UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DEL CENTRO

Ingeniería en Biotecnología - Microbiología Avanzada

Evidencia de conocimiento Unidad 2: Técnicas de conservación de microorganismos de
interés biotecnológico. Cuatrimestre 4

Nombre alumno: _Antonio Armando Ruiz Vázquez____ Fecha: 14 de octubre 2021

I. Responde de acuerdo a lo que se solicite en la pregunta y favor de fundamentar su

respuesta.
1. Explica claramente los tipos de curvas de crecimiento, fundamenta sus fases y en
que se diferencian de acuerdo a la figura 3.3. Además, explica que diferencia tiene
este tipo de cultivo (figura 3.3) con un cultivo continúo (15 puntos).

R= Las curvas de crecimiento se dividen en 4 fases diferentes, la primera es la llamada fase

Logarítmica donde los microorganismos están adaptándose al medio fresco al que fueron
trasladados, una vez adaptadas tenemos la fase exponencial que se caracteriza por ser la fase
donde los microorganismos empiezan a reproducirse debido a la cantidad de nutrientes que hay
en el medio, posteriormente la fase estacionaria es donde los microorganismos controlan su
consumo de nutrimentos ya que estos no son infinitos y por lo tanto dejan de reproducirse para
finalmente llegara a la fase de muerte, donde ya no hay nutrimentos y las células comienzan a
morir y a liberar sustancias que resultan toxicas para las pocas que siguen vivas, por lo tanto
también mueren. Aunque en algunos casos las sustancias de las células muertas no resultan
toxicas, al contrario, resultan ser nutritivas y en una fase estacionaria tardía podemos observar
otro crecimiento exponencial, esto es a lo que conocemos como crecimiento Diauxico, donde al
empezar un fase de muerte obtenemos de nuevo una fase exponencial, y esto puede repetirse
varias veces más, todo depende del microorganismo.
 El tipo de cultivo de la imagen se diferencia de un cultivo continuo debido a la fase de
muerte, en un cultivo continuo el medio es renovado periódicamente, entonces nunca hay fase de
muerte. Por el contario el tipo de medio de la imagen es Batch, es decir que el medio no se
renueva, y por tanto SI hay fase de muerte.

2. La producción de un compuesto antimicrobiano expresado por Enterococcus faecium fue

evaluado (35 puntos).

-Que técnica utilizaron para estimar el número de células en diferentes horas. ---
R= Turbidimetria debido a que miden la densidad óptica de la muestra (OD).

-Fundamenta qué relación tiene la producción con la curva de crecimiento y el factor

fisicoquímico evaluado.
R= Durante la fase exponencial no se producen tantos compuestos, pero llega a un punto
donde dejan de reproducirse (fase estacionaria) y los compuestos que se están
produciendo se mantienen en su valor más alto de 6.25 AU/mL entre las 16-24 hrs.
También el pH aumenta a 4.5, por lo que tenemos una estabilidad tanto en el número de
células, la cantidad de sustancias que están expresando y el cambio de pH, este último
cambia debido a la actividad que está teniendo el compuesto antimicrobiano contra
Bacillus Cereus.

-Desarrolla los cálculos de acuerdo a la técnica utilizada a las 12 horas que tiene una
absorbancia de 1.4.
3. En la siguiente imagen realizaron una curva de crecimiento de Listeria monocystogenes de
forma individual y en combinación la cepa Lactobacillus plantarum BAL 60-1 por un lado y
por otro con la cepa Lactobacillus plantarum BAL 62-1 (40 puntos).
-¿Que tipo de técnica utilizaron para contar las células?,
R= Conteo en Placa

-¿Explica relación del crecimiento con el pH y porque se comporta el pH de esa forma?

R= Cuando se multiplican el pH comienza a bajar, cuando llegan a una fase estacionaria el
pH alcanza valores de 3.6-3.8 aprox. Por lo que el medio ahora es ácido, lo que comprendo
aquí es que están expresando sustancias que vuelven al medio ácido, talvez por la
competencia por sustrato, ya que la cepa control creció mucho más que los cocultivos.

-¿Explica cómo se comporta el crecimiento de la cepa control sola con los cocultivos?
R= La cepa control sola crece sin ningún problema hasta tener su fase estacionaria, hay
una gran diferencia entre la cepa control y los cocultivos, y es que el pH acido reduce la
reproducción de las bacterias por mucho en los cocultivos.

- Desarrolla los cálculos para los tiempos de generación y número de generaciones a las 12
horas para L. monocystogenes (1.2x107). El inóculo inicial es de 1x103.
R=
n= log N – log No / log 2
n= log 1.2x10^7 – log 1x10^3 / log 2
n= log 12, 000,000 – log 1000 / log 2
n= 7.079 – 3 / 0.30
n= 13.59 generaciones

G = t/n
G = 12 hrs / 13.59 generaciones
G= 0.88 hrs = 52.8 minutos que se tardaba en replicarse cada generación de
L.monocystogenes.
- Desarrolla los cálculos para los tiempos de generación y número de generaciones del
cocultivo con la cepa BAL 62-1 a las 8 horas (1.5x10 5). El inóculo inicial es de 1x104.

R=
n= log 1.5x10^5 – log 1x10^4 / log 2
n= log 150,000 – log 10,000 / log 2
n = 5.17 – 4 / 0.30
n= 3.9 = 4 generaciones

G= t/n
G= 8hrs / 4 generaciones = 2 hrs que tardaban en replicarse cada generación del cocultivo
con la cepa BAL 62-1.
 4. Fundamenta el tipo de crecimiento que observas en la siguiente imagen y porque ocurre
este tipo de curva (10 puntos).

R= Observo un crecimiento Diauxico debido a que después de la fase estacionaria deberíamos de

tener una fase de muerte, sin embargo se aprecia otra fase exponencial, por lo que podemos intuir
que las sustancias que eran depositadas en el medio por las células muertas, sirvieron de
nutrimento para las que aún seguían vivas, entonces volvieron a reproducirse dándonos esa forma
en la gráfica.