INFORME DE LABORATORIO #1

USO DE MICROPIPETAS
UNIVERSIDAD DE CARTAGENA, FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y
NATURALES
AMANDA GAMARRA; VALENTINA FORTICH

RESUMEN
La micro pipeta es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir
pequeños volúmenes, el empleo de la técnica del pipeteo permite dosificar líquidos de
forma rápida y precisa. Las herramientas utilizadas para ello se denominan pipetas. Debido
a la elevada importancia de la técnica del pipeteo en laboratorios de cualquier tipo, desde la
medicina hasta la química, a lo largo de los años se han desarrollado diferentes pipetas de
múltiples tamaños y versiones. El objetivo de esta práctica de laboratorio fue identificar las
partes y funcionamiento de la micropipeta correctamente con el fin de adquirir destreza en
la utilización de esta herramienta.
Palabras clave: micropipeta,
ABSTRACT
INTRODUCCION absorbiendo el mismo volumen en todas
ellas
La utilización de las micropipetas
permite emplear distintos líquidos Las micropipetas están codificadas por
sin tener que lavar dicho aparato, para colores y etiquetadas con el volumen para
esto, se emplean puntas desechables el que están diseñadas. La codificación
de plástico, que generalmente son por colores permite una identificación
estériles. Además, existen distintos tipos rápida de las puntas que se van a
de puntas; las amarillas para pipetear necesitar, ya que el código de color de la
volúmenes pequeños y las azules para micropipeta coincide con el color de las
pipetear volúmenes más grandes. Existen puntas en la mayoría de los casos
un tipo de micropipetas que son (Fuentes, Fernández y Fuentes, 2020).
manuales, en las cuales el volumen a
Objetivos
aspirar se fija girando un botón en su
parte superior que está conectado a un 1. Conocer las partes y el
sistema analógico de confirmación de funcionamiento de las
volumen y otras automáticas, en donde micropipetas.
este sistema recién nombrado es digital. 2. Adquirir destreza en la utilización
Además, existe micropipetas simples, las de micropipetas para la medición
cual sólo acogen una punta cada vez, y de volúmenes En el rango de los
otros multicanales, las cuales μL.
permiten incorporar múltiples puntas,
 3. Evaluar la calibración de las
micropipetas, su exactitud y
precisión.
MATERIALES, REACTIVOS Y
EQUIPOS.
1. Puntas para las micropipetas
2. Microplacas de 96 pozos o tubos
para microcentrífuga (Eppendorf)
3. Agua destilada
4. Micropipetas de varios volúmenes
variables (P1000, P200 y P10)
5. Balanza analítica
6. Termómetro
7. Baker
8. Picnómetro Figura 1. Partes de la micropipeta
volumen fijo y variable
METODOLOGÍA
Practica de pipeteo- Verificación de
Procedimiento experimental- manejo
calibración
de micropipetas
Cada integrante del grupo utilizo dos
Se utilizo dos tipos de micropipetas para
micropipetas, la micropipeta de uso
cada uno de los integrantes del grupo, la
variable de 20μL y micropipeta de
micropipeta de uso variable Se puede
volumen fijo 1000μL
ajustar el volumen a dispensar, implica
que el equipo nos permite escoger En un beaker de 100ml se tomó agua
diferentes volúmenes entre un rango destilada previamente tomada la
definido y la micropipeta de volumen fijo temperatura a 25C y se procedió a pesarla
Los estudiantes se familiarizaron y en una balanza analítica (Figura 1). Luego
aprendieron como es el uso y llenado de se tomó el peso del picnómetro vacío y
las micropipetas y sus partes completas, lleno de agua, junto con los tubos
se aprendió a conocer los volúmenes y el Eppendorf. vacíos y posteriormente se
tipo de puntas especificas a utilizar en rotulo 1-5 tubos Eppendorf. donde se
cada micropipeta. llenó con la micropipeta fija 1000μL para
cada tubo y otros 6 tubos Eppendorf.
rotulados de A-F 20μL de agua destilada
(figura 2) y se recolecto los datos para
cada replica realizada por los estudiantes,
con esos datos se calculó el promedio
para cada uno, la desviación estándar y el
error relativo.
 Dato teórico proporcionado por el
docente= 997,13 Kg/m3, este cálculo se
convirtió a parámetros de gramos sobre
mililitros para mejor comodidad de los
analistas.
Dato teórico= 0,99712g/mL
Error relativo= valor teórico- valor
experimental* 100%
Error relativo= 0,997 g/mL-
1,018g/mL*100%= 2,1%
El diferencial de masas calculado para
Figura 1. Determinación de la masa de
ambos tubos para determinar el volumen
aguay el beaker en la balanza analitica
real del agua
Tub A B C D E F
o
(20
μL)
Vac 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3 0,3
ío 8g 9g 9g 8g 9g 9
Lle 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4
no 2g 1g 1g 0g 1g 0g
0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
4g 2g 02g 02 02 02
Tabla 1. Datos de los tubos A-F
Figura 2. Manejo de micropipetas
eppendorf vacíos, llenos y el diferencial
RESULTADOS de esos valores

