UNIVERSIDAD DE CUNDINAMARCA
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
PROGRAMA ACADÉMICO INGENIERÍA AMBIENTAL
INFORME DE LABORATORIO MICROBIOLOGIA 2021
IDENTIFICACIÓN DE PATÓGENOS
BACTERIANOS
Acevedo, N. F., Bustos, B. S., Hernández, L. D. G., Muñoz, L.
M., Sánchez, L. F1 Vargas, S. B.2
Resumen
Es importante recordar que la finalidad de la realización
de este laboratorio es el conocimiento de la existencia
de microbios infecciosos en muestras de pacientes
donde se lleva al hallazgo de su fuente y ruta de
transmisión, llevando a cabo el manejo cotidiano de las
infecciones, en el cual cada módulo tiene diferentes
muestras e interpretamos cada resultado identificándolo
de manera precisa, consistente y rápida a los
microorganismos presentes en las muestras,
observando así como las bacterias grampositivas se
tiñen de violeta y las gramnegativas de rosa en la tinción
de gram, el reconocimiento de los estreptococos siendo
catalasa negativa y los estafilococos catalasa positiva,
analizando por los cambios de color las especies
patógenas de Neisseria y distinguiéndolas de Neisseria
comensal y l estrechamente relacionada Moraxella
Catarrhalis, ayudando a la determinación de los
diferentes microorganismos bacterianos presentes en
las muestras de pacientes.
Introducción
Se realizó el laboratorio virtual e interactivo
enfocado en la identificación bacteriana a
través de diferentes métodos, obteniendo un
mayor efecto en el aprendizaje, analizando el
diagnóstico de patógenos infecciosos. La
tinción de Gram es un método utilizado Para
detectar el tipo de microorganismos bien sean
bacterias u hongos en una muestra obtenida
de la zona en la cual se sospecha que existe
una infección, otras técnicas como la planta de
rache, métodos por el cual se obtiene una
cepa pura, la caracterización de los
microorganismos y la susceptibilidad
microbiana fueron las técnicas aplicadas en los
laboratorios.
Metodología
La tinción de Gram:
En este laboratorio tenemos un cultivo de E.
coli y staph Aurens, tomamos el portaobjetos
con la muestra de estas bacterias y agregamos
3 reactivos de esta manera, Tenemos el cristal
Violeta y ponemos esta disolución sobre el
portaobjetos dejamos actuar 1 minuto y
enjuagamos con agua, luego tomamos el yodo
dejamos un minuto actuar y enjuagamos con
agua, el siguiente paso es tomar el alcohol el
cual lo dejamos más tiempo debido a sus
características y enjuagamos con agua ya para
finalizar ponemos la safranina al portaobjetos
dejándolo 1 minuto para posterior enjuagar con
agua para posteriormente dejarlo bajo el
1 desechable tomamos el microorganismo de la
Estudiantes programa académico de Ingeniería Ambiental, Universidad de
Cundinamarca, seccional Girardot.
2
Docente tiempo completo, programa académico de Ingeniería Ambiental
Universidad de Cundinamarca seccional Girardot.
microscopio y analizamos las diferentes
tonalidades Indicando el azul a una gram
positiva y el rosado a una gram negativa.
Técnica de placa de racha:
Para este laboratorio necesitamos un Asa
metálica y un mechero primero esterilizamos el
Asa y dejamos enfriar para no quemar los
microorganismos, tomamos las células
escogiendo las más aisladas del cultivo que se
encuentran en la primera caja de Petri y la
pasamos a la segunda caja de Petri la cual
está vacía haciendo una siembra de las células
que fueron tomados, esparcimos en zic Zac en
los diferentes cuadrantes y esperamos en la
incubadora durante 24 horas a una
temperatura de 37° grados más o menos y
observamos La idea es identificar la célula
viable.
Técnica de placa de racha:
Para este laboratorio necesitamos un Asa
metálica y un mechero primero esterilizamos el
Asa y dejamos enfriar para no quemar los
microorganismos, tomamos las células
escogiendo las más aisladas del cultivo que se
encuentran en la primera caja de Petri y la
pasamos a la segunda caja de Petri la cual
está vacía haciendo una siembra de las células
que fueron tomados, esparcimos en zic Zac en
los diferentes cuadrantes y esperamos en la
incubadora durante 24 horas a una
temperatura de 37° grados más o menos y
observamos La idea es identificar la célula
viable.
Prueba de Catalasa:
Horas de laboratorio tomamos un portaobjetos
en el cual depositamos una gota de peróxido
de hidrógeno luego con el palo estéril
escogemos una célula aislada entre la colonia
y depositamos la bacteria estaré cupos
biogénesis dentro de la muestra de H2O2
observamos la reacción si se forman burbujas
H esta indicaría que es positiva luego tomamos
la otra muestra de la otra bacteria y repetimos
el proceso.
Catalasa:
Horas de laboratorio tomamos un portaobjetos
en el cual depositamos una gota de peróxido
de hidrógeno luego con el palo estéril
escogemos una célula aislada entre la colonia
y depositamos la bacteria estaré cupos
biogénesis dentro de la muestra de H2O2
observamos la reacción si se forman burbujas
H esta indicaría que es positiva luego tomamos
la otra muestra de la otra bacteria y repetimos
el proceso.
Coagulasa:
Para este laboratorio empezaremos agregando
agua en el portaobjetos luego con el aza
Colonia y agregamos plasma de conejo,
suavemente movemos el portaobjetos tratando
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de mezclar todo durante 15 segundos y

