UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUÍMICA
LABORATORIO DE INSTRUMENTAL
ANALITICO

Práctica 3: Determinar el contenido de Hierro (Fe) en una

muestra de Fertilizante Inorgánico, mediante la técnica de
Espectrometría de Absorción Molecular en el UV-Vis
(Fotocolorimetría).

Reporte
Coeficiente
Concentración Concentración Intervalo de de
Muestra LOD LOQ
de hierro (Fe) de hierro (Fe) Confianza (% CV (%) Absortividad
Asignada (%p/p) (%p/p)
(mg/Kg) (%p/p) p/p) Molar (ε)
λ = 512 nm

Fertilizante
15413 ±
Inorgánico 200 ± 6 0,0200 ± 0,0006 0,020 ± 0,001 3 0,002 0,007
2950
A

Elaborado por:
Torrealba Joyner
C.I. V-25.482.286
Grupo 1

Caracas, 30 de noviembre de 2022

Resumen
La espectrofotometría de absorció n molecular ultravioleta visible, comú nmente
llamada espectrofotometría UV-VIS, esta técnica se basa en la medició n de absorció n
de radiació n U.V. o visible por determinadas moléculas. La radiació n correspondiente
a estas regiones del espectro electromagnético provoca transiciones electró nicas a
longitudes de ondas características a la estructura molecular de un compuesto. En la
prá ctica se realizó la determinació n de contenido de Hierro (Fe) en una muestra de
Fertilizante inorgá nico, previamente digestada mediante un tratamiento con á cido
nítrico concertado, la cual posteriormente se estudió mediante un aná lisis cuantitativo
empleando una curva de calibració n de externa. El estudio demostró que el Fe se
encuentra en una concentració n promedio de (0,0200 ± 0,0006) % p/p, con un Límite
de Detecció n para los aná lisis de 0.002 %p/p.

Objetivo General
 Determinar cuantitativamente la concentració n de Hierro (Fe) en una muestra
de fertilizante inorgá nico empleando la técnica de espectrometría de absorció n
molecular en el UV-Vis.
Objetivos Específicos
 Calcular el coeficiente de absortividad molar (ε) para el complejo de hierro (II)
con o-fenantrolina y comparar con los valores reportados en la literatura.
 Determinar el % p/p de Hierro (Fe) en la muestra de Fertilizante Inorgá nico A
mediante el método de curva de calibració n externa (CCE).
 Determinar LOD y LOQ obtenida en los aná lisis y comparar con los valores
reportados en la literatura.

Equipos y reactivos empleados (marca, modelo, fórmula y pureza

 Equipo empleado

Figura 1. Espectrofotó metro de absorció n molecular.

 Marca y Modelo: Espectrofotómetro de Absorción Molecular, Nicolet

Evolution 300 – Thermo Doble Haz.
 Lámpara: Xenón
 Longitud de onda de trabajo (Fe): 512 nm

 Reactivos empleados
 Nombre: Acido Clorhidrico
Formula: HCl
Pureza: 37 %

 Nombre: Sal de Mohr

Formula: (NH4)2Fe(SO4)2.6H2O
Pureza: 99 %

 Nombre: Clorhidrato de Hidroxilamina

Formula: H2NOH.HCl
Pureza: 99,5 %

 Nombre: 1,10-Fenantrolina
Formula: C12H8N2
Pureza: 99,5 %

 Nombre: Hidróxido de Sodio

Formula: NaOH
Pureza: 99,5 %
Metodología Experimental.
 Tratamiento previo de la muestra de fertilizante inorgánico.

Se pesaron 0,5360, Se trataron directamente Se calentó en plancha de

0,5000 y 0,5170 g, con porciones de 5 mL de calentamiento
respectivamente del HCl (concentrado). empleando vidrio de
fertilizante en un reloj y jinetillos por 30
beacker. min.

Una vez disuelto Se agregaron

completamente el porciones de 5 mL de
fertilizante, se aforaron al HCl cuando fue
menor volumen posible necesario.
(50 mL).

 Preparación de patrones de Hierro (Fe) para la construcción de curva de

calibración externa.

Se colocó una alícuota de Se agregaron 0,5 mL de Se ajustó a pH 4, con

(0,250 ± 0,001) mL de la solución de clorhidrato de solución de HCl o NaOH.
solución madre de hierro hidroxilamina al 10 % p/p.
preparada en un balón
aforado.

Se midió la absorbancia Se añadió 1 mL de la

para el patrón de disolución de 1,10- Se agregaron 2 mL de
concentración (1,042 ± fenantrolina 0,3 % y se solución buffer de pH
0,005) mg/L. enraso con agua destilada. 4.

