PRÁCTICA 4.

DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA Y
HEMATOCRITO

STEFHANY MENDOZA HERNÁNDEZ

SEBASTIÁN MARTÍNEZ MONTES
SEBASTIÁN MONSERRAT ARDILA
YORLIS QUINTERO LOBO
MARIA POMARICO ARENAS

Informe no. 4 sobre hemoglobina y hematocrito

CARMIÑA LUCÍA VARGAS

Docente

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO

FACULTAD DE QUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA – G2

BARRANQUILLA – ATLÁNTICO

2020-2
 Laboratorio de Bioquímica

CONTENIDO

Pág.

1. RESUMEN……………………………………………………………….….3

2. INTRODUCCIÓN………………………………………………,………….4

3. OBJETIVOS…………………………………………………….…….…….6

3.1 GENERAL

3.2 ESPECÍFICOS

4. METODOLOGÍA………………………………………………………..…..7

4.1 MATERIALES

4.2 PROCEDIMIENTO

5. DATOS Y RESULTADOS…………………………………….………...…..8

6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS…………………………………………..11

7. CONCLUSIONES…………………………………………………………..14

8. BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………….….......15

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1. RESUMEN

En el presente informe se pretende analizar y determinar los parámetros hematológicos de la

hemoglobina y los hematocritos, en el cual teníamos 4 pacientes, dos hombres y dos mujeres,
donde se establecieron los valores normales de la hemoglobina y los hematocritos, en los
cuales se pudieron comparar los valores. Por ello, para hallar el valor de la hemoglobina se
utilizó la observancia de la muestra y se dividió por la observancia del patrón y este resultado
se multiplicó por el patrón, teniendo en cuenta que las unidades de la hemoglobina son g/dL.
Para hallar los niveles de hematocrito matemáticamente, se necesita la longitud de los
glóbulos rojos divido entre la longitud total de la sangre del capilar multiplicado por 100 y
las unidades que quedarían son en porcentaje %.
Palabras claves: hemoglobina, hematocrito, muestra, valores, resultados.

ABSTRACT
This report aims to analyze and determine the hematological parameters of hemoglobin and
hematocrits, in which we had 4 patients, one man and three women, where normal values of
hemoglobin and hematocrits were established, in which compare the values. Therefore, to
find the value of hemoglobin, the observance of the sample was used and it was divided by
the observance of the standard and this result was multiplied by the standard, taking into
account that the units of hemoglobin are g / dL. To find the hematocrit levels mathematically,
you need the length of the red blood cells divided by the total length of the blood in the
capillary multiplied by 100 and the units that would remain are in percent%.
Keywords: hemoglobin, hematocrit, sample, values, results.

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2. INTRODUCCIÓN

En esta práctica se darán a conocer las características generales y conceptos relacionados con
la hemoglobina y hematocrito, por ello, hay que tener en cuenta que la hemoglobina es una
proteína globular de peso molecular de aproximadamente 64 458 Dalton. Existen varios tipos
de HbF, Hb A2, es el más común es la del adulto o del tipo A. Su componente proteico está
formado por subunidades, 2 cadenas alfa de 141 aminoácidos y 2 cadenas betas de 146 am
del tipo de las globinas, el gen para la beta globina está localizado sobre el cromosoma 11, y
tiene 475 variaciones alélicas, este es un miembro de la familia de genes, que es un grupo
involucrado en el transporte de oxígeno. La hemoglobina una proteína eritrocitaria
intracelular altamente especializada, se encuentra dentro de los glóbulos rojos que transporta
oxígeno desde los pulmones hacia el resto del y una causa común de la anemia es no tener
una cantidad de hierro suficiente para la producción de hemoglobina. Es la responsable de
realizar este transporte gaseoso. Cada gramo de hemoglobina puede llevar 1.34 mL de
oxígeno.