observar la reacción de coagulación se repite
el proceso para la otra bacteria.
Oxidasa:
Para este laboratorio tenemos un reactivo en
un plato de 4 pozos que nos indica si la
bacteria es positiva para oxidasa tomamos un
aza desechable luego de la caja de Petri de la
bacteria tomamos la muestra y la pasamos por Obtención de un cultivo puro a partir de la
uno de los pozos si esta cambia de color muestra de una colonia de un cultivo
indicaría que es oxidasa y así sucesivamente bacteriano.
con las bacterias faltantes a identificar.
Prueba rápido de estreptococos: Prueba de Catalasa:
En este laboratorio utilizaremos un tubo de
ensayo el cual pondremos dentro del caset y
agregaremos específicamente 4 gotas del
reactivo A y del reactivo B, mezclamos con el
hisopo desechable, tapamos agregamos 2
gotas dentro del caset el cual nos interpretara
la prueba.
Aglutinación látex:
Para este laboratorio tenemos 5 reactivos de Resultado del primer cultivo debido a la
anticuerpos con látex, los disponemos en una reacción de burbujeo que produjo es
plantilla con espacios entre reactivos y le Staphylococcus Aureus Catalasa positiva.
agregamos una gota de control ABC,
balanceamos durante 15 segundos el
portaobjetos y analizamos las aglutinaciones
presentes, luego tomamos otra plantilla y
volvemos a poner los 5 reactivos a cada
muestra una ponemos control FG y
analizamos.
Gonocheck test II:
Para este laboratorio utilizaremos un AZA
metálica previamente esterilizada, cogemos la Resultado del segundo cultivo ya que no
primera Colonia, llevamos esa muestra a un presento reacción es Streptococcus Pyogenes
tubo de reacción lo cerramos con la tapa Catalasa negativa.
blanca esperamos 15 segundos y si no
reacciona cerramos con la tapa roja y Prueba de Coagulasa:
mezclamos así repetimos el proceso con las
diferentes colonias.

Resultados y discusión
La tinción de Gram:

La primera muestra dio como resultado que es

Staph. Epidermidis Coagulasa negativa debido
Identificación de bacteria E. Coli y Staph. a que presento solubilidad.
Aurens, observando Gram-positivas (tinciones
de color púrpura oscuro) y Gram-negativas
(tinciones de rosa).

Técnica de placa de racha:

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Prueba de Aglutinación de Látex:

La segunda muestra arrojo como resultado que

era Staph. Aureus Coagulase positiva debido a
que se convirtió en fibrina insoluble.

Prueba de Oxidasa:
El reactivo látex A, B, y C dieron positivo
gracias al control ABC y el F y G negativo.

La primera muestra dio que era Neisseria

Gonorrhoeae oxidasa positiva porque oxido el El reactivo látex F y G dieron positivo gracias
reactivo de prueba cambiando de color, la al control FG y el A, B Y C negativo.
segunda muestra dio resultado de Burkholderia
Cenocepacia oxidasa positiva porque oxido el
reactivo de prueba cambiando de color, la
tercera muestra dio el resultado de
Enterobacter Aerogenes oxidasa negativa
debido que el reactivo de prueba no presento
oxidación.

Prueba rápida de estreptococo A

El reactivo látex C dio positivo en estreptococo
c y los reactivos A, B, F y G dieron negativo.

El 1 caset dio negativo para estreptococo A ya

que el indicado salió en negativo.
EL reactivo B estreptococo S. Agalactiae
positivo y los reactivos A, C, F y G negativos.

Prueba Gonocheck II:

El 2 caset dio positivo para estreptococo A

por que el indicador se mostró positivo.
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gulase.html
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cultivo N. meningitidis, el tercero es N. Bacteriology Laboratory. (2021). Retrieved 15
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Conclusiones idstrep.html
Latex Agglutination Test - Virtual Interactive
Es indispensable la esterilización de los Bacteriology Laboratory. (2021). Retrieved 15
utensilios del laboratorio a la hora de trabajar March 2021,
con cultivos bacterianos, ser muy cuidados al from https://learn.chm.msu.edu/vibl/content/late
momento de deshacerse de los residuos xaglu.html
producidos en el laboratorio de manera Gonochek-II Test - Virtual Interactive
correcta haciendo uso del guardián y de la Bacteriology Laboratory. (2021). Retrieved 15
caneca de desechos peligrosos. March 2021,
from https://learn.chm.msu.edu/vibl/content/go
Cuando las bacterias se extienden o se nochek.html
separan, se puede identificar el patógeno de la
enfermedad bacteriana. Anexos
Las diferentes pruebas ayudan a diferenciar la
producción de enzimas de las bacterias
dependiendo sin son gram positivas o gram
negativas, y así conocer su metabolismo
aerobio, anaerobio o sin son facultativas.

Se pueden observar como las bacterias

grampositivas y gramnegativas se tiñen de
forma distinta ya que sus paredes celulares
son diferentes, las grampositivas que son las
bacterias que se tiñen de Violeta debido a la
Ejemplos de otras muestras de bacterias
tinción de Gram. Esta propiedad química está
analizadas por la tinción de Gram.
estrechamente relacionada con la estructura
de la envoltura celular, lo que refleja el tipo
natural de tejido bacteriano. Son la categoría
principal de bacterias. las bacterias
grampositivas están compuestas por un 90%
de peptidoglicano, que es el principal
componente que las distingue de la pared y las
bacterias gramnegativas, pues al teñirlas,
gracias al grosor que aporta, puede mantener
el cristal morado o llegar a teñir rosa. Prueba de oxidasa a tres cultivos de bacteria.

La coagulasa es una proteína producida por

una variedad de microorganismos que permite
que el fibrinógeno se convierta en fibrina. En el
laboratorio, se utilizó para distinguir diferentes
tipos de estafilococos negativos.

Bibliografía
Catalase Test - Virtual Interactive Bacteriology
Laboratory. (2021). Retrieved 15 March 2021,