EXTRACCION DE CLOROFILA

Sugerencia: Antes de realizar cualquier experimento, lea con detenimiento la guía.

Objetivo
 Extraer clorofila a partir de hojas de espinaca
 Separar la clorofila mediante cromatografía en papel.

FUNDAMENTO TEORICO
El proceso de extracción se basa en la teoría de fuerzas intermoleculares y es
necesario que el solvente a emplear solubilice aquello que queramos extraer. Para
extraer la clorofila de las plantas es necesario emplear un solvente cuya fuerza
intermolecular sea similar a la fuerza intermolecular que prevalece en la propia
molécula de clorofila, es decir, “lo semejante disuelve lo semejante”.

La clorofila es una biomolécula extremadamente importante, crítica en la fotosíntesis,

proceso que permite a las plantas y algas producir energía a partir de la luz solar. Este
compuesto se encuentra presente en todas las plantas de color verde como por
ejemplo espinaca, perejil, etc.

Según sea el grupo “R”, la clorofila puede ser clorofila a o clorofila b. Aunque tanto la
clorofila a como la clorofila b absorben luz, la clorofila a tiene una función única y
crucial al convertir la energía de la luz en energía química. Todas las plantas
fotosintéticas, algas y cianobacterias contienen clorofila a, mientras que solo las
plantas y algas verdes contienen clorofila b, junto con algunos tipos de cianobacterias.
Para separar la clorofila de otros compuestos solubles existen varios métodos, uno de
ellos es la cromatografía. La cromatografía es un método físico de separación para la
caracterización de mezclas complejas, cuyo objetivo es, separar los distintos
componentes de una mezcla. Hay diferentes tipos en uso, incluyendo gas, líquido,
papel y la cromatografía de gel permeable. La fase estacionaria está constituida
simplemente por una tira de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo
colocando pequeñas gotas de la disolución y evaporando el disolvente. Luego el
disolvente empleado como fase móvil se hace ascender por capilaridad.

Materiales

1. Un mortero con pilón

2. Un embudo (de plástico, o la sección superior de una botella de policarbonato)
3. Un vaso o frasco contenedor mediano
4. Un plato tendido pequeño
5. Papel absorbente (papel toalla)
6. Papel bond
7. Papel Filtro para Café (SHURFINE N°19, se encuentran en Super Mercados), o
un trozo de tela de pantimedia (Nylon), o un pedazo de tela fina.
8. Una tijera

Reactivos

1. Alcohol etílico de 96º

2. Hojas de espinaca fresca

Precaución: Como se emplea alcohol en este experimento, evite realizar la

experiencia en lugares cerrados y cercanos al fuego, como la cocina.
PROCEDIMIENTO
1. Emplee 5 a 6 hojas de espinaca, lávelas correctamente para retirar cualquier
impureza como tierra y otras sustancias extrañas.

2. Retire los tallos de la espinaca de tal modo que se quede solo con las hojas. Con
la ayuda del mortero, triture las hojas de espinaca.

3. Observe como se va formando una pasta.

4. A la pasta anterior, agréguele alcohol etílico de 96º en cantidad suficiente, hasta

que quede algo húmeda. Siga triturando la muestra.

5. Filtre la mezcla con la ayuda del embudo y el filtro. Separe el líquido del sólido, de
modo tal que, el filtrado lo reciba en un frasco limpio y seco. El líquido (extracto),
debe ser de color verde.
6. En la tapa del frasco pegue una tira de papel toalla de tal modo que el extremo
libre toque ligeramente el líquido (extracto).

7. Espere aproximadamente 20 minutos para que las sustancias asciendan a través

del papel.

8. Retire la tira de papel, séquelo al ambiente y anote sus observaciones.

9. Si desea, repita el proceso empleando papel bond en lugar de papel toalla.

Cuestionario
1. Indique los tipos de fuerzas intermoleculares que existen.
2. Si no emplease alcohol etílico para realizar la extracción de la clorofila, ¿qué otro
solvente emplearía?
3. Señale propiedades fisicoquímicas de la clorofila a y b
4. Defina xantofilas y betacaroteno, ¿para qué sirven?
5. Señale los tipos de cromatografía que existen y explique brevemente cada uno de
ellos.

Presentable
Como parte de su evaluación, deberán:
 Identificar y señalar, en la tira de papel, qué sector contiene la clorofila a, la
clorofila b, los carotenos y las xantofilas.
 Un video que muestre la realización del experimento (explicándolo), y señalen
los compuestos identificados antes señalados.

Versión Fecha Elaborado por: Revisado por:

1.0 Mayo 2020 Nancy Fukuda Luis Lescano
1.1 Noviembre 2020 Nancy Fukuda