“Año del Bicentenario del Perú: 200 años de Independencia”

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE INGENIERÍA
E. A. P. AGROINDUSTRIAL

TEMA: DETERMINACIÓN DE LA DEMANDA BIOQUÍMICA DE

OXÍGENO (DBO)
PRACTICA N°07
ASIGNATURA:
Tópicos en Ingeniería Ambiental

DOCENTE:

Ing. Guillermo Luis Rubio Alfaro

INTEGRANTES:

 Herrera Uchalin Tracy

 Luna Escalante William
 Fiestas Mariscal Stephanno
 Portal Candelario Andy
 Saavedra Zegarra Naomi
 Zevallos Sarmiento Dair
CICLO:
IX

NUEVO CHIMBOTE

2021
 I. INTRODUCCIÓN

La oxidación microbiana o mineralización de la materia orgánica es una de las

principales reacciones que ocurren en los cuerpos naturales de agua y constituye
una de las demandas de oxígeno, ejercida por los microorganismos heterotróficos,
que hay que cuantificar. Uno de los ensayos más importantes para determinar la
concentración de la materia orgánica de aguas residuales es el ensayo de DBO a
cinco días. Esencialmente, la DBO es una medida de la cantidad de oxígeno
utilizado por los microorganismos en la estabilización de la materia orgánica
biodegradable, en condiciones aeróbicas, en un periodo de cinco días a 20 °C. En
aguas residuales domésticas, el valor de la DBO a cinco días representa en
promedio un 65 a 70% del total de la materia orgánica oxidable. La DBO, como
todo ensayo biológico, requiere cuidado especial en su realización, así como
conocimiento de las características esenciales que deben cumplirse, con el fin de
obtener valores representativos confiables. El ensayo supone la medida de la
cantidad de oxígeno consumido por organismos vivos en la utilización de la
materia orgánica presente en un residuo; por tanto, es necesario garantizar que
durante todo el periodo de ensayo exista suficiente oxígeno disuelto para ser
utilizado por los organismos. Además, debe garantizarse que se suministran las
condiciones ambientales adecuadas para el desarrollo y trabajo de los
microorganismos, así que hay que proporcionar los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacterial, tales como N y P y eliminar cualquier sustancia toxica de la
muestra. Es también necesario que exista una población de organismos suficiente
en cantidad y en variedad de especies, llamada “Cepa” o “semilla”, durante la
realización del ensayo, para la degradación de la materia orgánica. (Navarro M.
2007).

II. OBJETIVOS

 Determinación de la demanda bioquímica de oxígeno en una

muestra de agua aplicando el método Respirométrico
III. FUNDAMENTO TEORICO

La DBO5 se define como la cantidad de oxígeno consumido en la oxidación

mediante oxidantes químicos, de los constituyentes orgánicos del agua. El grado
de oxidación dependerá del tipo de sustancias presentes, pH, temperatura, tiempo
de reacción, presencia de catalizador, etc. (Cisterna P, 1992)

La Demanda bioquímica de oxígeno, más conocida como DBO, es una medida

que se utiliza para conocer la fuerza contaminante de las aguas de desecho o aguas
residuales domésticas e industriales. Se define como la cantidad que requieren las
bacterias para estabilizar la materia orgánica biodegradable contenida en las aguas
de desecho bajo condiciones aerobias, se expresa en mg/l de oxígeno. La prueba
de la demanda bioquímica de oxígeno DBO de inició en Inglaterra y se conoció
primero como DBO5, el subíndice significa que la prueba se lleva a cabo durante
un periodo de incubación en 5 días, el cual se estableció con base en el hecho de
que la mayor parte de los ríos en Inglaterra toman días para llegar al océano.
(Norduzian M, 1984.)

La Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5) es una prueba usada para la

determinación de los requerimientos de oxígeno para la degradación bioquímica
de la materia orgánica en el agua municipal, industriales y en general aguas
residuales; su aplicación permite calcular los efectos de las descargas de los
efluentes domésticos e industriales sobre la calidad de las aguas de los cuerpos
receptores. Los datos de la prueba de la DBO se utilizan en ingeniería para diseñar
las plantas de aguas residuales. (Sánchez M, 1994).

