Tampón bicarbonato

Tal y como se ha comentado anteriormente, el tampón bicarbonato está compuesto

por ácido carbónico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-) y el valor de su pKa es de 6,1. Es
el tampón más importante de la sangre (pH=7,4), representa el 75 % de la capacidad
buffer total de la sangre. También está presente en el líquido intersticial. Es un tampón
muy eficaz porque la relación HCO3-/ H2CO3 es muy alta, lo que supone una alta
capacidad para amortiguar los ácidos. Supone una ventaja el hecho que se trata de un
sistema abierto ya que el CO2 puede ser eliminado en la respiración muy rápidamente,
los H+ se pueden eliminar por vía renal y el HCO3- puede reemplazarse en la orina.
En realidad, este tampón está compuesto por dos equilibrios, pues el ácido carbónico
forma CO2, generando una molécula de H2O.
Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los protones libres. Así, el equilibrio se
desplaza hacia el H2CO3, que a su vez, mediante la reacción catalizada por la
anhidrasa carbónica (glóbulos rojos), cede una molécula de H2O y se convierte en
CO2, el cual se elimina a través de los pulmones. Por el contrario, si el pH de la sangre
aumenta, se forma HCO3- a partir de H2CO3, lo que conduce a mayor captación de
CO2. Las concentraciones de HCO3- y de H+ también se pueden controlar por
mecanismos fisiológicos a nivel renal. El riñón puede eliminar protones uniéndolos a
amoníacos o fosfatos y mantiene la concentración de bicarbonato mediante
reabsorción o regeneración del mismo.
La suma de las formas sal y ácido se llama reserva alcalina. En condiciones normales,
esta suma tiene el valor 25,2 mEq de CO2 por litro. Como a pH sanguíneo (pH=7,4), la
proporción entre la forma sal y ácido es de 20, resulta que [HCO 3-] es 24 mEq/L y
[CO2] es 1,2 mEq/L.
Así, es importante tener en cuenta que el cuerpo necesita más bicarbonato que no
ácido carbónico porque el metabolismo produce más ácidos que bases.
El principal Tampón

Sistema del tampón bicarbonato es clave en la regulación del pH en la sangre humana

y puede responder a los cambios de pH de varias formas:

1. El ion bicarbonato es realmente la base conjugada del ácido carbónico:

H+ + HCO3-   [H2CO3] ; pKa = 6,14

[Reacción ácido-base no enzimática, prácticamente instantánea]

2. El ácido carbónico, sin embargo, es rápidamente convertido en CO 2 y agua por

la anhidrasa carbónica, lo que hace de él una especie transitoria:
 [H2CO3]   CO2 + H2O ; pKa = 6,14 
[Reacción enzimática con muy alta velocidad]

3. En relación a los dos productos de la reacción de la anhidrasa carbónica, el

agua es fácilmente absorbida por el sistema, mientras que el CO 2 se puede
eliminar mediante la respiración. Además, la tasa de eliminación del CO 2 en la
respiración está controlada a través de mecanismos neurológicos.
4. La [HCO3-] y la [H+] pueden ser controladas (lenta e incompletamente) por
mecanismos fisiológicos a nivel renal.

Tampón fosfato
 Se trata de un tampón inorgánico que se encuentra en los líquidos intracelulares y
mantiene el pH en torno al 6,86 debido al equilibrio existente entre un ácido débil; el
dihidrógeno fosfato (DHP) y su base: el monohidrógeno fosfato (MHP). Ambos
compuestos mantienen un equilibrio entre sí, pudiendo el DHP liberar un protón y
transformarse en MHP, (la reacción se desplaza hacia la derecha), y el MHP puede
unirse a un protón para originar una molécula de DHP, (la reacción se desplaza hacia
la izquierda). H2PO4-    ? HPO4-2 + H+ 
Es decir, a pH fisiológico, las especies del fosfato con capacidad de tamponar son
H2PO4- y  HPO4-2 ya que su valor de pK es de 6,8.
Así pues, para el tampón fosfato:
                pH = 6,8 + log HPO4-2 / H2PO4-  
A pH fisiológico de 7,4 la concentración de HPO4-2 (un 80%) es 4 veces superior a la
de H2PO4- (un 20%). Así pues, el tampón fosfato es un sistema muy eficaz para
amortiguar ácidos.
La concentración de fosfato en la sangre es baja (2 mEq/L) por lo que tiene escasa
capacidad de tamponar si lo comparamos con otros tampones como el bicarbonato.
En cambio, a nivel intracelular, las concentraciones de fosfato son elevadas lo que le
convierte en un tampón eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de las
células corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depósito grande y eficaz
para amortiguar el pH. 

