Universidad de Córdoba

Facultad de Ciencias Básicas

Departamento de Biología

MANEJO DE MICROPIPETAS AUTOMÁTICAS Y PRECISIÓN DE SUS MEDIDAS.

HANDLING OF AUTOMATIC MICROPIPETS AND PRECISION OF YOUR
MEASURES.
Díaz Betin N; Hernández Quintero D; Pacheco Grandeth A*.
Universidad de Córdoba, Facultad de Ciencias Básicas, Departamento de Biología
E-mail: angelicagrandeth36@gmail.com*

RESUMEN
En biología molecular, la capacidad de medir y transferir pequeñas cantidades de sustancias
de forma precisa y reproducible es fundamental para obtener resultados útiles. Las
micropipetas son el instrumento adecuado para medir los volúmenes requeridos en orden de
microlitros. Al llevar a cabo esta práctica, se dieron las recomendaciones básicas y necesarias
para el uso y manejo adecuado de las micropipetas automáticas dentro del laboratorio de
biología molecular, ya que serán instrumentos frecuentemente utilizados en las prácticas de
laboratorio posteriores. Por lo tanto, se estudiaron las partes que componen la micropipeta, los
tipos de micropipetas que existen y su uso específico al tomar un cierto volumen.

PALABRAS CLAVE: Exactitud, microlitros, micropipeta, precisión, volumen.

ABSTRACT
In molecular biology, the ability to accurately and reproducibly measure and transfer small
amounts of fluid is critical to obtain useful results. The micropipettes are the appropriate
instrument to measure the volumes required in all the practices to be performed in the
molecular biology laboratory. By carrying out this practice, the necessary recommendations
for the appropriate use of micropipettes were given within the laboratory, this because they
will be instruments of frequent use in later laboratory practices. Therefore, the parts that make
up the micropipette were studied, the types of micropipettes that exist and their specific use
when taking a certain volume.

KEYWORDS: Accuracy, microliters, micropipette, precision, volume.

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INTRODUCCIÓN A continuación, repasaremos las nociones

En el campo de la biología molecular, el básicas a la hora de su manejo con el fin de
énfasis en los niveles celular y molecular garantizar la exactitud en las mediciones de
hace necesario trabajar con volúmenes las diferentes técnicas que se desarrollaran
pequeños y exactos. Para hacer esto es durante todo el curso.
imprescindible que nos familiaricemos con
un instrumento que sea capaz de medir y
transferir de manera exacta y reproducible
este tipo de volúmenes. (Fernández, 2014).
Este instrumento es conocido como
micropipeta (Fig. 1). Los volúmenes
captables por estos instrumentos varían
según el modelo: los más habituales,
denominados p20, p100 y p1000, admiten un
máximo de 20, 100 y 1000 μl,
respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas
permite emplear distintos líquidos sin tener
que lavar el aparato: para ello, se emplean
puntas desechables, de plástico, que Figura 1. Micropipeta y sus partes
habitualmente son estériles. Existen varios
tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas
para pipetear volúmenes pequeños (por DISEÑO METODOLÓGICO
ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear
volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl) MATERIALES:
(Salas, 1988).  Micropipeta de 0.5-10 µL
 Micropipeta de 10-100 µL
 Micropipeta de 100-1000 µL
 Tubos Eppendorf
 Puntas amarillas, azules y blancas
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 Beaker de 500 ml
 Balanza Analítica
METODOLOGÍA:
El protocolo que hay que seguir para medir
correctamente un volumen con una
micropipeta es el siguiente:
 Se selecciona la pipeta adecuada para
medir el volumen, de manera que esté
dentro del rango especificado para la
pipeta.
 Se fija el volumen deseado en la pipeta
mediante el giro del botón graduador, por
ejemplo 500 µl.
 Se coloca una punta desechable en la
zona de acoplamiento de la pipeta, en
este caso sería una de color azul. Se
asegura que esté bien sujeta ejerciendo
un ligero movimiento de torsión.
 Se presiona suavemente el émbolo con el
pulgar hasta el primer tope.
 Se introduce la punta de la micropipeta
en la muestra no más de 3 mm de la
superficie de líquido, manteniendo la
pipeta en posición vertical.
 Se succiona el líquido, relajando
suavemente la presión del dedo pulgar
sobre el émbolo, sin permitir que el
émbolo suba por sí solo. Se espera un par
de segundos con la punta introducida en
el líquido. Se retira la punta de la
muestra.
 Se introduce la punta de la pipeta en el
tubo adecuado, colocando la punta contra
la pared del tubo, sin sumergirla en la
solución y con la pipeta en posición
vertical.
 Se aprieta el émbolo lentamente hasta el
segundo tope para eliminar el posible
líquido que quede en la punta.
 Con el émbolo totalmente presionado se
retira cuidadosamente la pipeta,
deslizando la punta a lo largo de la pared
del tubo.
 Se relaja la presión del pulgar para que el
émbolo vuelva a la posición normal.
 Se elimina la punta por presión del
expulsor de puntas o tirando de ella, para
evitar contaminaciones.
 Precisión de las medidas tomadas con
micropipetas automáticas:
 Se llenó un Beaker con 400mL de
agua destilada a temperatura
ambiente.
 Se determinó la masa de un tubo
Eppendorf en una balanza analítica, y
se estableció como el peso inicial.
 Se transfirió con la micropipeta al
tubo Eppendorf 100 μL de agua
destilada, se tapó el tubo y se pesó en
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la balanza analítica. RESULTADOS
 Posteriormente se vacío el tubo y se Los resultados obtenidos de las mediciones
secó para hacer el mismo con micropipetas se presentan en la tabla 1.
procedimiento hasta llegar a 1000 μL
de agua en el tubo.

