Espectroscopía de absorción molecular.

Espectrofotometría visible
Caicedo, K.1; Lara, I. 2.; Llivisaca, C.3.; Montenegro, V.4.; Pinta, C.5.; Remache, A.6.

1: Universidad Central del Ecuador, Facultad de Ciencias Químicas, Laboratorio de Química Analítica Instrumental

Resumen

La espectrofotometría de absorción en las regiones ultravioleta y visible del espectro electromagnético es,
posiblemente, la más utilizada en la práctica del análisis cuantitativo de todas las técnicas espectroscópicas.
Se basa en la absorción de radiación ultravioleta y visible por el analito, como consecuencia de lo cual se
origina un estado activo que posteriormente elimina su exceso de energía en forma de calor. En la presente
práctica se pretende determinar hierro (2+) en una muestra de agua potable por el método de la
ortofenantrolina, para lo cual se preparó una solución de hierro a partir de la sal de mohr de concentración
1000ppb y a partir de esta una solución patrón 10ppb. Con la solución patrón se preparó una serie de
estándares colocando 0.5 ml de ácido ascórbico, 1 ml de buffer, 1 ml de ortofenantrolina y aforando a 15ml
con agua; se midió el porcentaje de transmitancia y absorbancia a 510nm. Para la preparación de la muestra se
tomó 12.5 ml de agua y se trató de la misma manera que los estándares. Una vez realizada la curva de
calibración y por interpolación gráfica se concluye que la concentración de hierro (2+) en agua potable, según
la gráfica 2: Interpolación analítica (Recta ajustada A = A0 + KsC) es 8.335 x 10−4 ±2.000 %.

Palabras clave: Espectrofotometría visible, Hierro, Ortofenantrolina, Agua potable.

Abstract

The absorption spectrophotometry in the ultraviolet and visible regions of the electromagnetic spectrum is
possibly the most used in the practice of quantitative analysis of all spectroscopic techniques. It is based on
the absorption of ultraviolet radiation and visible by the analyte, as a result of which an active state is
originated that later eliminates its excess energy in the form of heat. In the present practice it is tried to
determine iron (2+) in a sample of potable water by the method of orthophenanthroline, for which an iron
solution was prepared from the salt of mohr of concentration 1000ppb and from this a solution 10ppb pattern.
With the standard solution, a series of standards were prepared by placing 0.5 ml of ascorbic acid, 1 ml of
buffer, 1 ml of orthophenanthroline and gauging to 15 ml with water; the percentage of transmittance and
absorbance at 510 nm was measured. For the preparation of the sample, 12.5 ml of water was taken and
treated in the same way as the standards. Once the calibration curve was made and by graphic interpolation, it
is concluded that the concentration of iron (2+) in drinking water, according to graph 2: Analytical
interpolation (Adjusted straight A = A0 + KsC) is 8.335 x 10−4 ±2.000 %.

Keywords: Visible spectrophotometry, Iron, Orthophenanthroline, Drinking water.

1. Introducción molecular ultravioleta/visible sean los

Las medidas de absorción de radiación
ultravioleta y visible tienen una gran
aplicación en la identificación y
determinación de una enorme cantidad de
especies inorgánicas y orgánicas. Es
probable que los métodos de absorción
más utilizados de entre todas las técnicas
de análisis cuantitativo en los
laboratorios químicos y clínicos a lo
largo del mundo.
La absorción de radiación visible por una
especie molecular M se puede considerar
 como un proceso de dos etapas, la agregando 0,5mL de ácido ascórbico,
primera de ellas consiste en una 1mL de buffer, 1mL de ortofenantrolina
excitación electrónica como se muestra y luego se añadió agua destilada hasta
en la ecuación M +hv → M ¿. El llegar a un volumen de 15mL de
producto de la reacción entre M y el solución, lo mismo se realizó a la
fotón hv es una especie excitada muestra sin añadir la solución de Fe.
electrónicamente simbolizada por M*. El Posteriormente se calibró el
tiempo de vida de a especie excitada es espectrofotómetro y se realizó las
breve (10-8 a 10-9 s), su existencia se lecturas de las absorbancias de las
termina por alguno de los distintos soluciones.
procesos de relajación más común 3. Resultados y discusión
supone la conversión de la energía de
Gráfica 1
excitación en calor.
La absorción de radiación visible resulta, Absorbancia vs. Concentracion de
generalmente, de la excitación de los Fe
electrones de enlace; como consecuencia,
0.16
los picos de absorción pueden
0.14
correlacionarse con los tipos de enlaces 0.12 f(x) = 0.02 x + 0
de las especies de objeto de estudio. Las R² = 1
Absorbancia 0.1
aplicaciones de la espectroscopia de 0.08
absorción ultravioleta y visible en la 0.06
0.04
determinación cuantitativa de
0.02
compuestos que contienen grupos 0
absorbentes, utilizando la Ley de Beer- 0 1 2 3 4 5 6 7 8
Lambert. [ CITATION Sko \l 12298 ] Concentración ugFe/ml