Si la hemoglobina se mantiene dentro de los límites normales es porque la serie de fenómenos

que concurren a su formación como a su disminución se equilibran, pero cuando existe un
desequilibrio ya sea por diversos factores van a dar diferentes cambios enfermedades como
son las anemias14. Los valores normales dependen de la edad, altitud geográfica,
alimentación y otros factores. Según los criterios de la OM: las cifras para que se considere
una anemia es: Niños 6 meses 6 años (< 11 g/dl); niños 6 - 14 años (< 12 g/dl); varón adulto
(< 13 g/dl); Mujer adulta no gestante (< 12 y Mujer gestante (< 11 g/dl)(15). Una
alimentación pobre en alimentos ricos en hierro puede provocar anemia, así como una
enfermedad parasitaria intestinal también puede provocar pérdidas de sangre, debido a que
sea consumida por los parásitos. También puede ser producida por alguna enfermedad o
infección, como la urinaria, tuberculosis, paludismo, tumores, fiebre tifoidea, leucemia, entre
otras.

El hematocrito de una muestra de sangre es el volumen de células empacadas (VCE) que

denota el porcentaje de eritrocitos en un volumen conocido de sangre entera, es útil en la
detección de anemia y policitemia, y junto con el número total de eritrocitos y la
determinación de la hemoglobina, se usa para calcular los índices eritrocitarios, volumen
corpuscular medio (VCM) y concentración de la hemoglobina corpuscular media
(CHCM).En el caso de la determinación del hematocrito llamado también volumen de
glóbulos rojos centrifugados (VGC) o porcentaje de volumen sanguíneo ocupado por
eritrocitos, constituye uno de los métodos más sencillos y valiosos en la hematología.

Se considera los valores de hematocrito dependen de la edad del sexo, que la altitud
geográfica.

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Los valores aumentados se deben a una hemoconcentración, policitemia vera, quemaduras.

Mientras que los valores disminución de hematocrito pueden ser indicio de una anemia (de
varias clases), pérdida de sangre (hemorragia), insuficiencia de la médula ósea a radiación,
toxina, fibrosis o tumor), destrucción de los glóbulos rojos, leucemia, etc22). Su valor normal
en el varón es de 40-50 en la mujer es 37-47%, en el niño es de 35- 49%, en lactantes 3 meses
es de y en recién nacidos es de 50-58%. Estos valores son muy variables, dependiendo de si
la persona tiene anemia, del grado de actividad corporal y de la altitud en que reside la
persona.
En nuestro medio. necesario conocer el valor de la hemoglobina y hematocrito ya que por
medio de estos análisis se puede ayudar a la prevención y al diagnóstico oportuno de
diferentes enfermedades relacionadas con estas y a la vez orientar como profesionales a la
población en llevar un adecuado estilo de vida. Los valores aumentados se deben a una
hemoconcentración, policitemia vera, quemaduras. Mientras que los valores disminución de
hematocrito pueden ser indicio de una anemia (de varias clases), pérdida de sangre
(hemorragia), insuficiencia de la médula ósea a radiación, toxina, fibrosis o tumor),
destrucción de los glóbulos rojos, leucemia, etc). Su valor normal en el varón es de 40-50 en
la mujer es 37-47%, en el niño es de 35- 49%, en lactantes 3 meses es de 35-45% y en recién
nacidos es de 50-58%. Estos valores son muy variables, dependiendo de si la persona tiene
anemia, del grado de actividad corporal y de la altitud en que reside la persona.
En nuestro medio es necesario conocer el valor de la hemoglobina y hematocrito ya que por
medio de estos análisis se puede ayudar a la prevención y al diagnóstico oportuno de
diferentes enfermedades relacionadas con estas y a la vez orientar como profesionales a la
población en llevar un adecuado estilo de vida.

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3. OBJETIVOS

3.1 OBJETIVO GENERAL

Determinar la hemoglobina y los hematocritos en muestras de sangre.

3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Calcular el porcentaje de hematocritos en la muestra de sangre.

• Calcular la concentración de hemoglobina en todas las muestras.
• Discutir y argumentar los resultados de la experiencia con los valores normales de
la hemoglobina y los hematocritos.

