ESCUELA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

ICB 465 Ingeniería de Procesos de Fermentación

Fecha 20/08/2021

Ayudantía n°1 Crecimiento microbiano y medios de cultivo

1. En un laboratorio se desea cultivar un microorganismo y se conoce que su velocidad

específica de crecimiento (µ) en fase de crecimiento exponencial corresponde a 0,34 ℎ−1 .
Calcule:

a) El tiempo que demora el cultivo en duplicar su concentración de biomasa.

b) La concentración de biomasa obtenida si al momento de agotarse el sustrato limitante
han transcurrido 8 horas desde el inicio del cultivo y el inóculo utilizado fue de 0,5 g/L.

2. Un alumno en su práctica experimental dispone de un inóculo de 10 mL cuya concentración

de biomasa es de 3 g/L. Según el procedimiento, el alumno debe agregar el inóculo a un
matraz que ya cuenta con 240 mL de medio de cultivo. Al iniciar el cultivo la concentración
inicial de glucosa es de 10 g/L. Después de 5 horas de cultivo la concentración de glucosa es
de 4,04 g/L. Además, el tiempo de duplicación es de 1,25 ℎ−1 . Calcule:

a) La concentración de biomasa en el matraz al inicio del cultivo.

b) La velocidad específica de crecimiento máxima del microorganismo.
c) El rendimiento de glucosa en biomasa.
d) El tiempo de cultivo y la concentración de biomasa final si la concentración de sustrato
final es el 10% de la concentración de sustrato inicial.

3. En un laboratorio se realiza un cultivo de Escherichia coli y se obtienen los siguientes datos

experimentales para la concentración de biomasa y sustrato limitante

Tiempo X S
[h] [g/L] [g/L]
0 0,115 2,680
1 0,114 2,677
2 0,116 2,665
3 0,117 2,620
4 0,189 2,486
4,5 0,241 2,369
5 0,306 2,220
5,5 0,389 1,942
6 0,504 1,771
6,5 0,629 1,487
 7 0,889 0,865
7,5 1,016 0,607
8 1,242 0,094
8,5 1,284 0,000
9 1,283 0,000

A partir de los resultados del cultivo calcule o estime

a) Tiempo de latencia
b) µ𝑚á𝑥 (en ℎ−1 )
c) Tiempo de duplicación (en h).
d) 𝑌𝑥/𝑠

4. A un alumno en su práctica profesional se le ha encargado diseñar el medio de cultivo para

el estudio de un microorganismo aerobio. El supervisor le indica que, aproximadamente, el
microorganismo posee un 50% de C, 13% de N y 3% de P en peso seco. Además, los
nutrientes disponibles se presentan a continuación

Elemento Nutriente Fórmula Molecular PM [g/mol]

C Glucosa 𝐶6 𝐻12 𝑂6 180
N Cloruro de amonio 𝑁𝐻4 𝐶𝑙 53
P Fosfato de disodio 𝑁𝑎2 𝐻𝑃𝑂4 142

A partir de los datos entregados calcule:

a) El rendimiento 𝑌𝑥/𝑠 teórico de cada nutriente

b) La concentración mínima que debe agregarse de cada nutriente para producir 30 g/L de
biomasa
c) Si el alumno diseña un medio de cultivo con 35 g/L de glucosa, 10 g/L de cloruro de
amonio y 2,4 g/L de fosfato de disodio, ¿Cuánta biomasa podría producirse,
teóricamente?, ¿Cuál sería el sustrato limitante?