Nota: Se repitió el mismo procedimiento para la preparació n de los demá s patrones,

tomando alícuotas de (0,500 ± 0,001), (0,750 ± 0,001) y (1,00 ± 0,01) mL para obtener
patrones de concentració n (2,083 ± 0,007), (3,13 ±0,01) y (4,17 ±0,04) mg/L,
respectivamente. Para la preparació n del blanco se realizó el mismo procedimiento
sin agregar solució n patró n de hierro (Fe).
Nota: se esperaron 10 minutos para que se desarrolle la má xima intensidad de color
antes de realizar la medició n de la absorbancia. Para las mediciones se empleó una
cubeta de vidrio de camino ó ptico 1 cm.
  Elección de la longitud de onda óptima para el análisis de Hierro (Fe).
Se midió el cero de Posteriormente se
absorbancia colocando en seleccionó la longitud de
una celda agua destilada onda de trabajo.
(referencia) y en otra
celda nuestro blanco de
reacción.
Una vez seleccionada la Se seleccionó la longitud de
longitud de onda de trabajo onda donde se tuviera un
(512 nm) se realizó la máximo de absorbancia
medición de los demás para el patrón más
patrones. concentrado.
 Análisis de la muestra para determinación de Hierro (Fe).
Se colocó una alícuota de Repetir el procedimiento
15 mL de la solución de empleado para la
fertilizante preparada y se preparación de los
trasvaso a un balón patrones de la curva de
aforado de 25 mL. calibración.
Se colocó en una celda de
referencia nuestro blanco
de reacción, y en otra
celda el patrón de mayor
concentración.
Se realizó un doble
barrido de absorción a
longitudes de onda entre
los 400-600 nm.
Se midió la absorbancia de
la muestra y se observo que
entraba dentro del rango de
la curva de calibración.
Se repitió el procedimiento
para las otras dos
soluciones preparadas de
fertilizante.
 Tablas de Datos y Resultados Analíticos
Se realizó un barrido de absorció n durante un intervalo de longitudes comprendido
entre 400-600 nm para la obtenció n de la longitud onda donde se tiene un má ximo de
absorbancia y por consiguiente una mayor sensibilidad para complejo de hierro con la
1,10-fenantrolina (la curva es relativamente aplanada en las proximidades al má ximo,
de manera que apenas varía la absorbancia; La ley de Beer se cumple mejor cuando la
absorbancia es casi constante a lo largo de la banda de longitudes de onda escogida.),
a partir del patró n de mayor concentració n preparado (4 mg/L), entre 350 nm a 500
nm y un ancho de banda de 2,0 nm. Segú n se puede observar en la Figura 2.

Figura 2. Barrido de absorbancia en un intervalo de longitudes de onda escogido

entre 400-600 nm.

Tabla 1. Preparació n de Solució n Estandar Madre y Está ndares de Calibració n.

Vol. Conc.
Masa error Vol. Ali error error Error
ID Aforo M CV (%) Obs.
(g) (g) (mL) (mL) (ml) (mg/L)
(ml) (mg/L)
Apend.
Std M 7,0300 0,0002 - - 1000,0 0,3 1041,7 0,3 0,03
1
Std Sub Apend.
- - 5,00 0,01 50,00 0,05 104,2 0,2 0,2
M 1
Apend.
Std 1 - - 0,250 0,001 25,00 0,03 1,042 0,005 0,5
2
Std 2 - - 0,500 0,001 25,00 0,03 2,083 0,007 0,3  
Std 3 - - 0,750 0,001 25,00 0,03 3,13 0,01 0,3  
Std 4 - - 1,00 0,01 25,00 0,03 4,17 0,04 1,0  
Blanco - - - - - - - - -  
 Tabla 2. Determinació n de Hierro (Fe). Curva de Calibració n en UV-Vis.
Conc error Señal (int)
ID Sdv (int) Obs.
(mg/L) (mg/L) λ = 512 nm
Blanco 0 0 0,0010 0,0006  
Std1 1,042 0,005 0,3450 0,0006 Apend.2
Std2 2,083 0,007 0,5600 0,0006  
Std3 3,13 0,01 0,7250 0,0006  
Std4 4,17 0,04 0,9130 0,0006  
Curva de calibración Abs = 0,1792 [Fe] + 0,1688  
r^2 0,9974 Desviación típica 0,015 Apend. 3
Coeficiente de Absortividad Molar (L/ mol cm) 15413 ± 2950 Apend. 8
0,25 mg/L 0,0021 %p/p
LOD Apend. 4
21 mg/Kg    
0,8 mg/L 0,0070 %p/p
LOQ Apend. 4
70 mg/Kg    
Absorbancia (ua)