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4. METODOLOGÍA

4.1 MATERIALES.

• 2 jeringas desechables.
• Torniquete.
• Tubo de ensayo para colecta de sangre con tapa violeta.
• 2 tubos de ensayos medianos o grandes.
• Pipetas Pasteur plásticas.
• Algodón, torniquete, pedazo de alambre delgado de aprox. 15 cm.
• Hemo centrifuga, espectrofotómetro.
• 1 gradilla.
• Otros materiales: 2 beacker de 250 ml, 1 litro de agua destilada.
• Reactivos: Alcohol antiséptico; solución patrón de hemoglobina; reactivo de trabajo
para determinar hemoglobina (Brabkin).

4.2 PROCEDIMIENTO

Para esta práctica debemos extraer la sangre donde se hará la determinación de Hematocritos
y Hemoglobina. Para esta extracción, utilizaremos una jeringa para sacar tres mililitros de
sangre de la vena del brazo del paciente (en este caso de un integrante del grupo) quitamos
la aguja y la colocamos cuidadosamente en el tubo colector de sangre de tapa violeta
conteniendo EDTA, homogenizamos. Siguiente a esto Llenamos homogéneamente 2
capilares, limpiamos la superficie externa de los capilares con papel higiénico y sellamos los
capilares con plastilina blanca; luego homogenizamos la sangre y debemos tomar una
alícuota por duplicado diez microlitros (µL) de sangre total, colocamos en tubos de ensayos
limpio y seco separadamente.
Después de haber preparado la sangre procedemos a realizar las dos determinaciones:
Hematocritos y Hemoglobina.

DETERMINACIÓN DEL HEMATÓCRITO

1. Centrifugar los capilares en la hemo centrifuga manteniendo el equilibrio.

2. Medir la longitud del plasma y de los glóbulos rojos

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3. Calcular el % del hematocrito.

DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA
1. Añadir a las alícuotas (10μL) de sangre total 2,5 ml de reactivo de trabajo, homogenizar
bien y reposar por 5 minutos.
2. Leer absorbancia en todos los tubos a 540nm, calibrando el equipo con el blanco reactivo
(reactivo de color).

3. Calcular la concentración de hemoglobina en todas las muestras, multiplicando la

absorbancia de las muestras por 36,8%. Discuta todos los resultados.

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5. DATOS Y RESULTADOS

Tabla 1. Datos de hematocrito

Paciente Sexo Longitud Longitud total Ht

glóbulos rojos de la sangre en
el capilar (g/dL %)
BLEYDIS F 1,5 6.9 21,73%
SEBASTIAN M 5,0 7,5 66,66%
ROSA F 3,2 7,15 44,75%
BRANDON M 2,0 9.0 22,22%

Tabla 2. Datos de hemoglobina

GRUPO Sexo Absorbancia de la Absorbancia del Hb

muestra patrón (g/dL %)
BLEYDIS F 0,20 0.50 6
SEBASTIAN M 1,0 0,50 30
ROSA F O,50 0,50 15
BRANDON M 0,25 0,50 -7,5

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CÁLCULOS

a. Determinación de hematocrito

𝒍𝒐𝒏𝒈𝒊𝒕𝒖𝒅 𝒅𝒆 𝒍𝒐𝒔 𝒈𝒍𝒐𝒃𝒖𝒍𝒐𝒔 𝒓𝒐𝒋𝒐𝒔

𝑯𝒕(%) = × 𝟏𝟎𝟎
𝒍𝒐𝒏𝒈𝒊𝒕𝒖𝒅 𝒔𝒂𝒏𝒈𝒓𝒆 𝒕𝒐𝒕𝒂𝒍

1,5
𝐻𝑡(%) = × 100 = 21,73%
6,9

5,0
𝐻𝑡(%) = 7,5 × 100 = 66,66%

3,2
𝐻𝑡(%) = × 100 = 44,75%
7,15

2,0
𝐻𝑡(%) = 9,0 × 100 = 22,22%

b. Determinación de hemoglobina

𝒂𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂
𝑯𝒃 = × [𝒑𝒂𝒕𝒓ó𝒏]
𝒂𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒅𝒆𝒍 𝒑𝒂𝒕𝒓ó𝒏
𝒈
[𝒑𝒂𝒕𝒓ó𝒏] = 𝟏𝟓
𝒅𝑳