La prueba de DBO es un procedimiento experimental, tipo bioensayo, que mide

el oxígeno requerido por los organismos en sus procesos metabólicos al consumir
la materia orgánica presente en las aguas residuales o naturales, las condiciones.
estándar del ensayo incluyen incubación en la oscuridad a 20°C por un tiempo
determinado, generalmente cinco días. Existen numerosos factores que afectan la
prueba de la DBO, entre ellos la relación de la materia orgánica suspendida, los
sólidos sediméntales, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o
reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas.
(Anónimo, 2010)

La DBO5 es la cantidad medida de oxígeno que requieren microorganismos

aclimatados para degradar biológicamente la materia orgánica del agua. La DBO5
es el parámetro más importante en el control de la contaminación, como una base
para estimar este dato se utiliza como una medida de la contaminación orgánica,
como base para estimar el oxígeno necesario para los procesos biológicos y como
un indicador del rendimiento de los procesos. Existen diversas variantes de la
determinación de DBO a los cinco días. ( Glynn y Heinke, 1999).

La oxidación bioquímica es un proceso lento cuya duración es en teoría infinita.

En un periodo de 5 días se completa la oxidación del 95 al 99% de la materia
carbonosa, y en los 5 días se alcanzan valores cercanos al 70-75%. Se asume la
temperatura de 20°C como un valor medio representativo de temperatura que se
da en los cursos de agua que circulan a baja velocidad en climas suaves, y es
fácilmente duplicada en una incubadora. Los resultados obtenidos a diferentes
temperaturas serán distintos debido a que las velocidades de las reacciones
bioquímicas son función de la temperatura. (Fernández G, 2013).

La Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO), es un parámetro que mide la

cantidad susceptible de ser consumida u oxidad por medios biológicos que
contiene una muestra líquida disuelta o en suspensión. Se utiliza para medir el
grado de la contaminación, normalmente se mide transcurridos cinco días de la
reacción (DBO5) y se expresa en miligramos de oxígeno diatómico por litro
(mgO2/L). El método de ensayo se basa en medir el oxígeno consumido por una
población microbiana en condiciones en las que se ha inhibido de los procesos
fotosintéticos de producción de oxígeno en condiciones que favorecen el
desarrollo de los microorganismos. La curva de consumo de oxígeno suele ser el
principio débil y después se eleva rápidamente hasta un máximo sostenido, bajo
la acción de la fase logarítmica de crecimiento de los microorganismos. Es un
método aplicable en aguas continentales (ríos, lagos o acuíferos), aguas negras,
aguas pluviales o agua de cualquier otra procedencia que pueda contener una
cantidad apreciable de materia orgánica. (Avecillas L, 2012).
IV. MATERIALES Y METODOS