Absorbancia vs [Fe]
1.0000
0.8000 f(x) = 0.179169684080193 x + 0.168789010865997
R² = 0.997352677575318
0.6000
0.4000
0.2000
0.0000
0.500 1.000 1.500 2.000 2.500 3.000 3.500 4.000 4.500

Concentracion de Fe (mg/L)

Grafica 1. Curva de Calibració n Externa empleada en la cuantificació n de hierro a una

longitud de onda de 512 nm.
Tabla 3. Datos y resultados del aná lisis de la muestra “Fertilizante Inorgá nica A”.
Señal
Vol Vol
erro Vol erro erro (ua) Conc. error error
Masa erro afor afor error % CV
ID r Aliq. r r λ= (mg/K (mg/K %p/ Obs
(g) r (g) o o (ua) g) g) p/p (%)
(ml) (ml) (ml) (ml) 512 p
(ml) (ml)
nm
MA 0,536 2E- 50,0 15,0 25,0 0,019 0,000 Apen
0,05 0,05 0,03 0,3460 0,0006 193 1 0,4
1 0 04 0 0 0 3 1 d. 5
MA 0,500 2E- 50,0 15,0 25,0 0,020 0,000
0,05 0,05 0,03 0,3450 0,0006 206 1 0,4  
2 0 04 0 0 0 6 1
MA 0,517 2E- 50,0 15,0 25,0 0,020 0,000
0,05 0,05 0,03 0,3440 0,0006 201 1 0,4  
3 0 04 0 0 0 1 1
Apen
Conc. Promedio 200 0,0200  
d. 6
Des. std. 6 0,0006    
CV (%) 3 3    
In. Confianza (3, Apen
3,18   0,001  
95%) d. 7
Discusión y Conclusiones
  Discusiones
Un método muy sensible para la determinació n del hierro se basa en la formació n de
un complejo rojo-naranja de hierro (II) con o-fenantrolina. La o-fenantrolina es una
base débil y en disolució n á cida, la principal especie es el ió n fenantrolina, PhH+.
Previo al acomplejamiento, se debe reducir todo el hierro presente en la solucione
para asegurar que todo el hierro se encuentre como ió n Fe +2. Para ello se emplea un
exceso de hidroquinona o clorhidrato de hidroxilamina en solució n, la reducció n de
las especies a Fe (II) y la reacció n de formació n del complejo se describen segú n la
siguiente reacció n:
2Fe+3 + 2NH2OH + 2OH- → 2Fe+2 + N2 + 4H2O
Fe+2 + 3PhH+ ↔ Fe(Ph)3+2 + 3H+
La formació n cuantitativa del complejo se observa en el intervalo de pH 3-4. Se
recomienda un pH pró ximo a 4 para evitar la precipitació n de diversas sales de hierro.
La lectura de la absorbancia se realiza en los 512 nm, donde este complejo presenta
un má ximo de absorbancia, tal como se observa en la Figura 2.

A partir de la Ley de Beer y los datos obtenidos experimentalmente durante el barrido

expuestas en la Figura 2, se determinó la absortividad molar experimental para el
complejo 1,10-fenantrolina de 12850,62 L / cm mol para una longitud de trabajo de
512 nm, el cual difiere del valor reportado en la literatura (1,10x10 4 L/mol cm), esto
puede deberse a posibles interferencias durante la formació n del complejo. Se obtuvo
la curva de calibració n externa de ecuació n Abs= 0,1792 [Fe] + 0,1688, con coeficiente
de correlació n lineal de r2=0,997, que indica un ajuste muy cercano a la linealidad y
con una desviació n típica de los residuales (S 2) de 0,015. Este ú ltimo pará metro
estadístico se refleja en la obtenció n de un aná lisis con una buena precisió n con un
límite de detecció n de 0,25 mg/L, el cual se encuentra de lo esperado para la técnica
(10-4 a 10-6 M). Obteniéndose así que para la muestra analizada de fertilizante
inorgá nico el % p/p de hierro promedio es de (0,0200 ± 0,0006) %p/p, el cual se
encuentra dentro de los valores reportados para los fertilizantes de 0,020 % p/p, con
un CV= 3 %. Por lo que la precisió n en el aná lisis realizado se encuentra entre el 1-5
% reportado para la técnica empleada.

