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INFORME DE RESULTADOS DE LA PRÁCTICA DE

LABORATORIO No 4
PROPIEDADES FÍSICAS Y CUANTIFICACIÓN DE
PROTEÍNAS
Fecha: 10/07/2021 Grupo: 1

Integrantes

Nombre Código

1. Salma Sofia Morales Alvarado 1002543409

2. Valentina Castaño Jimenez 1005021137
3. Catalina Loaiza Arias 1004682083
4. José David Acosta Sanabria 1088345596
5. Samantha Lucia Rios Velez 1004701037

I. Precipitación de Proteínas

1. Anexe imágenes de los resultados y describa los cambios observados en la solución de

clara de huevo en los tres tratamientos aplicados.
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Vaso 1: El alcohol reacciona con la albúmina una proteína que contiene el huevo y se encarga
de que la clara pase de estar de color transparente a blanco, mediante la desnaturalización.
Cuando las proteínas se desnaturalizan pierden parte de su estructura molecular y por eso su
aspecto cambia porque el huevo se va deshidratando, el agua sale de sus tejidos y el alcohol
entra.

Vaso 2: El ácido cítrico presente en el limón producen la desnaturalización de la proteína

llamada caseína, la transformación de esta provoca la precipitación de la proteína.

Vaso 3: La clara de huevo es incolora y soluble en agua en su estado normal, pero al aplicar
calor no se rompe la cadena de péptidos, pero cambia su forma y por lo tanto sus propiedades,
llegando a coagularse, ya que pierde su solubilidad.

2. Explique los cambios que ocasiona el pH, la temperatura y el alcohol en la estructura

terciaria de la proteína, responsables de la precipitación de la proteína albúmina
presente en la clara de huevo. Indique ¿En cuál de los casos anteriores la
desnaturalización de las proteínas es reversible? ¿por qué?

Temperatura: La clara de huevo al ser sometida a una alta temperatura rompe sus enlaces,
por ello se precipita y coagula. Este proceso de desnaturalización es irreversible, puesto que,
así vuelva la proteína a temperatura ambiente sus enlaces y estructura no se volverán a
conformar.

Alcohol etílico: Se observa en este caso que la proteína se coagula y precipita con mayor
velocidad que en el caso anterior, esto se debe a que el alcohol (polar) atrae el agua y
deshidrata la proteína. Esta desnaturalización es reversible porque se puede volver a hidratar
parcialmente la proteína al añadirle H2O.

Ácido cítrico (pH): Al añadir este ácido la proteína se precipita debido al cambio del pH.
Este proceso puede ser reversible, esto debido a que el pH posiblemente se podrá estabilizar y
así la proteína volverá a su estado normal.

3. Describa el papel del HCl presente en el jugo gástrico en el proceso digestión de las
proteínas ¿Cuál es la importancia de este proceso para la absorción de los aminoácidos
de la dieta?

El ácido clorhídrico es esencial para la digestión de las proteínas debido a que la enzima
encargada de la descomposición de estas solamente tiene la capacidad de descomponerlas en
presencia de un pH ácido.
La forma inactiva de esta enzima se le denomina pepsinógeno la cual al momento de entrar
en contacto con el HCl pasa a activarse y llamarse pepsina. Si el pepsinógeno no entra en
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contacto con el ácido clorhídrico este no se desplegará y por ende no habría presencia de
pepsina haciendo imposible la descomposición de proteínas en péptidos y aminoácidos.

4. ¿Qué importancia fisiológica tiene la coagulación sanguínea? ¿Qué proteínas participan

en este proceso? ¿Qué enfermedad se produce cuando se presenta deficiencia del
proceso de la coagulación sanguínea?

Los factores de la coagulación son proteínas de la sangre que tienen como principal función
evitar la pérdida de una cantidad excesiva de sangre. Este proceso se conoce como cascada de
la coagulación, en donde participan varias proteínas como:

El factor coagulante trombina, una proteína soluble que juega un papel central en la formación
de trombos. La trombina activa, transforma en fibrina el fibrinógeno que se encuentra diluido
en la sangre, esto forma una malla estable en donde células sanguíneas quedan atrapadas,
originando posteriormente un coágulo que sella el vaso sanguíneo.