2. Sección Experimental Fig. 1. Variación de la absorbancia en función de la

2.1. Reactivos y Materiales concentración a una longitud de onda de 510nm.

Los materiales utilizados comprenden

Gráfica 2
balón aforado de 100mL, cubetas,
espectrofotómetro, pera de succión, vasos
de precipitación 50mL, pipeta, piseta. En
Interpolación
reactivos se utilizó: ácido ascórbico 10%, 0.2

agua destilada, buffer de pH 4-5, 0.15

Absorbancia

ortofenantrolima 0,25%, sal de Mohr 0.1 f(x) = 0.02 x + 0

R² = 1
(Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O). 0.05
2.2. Procedimiento
0
En la elaboración de una solución de Fe 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
10ppb se preparó inicialmente una
Concentración ug Fe/ml
solución de Fe 1000ppb a partir de la sal
de Mohr, luego se tomo 1mL de la Fig. 2. Interpolación analítica (Recta ajustada A = A0 +
solución y se aforo a 100mL. KsC)

En la determinación de Fe2+ en agua

Tabla 1. Valores de absortividad específica y
potable se preparó estándares tomando
molar a 510nm
volúmenes diferentes de Fe10ppb luego
 S g Molaridad Espectrofotómetro absorbancia crecerá. Estos resultados se
t Fe/ml Fe  (l / mol los obtiene con un correcto manejo del
α (l / mg cm)
cm)
equipo preparando muestras de señales
0 0,00 0,000
0
- - de un blanco y estándares.
1 0,40 7,163 x 10−6
0
0.028 1.535 x 103 Se logro determinar el porcentaje de
2 0,86 1,553 x 10−5 3 hierro en una muestra de agua el cual fue
7
0,022 1.223 x 10
3 1,66 2,985 x 10 −5
3 de 8.335 x 10−4 ±2.000 g Fe/ml con
7
0,022 1.239 x 10
un límite de detección de 0.632 ±2.000
4 3,33 5,968 x 10 −5
3
0,020 1.122 x 103 esto demuestra que la concentración de la
5 6,66 1,194x10-4 sustancia si puede ser detectada con
7
0,020 1.130 x 103 fiabilidad por el espectrofotómetro.
x́ ___ ___ 0,022 1.250 x 103
σ ___ ___ 3.286 x 10−3 167.972
❑
Experimentalmente se obtuvieron los
Elaborado por Lara & otros. valores de absorbancia molar los cuales
fueron (a una longitud de onda de 510
Tabla 2. Cálculos estadísticos
nm) : para St1=0,028 (l/ mg cm)
Método Espectrofotómetro St2=0,022 (l/ mg cm) St3=0,022(l/ mg
% Fe (agua potable) 8.335 x 10−4 ±2.000 cm) St4=0,020(l/ mg cm) y St5= 0,020
α 0.022 ±2.000 (l/ mg cm). De igual manera se
ε 1.250 x 103 ±2.000 obtuvieron los valores de absorbancia
Ks 0.019 ± 2.000 especifica: St1=1.535 x 103 (l/mg cm)
LD 0.632 ±2.000
Elaborado por Lara & otros. St2= 1.223 x 103 (l/mg cm), St3 =

1.239 x 103 (l/mg cm), St4=

3
1.122 x 10 (l/mg cm) y St5=
4. Conclusiones
1.130 x 103 (l/mg cm)
El espectrofotómetro nos ayuda a que en
función de la longitud de onda
determinemos la relación entre la
absorbancia y la concentración. Una vez 5. Referencias
realizadas y analizadas las gráficas de
absorbancia vs concentración de Fe [1] D. A. Skoog, «Espectroscopía de
podemos determinar una relación absorción molecular,» de Principios de
directamente proporcional pues si la Análisis Instrumental, México, Cengage
concentración de hierro aumenta la Learning, 2008, pp. 353-355.