4.1. MATERIALES Y REACTIVOS

4.1.1. Materiales y Equipos
 Botellas winkler de 300 mL
 Probeta en vidrio ó plástica de 100 mL
 Erlenmeyer de 250 mL
 Balones aforados de 1L clase A para la preparación de reactivos
 Pipeta graduada de 1 mL ó gotero plástico
 Bureta plástica de 10 mL ó Microbureta de 10 mL de capacidad
con tolerancia de 0.02 mL Clase A
4.1.2. Reactivos:
 Solución de sulfato manganoso. Disolver 480 g de MnSO4 .4H2O, 400 g
de MnSO4.2H2O, o 364 g de MnSO4 .H2O en agua destilada, filtrar y
diluir a 1 L. Cuando se adicione la solución de MnSO4 a una solución
acidificada de yoduro de potasio (KI), no debe producir color con el
indicador de almidón.
 Reactivo álcali-yoduro-azida.-
o Para muestras saturadas o sin saturar. Disolver 500 g de NaOH (o 700
g de KOH) y 135 g de NaI (o 150 g de KI) en agua destilada y diluir a
1 L. Agregar 10 g de NaN3 disuelto en 40 mL de agua destilada. Las
sales de potasio y de sodio pueden usarse alternadamente. Cuando se
diluya y acidifique, el reactivo no debe dar color con la solución de
almidón.
o Para muestras supersaturadas. Disolver 10 g de NaN3 en 500 mL de
agua destilada. Agregar 480 g de hidróxido de sodio (NaOH) y 750 g
de yoduro de sodio (NaI), y agitar hasta disolver. Puede presentarse
turbidez blanca debido al carbonato de sodio (Na2CO3), pero esto no
es perjudicial. PRECAUCIÓN: No acidificar esta solución porque se
pueden producir vapores tóxicos de ácido hidrazoico.
 Ácido sulfúrico, H2SO4, concentrado. 1 mL es equivalente a
aproximadamente 3 mL del reactivo de álcali-yoduro-azida.
 Solución de Almidón. Para preparar una solución acuosa, disuelva 2 g de
almidón soluble grado analítico y 0,2 g de ácido salicílico como
preservativo, en 100 mL de agua destilada caliente.
 Tiosulfato de sodio titulante estándar, 0.025N. Disuelva 6,205 g de
Na2S2O3.5H2O en agua destilada, agregar 1,5 mL de NaOH 6N o 0,4 g
de NaOH sólido y diluir a 1000 mL. Estandarizar con solución de biyodato
de potasio KH(IO3)2, ó si no hay biyodato estandarizar con solución de
yodato de potasio KIO3.
o Solución de yodato de potasio 0.025N: Disuelva 0.8917 g de yodato de
potasio KIO3 en agua destilada y diluya a 1000 mL.
o Solución de biyodato de potasio estándar, 0,0021 M. Disuelva 812,4 mg
de KH(IO3)2 en agua destilada y diluya a 1000 mL.
Estandarizar de la siguiente manera:
1) Si se va a estandarizar con biyodato de potasio, en un erlenmeyer
disuelva aproximadamente 2 g de KI, libre de yodato, con 100 a 150
mL de agua destilada, agregue 1 mL de H2SO4 6N o unas pocas
gotas de H2SO4 concentrado y 20,00 mL de solución estándar de
biyodato.
2) Diluya a 200 mL y titular con tiosulfato el yodo liberado, agregue
almidón cerca al punto final de la titulación, o sea cuando se alcance
un color pajizo tenue, al agregar el almidón se torna de color azul,
continúe con la titulación hasta incoloro. Anote el volumen gastado
de tiosulfato.
Si se va a estandarizar con yodato de potasio, en un erlenmeyer
disuelva aproximadamente 2 g de KI, libre de yodato, con 100 a 150
mL de agua destilada, agregue 1 mL de H2SO4 6N o unas pocas
gotas de H2SO4 concentrado y 20,00 mL de solución estándar de
yodato.
3) Diluya a 200 mL y titular con tiosulfato el yodo liberado, agregue
almidón cerca al punto final de la titulación, o sea cuando se alcance
un color pajizo tenue, al agregar el almidón se torna de color azul,
continúe con la titulación hasta incoloro. Anote el volumen gastado
de tiosulfato. Cuando las soluciones son equivalentes, se requieren
 20,00 mL de Na2S2O3 0,025 M, de lo contrario, ajustar la
concentración del Na2S2O3 a 0,025 M.

4.2.METODOLOGÍA:
1) Llene con muestra una botella winkler hasta que rebose y tápela
2) Destape la botella y agregue 1 mL ó 20 gotas de solución de MnSO4 (reactivo
1) a la muestra en la botella de DBO, seguido de 1 mL ó 20 gotas del reactivo
de álcali-yoduro-azida (reactivo 2); tape cuidadosamente para evitar burbujas
de aire y mezcle varias veces por inversión de la botella.
3) Cuando el precipitado se haya decantado hasta aproximadamente la mitad del
volumen de la botella, para dejar un sobrenadante claro sobre el floc de
hidróxido de manganeso, agregue 1,0 mL ó 20 gotas de H2SO4 concentrado
(reactivo 3), tape y mezcle varias veces por inversión de la botella, hasta
disolución completa, hasta aquí ya está fijado el oxígeno. Si no hay disolución
completa agregue exceso de ácido sulfúrico
4) Mida con una probeta 100 mL de la solución y trasváselos a un erlenmeyer de
250 mL
5) Purgue la bureta de 10 mL con una porción de tiosulfato de sodio (Na2S2O3)
0.025N; llene la bureta con tiosulfato de sodio hasta cero.
6) Titule con solución 0,025 M de Na2S2O3 (reactivo 4) agregándolo gota a gota
y agitando el erlenmeyer hasta obtener un color amarillo pajizo pálido; en ese
punto agregue de 3 a 5 gotas de solución de almidón (Reactivo No. 5) en donde
vira a color azul y continúe la titulación hasta la desaparición del color azul.
Este es el punto final de la titulación. Si el color azul reaparece no se debe
agregar más tiosulfato, ignore subsecuentes reapariciones del color.
7) Anote en el formato de campo TF0010 el volumen gastado de tiosulfato de
sodio, el volumen de alícuota que son 100 mL y la concentración del tiosulfato,
que generalmente es 0.025N.
V. RESULTADOS

Tabla 1
 En base a la Tabla 1, se toma el factor de acuerdo al volumen que se indica. De tal
forma que el DBO es el dato determinado por el factor.

