Ingeniería de las Reacciones Bioquímicas - Plan de Ejercicios Año 2020

“INGENIERÍA DE LAS REACCIONES BIOQUÍMICAS” - 2020

TEMA 1
Introducción. Conceptos de Biotecnología y de Ingeniería bioquímica. Etapas de un proceso biotecnológico.
Aplicaciones de procesos biotecnológicos en industrias y servicios. Bio-reactor. Factores influyen en el diseño y la
operación de un bio-reactor. Estequiometría y cinética microbiana. Aspectos termodinámicos del crecimiento.
Eficiencia energética. Rendimientos.

1. Explique qué entiende usted por bioproceso. Esquematice las etapas que debe cumplir para llegar a
obtener un bioproducto (por ejemplo, un antibiótico).
2. Defina:
- Medio de cultivo
- Condiciones de cultivo
- Bioreactor
- Metabolismo primario y metabolismo secundario
- Biotecnología
3. Xantomonas campestris es una bacteria Gram-negativa que en su metabolismo secreta cantidades
importantes de un polisacárido (goma xantano). Indicar como afectaría la producción de este polímero
al crecimiento bacteriano. Proponer medidas que, a su entender, contribuyan a garantizar la
producción de la goma xantano.

4. Enterobacter aerogenes fue inoculado simultáneamente en tres medios de cultivo diferentes,

químicamente definidos y con variaciones en la única fuente de carbono. Detalles de dichos cultivos
creciendo en fase logarítmica se presentan en la tabla. Determine para cada cultivo:
a) Tiempo medio de generación
b) Número de generaciones al cabo de 4,5 horas de cultivo
c) Velocidad de crecimiento de la población a las 2 horas de cultivo
d) Comente los resultados

Fuente de Inóculo Fase de Tiempo de Población final

Medio carbono (cél/cm3) latencia (min) cultivo (h) (cél/cm3)
1 Peptona 3000000 0 4,5 9,732*109
2 Glucosa 3000000 0 4,5 4,111*108
3 Ácido cítrico 3000000 90 4,5 1,427*107

5. Una bacteria creciendo en condiciones óptimas duplica su biomasa cada 45 minutos. Si un medio de
cultivo con 0,5 % p/v de glucosa se inocula con 10 mg/l de biomasa. Suponer que el crecimiento, se
realiza a velocidad constante.
a) Si la concentración final de azúcares en el medio de cultivo es de 100 mg/l calcule cuál es su
rendimiento de biomasa.
b) Calcule la cantidad de biomasa que se producirá en mg/l a las 4, 8 y 12 horas de incubación.
c) Comente los resultados

6. Un microorganismo que tiene una velocidad de crecimiento de 0,08 h-1, es inoculado en un

fermentador que contiene 80 g/l de sustrato. El microorganismo produce 45 g/l de ácido glutámico con
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un rendimiento de YP/S de 0,6 g Producto/g Sustrato. Si el inóculo fue de 0,6 g células/l y tiene un rendimiento de
YX/S de 0,23 g Células/g Sustrato. Calcular el tiempo requerido para obtener los 45 g/l de ácido glutámico.

7. Hansenula sp., es una levadura que, cultivándola en condiciones aireadas, tiene un rendimiento celular
de 0,45 g Células/g Sustrato. Si se inocula un fermentador de 50 litros que contiene 20 g/l de glucosa con 0,5
litros de una suspensión (0.1% de biomasa), y quedan 15% de sustrato residual al final de la
fermentación. Calcule la cantidad de biomasa total producida.

