UNIVERSIDAD

NACIONAL
AUTONÓMA DE
ASESORA: M en A MARISOL
GANDARILLAS ORTIZ DE

Enterobact
er cloacae
PÉREZ VALERIO EDER
ALEJANDRO
1651
EQUIPO 11
 INTRODUCCIÓN
Una de las tareas fundamentales del laboratorio de microbiología es la aplicación de una metodología
precisa que permita la identificación de los microorganismos implicados en procesos clínicos asociados a
infecciones o de aquellos que tienen relación con el hombre. Con el objetivo de identificar el agente
etiológico responsable del proceso infeccioso y para conocer las implicaciones patogénicas/patológicas, la
evolución clínica, y aplicar una terapia antimicrobiana eficaz, un pilar fundamental en la práctica de la
microbiología clínica lo constituye la asignación de especie a un aislamiento microbiano
Las pruebas bioquímicas permiten determinar las características metabólicas de las bacterias objeto de
identificación. Algunas de estas pruebas son técnicas rápidas, ya que evalúan la presencia de una enzima
preformada y su lectura varía entre unos segundos hasta unas pocas horas.
en general, se trata de reacciones enzimáticas cromo génicas o pruebas convencionales modificadas (hay
discos o tabletas comercializados con substratos criogénicos para uso individualizado).

CARACTERISTICAS
FISIOLOGICAS
El Enterobacter cloacare es una bacteria que pertenece al género Enterobacter, son anaerobias
facultativas de la familia de las Enterobacteriaceae. Es un bacilo Gram negativo , Oxidasa negativo y
Catalasa positivo presente (como microbiota local) en el aparato digestivo humano
El género Enterobacter, así como las demás enterobacterias, son fermentadoras de la glucosa. Estos
fermentan la lactosa por lo tanto se observan como colonias rosadas en Agar MacConkey, son lisinas
negativas, es decir, no descarboxilan ni desaminan la Lisina; son Ornitina descarboxilasa positivos y
fermentan la Arginina y el SorbitolLas bacterias del género Enterobacter son bacilos gramnegativos
pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, ampliamente distribuidos en la naturaleza. Se les puede
Patología:
encontrar en el suelo, agua y como parte del microbiota de animales, insectos y tracto gastrointestinal
humano. Fue descrito en 1890 como Bacillus cloacae, sufriendo varios cambios taxonómicos hasta ser
En las infecciones sistémicas se desarrollan anticuerpos específicos, pero es dudoso que se desarrolle
nombrado como E. cloacae por Hormaeche y Edwards en 1960. La relación dentro de este complejo se
inmunidad significativa a estos microorganismos.
establece a partir de la hibridación ADN-ADN de genomas completos, pruebas bioquímicas y por la
Se le encuentra en infecciones del aparato urinario, cistitis y pielonefritis, por su producción de ureasa
secuenciación del 16S ARNr y del gen hsp60.
hidrolizan con rapidez la urea con liberación de amonio, la orina se vuelve alcalina, promueve la
formación de cálculos y es casi imposible acidificar la orina, la rápida motilidad de proteus puede
contribuir a su capacidad para invadir el aparato urinario y produce bacteriemia, neumonía e infecciones
focales, enteritis(especialmente en niños), abscesos hepáticos, meningitis, otitis media. Es un frecuente
invasor secundario de quemaduras y heridas.
Proteus. Bacterias Gramnegativo, normalmente no fermentan lactosa por razón de no tener una β
galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI ("Triple Azúcar de
Hierro"). Son oxidasa-negativas y ureasa-positivas. No esporulados ni capsulados y son productoras de
fenilalanina desaminasa. Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan positivos con la
prueba del indol.
 TINCIÓN DE
GRAM
Las bacterias son microorganismos unicelulares que conviven habitualmente con el ser humano. En
muchos casos forman parte de nuestra flora habitual y la de nuestro entorno sin ocasionar ningún
peligro para la salud. En otras situaciones, las bacterias pueden ser patógenas, es decir, producen
infecciones de diversos tipos: cutáneas, abdominales, óseas, etc.
Para poder identificarlas y tratarlas es necesario clasificarlas. Las diferentes clasificaciones
atienden a diversos criterios y características bacterianas: morfología, metabolismo, presencia de
pared celular, etc.
Una de las maneras de diferenciar a las bacterias es en base a la presencia de una pared celular. Así,
hay bacterias con una pared gruesa (formada por peptidoglicanos) y otras con una pared mucho más
delgada.

La tinción de Gram es un tipo de tinción que se realiza sobre las bacterias para observarlas mejor
bajo el microscopio. Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve, se
tiñen de una forma u otra. Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se denominan Gram
negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas de peptidoglicano y una
segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram), al microscopio aparecen incoloras.

¿Cómo hacer la tinción?

 Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo
(bastón estéril de algodón).
 Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
 Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
 Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y
esperar un minuto.
 Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de
genciana (lugol). El lugol y el violeta de genciana forman un complejo
insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de las células
bacterianas.
 Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona
durante unos segundos.
 Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o
fucsina para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el
microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar
con agua.
 Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se
visualizarán de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo
las gram negativas.
 LA TINCIÓN DE
FLAGELOS DE LEIFSON
Los flagelos, largos y finos apéndices de las células bacterianas que les permiten moverse, son tan
delgados que resultan invisibles al microscopio óptico, si no se realiza una técnica especial para su
tinción. Los distintos métodos de tinción utilizan combinaciones de mordientes y metales para
engrosar los flagelos, así como colorantes para teñirlos. La tinción de flagelos de Leifson se realiza
según la siguiente técnica, Esta tinción permite determinar el número y la disposición de los flagelos
de las bacterias, lo que constituye una información esencial para la identificación de muchas
especies. La tinción de flagelos es un arte que se adquiere sólo con la práctica.

¿Cómo hacer la tinción?

 Se fija químicamente la suspensión bacteriana, mediante formol, y se
hace la extensión en un portaobjetos.
 Se deja secar al aire, sin calentamiento alguno.
 Se cubre la preparación con una mezcla de ácido tánico y el colorante
rosanilina, de preparación extemporánea. El ácido tánico engruesa los
flagelos y la rosanilina los tiñe.
 Se retira el exceso de colorante con agua.
Por último, se deja secar al aire, antes de su observación al
microscopio. 
 ENFERMEDADES QUE PUEDE
OCASIONAR
Ardor o dolor al orinar la sensación de tener que orinar aún cuando en realidad no sale orina o solo sale un
poquito, dolor en la parte inferior del abdomen, dolor por encima del hueso púbico (en las mujeres), una
sensación de tener el recto lleno (en los hombres), orina sanguinolenta o con mal olor, fiebre leve, una
sensación general de temblor y fatiga. Toda infección suele producir fiebre, dolor y malestar general.
Si la infección llega a la sangre (bacteriemia), puede producirse un shock y niveles bajos de tensión
arterial, por lo que suelen administrarse líquidos intravenosos tales como el suero salino fisiológico, una
solución con una concentración del 0'9% en cloruro de sodio (ClNa) o el suero glucosalino (glucosa al 2'5% y
cloruro de sodio al 0'45%).
Enterobacter cloacae es un microorganismo ubicuo en la naturaleza que forma parte de la flora intestinal
en humanos, y en los últimos años se ha convertido en un importante patógeno asociado a infecciones de
origen nosocomial, principalmente bacteriemia, infección respiratoria, del tracto urinario y abdominal

CARACTERISTICAS
MORFOLOGICAS
En los laboratorios clínicos el cultivo se realiza en medios habituales como agar sangre o agar MacConkey y la
identificación del complejo se puede hacer por pruebas bioquímicas convencionales. Son cepas no
pigmentadas, la mayoría de las veces móviles, catalasa positiva, oxidasa y ADNasa negativas, fermentan la
glucosa, reducen los nitritos, reacción de indol negativa, decarboxilan la ornitina, no decarboxilan la lisina y
son citrato y ureasa positiva. Sin embargo, la identificación de especies dentro del complejo es difícil y
requiere pruebas adicionales, como la hidrólisis de esculina, fermentación de la sacarosa, dulcitol y D-
sorbitol, y producción de putrescina, entre otras. Los métodos automatizados son capaces de distinguir E.
cloacae y E. asburiae, pero no las otras especies.

Medio no selectivo: El agar sangre constituyen

ejemplos de medios de cultivo complejos no
selectivos que facilitan el crecimiento de muy
diversas bacterias. El propósito de estos medios es
cultivar tantas especies como sea posible y generar,
de esta manera, numerosos tipos de colonias
bacterianas.

Medios diferenciales
Al cultivarse, algunas bacterias producen pigmentos
característicos y otras se distinguen con base en la
producción de enzimas extracelulares; la actividad de
estas enzimas puede identificarse como zonas claras
alrededor de las colonias cultivadas en presencia de
sustratos insolubles Muchos de los miembros de
Enterobacteriaceae se distinguen por su potencial para
metabolizar lactosa.
 PRUEBAS BIOQUIMICAS A
REALIZAR
PRUEBA FUNDAMENTO RESULTADO
INDOL La reacción al indol prueba la capacidad Negativa
del microorganismo de producir indol, un
benzopirrol derivado del triptófano. El
indol se detecta por la formación de un
color rojizo después de la adición de un
reactivo de benzaldehído. La prueba
puede realizarse en segundos si se
utilizan colonias.
REDUCCIÓN DE NITRATOS nitratos. Las bacterias pueden Positiva
ocasionar reducción de nitratos por
varios mecanismos. Esta capacidad se
demuestra con la
detección de nitratos o con la formación
de gas nitrógeno en el proceso.
DESCARBOXILASAS Y AMINASAS La descarboxilación o desaminación de Descarboxilan la ornitina/No
los aminoácidos lisina, ornitina y arginina descarboxila la lisina
se detecta por el efecto de los
productos amino sobre el pH de la
mezcla de reacción o por la formación
de productos coloreados. Las pruebas
se utilizan principalmente con
bacilos gramnegativos.
PRUEBA DE CITRATO Esta prueba sirve para determinar si Positiva
un organismo es capaz de utilizar
citrato como única fuente de carbono y
compuestos amoniacales como
FERMENTACIÓN DE SACAROSA Producción de ácidos a partir de la Positivo
fermentación y puede existir una
acumulación de gases
LACTOSA Esta prueba se usa para diferenciar Positiva
entre las enterobacterias en general y
el grupo de los
coliformes. Se trata por tanto de una
prueba de gran importancia debido a
que los coliformes se utilizan como
organismos indicadores de
contaminación fecal en análisis,
sobre todo, de aguas.
UREASA La ureasa hidroliza la urea y produce Positiva
dos moléculas de amoniaco y una
molécula de CO2 Esta reacción puede
detectarse
por el incremento del pH del medio de
cultivo causado por la producción de
amoniaco. Las especies positivas para
ureasa varían en la cantidad de
enzima producida; las bacterias pueden
designarse, entonces, como positivas,
débilmente positivas o negativas.

