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MANEJO DE MICROPIPETAS AUTOMTICAS Y PRECISIN DE SUS

MEDIDAS
Anglica Villalobo lopez1, Ingri Gmez Ibez 2, Andrea Barn Vasquez3, Madeleissy
Prez Agudelo4 .

Universidad De Crdoba.
Facultad De Ciencias Bsicas.
Departamento De Biologa.
Montera, Crdoba.
RESUMEN
En esta prctica se implement el manejo apropiado de las Micropipetas, las cuales sern
utilizadas en muchos procesos dentro del laboratorio. De igual forma se estudiaron las
diferentes Micropipetas y su uso especfico a la hora de tomar volmenes.

INTRODUCCIN
Las Micropipetas son un instrumento de
laboratorio empleado para medir pequeos
volmenes de lquidos y permitir su manejo
en las distintas tcnicas cientficas. Los
volmenes captables por estos instrumentos
varan segn el modelo; En los laboratorios
de Biologa Molecular, el manejo del equipo
bsico es fundamental. Adems, se requiere del
conocimiento de las distintas unidades de
medicin, ya que dichos procedimientos se
utilizan a diario (Acero et al., 2011).
Las pipetas son una herramienta bsica en
cualquier laboratorio de investigacin en
el que se necesiten preparar disoluciones.
Con ellas podremos alicuotar distintos
rangos de volmenes sin cometer un error
excesivo. Son de especial inters para
volmenes pequeos (desde 0,1l a 5 ml)
ya que para mayores se dispone
actualmente de otro tipo de instrumental
como las probetas graduadas (Tortosa
2013).

En funcin del material de que estn


hechas, existen dos grandes tipos:

De cristal. Estas pueden ser tanto


de volumen fijo como variable.
Suelen tener gran precisin y
exactitud dependiendo del tipo de
cristal (tipo A, B). El lquido se
toma mediante un sistema de
succin manual. No necesitan
calibracin.

De plstico. Dentro de este grupo,


cabe
destacar
las
pipetas
automticas, las cuales se basan en
el uso de un pistn interno de
succin que variamos para
permitirnos tomar el volumen
deseado. Son ms ergonmicas que
las anteriores aunque necesitan
calibracin peridica (Tortosa
2013).

METODOLOGA
El protocolo que hay que seguir para
medir correctamente un volumen con una
micropipeta es el siguiente:
Se selecciona la pipeta adecuada para
medir el volumen, de manera que est
dentro del rango especificado para la
pipeta.
Se fija el volumen deseado en la pipeta
mediante el giro del mbolo. Por ejemplo
100 l.
Se coloca una punta desechable en el
vstago de la pipeta Se asegura que est
bien sujeta ejerciendo un ligero
movimiento de torsin.
Se presiona suavemente el mbolo con el
pulgar hasta el primer tope.
Se introduce la punta de la micropipeta en
la muestra no ms de 3 mm de la
superficie de lquido, manteniendo la
pipeta en posicin vertical
Se succiona el lquido, relajando
suavemente la presin del dedo pulgar
sobre el mbolo, sin permitir que el
mbolo suba por s solo. Se espera un par
de segundos con la punta introducida en
el lquido. Se retira la punta de la
muestra.
Se introduce la punta de la pipeta en el
tubo adecuado, colocando la punta contra
la pared del tubo, sin sumergirla en la
solucin.
Se aprieta el mbolo lentamente hasta el
primer tope.

Se espera un par de segundos y se aprieta


el mbolo hasta el segundo tope para
eliminar el posible lquido que quede en
la punta.
Con el mbolo totalmente presionado se
retira
cuidadosamente
la
pipeta,
deslizando la punta a lo largo de la pared
del tubo.
Se relaja la presin del pulgar para que el
mbolo vuelva a la posicin normal.
Se elimina la punta por presin del
expulsor de puntas o tirando de ella, para
evitar contaminaciones.
Precisin de las medidas tomadas con
Micropipetas automticas siguiendo las
siguientes instrucciones:
1. Llenar un Beaker con 400mL de agua
destilada a temperatura ambiente.
2. Determinar la masa de un tubo
Eppendorf en una balanza analtica, este
ser el peso inicial.
3. Transferir con la micropipeta al tubo
Eppendorf 100 L de agua destilada. Tapa
el tubo pselo y anote su masa.
4. Retire la tapa del tubo y adale 100
L ms de agua destilada, tpelo y
vulvalo a pesar. Anote este valor.
5. Repita este procedimiento hasta
completar 1000 L de agua en el tubo.
ANLISIS Y RESULTADOS:
En la prctica del uso y manejo de las
Micropipetas se aprendi la gran
importancia de estos al momento de
realizar procedimientos en el laboratorio,
ya que estas son necesarias en biologa
molecular. Por
ejemplo
en
las
extracciones de ADN en donde se
necesitan cantidades muy pequeas, en
micro litros generalmente, que no son