Uso y Aplicación Es uno de los buffers más utilizados porque es isotónico y no tóxico
para las células. Se utiliza para diluir sustancias utilizadas para el cultivo y para lavar
los recipientes que contienen células.1
El PBS se emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica el perfil de
expresión y funcionamiento celular normal. El uso de esta solución es muy común
para lavar células a través de centrifugación. El PBS puede emplearse como diluyente
para métodos de desecación de biomoléculas, ya que las moléculas de agua
presentes en el PBS se adhieren alrededor de la biomolécula y permiten inmovilizarla
a una superficie sólida.2 Esta monocapa de agua evita que la biomolécula sea
desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el proceso de
desecación.
Tampón hemoglobina
La hemoglobina es una proteína globular multimérica que dispone de cuatro puntos de
unión a ligandos cuyas propiedades de unión están reguladas alostéricamente. La
función principal de la hemoglobina es el transporte de oxígeno por la sangre.
Referente a su estructura, se trata de un heterotetrámero y consta de dos pares de
cadenas polipeptídicas diferentes. Cada una de las cadenas lleva un hemo como
grupo prostético, donde se unen las moléculas de O 2, por lo que una hemoglobina
puede unir como máximo cuatro moléculas de O 2.
La captación de O2 se ve afectada, entre otros factores, por los H+ y el CO 2. Algunos
factores favorecen el estado T, en el cual la proteína no tiene O 2 unidos, y otros
favorecen el estado R, en el cual la hemoglobina tiene unidas moléculas de O 2. Este
fenómeno se denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre
las distintas afinidades para el O2; la cual es esencial para que cumpla su función de
transporte.
Cuando el CO2 forma ácido carbónico y protones, los protones estabilizan el estado T,
de descarga de O2. Así, en los capilares periféricos, dónde encontramos CO 2, la
hemoglobina cede las moléculas de O2. En los capilares de los alvéolos pulmonares
se invierte este efecto.
Así, cuando se unen H+ a la hemoglobina, se produce un efecto en el equilibrio del
tampón bicarbonato ya que se induce a la formación de bicarbonato.
Es un tampón fisiológico muy eficiente gracias al cambio de su pK cuando pasa de la
forma oxidada (pK=7,16) a la reducida (pK= 7,71) y a la gran cantidad que hay en la
sangre.
Aminoácidos y proteínas
Los aminoácidos tienen carácter anfótero, es decir, pueden ceder protones y también
captarlos. Esto es así gracias a dos de los radicales comunes en todos los
aminoácidos: el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos radicales, al estar en contacto con
el agua, se presentan ionizados o protonados; actuando los dos como donantes o
aceptores de protones.
En pH ácidos:
 El NH2 capta un protón: NH3+ (el pka para este radical es 9)
En pH básicos:

 El COOH pierde un protón: COO- (el pKa para este radical es 2)

En el punto de pKa del grupo amino existe el 50 % de radicales amino protonados
(NH3+) y el otro 50 % de radicales amino desprotonados (NH2). En este punto, la
variación de pH, si adicionamos NaOH a la solución, es mínima. Por lo tanto, en este
punto la capacidad amortiguadora es máxima.
En el punto de pKa para el grupo carboxil existe el 50 % de radicales carboxil
protonados (COOH) y el otro 50 % de radicales carboxil desprotonados (COO-). En
este nivel de pH el aminoácido también es buen amortiguador.
En el punto isoeléctrico de los aminoácidos sin cadena radical ácida o básica se
encuentra a medio camino entre el pKa del grupo amino y el pKa del grupo carboxil. Y
encontramos el aminoácido en su forma zwitterión, com ambos grupos funcionales
ionizados: NH3+ y COO-.
El punto isoeléctrico de los aminoácidos con cadenas protonables es diferente ya que
existe un tercer pka, que corresponde al valor de pH en el cual el protón de la cadena
lateral se disocia.
Así, vemos como esta capacidad para captar y ceder protones convierte a las
proteínas y aminoácidos en amortiguadores del pH, actuando como ácidos si están
protonados, o como bases, si no lo están.
Muchas proteínas tienen grupos protonables en la cadena radical variable, así cada
proteína o aminoácido tiene su punto isoeléctrico y sus pKa característicos para cada
grupo protonable del radical variable.
Los pKa pueden verse afectados por radicales próximos y así, puede variar calidad
amortiguadora de los aminoácidos según radicales de su entorno. Por ejemplo, la
histidina, próxima al grupo hemo en la hemoglobina, tiene pK muy diferentes según si
está unida al oxígeno o no.
Cuando los aminoácidos se unen formando péptidos mediante enlaces entre el grupo
COOH de un aminoácido y el grupo NH2 de otro, desaparecen sus propiedades
amortiguadoras. Ahora bien, siempre existen los grupos terminales y también los
grupos ionizables de las cadenas laterales de los aminoácidos: ácido aspártico y
glutámico, arginina, lisina, histidina, etc. Así, para determinar su capacidad
amortiguadora, solamente observaremos los pK de los terminales y de los laterales
ionizables.
Valores

 Presión parcial de oxígeno (PaO2): 75 - 100 mmHg

 Presión parcial de dióxido de carbono (PaCO 2): 38 - 42 mmHg
 pH de sangre arterial de 7.38 - 7.42
 Saturación de oxígeno (SaO2): 94 - 100%
 Bicarbonato (HCO3): 22 - 28 mEq/L