Universidad Nacional

Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores
Zaragoza

Laboratorio de Microbiología General II

Virología
Reporte de resultados esperados Práctica 3:
Estructuras del embrión de pollo y sus vías de
inoculación

Equipo: 1

Asesora: María Galia Martínez Flores

Integrantes del equipo:

· Auza Hernández Nadia Yael

· Buendía Martínez Ricardo Habid

Grupo: 2701
Semestre: 2021-1

Fecha de entrega: 25 de noviembre del 2020

Objetivo:

· Adquirir el conocimiento para el correcto manejo de la técnica de

inoculación de embrión de pollo por las vías más utilizadas.
· Conocer las diversas partes del embrión de pollo de 9 días de incubación.

Resultados:

Inoculación observaciones
Membrana coriolantoidea Azul en la periferia.

Saco vitelino Es amarillo con azul dando una coloración verde obscuro.

Cavidad alantoidea Esta formado por una capa transparente dando una
coloración azul.
Cavidad amniótica Forma una coloración azul alrededor de la estructura del
embrión
DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La inoculación de animales es útil para el diagnóstico, aislamiento,

propagación y caracterización de los virus, así como para la producción
de vacunas virales. Esto se logra gracias a las características propias del
embrión y de sus tejidos que proporcionan un medio favorable para el
cultivo de diferentes virus. Los virus sólo pueden reproducirse en
determinadas partes del embrión; por consiguiente se debe inyectar en la
región apropiada. Para obtener resultados óptimos en el aislamiento y
propagación de los virus, se deben considerar:

· Vía de inoculación
· edad del embrión
· temperatura de incubación
· tiempo de incubación
· volumen y dilución del inoculo(ya que al ser mayor el volumen a
inocular podrá causar mayor mortalidad

Entre los lugares de inoculación se encuentra:

· Membrana Corioalantoidea: se emplean embriones de 10-12 días y

la cantidad de inóculo es de 0.1-0.5 mL. Es una vía apropiada para el
aislamiento de virus de la viruela, virus de la Laringotraqueitis aviar,
entre otros que producen pústulas visibles.
· Cavidad Alantoidea: Se emplean embriones de 9-12 días y la
cantidad de inoculo es de 0.1-0.2 mL. Entre los virus que se
desarrollan en el endodermo alantoideo tenemos: virus de la
bronquitis infecciosa, parotiditis entre otros.
· Cavidad Amniótica: se emplean embriones de 7-15 días y la
cantidad de inoculo es de 0.1-0.2 mL la edad delos mismo depende
fundamentalmente del tipo de virus o del estudio que se realiza.
· Saco Vitelino: embriones de 5-8 días de incubación, cantidad de
inóculo es de 0.2-1mL. Vía sumamente adecuada para el
aislamiento y cultivo de los virus de las enfermedades venéreas, así
como neumonía.

La característica especial del saco Vitelio que anteriormente era la Yema

del huevo es que al agregar el colorante cambia a una coloración
verdosa, esto sucede ya que el saco Vitelio es el lugar donde se
encuentran pigmentos liposolubles y es el lugar donde se da el intercambio
de recursos.

Se sabe que las diferentes cavidades durante la gestación de 9 a 10 días

tiene como objetivo el inoculo de virus , esto sucede con la unión de las
proteínas del virus y el ácido sálico de las células formadas del embrión.

ANEXO:

Los huevos embrionados se emplean ampliamente para el aislamiento de

muchos virus aviar es y algunos de mamíferos, que pueden adaptarse a
crecer en embriones de aves. A través de este proceso, éstos pueden
atenuarse adquiriendo mutaciones que los hacen menos patógenos. Las
especies animales empleadas para inoculación en sus embriones integran
aves como gallinas, patos y pavos.

Ventajas del uso de la inoculación en embriones.

Los huevos embrionados tienen muchas ventajas, algunas de ellas son:

· Son baratos de obtener y puede disponerse de ellos fácilmente.

· Son fáciles de manipular y su manejo no exige mucho personal ni
que esté especialmente entrenado como ocurriría con el caso de
animales de experimentación.
 · Son estériles y libres de contaminación bacteriana e incluso de
muchos virus que pueden estar latentes en aves o mamíferos.
· Las células de embriones son muy indiferenciadas y por lo tanto
muchos virus pueden crecer en ellas
· Presentan diferentes localizaciones con distintas características por
ejemplo de ph, de cantidad de grasa, etc. Esto permite buscar el
sitio mejor o más adecuado para cada virus.
· Carecen de respuesta inmunitaria que eliminaría al virus.

Desventajas del uso de la inoculación en embriones.

· El sitio de la inoculación y la edad del embrión varía con los
diferentes virus, y cuando se trata de virus en los que esta
circunstancia no se conoce, se deben realizar diferentes pruebas.
· Hay variabilidad individual

Efectos en cada cavidad.

La inoculación en la cavidad amniótica o la cavidad alantoidea, el virus en multiplicación

activa pasa el saco amniótico y es posible detectarlo por hemaglutinación. Cuando la
inoculación se realiza en saco vitelino, se produce la muerte del embrión. Si la inoculación
tiene lugar en la membrana corioalantoidea, se producen zonas con necrosis, pústulas y
hemorragia identificables.

CONCLUSIÓN.

Se ha desarrollado un estudio completo de los medios de propagación de

virus y formas de inoculación, específicamente en el embrión de pollo a las
10 días de gestación en sus diferentes cavidades, demostrando su
desarrollo completo . Tenemos como resultados sus vías de inoculación
utilizando azul de metileno que no es reactivo con estructuras proteicas y
solo tiende a liposolubilizarse facilitando la diferenciación y la importancia
del estudio de las cavidades del embrión de pollo. Se cumplieron los
objetivos a pesar de la no realización experimental debido a las
circunstancias en que se lleva a cabo el semestre 2021-1.
REFERENCIAS

ü Carballal G, Oubiña J. Virología Médica. 4° ed. Buenos Aires: Editorial

Corpus; 2014.

ü Gil-Loyzaga P. Cultivo de Células Animales y Humanas. 2ª ed. México:

Editorial Visión libros; 2004.

ü Romero R, Microbiología y Parasitología Humana, 3ª ed. México:

Panamericana; 2007.

ü UCM. A veces es más fácil cultivar virus en huevos. Disponible en :

https://www.ucm.es/data/cont/docs/1462-2017-10-18-
1.5%20Eggs_es.pdf

ü Cyrus Ngullie. Egg inoculation, disponible en :

https://www.slideshare.net/CyrusNgullie1/egg-inoculation-by-
chinithung-ngullie-2-59052236