0,20 𝑔 𝑔
𝐻𝑏 = × [15 ] = 6
0.50 𝑑𝐿 𝑑𝐿
1,0 𝑔 𝑔
𝐻𝑏 = × [15 ] = 30
0,50 𝑑𝐿 𝑑𝐿

0,50 𝑔 𝑔
𝐻𝑏 = × [15 ] = 15
0,50 𝑑𝐿 𝑑𝐿

0,25 𝑔 𝑔
𝐻𝑏 = × [15 ] = −7,5
0,50 𝑑𝐿 𝑑𝐿

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6. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En esta práctica pudimos obtener la determinación de hematocritos y hemoglobina, mediante

los datos suministrados por la docente. Primeramente, el porcentaje de hematocritos de una
muestra tomada a cada persona fueron sacados utilizando la siguiente fórmula:
𝑙𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑑𝑒 𝑙𝑜𝑠 𝑔𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠
𝐻𝑡(%) = × 100
𝑙𝑜𝑛𝑔𝑖𝑡𝑢𝑑 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙

Pudimos observar que los porcentajes que nos dio como resultado por cada persona varía sin
ningún orden específico, eso quiere decir que no todos tenemos el mismo volumen de
glóbulos rojos en la sangre, teniendo en cuenta que el hematocrito mide la cantidad de sangre
compuesta por glóbulos rojos.
Tener niveles del hematocrito demasiado altos o bajos puede indicar un problema de la
sangre, deshidratación u otras condiciones médicas. Conociendo el valor normal de una
mujer (35,5% a 44,9%) y el valor normal del hombre (38,3 % a 48,6%) se hizo un análisis
de los resultados comenzando por el primer paciente mujer, en el cual, el valor obtenido fue
de 21,73% lo que está por debajo del valor normal estándar, un hematocrito más bajo que lo
normal puede indicar, un suministro insuficiente de glóbulos rojos sanos, una gran cantidad
de glóbulos blancos debido a una enfermedad de larga duración, una infección o un trastorno
en los glóbulos blancos como leucemia o linfoma, vitaminas o minerales deficientes. En el
caso del segundo paciente llamado Sebastián, el valor de hematocrito es de 66,66% lo que
nos quiere decir que está por encima del valor normal de los hombres. El valor obtenido en
el tercer paciente mujer llamada Rosa es de 44,75% el cual se encuentra entre los valores
normales de hematocrito en mujeres, lo que nos indica que no presenta alteraciones, pero
siempre es recomendable tener los cuidados necesarios para que no haya aumentos ni
disminución de este. Por último, tenemos al paciente llamado Brandon, en el que el valor de
hematocrito es 22,22%, en el que podemos observar que se encuentra por debajo de los
valores normales de hematocrito en hombre, lo que nos indica también que el paciente tiene
presencia de anemia, sangrado, desnutrición, falta o disminución de vitamina B12, ácido
fólico o hierro, leucemia o exceso de hidratación.
Por otro lado, también hicimos un proceso de determinación de hemoglobina, para esto se
tomaron muestras para estas mismas cuatro personas, sacamos los datos empleando la
siguiente fórmula:
𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐻𝑏 = × [𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛]
𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛

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Teniendo en cuenta que el patrón es de [patrón] = 15 g/dL