Tabla 2

MUESTRA DÍA 1 DÍA 2 DÍA 3 DÍA 4 DÍA 5 FACTOR VOLUMEN DBO,

MG/L
E1 13 18 21 23 24 10 157 240
E2 9 12 16 17 12 2 360 24
E4 4 7 11 12 13 2 360 26
E6 5 9 12 13 14 2 360 28
E7 10 13 16 20 22 1 428 22

VI. DISCUSIONES

 Según GRAF (2021), el valor DBO5 indica la cantidad de oxígeno que las
bacterias y otros seres vivos minúsculos consumen durante 5 días a una
temperatura de 20°C en una muestra de agua para la degradación aeróbica de
las sustancias contenidas en el agua. El valor DBO es pues una medida
indirecta de la suma de todas las sustancias orgánicas biodegradables del agua.
El valor DBO indica la cantidad de oxígeno disuelto (mg/l) que se requiere
durante un tiempo determinado para la degradación biológica de las sustancias
orgánicas contenidas en el agua residual. Al ser las sustancias contenidas en
el agua residual degradadas en el cauce receptor por las bacterias allí
presentes, se elimina el oxígeno en parte o totalmente del agua. Cuando se
superan estos valores límite se puede provocar la muerte de los seres vivos
que respiran oxígeno (cangrejos, peces, etc.). Concordando con
 INDUANALISIS (2019); que menciona que la DBO es la demanda
bioquímica de oxígeno que tiene un agua. Que representa la cantidad de
oxígeno que los microorganismos, especialmente bacterias (aeróbicas o
anaeróbicas), hongos y plancton, consumen durante la degradación de las
sustancias orgánicas contenidas en la muestra. Se utiliza para medir el grado
de contaminación. La DBO es un proceso biológico y por lo tanto es delicado
y requiere mucho tiempo. Como el proceso de descomposición depende de la
temperatura, se realiza a 20ºC durante 5 días de manera estándar,
denominándose DBO5.

 Calderón F. (2007); menciona que el método respirométrico, se usa para la

determinación de la DBO5 se basa en medir el consumo de oxígeno, o la
producción de CO2, en una botella respirométrica. Este objetivo se logra entre
otras formas (Método Manométrico) midiendo la variación de la presión en la
botella, mediante un manómetro lo suficientemente sensible. Otros métodos
respirométricos propiamente dichos miden la producción de CO2 u otros gases
como Metano, Anhídrido Sulfhídrico, etc. dentro de la botella. Mientras que,
en el Método Clásico, para la determinación de la DBO5, se calcula la
diferencia entre el Oxígeno Disuelto en la muestra o en una dilución de la
misma, entre el día 0 y el día 5. Este método tiene muchas limitaciones, siendo
una de las principales la pequeña cantidad de oxígeno disponible en la
muestra.

VII. CONCLUSIONES
Se determinó la demanda bioquímica de oxígeno en las muestras de agua
aplicando el método Respirométrico, en el que se analizó la contaminación que
ocurre en este volumen de muestra a lo largo de 5 días en 5 muestras diferente y
para esto mediante la tabla de elección del volumen de muestra e inhibición de la
nitrificación se da lección al factor, que sirve para la tener los resultados de DBO5.
En este se puede apreciar cómo se reduce el DBO5 drásticamente del E1 de 240
mg/L de DBO al E2 de 24 mg/L de DBO, y que se mantiene en subidas y bajas
mínimas después de eso.

VIII. CUESTIONARIO
IX. CUESTIONARIO

1. ¿Existe algún grupo de datos que no sea fiable?, ¿por qué?, ¿se puede obtener
alguna información de ese grupo?
No, porque la DBO de un día en particular debe ser siempre mayor que el del día
anterior, y en la tabla se muestra ese comportamiento para todas las muestras

2. A estas muestras no se les añadió el inhibidor de nitrificación, por tanto, los

valores de DBO obtenidos, ¿deben ser mayores, menores o iguales que si se
hubiera añadido?
Los valores deberían ser iguales ya que la nitrificación toma su actividad aun desde el
8vo día, en cambio en la muestra de datos solo se tienen resultados hasta el día 5 donde
se pude tener de 65 a 80% del total de la materia orgánica, esto se observa el siguiente
grafico

3. Si comparamos los valores de DBO de las muestras con inhibidor y sin inhibidor,
¿qué información podemos obtener?

si se desea medir la DBO sin nitrificación, habrá que añadir un número determinado de
gotas del inhibidor de ésta.