Tabla 1.- Pruebas bioquímicas

 ANÁLISIS DE RESULTADOS

Las bacterias del género Enterobacter son bacilos gramnegativos esto es por su estructura
didérmica ya que presenta doble membrana celular y esto nos da una idea en que este tipo de
bacterias donde en su parte exterior comprende un complejo de lipopolisacáridos, actúa como
endotoxina que es la responsable de darle la capacidad patógena a la bacteria y esta misma
capa externa protege a las bacterias de varios antibióticos. también nos indica que son
anaerobias facultativas esto quiere decir que pueden crecer con o sin presencia de oxigeno
porque pueden metabolizar la energía de forma aeróbica o anaeróbica y es por eso que sin
presencia de oxigeno esta bacteria puede fermentar.

Por lo general este tipo de bacterias puede realizarse en agar sangre y en agar MacConkey.
esto porque en el primero es un medio no selectivo y aporta muchos factores de
enriquecimiento para este tipo de bacterias, y en el agar MacConkey que es un medio selectivo
es porque este agar nos permitirá aislar los gram negativos e inhibir el crecimiento de las gram
positivas.

Es una bacteria oxidasa positiva y esto se debe a que la reacción de oxidasa es por la presencia
de sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo que es reducido por el
oxígeno molecular. Otra de las características principales de nuestra bacteria es que posee
flagelos y es por eso que también se puede realizar por la tinción de flagelos.

El genero de esta especie se caracteriza por ser fermentadoras de carbohidratos en

condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas y oxidadores de una amplia gama de
substratos en condiciones aeróbicas (como lo podemos ver en la tabla de pruebas bioquímicas)

CONCLUSIÓN

El Enterobacter cloacare es una bacteria que pertenece al género Enterobacter, son

anaerobias facultativas de la familia de las Enterobacteriaceae. Es un bacilo Gram negativo ,
Oxidasa negativo y Catalasa positivo presente (como microbiota local) en el aparato digestivo
humano.
El género Enterobacter, así como las demás enterobacterias, son fermentadoras de la glucosa.
Estos fermentan la lactosa por lo tanto se observan como colonias rosadas en Agar MacConkey,
son lisinas negativas, es decir, no descarboxilan ni desaminan la Lisina; son Ornitina
descarboxilasa positivos y fermentan la Arginina y el SorbitolLas bacterias del
género Enterobacter son bacilos gramnegativos pertenecientes a la
familia Enterobacteriaceae, ampliamente distribuidos en la naturaleza.
 REFERENCIAS
 Jean, F. Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica. Tercera edición. Buenos
Aires: Editorial médica panamericana; 2003. 
 Facultad de Química. Pruebas bioquímicas [Internet]. Universidad Nacional Autónoma de México. [Consultado 26
de noviembre de 2020]. Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U3c_PruebasBioquimicas_17461.PDF 
 Bailón, L. Atlas de pruebas bioquímicas para identificar bacterias. UNAM: Facultad de Estudios Superiores
Zaragoza; 2003. [Consultado 26 de noviembre de 2020]. Disponible en:
https://microbitos.files.wordpress.com/2010/06/atlasmicrobiologia1.pdf 
 Laboratorios Britania S.A. Simmons Citrato Agar. [Internet]. Britania. Buenos Aires. Argentina. [Consultado 28 de
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https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a29779bd2be8.pdf
 Laboratorios Britania S.A. Fenilalanina Agar. [Internet]. Britania. Buenos Aires. Argentina. [Consultado 28 de
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https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5a2824e447e10.pdf
 Laboratorios Britania S.A. Hugh-Leifson. [Internet]. Britania. Buenos Aires. Argentina. [Consultado 28 de
noviembre de 2020]. Disponible en: https://www.britanialab.com/home