La hemofilia es un trastorno de la coagulación, este se da por mutación de los genes que

generan instrucciones para producir las proteínas del factor de la coagulación. Estos genes se
localizan en el cromosoma X por lo que afecta sobre todo al género masculino.
Las personas con esta enfermedad tienden a sangrar mucho después de una lesión o un
accidente, además de tener sangrados internos en rodillas, tobillos y codos, o en los peores
casos cerebrales. Sin embargo, es controlable mediante inyecciones de componentes de la
sangre (regulares en los casos más graves), aprendiendo a identificar los sangrados internos y
evitando algunos tipos de deporte.
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II. Cuantificación de proteínas por métodos colorimétricos

1. Reporte el diagrama de flujo para la prueba de Biuret con una solución de proteínas de
la clara de huevo. Esquematiza los resultados positivos y negativos de la prueba.

2. Prueba de Biuret:
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A. Registre los valores de absorbancia a 540 nm de las muestras de la proteína estándar

aportados en la presentación de la práctica y grafíquelas como Absorbancia (densidad
óptica) vs concentración.

B. Concluya acerca de la relación entre la densidad óptica (o absorbancia) y la

concentración de las muestras de la proteína patrón.

En base a la ley de Lambert Beer, se observa que la absorbancia de la solución es

directamente proporcional a la concentración de proteína y a la longitud del paso de la luz.
Podemos notarlo por la obtención de una línea con puntos muy cercanos a formar una recta,
esto debido a su coeficiente de correlación de R2 = 0,97. Por lo anterior, concluimos que a
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medida que se aumenta la concentración de proteína, se intensifica el color y a su vez aumenta

la absorbancia debido a que las moléculas incrementan su complejidad.

3. Ubique la absorbancia de las muestras de albúmina (M1) y leche (M2) en la gráfica

estándar construida. Concluya acerca del contenido de proteínas de estos alimentos y su
importancia en la dieta.

Al interpolar los datos de las muestras M1 y M2 se demuestra su alto contenido proteico.

Tanto la albúmina en el huevo como la caseína en la leche, son proteínas de altos valores
biológicos y de gran valor nutricional, puesto que ayudan a fortalecer el sistema inmunitario,
al desarrollo muscular adecuado, a la reserva y regulación de nutrientes, a mantener la masa
muscular en procesos de pérdida de peso y contribuyen a la sensación de saciedad, entre otros.

4. Método de Bradford:
A.Registre los valores de absorbancia de las muestras evaluadas y grafíquelas como
densidad vs concentración.
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B. Describa y analice los resultados obtenidos. Ubique la absorbancia de muestra de

plasma (M1) y orina (M2) en la gráfica estándar construida. Concluya acerca de los
valores obtenidos de proteína para esta muestra.
En los niveles de proteína de la M1 se identifica que el plasma 165 µL/ml es decir 16.5
mg/dL se encuentra mucho más alto de lo normal (6.4 a 8.3 g/dL) lo que nos lleva a pensar en
enfermedades como Amiloidosis, deshidratación, Hepatitis B o C, VIH/sida, Mieloma
múltiple, etc.
Mientras que, en la muestra de orina (M2) hay un valor de 2.4 µL/ml es decir 0. 2 mg/dL son
normales ya que los niveles fisiológicos oscilan entre 0 y 8 mg/dL

5. ¿Cuál es la utilidad clínica de la determinación y cuantificación de proteínas

plasmáticas y de la orina? Explique.

La determinación y cuantificación de proteínas plasmáticas en sangre es fundamental en el

diagnóstico de patologías variadas asociadas a problemas hepáticos, por ejemplo: la
disminución de albúmina y gammaglobulinas corresponden a una hepatopatía crónica.

Además, problemas como la absorción de nutrientes y la presencia de anticuerpos

(inmunoglobulinas) se manifiestan también mediante cambios en la cantidad de proteínas.

En el caso de las proteínas de la orina su presencia puede absorberse a patologías en la

filtración de los riñones, ejemplo: nefritis y glomerulonefritis, hay causas secundarias como
diabetes mellitus o lupus. Asimismo, cada cuantificación de proteínas es una parte importante
del diagnóstico.
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CONSULTAS PREVIAS

1. Consulte cuales son los efectos de los alcoholes, compuestos orgánicos como acetona y
cloroformo, pH y calor en las estructuras terciaria y cuaternaria de una proteína.

