UNIVERSIDAD DE AMÉRICA

TALLER CINÉTICA CRECIMIENTO MICROBIANO

1. Para la producción de hormona de crecimiento porcina se utiliza Escherichia coli recombinante. La bacteria crece
en condiciones aerobias en fermentación batch, utilizando glucosa como sustrato limitante. La concentración de
biomasa y sustrato fueron medidas en función del tiempo, con los siguientes resultados:

Time(h) x (kg/m3) s (kg/m3)

0,00 0,20 25,0
0,33 0,21 24,8
0,50 0,22 24,8
0,75 0,32 24,6
1,00 0,47 24,3
1,50 1,00 23,3
2,00 2,10 20,7
2,50 4,42 15,7
2,80 6,90 10,2
3,00 9,40 5,2
3,10 10,90 1,65
3,20 11,60 0,2
3,50 11,70 0,0
3,70 11,60 0,0

a) Grafique la concentración de biomasa en función del tiempo y determine cada una de las fases de crecimiento
que describe el cultivo
b) Determine la velocidad específica de crecimiento máxima (µmax), el tiempo de duplicación y la constante de
afinidad por el sustrato (Descarte los datos que no correspondan a fase de crecimiento exponencial)
c) Grafique la velocidad de crecimiento en función del tiempo y analice.
d) Calcule el rendimiento observado Y’XS . Tome los deltas de sustrato y biomasa punto a punto

2. La enzima Glucosa isomerasa (causa la isomerización de la glucosa a fructosa) es ampliamente utilizada en la

producción de edulcorantes. Se conocen un gran número de bacterias que llevan a cabo la isomerización por
una glucosa fosfato isomerasa, sin embargo estos organismos no son utilizables industrialmente ya que sus
enzimas requieren arsénico para máxima actividad y el arsénico está prohibido en la industria de alimentos.
Con el fin de hallar cepas que no requieran el uso de arsénico, un grupo de investigación universitario realizó una
publicación con una levadura capaz de sintetizar Glucosa isomerasa paralelo a la formación de biomasa, sin el uso
de arsénico, llevando a cabo la fermentación con alimentación de oxígeno a muy bajas concentraciones, por 70 h,
20°C y pH 7. Los resultados del artículo son:
a) Basado en la información del artículo determine la velocidad máxima de crecimiento y el tiempo de
duplicación
 Time (h) X(kg/m3) Ln x
0 1,062 0,06015392
5 1,107 0,10165365
10 1,197 0,17981843
12 1,587 0,46184544
20 2,022 0,70408712
24 2,172 0,7756484
30 2,571 0,94429493
35 3,468 1,24357806
45 5,718 1,74361909
50 6,84 1,92278773
60 11,01 2,39880395
70 21,51 3,06851794

Determine µmáx:___________________ y td:_____________________________

3. La cepa Lactococcus lactis lactis produce Nisina (preservante en alimentos por sus propiedades bactericidas). Se
realiza un estudio experimental de la fermentación, utilizando como sustrato Sacarosa a una concentración 10g/L,
el seguimiento se realizó durante 24h, arrojando los siguientes resultados:
Nisina (UI unidades internacional de nisina /mL)

Time(h) Cell (gl-1) x Sugar (gl-1) s Nisin(IU ml-1) p

0 0,02 9,87 0
1 0,03 9,77 278
2 0,03 9,38 357
3 0,042 9,45 564
4 0,21 9,02 662
4,5 0,33 8,55 695
5 0,35 9,12 1213
5,5 0,38 8,09 1341
6 1,13 7,58 1546
6,5 1,95 6,24 1574
7 3,66 1,3 1693
7,5 4,09 1,14 1678
8 4,23 0,05 1793
8,5 4,07 0,02 1733
9 3,85 0,02 1567
9,5 2,66 0,015 1430
10 2,42 0,018 1390
11 2,03 0
12 1,54 0 1220
14 1,89 0 995
16 1,45 0
24 1,67 0 617
 • Grafique el comportamiento del sustrato(sugar), biomasa (cell) y nisina en el tiempo, en una misma gráfica. A
partir de ello analice
a) Cúal es la relación entre la nisina y la biomasa, que tipo de metabolito podría ser y por qué?
b) L.lactis produce acido láctico como producto de su metabolismo energético, por lo que el PH del medio puede
descender de forma significativa, incidiendo en el crecimiento de la biomasa. Muestran los datos alguna evidencia
de esto? Sustente su respuesta.
c) Son las 24h de fermentación suficientes para la producción de nisina? Sustente su respuesta
• Grafique en escala semilogarítmica la concentración de biomasa en el tiempo.
d) Experimenta el cultivo una fase lag o de latencia?, en caso de ser así, Cuál es la duración de esta?
e) Experimenta el cultivo una fase exponencial?, en caso de ser así, Cuál es la duración de esta?
f) Qué ecuación podría describir la producción de biomasa en función del tiempo durante la fase de crecimiento,
partiendo de una concentración inicial de biomasa?
g) Cuál sería la velocidad específica de crecimiento?
h) Cuál es el tiempo de duplicación?
i) Alcanza el cultivo la fase estacionaria?.
j) Cuáles son las condiciones que propician la fase estacionaria?

4. Se realiza una fermentación discontinua durante 28h,para la producción de un compuesto intracelular, el

microorganismo productor es una bacteria Gram negativa, que tiene como valores óptimos de crecimiento pH (3-
5), T° (50-60°C), agitación continua. Sin embargo con el fin de mejorar los rendimientos del proceso, se evalúan
tres concentraciones de Glucosa, obteniendo los siguientes parámetros:

Concentración Inicial de Parámetros Cinéticos

Glucosa (g/L) µmax(1/h) Ks(g/L) Yxs(g/g)
85 0,231 0,00263 0,0582
113 0,2696 0,00943 0,0493
156 0,2589 0,0071 0,0427

a) ¿Qué caracteriza a una fermentación discontinua?

b) Cuál de las concentraciones de glucosa seleccionaría para el bioproceso y por qué.
c) Clasifique el microorganismo según los factores de crecimiento y metabolismo.
d) Qué factores afectan el crecimiento y la velocidad especifica en una población microbiana.