 Conclusiones
 Se determinó la absortividad molar experimental para el complejo 1,10-
fenantrolina, siendo este de (15413 ± 2950) L/ cm mol, el cual se desvía del
valor reportado para la longitud de onda de 512 nm.
 Se obtuvo un límite de detecció n de 0,002 % p/p y un límite de cuantificació n
de 0,007 % p/p.
  Se determinó la concentració n de hierro presente en la muestra de fertilizante
inorgá nico, siendo esta de 0, 020 ± 0,006 % p/p.

Referencias Bibliográficas
Vogel Arthur “Química Analítica Cuantitativa: Teoría y Prá ctica” 2da edició n, Vol. II,
Cap. V, Editorial Kapelusz, Buenos Aires, 1969.

Chamberlin G. J. y Thomas L. C. “Colorimetric Chemical Analytical Methods”, 9 na

edició n, Tintameter Ltd, England, 1980.

Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. Crouch “Química Analítica” 8va edició n, Cap.
27, McGraw-Hill, Mexico, 2001.
Marczenko, Z., & Balcerzak, M. (2000). Iron. Separation, Preconcentration and
Spectrophotometry in Inorganic Analysis, 226–237. doi:10.1016/s0926-
4345(00)80090-5.

Apéndices
 Apéndice 1. Cá lculos para determinar la concentració n de la solució n madre y
la solució n sub-madre.
Solución madre
Sal∗1 mol de Sal
∗99 g
392 , 14 g Sal
∗1 mol Fe
100 g
∗58 , 6934 g Fe
1 mol de Sal
∗1
1 mol Fe
∗1000 mg
1L mg
7.030 g =1041 , 69 Fe
1g L

√( )( )
2 2
mg 0,0002 0,3 mg
σ =1041,69 + =¿ 0 , 3 ¿
L 7.0300 1000.0 L
[Sol. Madre] = 1041,7 ± 0,3 mg/L

mg
0,3
Desv . Est . L
CV = ∗100 %= ∗100 %=0,03 %
Conc . mg
1041,7
L
Solución sub-madre
C 1 V 1=C 2 V 2
 C 1∗V 1 1041,69 mg/ L∗5 ml mg
C 2= = =104,17
V2 50 ml L

σ =104,17
mg
L √( 1041,7)( ) (
0,3 2 0,01 2 0,05 2
+
5,00
+
50,00
=0,2
mg
L )
[Sol. Sub-Madre] = 104,2 ± 0,2 mg/L

mg
0,2
Desv . Est . L
CV = ∗100 %= ∗100 %=0,2 %
Conc . mg
104,17
L

 Apéndice 2. Modelo de cá lculo para curvas de calibració n externa.

Solución patrón (1 mg/L)
C 1 V 1=C 2 V 2

C 1∗V 1 104,17 ppm∗1 ml mg

C 2= = =1,042
V2 25 ml L

√( ) ( )( )
2 2 2
mg 0,2 0,001 0,03 mg
σ =1,042 + + =0,005
L 104,2 0,250 25,00 L
[Patró n 1] = 1,042 ± 0,005 mg/L

mg
0,005
Desv . Est . L
CV = ∗100 %= ∗100 %=0,5 %
Conc . mg
1,042
L

NOTA: el mismo modelo de cá lculo se emplea para la preparació n de los patrones de

concentració n 2, 3, 4 mg/L.

 Apéndice 3. Modelo de cá lculo para la Desviació n Típica.

Desviación típica de los valores de X (concentración de los patrones).

(∑ X i )
2

S xx =∑ X −
2
i
N
 108,51 mg
S xx =32,55− =5,42
4 L
Desviación típica de los valores de Y (absorbancia de los patrones).

(∑ Y i )
2

S yy =∑ Y − 2
i
N
6,46 mg
S yy =1,79− =0,175
4 L

Desviación típica de la curva de calibración.

(∑ X i ∑ Y i )
S xy =∑ X i Y i−
N
26,49 mg
S xy=7,60− =0,97
4 L

Desviación estándar de los residuales.

√
2
( m ) S xx
Sr = S yy−
N −2

√
2
( 0,1792 ) ( 5,42 ) mg
Sr = 0,175− =0,015
4−2 L

 Apéndice 4. Modelo de cá lculo para el Limite de Detecció n y Limite de

Cuantificació n asociados a la técnica.
Límite de Detección
3 Sr
C LOD =
m
3 ( 0,015 ) mg
C LOD = =0,25
0,1792 L
mL∗1 L
∗1
1000 mL
∗1000 g
mg 0,6 g mg
C LOD =0,25 ∗50 =20,92
L 1 Kg Kg
 mg
∗1 g
Kg
∗1 Kg
1000 mg p
C LOD =20,92 ∗100 %=0,0021 %
1000 g p