También, se debe tener en cuenta que, para la determinación de los niveles de hemoglobina
en persona, tenemos que conocer la absorbancia de la muestra y la absorbancia del patrón,
así como también la concentración del patrón. Sabemos que el valor normal de la mujer es
de 12,1 a 15,1 g/dL y el de los hombres es de 13,8 a 17,2 (g/dL) gramos por decilitro.
Teniendo en cuenta estos valores, realizamos el respectivo análisis, comenzando por el
primer paciente mujer llamada Bleidys, su valor fue de 6 gramos por decilitro (g/dL), el cual
es un valor que está por debajo del valor normal estándar para las mujeres, que una persona
tenga la hemoglobina baja puede estar relacionado con una enfermedad o un trastorno que
provoca que el cuerpo tenga muy pocos glóbulos rojos, Las enfermedades y las afecciones
que provocan que el organismo produzca una menor cantidad de glóbulos rojos de lo normal
son la anemia aplásica, cáncer, ciertos medicamentos, como los antirretrovirales que se
utilizan para tratar la infección por el VIH y los de quimioterapia para tratar el cáncer y otras
enfermedades, cirrosis (cicatrización del hígado), hipotiroidismo (tiroides hipoactiva),
anemia por deficiencia de hierro, leucemia, etc. En el caso del segundo paciente llamado
Sebastián, el valor fue de 30 gramos por decilitro (g/dL), lo que nos indica que está muy por
encima del valor normal de hemoglobina en hombres. El valor obtenido en el tercer paciente
mujer llamada Rosa fue de 15 gramos por decilitro (g/dL) este valor como podemos observar
sobrepasa el valor normal estándar de las mujeres, esto normalmente se presenta cuando tu
cuerpo requiere una capacidad aumentada para transportar oxígeno y puede provocar
alteraciones como: enfermedad cardíaca congénita en adultos, enfermedad pulmonar
obstructiva crónica (EPOC), deshidratación, enfisema, insuficiencia cardíaca, cáncer de
riñón, cáncer de hígado, policitemia vera. Por último, en el caso del paciente hombre llamado
Brandon tenemos que el valor fue de -7,5 gramos por decilitro (g/dL), lo que podemos
observar que esta muy por debajo del valor normal de hemoglobina en hombres.

Luego de realizar estos dos procedimientos: Determinación de hematocrito y determinación

de Hemoglobina en 4 pacientes diferentes, observamos que los valores de estos podrían ser
muy diferentes. No todos tenemos un valor normal estándar para esto, esto podría llevar
algunas alteraciones dependiendo de si estamos por encima o por debajo del valor normal
estándar, algunos de los examinados en el laboratorio resultaron con la hemoglobina alta, y
otros baja, igual que en el caso del volumen de hematocritos presentes los cuales algunos
resultaron con un nivel bajo y otros con un nivel bajo, con la excepción de una persona
(mujer) donde los valores obtenidos fueron normales ya que tanto como en la muestra de
hematocritos y la muestra de hemoglobina estuvieron dentro del rango normal de estas, cabe
resaltar que el tipo de alteraciones no son iguales para los hematocritos como para la
hemoglobina.

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La determinación de estas es muy importante, porque esto nos permite conocer el estado en
que se encuentra nuestra salud y, sobre todo, para saber si estamos en el rango normal, o si
estamos fuera de este rango, por ende, sabiendo estos valores ya podríamos buscar la manera
de disminuirlo o aumentarlo en dado caso.

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7. CONCLUSIONES

• Los resultados demuestran que logramos descubrir hemoglobina y hematocritos en

las respectivas pruebas de sangre extraídas en este laboratorio, pero sabiendo que
existen varios tipos de sangre no todas las muestras van a ser certeras por lo que opta
a extraer varias muestras.
• Se logro calcular el porcentaje aproximado en la muestra de sangre tomadas para este
experimento.
• Logramos obtener la concentración de cada una de las muestras extraídas en este
proceso.
• Se logro razonar cada resultado de esta experiencia con sus valores normales de
hemoglobina y hematocrito

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8. BIBLIOGRAFÍA

• Anemia. En Wikipedia Enciclopedia Libre.Sitio Web en Internet. Disponible en:

http://es.wikipedia.org/wiki/Anemia

▪ Greer JP, Foerster J, Lukens JN, ed. Wintrobe's Clinical Hematology, 11 ed.
Baltimore: Lippincott Williams & Wilkins Publishers; 2003. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892010000400012

▪ Gallardo A. Relación hemoglobina-hematocrito. ¿Mito o realidad? Disponible

en: http://bioanalisisaldia.net_de_hoy/tema_01

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