Los resultados se reportan como DBO5 debido a que no se adiciona inhibidor de

nitrificación

Entre las muestras que requieren inhibición de la nitrificación, se incluyen, pero no son
las únicas los efluentes tratados biológicamente, las muestras sembradas con efluentes
tratados biológicamente y las aguas fluviales. Si la depleción de oxigeno del agua a
utilizar excede de 0.2 mg/L, se obtiene una muestra de agua satisfactoria mejorando la
purificación u obteniéndola de otra fuente. No se recomienda el almacenamiento del agua
de dilución cuando se va a determinar la DBO sin inhibir la nitrificación, ya que pueden
desarrollarse organismos nitrificantes durante ese tiempo.

4. Calcular el porcentaje de eliminación de la DBO por la siguiente expresión: (E1-

E7)/E7 x 100. Comparado con otros métodos de tratamiento de agua, por ejemplo,
lodos activados, ¿se obtiene una eliminación alta o baja de la DBO?

260 − 5
𝑥100 = 98.1%
260

280 − 5
𝑥100 = 98.2%
280

240 − 22
𝑥100 = 90.8%
240
La tecnología de tratamiento más utilizado son los lodos activados y los filtros
percoladores.
En la actualidad son muchas las modificaciones que se han realizado a estos procesos
que
son utilizados para hacer frente a los requerimientos específicos de cada tratamiento.
Asimismo, dentro de este grupo se incluyen a las lagunas de estabilización y lagunas
aireadas, así como el tratamiento biológico empleando oxígeno puro y el tratamiento
anaeróbico.
Los tratamientos biológicos de esta categoría tienen una eficiencia de remoción de la
DBO5 entre el 85% al 95%
Tabla N°: Procesos de Tratamiento Avanzado y Eficiencia de Remoción se detallan los
procesos de tratamiento avanzado más comunes y sus eficiencias de remoción que
logran obtenerse en ocho parámetros evaluados en el tratamiento de aguas residuales.

Tabla N°: Eficiencia de Remoción de los Sistemas de Tratamiento. se muestra las

eficiencias de remoción que brindan los de los diferentes procesos de tratamiento.

5. ¿Para qué se añaden 2 gotas de la disolución de KOH en la junta de goma de la

botella?
El CO2 producido por la actividad bacteriana es eliminado por adición en la junta de
goma de una disolución de KOH. Como resultado se produce una caída de la presión de
aire en el interior de la botella que es medido por el sensor y convertido en mg/L de
DBO.

6. ¿Cómo afectaría a la medida de la DBO la presencia de sustancias tóxicas en la

muestra?
Agentes tóxicos de la muestra pueden inhibir la actividad microbiana: en muestras con
pH extremo o con cloro, se neutraliza el primero, se suprime el segundo y se inocula
flora bacteriana nueva para garantizar la actividad microbiana, pero puede haber otros
agentes inhibidores desconocidos.

X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

AVECILLAS, L. (2012). Caracterización físico-quçimico del estero salado

entre el puente de la Avenida Kennedy y el puente 5 de junio efectuado en el
período Agosto Octubre 2012.
FERNÁNDEZ, G. (2013). Validación de los métodos de ensayo para DBO5,
en agua residuales, TPH, aceites vegetales y grasas en aguas residuales y
suelos. Quito: Universidad Central del Ecuador
Guayaquil: Facultad de Ingeniería Química - Universidad de Guayaquil.
Real Decreto 140/2003, de 7 de febrero, por el que se establecen los criterios
de la calidad del agua de consumo humano. Recuperado de:
http://www.boe.es

Ministerio de Producción. (2020). Protocolo para el Monitoreo de Efluentes

de los Establecimientos Industriales Pesqueros en Consumo Humano Directo
e Indirecto. Recuperado de SINIA:
https://sinia.minam.gob.pe/download/file/fid/67341

Navarro M. 2007. Demanda Bioquímica De Oxígeno 5 Días, Incubación Y

Electrometría. Recuperado de:
http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38155/Demanda+Bioqu%C3%
ADmica+de+Ox%C3%ADgeno..pdf/ca6e1594-4217-4aa3-9627-
d60e5c077dfa
NORDUZIAN, M. (1984). Demanda Bioquímica de Oxígeno, conceptos y
metodología. Series de Instituto de Ingeniería UNAM.