Tabla 1.
Volumen (μL) Wtubo (g) Wtubo+Wagua Wagua
0 0,8933 0,8933 0
100 0,8933 0,9791 0,0858
200 0,8933 1,0923 0,199
300 0,8933 1,1528 0,2595
400 0,8933 1,2669 0,3736
500 0,8933 1,4020 0,5088
600 0,8933 1,4653 0,572
700 0,8933 1,6070 0,7137
800 0,8933 1,6926 0,7993
900 0,8933 1,7835 0,8902
1000 0,8933 1,8941 1,0008
Media 1,38444545 0,50138889
Varianza 0,102607452 0,080808083
Desviación 0,335958624 0,325495261

Volumen vs Wtubo+Wagua
1200

1000

800
Volumen

600

400

200

0
0.89 0.98 10923 1.15 1.27 1.4 1.47 1.61 1.69 1.78 1.89
Wtubo+Wagua
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Volumen vs Wagua
1.2

0.8
Wagua

0.6

0.4

0.2

0
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000
VOLUMEN

Wagua

ANÁLISIS DE RESULTADOS Se describió el nombre y la funcionalidad de

cada una de las partes de la micropipeta.
De acuerdo a los datos que se obtuvieron y
posterior a las mediciones, se determinó la Se comprobó el grado de precisión y
media aritmética, la varianza y deviación exactitud que poseen las micropipetas
estándar. Estas medidas pueden arrojar mediante algunas mediciones.
características de precisión o exactitud. La
Se determinó la gran importancia de las
exactitud muestra que tan cercana esta la
micropipetas al momento de realizar
medición a su valor verdadero y determina el
mediciones de volúmenes en el laboratorio,
error, mientras que la precisión describe que
pues los volúmenes usados en las prácticas
tan cercanas están las mediciones están entre sí.
se expresan en unidades de microlitros y
Analizando los datos se puede afirmar, que el además en cantidades exactas.
peso obtenido del agua es directamente
El uso correcto de las micropipetas garantiza
proporcional al volumen tomado en microlitros
un buen proceso y por ende resultados con
de agua, es decir, a mayor volumen del agua
menor grado de error.
mayor será su peso tal y como se puede
evidenciar en las gráficas. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS.
1. Consulte los siguientes conceptos:
CONCLUSIONES
exactitud y precisión.
Se obtuvieron los conocimientos necesarios
Exactitud es la proximidad existente entre
para el manejo adecuado de micropipetas
un valor medido y un valor verdadero de
automáticas.
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un mensurando. Así pues, una medición es
más exacta cuanto más pequeño es el error
de medida.

Precisión es la proximidad existente entre

las indicaciones o los valores medidos
obtenidos en mediciones repetidas de un
mismo objeto, o de objetos similares, bajo
condiciones específicas. Estas condiciones
se denominan principalmente condiciones
de repetitividad, o de reproducibilidad, y
por tanto, frecuentemente, el término
precisión denota simplemente repetitividad,
es decir, está asociado a la dispersión de las
mediciones reiteradas, la cual es habitual
expresarla numéricamente mediante
medidas de dispersión tales como la
desviación típica, la varianza o el
coeficiente de variación

BIBLIOGRAFÍA

Fernández, A., Vera, O., & Cabrera, P. (2014).

Micropipeta Eppendorf automática Research
Pro.

 Salas, R., & Loría, A. (1988). Precisión y

exactitud de micropipetas automáticas.
Rev. invest. clín, 40(2), 207-10.