8. Un inóculo de 106 células/ml de Enterobacter aerogenes se agregó a un medio que contenía glucosa y
sulfato de amonio. Además, se agregó fenol en concentración de 3,4 x 10-2 M. Este cultivo presentó una
fase de latencia de 100 minutos. A los 230 minutos, el cultivo en fase logarítmica tenía 37,55x105
células/ml. El tubo control (sin fenol y sembrado con el mismo inóculo) creció sin fase de latencia. A los
180 minutos su población fue 15,85x106 células/ml, todavía en fase logarítmica. Determine si la
concentración de fenol empleada ejerció algún efecto sobre el crecimiento del microorganismo y, de
ser así, diga de qué tipo de efecto de trata.

9. En un experimento de laboratorio se inocularon diferentes medios de cultivo con una bacteria aerobia
facultativa (Escherichia coli). El medio sintético empleado en todos los casos contiene la misma
concentración de sales y de fuente de nitrógeno. Las diferencias existentes entre los distintos cultivos
se presentan en la tabla. Los perfiles de crecimiento de la bacteria obtenidos se muestran en el gráfico.
Indique a que cultivo de la tabla corresponde cada una de las curvas del gráfico. Justifique sus
respuestas.

Concentración inicial de Volumen de medio de

Cultivo glucosa (g/l) pH cultivo (ml)
A 5 7 100
B 10 7 100
C 20 7 100
D 10 3,7 100
E 10 7 300

10. Acetobacter aceti en aerobiosis, convierte etanol en ácido acético. Se propone un proceso continuo
para producir vinagre usando células inmovilizadas de estas bacterias, en un rector donde se bombean
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200 gmol/h de aire. La producción de ácido acético es 2 kg/h y la máxima concentración de ese ácido
tolerada por las células es 12% (p/p). Averiguar:
a) La cantidad mínima de etanol que se requiere en el proceso.
b) La mínima cantidad de agua que debe usarse para diluir el etanol y evitar la inhibición del ácido.
c) La composición de los gases de salida del fermentador.

11. La fórmula elemental para una bacteria particular es: C4,4H7,3O1,2N0,86

Esa bacteria se pone a crecer bajo condiciones aeróbicas con hexadecano (C16H34) como sustrato. La
ecuación que describe el crecimiento es:
C16H34 + 16,28 O2 + 1,42 NH3→ 1,65 C4,4H7,3 O1,2N0,86 + 8,74 CO2 + 13,11 H2O
a) Determinar si la ecuación está estequiométricamente balanceada.
b) Asumiendo 100 % de conversión. ¿Cuál es el rendimiento de células en g/g?
c) Si se carga un fermentador a escala de laboratorio, para producir 2,5 kg de la bacteria que servirán
para inocular otro fermentador de mayor escala:
- ¿Cuál es la mínima cantidad de hexadecano que debe contener el medio de cultivo?
- ¿Cuál es la mínima cantidad de hexadecano en el medio de cultivo, si el volumen de trabajo
del fermentador es de 3 m3?
d) Determinar el volumen mínimo de aire, a 20°C y 1 atm de presión que debe ser bombeado al
fermentador, para producir la cantidad requerida de células.

12. La goma xantano se produce utilizando Xantomonas campestris en un cultivo en discontinuo. Los
experimentos de laboratorio han mostrado que por cada gramo de glucosa utilizado por la bacteria se
consumen 0,23 g de oxígeno y 0,01 g de amoníaco, mientras que se forman 0,75 g de goma, 0,09 g de
células, 0,27 g de CO2 gas y 0,13 g de H2O. Otros componentes del sistema como fosfatos pueden
despreciarse. Un medio que contiene glucosa y amoníaco disuelto en 20000 litros de agua se bombea
hacia un fermentador agitado y se inocula con X. campestri Se inyecta aire al fermentador. La cantidad
total de gas de salida recogido durante todo el proceso es de 1250 Kg. Teniendo en cuenta la elevada
viscosidad y dificultad de manejo de las diluciones de goma xantano, la concentración final de goma no
debe ser superior al 3,5 % en peso.
a) ¿Cuánta glucosa y amoníaco se necesitan?
b) ¿Qué porcentaje de aire en exceso es suministrado?

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