Límite de Cuantificación
10 S r
C LOQ =
m
10 ( 0,015 ) mg
C LOQ = =0,84
0,1792 L
mL∗1 L
∗1
1000mL
∗1000 g
mg 0,6 g mg
C LOQ =0,84 ∗50 =69,75
L 1 Kg Kg
mg
∗1 g
Kg
∗1 Kg
1000 mg p
C LOQ =69,75 ∗100 %=0,0069%
1000 g p

 Apéndice 5. Modelo de cá lculo para la determinació n de la concentració n de

hierro en las muestras de fertilizante.
Abs = 0,1792 [Fe] + 0,1688
Muestra de Fertilizante A1
|−0,1688|
[ Fe ] =
0,1792
0,347 0−0,1688 mg
[ Fe ] = =0,9944
0,1792 L
mL∗1 L
∗1
mg 1000 mL
∗25 mL ∗1000 g
L 0,5360 g mg
[ Fe ] =0,9944 ∗50 =193,25
15 mL 1 Kg Kg

σ =192,17
mg
Kg √( 0,5360 )(
+
50,00
+ ) (
0,0002 2 0,05 2 0,05 2 0,03 2
15,00
+
25,00 )(
=0,86)mg
Kg
 mg
∗1 g
Kg
∗1 Kg
1000 mg p
[ Fe ] =192,17 ∗100 %=0,0192%
1000 g p

√( )
2
p 1 p
σ =0,0912 % =0,0001 %
p 192 p

NOTA: el mismo modelo de cá lculo se emplea para la determinació n de la

concentració n de hierro para las otras dos muestras preparadas.

 Apéndice 6. Modelo de cá lculo para la determinació n del promedio de las

concentraciones de hierro y su desviació n está ndar asociado (%p/p) en las
muestras de fertilizantes tratadas.

X=
∑ Xi
N
0,0193+ 0,0206+0,0201 p
X= =0,0200 %
3 p

S=
√ ∑ ( X i−X ) 2
N −1

√
2 2 2
( 0,0193−0,0200 ) + ( 0,0206−0,0200 ) + ( 0,0201+ 0,0200 ) p
S= =0,0006 %
3−1 p

mg
0,00 06
Desv . Est . L
CV = ∗100 %= ∗10 0 %=3 %
Conc . mg
0,0200
L

 Apéndice 7. Modelo de cá lculo para el Intervalo de Confianza asociado a la

determinació n de la concentració n de hierro en las muestras de fertilizante
tratadas.
 tS
IC (3 , 95% )=X ±
√N
( 3,18 )( 0,0006 ) p
IC (3 , 95% )=0,0198 ± =( 0,020± 0,001 ) %
√3 p

 Apéndice 8. Determinació n del coeficiente de absortividad molar para el

complejo de hierro con 1,10-fenantrolina.

Solución Patrón 1
|¿|εbC

0,3450 L
ε= ¿ =
||
=0,331 ¿
bC
( 1,042
mg
L )
(1 cm )
mg cm

L
∗1000 mg
mg cm
∗58,6934 g
1g l
ε =0,331 =19427,51
1mol mol cm

Solución Patrón 2
|¿|εbC

0,5600 L
ε= ¿ =
||
=0,269 ¿
bC
( 2,083
mg
L )
( 1 cm )
mg cm

L
∗1000mg
mg cm
∗58,6934 g
1g l
ε =0,26 9 =15779,31
1 mol mol cm
 Solución Patrón 3
|¿|εbC

0,7250 L
ε= ¿ =
||
=0,232 ¿
bC
( 3,13
mg
L )
( 1 cm)
mg cm

L
∗1000 mg
mg cm
∗58,6934 g
1g l
ε =0,232 =13595,12
1mol mol cm

Solución Patrón 4
|¿|εbC

0,9130 L
ε= ¿ =
||
=0,219 ¿
bC
( 4,17
mg
L )
( 1 cm )
mg cm

L
∗1000 mg
mg cm
∗58,6934 g
1g l
ε =0,219 =12850,62
1 mol mol cm

X=
∑ Xi
N
19427,51+15779,31+13595,12+12850,62 l
X= =15413,14
4 mol cm

S=
√ ∑ ( X i−X ) 2
N −1

√
2 2 2 2
( 19427,51−15413,14 ) + ( 15779,31−15413,14 ) + ( 13595,12+15413,14 ) + ( 12850,62−15413,14 )
S= =2950,7
4−1
 L
2950
Desv . Est . mol cm
CV = ∗100 %= ∗10 0 %=19 %
Conc . L
15413
mol cm