Los disolventes orgánicos como el alcohol y la acetona actúan rompiendo las interacciones
hidrofóbicas internas de las estructuras de las proteínas, desorganizando su estructura terciaria,
generando así una precipitación.
● Los cambios de pH alteran la carga neta de la proteína dando lugar a la aparición de
repulsiones electrostáticas y a la destrucción de algunos enlaces de hidrógeno.
● El calor afecta las interacciones débiles principalmente los enlaces de hidrógeno,
afectando así la estabilidad de las estructuras de las proteínas.

2. Consulte cuál es la proteína presente en mayor cantidad en la clara de huevo. Indique

sus características (estructura terciaria, peso molecular, función).

La ovoalbúmina es la proteína presente en mayor cantidad en la clara de huevo, esta se

caracteriza por:
● Ser una proteína de alto valor biológico
● Ser una fosfoglucoproteína formada por una cadena de 385 aminoácidos
● Contener nueve aminoácidos esenciales
● Su fácil desnaturalización a altas temperaturas
● Masa molecular relativa de 45 kDa

Su función es atrapar los iones de los metales pesados, esto gracias a la presencia de las
uniones sulfhídricas de la proteína, con el propósito de prevenir el envenenamiento por la
absorción de estos metales en el tracto gastrointestinal.

3. Consulte los fundamentos de los métodos de cuantificación de Bradford y Biuret para

cuantificación de proteínas.

Biuret: se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu y los grupos Nj de los

enlaces peptídicos en medio básico. La intensidad de coloración es directamente proporcional
a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos).
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Bradford: Se basa en la unión del colorante Coomassie Blue G-250 (severa blue) a las
proteínas. El colorante existe en forma azul o naranja, es una solución ácida las proteínas se
unen a la forma azul para formar un complejo proteína-colorante.

4. Después de observar el siguiente video y complementar con una consulta y responde

¿Qué patologías se caracterizan por la pérdida de proteínas sanguíneas?

Enfermedad hepática: Enfermedades que impiden que el hígado funcione o evitan que
trabaje bien. El dolor abdominal, el color amarillo de la piel o los ojos (ictericia) o los
resultados anormales de las pruebas de la función hepática pueden sugerir el padecimiento de
alguna enfermedad hepática.

Anemia hemolítica: Es una afección en la cual el cuerpo no tiene suficientes glóbulos rojos
sanos. Los glóbulos rojos proporcionan el oxígeno a los tejidos del cuerpo. Normalmente, los
glóbulos rojos duran aproximadamente 120 días en el cuerpo. En la anemia hemolítica, los
glóbulos rojos en la sangre se destruyen antes de lo normal.

Megaloblástica: Es un tipo de anemia en el que la médula ósea produce glóbulos rojos

anormalmente grandes (en lugar de redondos o en forma de disco) con contenido interno poco
desarrollado (hemoglobina) y que tienden a no sobrevivir tanto tiempo como los glóbulos
rojos normales.

5. Consulte las proteínas que participan y los procesos ocurren durante la coagulación
sanguínea.

Cuando un vaso sanguíneo se lesiona, sus paredes se contraen para

limitar el flujo de sangre al área dañada. Entonces, pequeñas células
llamadas plaquetas se adhieren al sitio de la lesión y se distribuyen a
lo largo de la superficie del vaso sanguíneo.

El factor coagulante trombina, una proteína soluble que se

encuentra en la sangre, juega un papel central en la formación de
trombos. La trombina activa transforma en fibrina el fibrinógeno
que se encuentra diluido en la sangre, formándose una malla
estable. Las células sanguíneas quedan atrapadas en esta red,
originando un coágulo que sella el vaso sanguíneo.

