que el hígado sintetiza otras proteínas para
transportar triglicéridos denominadas VLDL, que son las siglas
en inglés “de lipoproteínas de muy baja densidad”.
• En el análisis de sangre aparece bajo la denominación genérica
de triglicéridos la suma las concentraciones en plasma de los
triglicéridos aportados por los quilomicrones y por lasVLDL.
¿QUÉ CASUSA LOS
TRIGLICÉRIDOS ALTOS?
• Comer regularmente más calorías de las que
quema,especialmente si consume mucha azúcar
• Tener sobrepeso u obesidad
• Fumar cigarrillos
• Uso excesivo de alcohol
• Ciertos medicamentos
• Algunos trastornos genéticos
• Enfermedades de la tiroides
• Diabetes tipo 2 mal controlada
• Enfermedades del hígado o renales
NIVELES DE
TRIGLICÉRIDOS
 FUNCIÓN
Grupo particular de lípidos
Formados: molécula de glicerol
Circulan en la sangre, almacenan
En el Tejido graso

Producir energía para el metabolismo

Energéticos
Actúan como aislantes
 DETERMINACIÓN DEL TRIGLICERIDOS

TUBOS B S D

Muestra
--- --- 20 ul
(suero)

Standard --- 20 ul ---

Reactivo de
2 ml 2 ml 2 ml
trabajo
Mezclar, incubar 10 minutos a 37° C y retirar del baño. Enfriar
y leer en espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a
cero con agua destilada.
 CALCULO DE RESULTADOS (TRIGLICÉRIDOS)

• Triglicéridos mg/dl = D x f

200 𝑚𝑔/𝑙
• Factor (f) =
𝑆

VALORES NORMALES DE TRIGLICÉRIDOS

• Mujeres = 40 - 140 mg/dl

• Hombres = 60 – 165 mg/dl
 DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
TUBOS B S D
Standard --- 20 ul ---

Muestra (suero) --- --- 20 ul

Reactivo de trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
Incubar 15 minutos en baño de agua a 37° C o 30 minutos de temperatura
ambiente (25° C) leer en espectrofotómetro 505 nm, llevando el aparato a cero
con el blanco
DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS

TUBOS B S D

Muestra (suero) --- --- 20 ul

Standard --- 20 ul ---

Reactivo de trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
Mezclar, incubar 10 minutos a 37° C y retirar del baño. Enfriar y leer en
espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con agua destilada.
 CALCULO DE RESULTADOS
(COLESTEROL)
• Colesterol g/l = D x f
• Factor (f) = 200 𝑚𝑔/𝑙
𝑆 𝑆
VALORES NORMALES DE
COLESTEROL
• Deseables: > 240 mg/dl
• Moderadamente alto: 200- 239
mg/dl
• Elevado: > 240 mg/dl
CALCULO DE RESULTADOS
(TRIGLICÉRIDOS)
• Triglicéridos mg/dl = D x f
• Factor (f) = 200 𝑚𝑔/𝑙
VALORES NORMALES DE
TRIGLICÉRIDOS
• Mujeres = 40 - 140 mg/dl
• Hombres = 60 – 165 mg/dl