Los resultados obtenidos para la Tubo 1 2 3 4 5

determinación de la densidad-masa y (1000
volumen del agua. μL)
Vacío 0,8 0,8 0,8 0,9 0,8
Peso Picnómetro vacío= 12,71g 8g 8g 8g 1 7
Lleno 1,8 1,8 1,8 1,9 1,8
Picnómetro lleno= 17,809g
9g 9g 9g 1g 7g
Picnómetro lleno-Picnómetro vacío= 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
17,809g -12,71g = 5,09g. 1g 1g 1g 0g 0g
Tabla 2. Datos de los tubos 1-5 eppendorf
La masa total de H20= 5,09g vacíos y llenos
La densidad del agua= 5,09g/5.0ml=
1,018 g/ml es nuestro calculo
experimental. DISCUSION
La profundidad de inmersión de la punta Las diferencias entre la precisión se
es especialmente importante en el uso de pueden deber a la falta de experiencia de
volúmenes pequeños. Si la punta se ambos analistas al momento de utilizar las
sumerge demasiado, se aspirará más pipetas, además de las tecinas usadas y
líquido debido al aumento de la presión. aprendidas por ambos.
Si, por el contrario, la punta no se
2. ¿Utilizó dos pipetas diferentes
sumerge lo suficiente, se puede cargar
para medir el mismo volumen?
aire con las consiguientes burbujas y
¿Por ejemplo, 100 μL con un
volumen inadecuado.
P1000 y un P100? ¿Si es así, cual
Es posible que el valor de los resultados fue más exacto? Explique.
obtenidos sean tales diferencias entre si
Respuesta: en nuestro procedimiento se
porque al momento de pipetear los
nos fue asignada dos pipetas, una con
analistas cometieron errores desplazando
volumen fijo y otra con volumen variable
el ángulo de los tubos,
de 20uL sin embargo no se tomó otros
Sumergir la punta a una profundidad valores de volumen adicional con otras
adecuada puede mejorar la precisión. pipetas
Una gran variable a la hora de analizar 3. ¿Cuál pipeta y el volumen fue el más
nuestros resultados fue el uso de preciso? Explique.
decimales en la balanza analítica, la falta
4. ¿La precisión y exactitud variaron para
de experticia de los analistas al momento
la micropipeta de 1000 μL, dependiendo
de utilizar la balanza analítica causo un
del volumen tomado? Explique.
error grande ya que al eliminar dos cifras
significativas la precisión se hizo menor. 5. Liste al menos 3 errores que los
analistas pueden hacer al usar las
Cuestionario
micropipetas.
1. ¿Existe alguna diferencia en la
CONCLUSION
exactitud entre sus medidas y las
de su compañero de laboratorio? Es importante la calibración de las
¿Ha observado alguna diferencia micropipetas sobre la confiabilidad de los
en la precisión entre sus medidas análisis se debe a que un error analítico
y las de su compañero de puede ser ocasionado por este
laboratorio? Explique. instrumento afectando considerablemente
en muchos procedimientos de análisis de
Respuesta: Si existen diferencias entre las
muestras generando errores en el
medidas tomadas por ambos compañeros
procedimiento.
de laboratorio. Las tres primeras replicas
tomadas por el analista 1. Se ver reflejas
en la grafica donde sus valores son
constantes mientras que para las replicas
tomadas por el analista 2 se ve una
diferencia con respecto al primero.