QUÍMICA ANALÍTICA III

CONTENIDO: CROMATOGRFÍA DE ADSORCIÓN

NOTA IMPORTANTE:

 Adsorción: proceso en el cual átomos, iones o moléculas son atrapadas o retenidas en la superficie de un
material.
 Absorción: las partículas se disuelven en la fase estacionaria líquida.

FUNDAMENTO:

Consiste en hacer pasar una fase móvil a cierta presión, compuesta de solventes orgánicos muy apolares, que
intervendrá en la separación de los compuestos de la muestra, al pasar a través de una fase estacionaria adsorbente.

La retención de un compuesto viene controlada por la energía de adsorción sobre el sólido absorbente:

“A mayor energía de adsorción, mayor retención”

MECANISMOS DE SEPARACIÓN:

1. SEGÚN SNYDER:

Se basa en la competición de adsorciòn entre el soluto y el eluyente por los grupos activos de la fase estacionaria, que
es un sólido adsorbente.

2. SEGÚN SCOT:

Se basa en la formación de una doble capa de disolvente en la superficie del absorbente.

FASE ESTACIONARIA EN CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN:

Todas reúnen una propiedad común: “son adsorbentes”.

Las más utilizadas son:

1. LA SÍLICE:

Contiene grupos químicos denominados silanoles (Si-O-H) en sus respectivas superficies. Dependiendo de los
tratamientos térmicos que han sufrido, cambia la estructura de las superficies de los gránulos de sílice:

a. A partir de 200 °C se elimina el H2O adsorbida.

b. A partir de 450 °C se producen los grupos siloxanos eliminando el carácter polar de la estructura superficial del
gránulo de sílice.

Si−OH + Si−OH ↔ Si−O−Si

Existen 3 tipos de grupos silanoles enlazados a la superficie de la sílice:

 EN EL COMERCIO SE DISTINGUEN 2 TIPOS DE RELLENOS:

a. Totalmente poroso:

 Microporoso (diámetro : 10-30 A)

 Macroporoso: (diámetro: 1000-4000 A)

b. Peliculares porosos: consistían en un granulo de vidrio rodeado de una capa

2. LA ALÚMINA:

Los grupos activos son de dos tipos:

a. Unos son los grupos hidroxilos que se comportan en forma parecida al grupo silanol de la sílice.
b. Los átomos de aluminio se puede comportar como ácidos de Lewis y pueden interaccionar con regiones de
moléculas de densidad electrónica elevada.

Los hidrocarburos saturados son poco o nada adsorbidos, sin embargo, se puede aumentar su retención introduciendo:

a. Dobles enlaces en la molécula

b. Grupos o radicales polares.

La introducción de grupos o radicales varían la retención dependiendo de su polaridad, así la adsorción seria
descendente según el orden:

 COOH
 CONH2
 OH
 NHCOOCH3
 NH2
 OCOCH3
 N(CH3)2
 OCH3
 H
 Cl
La introducción de radicales orgánicos que están en la cercanía a los grupos funcionales disminuye la retención.

Una de las características muy importantes de la cromatografía de adsorción es la posibilidad de separar compuestos
isoméricos:

“Los isómeros cis son más retenidos que los de configuración trans”

APLICACIONES:

Se los utiliza principalmente para separar moléculas que se diferencian en los grupos activos, en su número o en su
naturaleza.

Cuanto más polar sea el analito, mayor es su retención en la fase estacionaria. Así también aumentando la polaridad de
la fase móvil se logra una menor retención, o disminuyéndola, una mayor retención.

Se han descrito separaciones de compuestos muy semejantes de gran interés biológico y toxicológico, tales como
ciertas micotoxinas, aflatoxinas, hidrocarburos saturados, vitaminas liposolubles, antidepresivos, etc…

CONTENIDO: CROMATOGRAFÍA DE PARTICIÓN LÍQUIDO- LÍQUIDO

FUNDAMENTO:

Resulta del reparto del soluto problema entre las dos fases, móvil y estacionaria. Puede utilizarse una fase estacionaria
líquida, dando lugar a un mecanismo parecido a una extracción líquido-líquido.

MECANISMOS DE UNIÓN DE FASE ESTACIONARIA AL SOPORTE INERTE:

a. POR ADSORCIÓN, MEDIANTE PROCESOS FÍSICO-QUÍMICOS:

En este caso, la fase estacionaria liquida se retiene sobre la superficie del soporte por adsorción física.

Una de las desventajas de este mecanismo es la pérdida de fase estacionaria por disolución en la fase móvil, lo que hace
necesario un periódico recubrimiento de las partículas del soporte.

b. POR UNIÓN QUÍMICA, MEDIANTE FASES LIGADAS:

La fase estacionaria se une químicamente a la superficie del soporte.

PRINCIPALES FASES ESTACIONARIAS QUÍMICAMENTE UNIDAS:

 Aminos
 Diamino
 Nitrilo
 Fenilo
 Diol
TIPOS DE CROMATOGRAFÍA DE PARTICIÓN LÍQUIDO-LÍQUIDO:

a. CROMATOGRAFÍA EN FASE NORMAL:

Cuando la separación se realiza con una fase estacionaria polar (amino, fenilo, nitrilo y diol) y fase móvil apolar. Se usa
para separar compuestos polares tales como carbohidratos, péptidos y ácido ascórbico.

Ejemplos:

Fase estacionaria: agua o trietilenglicol soportados sobre partículas de sílice o alúmina.

Fase móvil: hexano.

“El componente menos polar eluye primero”

b. CROMATOGRAFÍA EN FASE INVERSA:

Cuando la separación sucede con una fase estacionara apolar y fase móvil compuestas con mezclas de agua y solventes
muy polares como el metanol, acetonitrilo y el tetrahidrofurano.

Ejemplos:

Fase estacionaria: un hidrocarburo.

Fase móvil: agua, metanol o acetonitrilo.

“Los componentes más polares aparecen primero”

Este tipo de cromatografía se ha utilizado para separar fármacos y sus metabolitos, vitaminas liposolubles, lípidos,
esteroides, estrona, estriol, estradiol en orina, catecolaminas, etc...