6. ¿Qué significado clínico tiene el aumento o la disminución de

proteínas en plasma y orina?
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● Aumento: la hiperproteinemia es la concentración elevada de alguna (albúmina o

globulina) de las proteínas plasmáticas. Cuando el incremento se debe a una
hemoconcentración (Aumento en el número de hematíes) provocada por una
deshidratación; si se incrementa de las síntesis de globulinas se puede deber a: estados de
defensa contra agentes infecciosos, en procesos inflamatorios crónicos, en patologías
inmunomediadas como la artritis reumatoidea o el Lupus eritematoso sistémico, o como
resultado de una vacunación. Si el aumento es en la orina podría indicar un daño en los
riñones.
● Disminución: la hipoproteinemia es una afección en la que hay un nivel anormalmente
bajo de proteínas en la sangre. Puede ser causada por: desnutrición como es el
Kwashiorkor , la Malabsorción, enfermedad hepática (menos síntesis), enfermedad renal
como síndrome nefrótico (proteínas perdidas en la orina) y/o Sepsis (infección de todo el
cuerpo): los macrófagos activados en el hígado y el bazo secretan TNF-alfa al torrente
sanguíneo, lo que produce hipoproteinemia.
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7. ¿Qué cantidad de proteínas se presentan en el plasma?
El plasma está conformado por:
- 90 % de agua
- 7 % de proteínas
- 3 % restante por grasa, glucosa, vitaminas, hormonas, oxígeno, dióxido de carbono y
nitrógeno, además de productos de desecho del metabolismo como el ácido úrico.

8. ¿Cuál es la función de las diferentes proteínas plasmáticas?

● Prealbúmina: Su función principal es participar en el transporte hormonal

(principalmente de las hormonas T3 y T4 y de vitamina A).
● Albúmina: Es la proteína plasmática más abundante, posee diversas funciones tales
como mantener la presión oncótica (impide que líquido de la sangre se filtre hacia los
tejidos) del sistema circulatorio, control del pH, es también transportadora de
hormonas, fármacos, etc.
● Alfa 1-Glicoproteína ácida y Alfa 1-Antitripsina: Son dos proteínas asociadas a la
respuesta inmune. La primera responde a inflamación y daño de tejidos, la segunda
protege de daño a los pulmones y el hígado ya que inhibe proteasas lesivas para los
epitelios anteriormente mencionados.
● Alfa 2- Macroglobulina: Su función es inactivar la trombina y otros factores de
coagulación. Es esencial para evitar la formación de coágulos sanguíneos.
● Ceruloplasmina. Proteína que contiene cobre y cumple con una función doble:
oxidante de hierro y antioxidante general.
● Transferrina: Es un transportador específico de hierro y también regula su absorción.
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● Beta 2-Microglobulina: Es una proteína perteneciente a los antígenos de

histocompatibilidad, es decir, está implicada en el reconocimiento intracelular. Se halla
presente en la superficie de la mayoría de células nucleadas, sangre y orina.
● Proteína C reactiva: Esta proteína induce la actividad fagocitica, está asociada a la
inflamación y la necrosis.
● Inmunoglobulinas: Conjunto de proteínas relacionadas a la respuesta inmune
adaptativa. Son específicas de antígeno.
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9. ¿Cuál es el efecto en la concentración de proteínas plasmáticas, de la escasez de
proteínas en la dieta? ¿Por qué?

Las proteínas plasmáticas ayudan a determinar la distribución del líquido entre la sangre y los
tejidos, por ello si la concentración disminuye por una desnutrición o alguna otra afección, el
líquido podría acumularse en tejidos extravasculares provocando edemas y otras
problemáticas clínicas.

BIBLIOGRAFÍA
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U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES (2008). El aparato digestivo y

su funcionamiento. Recuperado de: https://www.niddk.nih.gov/-/media/Files/Enfermedades-
Digestivas/yrdd_sp_508.pdf

La hemofilia, una enfermedad genética que impide la buena coagulación de la sangre. (2015).
Faros HSJBCN. https://faros.hsjdbcn.org/es/articulo/hemofilia-enfermedad-genetica-impide-
buena-coagulacion-sangre

Fernández, E., & Cejudo, A. (n.d.). 27. Métodos para la cuantificación de proteínas.
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/27%20METODOS%20PARA%20LA
%20CUANTIFICACION%20DE%20PROTEINAS.pdf

Boehringer Ingelheim. (2018). Boehringer-Ingelheim.mx. https://www.boehringer-

ingelheim.mx/areas-terapeuticas/enfermedad-cardiovascular/procesos-de-la-coagulacion

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