posibles con otros instrumentos y adems


cantidades exactas, que es uno de las
ventajas que bridan las Micropipetas ya
que tienen una medida estndar. El buen
uso de las Micropipetas garantiza un buen
proceso de medicin ya que al darle un
mal uso se pueden alterar los resultados.
Por ejemplo, al oprimir mal el embolo, al
no sumergir bien la punta de la
micropipeta se pueden generar burbujas
que posteriormente generara un error en
la medicin.
Los resultados del procedimiento se
encuentran en la siguiente tabla:
Volumen
(ul)

W(tubo
)g

W tubo
+W
agua g

W
agua g

0,8978

0,8978

100

0,8978

0,9943

0,0965

200

0,8978

1,0929

0,1951

300

0,8978

1,1972

0,2994

400

0,8978

1,2856

0,3878

500

0,8978

1,3427

0,4449

600

0,8978

1,4862

0,5884

700

0,8978

1,5927

0,6949

800

0,8978

1,6893

0,7915

900

0,8978

1,7959

0,8981

1000

0,8978

1,8941

0,9963

CLCULOS:
Media Aritmtica
= 1,3427
Varianza:
0,0998232
Desviacin estndar:
0,33104404
De acuerdo con los datos que se
obtuvieron al determinar el peso en
gramos del agua, se determin la media
aritmtica, la varianza y la desviacin
estndar, estas medidas pueden arrojar
caractersticas de precisin o exactitud.
La exactitud muestra que tan cercana esta
la medicin a su valor verdadero y
determina el error, y la precisin describe
que tan cercanos estn entre silos
resultados obtenidos exactamente.
Observando los datos se puede decir que
el peso obtenido del agua es directamente
proporcional al volumen tomado en
microlitros de agua, es decir, a mayor
volumen del agua mayor ser su peso que
es lo observado.
PRECISIN: el trmino precisin
describe la aproximacin de las
mediciones, es decir, que tan cercanos
estn entre si los resultados que se han
obtenido exactamente para describir la
precisin de una serie de datos repetidos
se utilizan: la desviacin estndar, la
varianza y el coeficiente de variacin.
Estos trminos son una funcin de
desviacin de los datos respecto a la
media.

EXACTITUD: El termino exactitud


indica que tan cercana esta la medicin de
su valor verdadero o aceptado, y se
expresa en trminos de error. Est
relacionada al valor central de una serie
de mediciones, el cual se determina
mediante la media o la mediana.
CONCLUSIN:
Despus de realizarse la prctica
podemos concluir que la micropipeta
es un instrumento de laboratorio
empleado para succionar y transferir
pequeos volmenes de lquidos, la
utilizacin
de
micropipetas
de
volumen fijo nos permitir tener un
mayor control dentro de los
volmenes exactos que se deben
tomar, los volmenes captables por
estas varan segn el modelo: las
utilizadas se encuentran en un rango
de 0.5, 10, 100 y hasta 1000 l,
respectivamente. Es destacable que
el uso de micropipetas permite
emplear distintos lquidos sin tener
que lavar estas porque para ello se
emplean puntas desechables, de
plstico, que habitualmente son
estriles. Existen varios tipos de
puntas dependiendo del volumen que

se desee tomar por tal razn se


podemos decir que las micropipetas
son muy tiles y necesarias para los
laboratorios de la biologa molecular.

BIBLIOGRAFIA

Acero P, Tarazona D, Vsquez


D.
Mediciones
con
mircropipetas 2011.

Kergaravat Vanessa, Macagno


Julio.
Tema
1.
Proceso
analtico General. Facultad de
Bioqumica
y
ciencias
Biolgicas. Escuela superior
de
sanidad
Dr-Ramon
Carrillo. Universidad Nacional
del Litoral.

Tortosa G. Caso prctico N1


calibracin de micropipetas
2013.

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