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UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO BIOTECNOLOGIA


FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

GUIA DE PROBLEMAS DEL


CURSO DE BIOTECNOLOGIA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA E INDUSTRIAS


ALIMENTARIAS

FUENTE / ELABORACIÓN REVISADO POR: APROBADO POR:


Facultad de Ingeniería Química E Director de Departamento de Procesos Decano de la Facultad de Ingeniería
Industrias Alimentarias y Operaciones Unitarias Química E Industrias Alimentarias

M.Sc. Ada Patricia Barturén Dr. César García Espinoza M.Sc. Juan Carlos Díaz
Quispe Visitación

Lambayeque

2019

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CONTENIDO

1. BALANCE DE MATERIA EN BIOPROCESOS ........................................................3

2. BALANCE DE ENERGIA EN BIOPROCESOS .........................................................9

3. FLUIDOS EN BIOPROCESOS Y TRANSPORTE DE MATERIA¡Error! Marcador


no definido.13

5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ....................... ¡Error! Marcador no definido.

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Nombre de la Asignatura Biotecnología


Contenidos Transformaciones biológicas y
estequiometria del crecimiento celular.
Nombre de la Práctica Balance de material en bioprocesos
Competencia Al resolver el seminario el estudiante
estará en capacidad de conocer el
balance de materia en bioprocesos para
aplicarlos en los Al finalizar el taller el
estudiante estará en la capacidad
resolver ejercicios aplicados y aplicarlos
en los trabajos de laboratorios
Resultado de Aprendizaje El alumno identifica y describe los
aspectos básicos de los bioprocesos.
Requerimiento Hojas blancas, tabla de conversiones,
pizarrón, calculadora, plumones.

SEMINARIO N°01
BALANCE DE MATERIA EN BIOPROCESOS

1. Se bombea aire a través de un orificio sumergido en un líquido. El tamaño


de las burbujas que salen del orificio depende del diámetro del orificio y de
las características del líquido. La ecuación que representa esta situación es:

𝑔(⍴𝐿 − ⍴𝐺 )𝐷𝑏3
6=
𝜎𝐷0

donde g = aceleración gravitacional = 32.174 ft/s2; ⍴L = densidad líquida = 1


g/cm3; ⍴G = densidad del gas = 0.081 lb/ft3; Db = Diámetro de la burbuja;
σ= tensión superficial gas-líquido = 70.8 dyn/cm Do = diámetro del orificio =
l mm. Calcular el diámetro de la burbuja Db

2. Un gas deja un fermentador a una presión cercana a 1 atm y 25 °C con la


siguiente composición: 78.2% nitrógeno, 19.2% oxígeno y 2.6% dióxido.
Calcular:
(a) la composición en masa del gas de salida del fermentador
(b) la masa del CO2 en cada metro cúbico de gas que sale del fermentador

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3. La velocidad de mutación de la E. COLI aumenta con la temperatura. Los


siguientes datos se obtuvieron midiendo la frecuencia de mutación celular :

La frecuencia de la mutación se espera que cumpla una ecuación del tipo de


Arrhenius :

Donde α es el parámetro de la velocidad de mutación. E la energía de


activación. R constante universal de los gases y T temperatura absoluta.
a) Comprobar el método utilizando la representación adecuada . b) Cual es
la energía de activación de la velocidad de mutación?. c) Cual es el valor de
α0

4. Se disuelven 15 kg de sal en agua para hacer 100 litros. Al tanque que


contiene esta disolución se alimenta agua pura a una velocidad de 5 l/min,
de manera que la solución salina sale del tanque con la misma velocidad. El
tanque se encuentra en mezcla perfecta. ¿Cuánta sal existe en el tanque al
cabo de 15 minutos?. Supongase que la densidad de la disolución salina es
constante e igual a la del agua.

5. Las bacterias Acetobacter aceti convierten el etanol a ácido acético bajo


condiciones aerobias. Un proceso de fermentación continua para la
producción del vinagre es propuesto usando las células no viables A. aceti

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inmovilizadas en la superficie de gránulos de la gelatina. La producción


esperada es de 2 kilogramos/h de ácido acético; sin embargo, la
concentración máxima del ácido acético tolerada por las células es el 12%.
El aire se alimenta al fermentador a una velocidad de 200 del gmol/h.
(a) ¿Qué cantidad mínima de etanol se requiere?, (b) ¿Qué cantidad mínima
de agua se debe utilizar para diluir el etanol con el fin de evitar la
inhibición ácida?, (c) ¿Cuál es la composición del gas de escape del
fermentador?

6. La goma de xantano se produce usando Xanthomonas campestris en cultivo


en lote. Experimentos del laboratorio han demostrado que por cada gramo
de glucosa utilizada por las bacterias, se consumen 0.23 g de oxígeno y 0.01
g de amoníaco, mientras que se forman 0.75 g de goma, 0.09 g de células,
0.27 g de CO2 gaseoso y 0.13 g de H20. Otros componentes del sistema
tales como fosfato pueden ser despreciado. El medio de cultivo que contiene
glucosa y el amoníaco disueltos en 20 000 litros de agua se bombea a un
fermentador de tanque agitado a y se inocula con X. campestris. Aire en
burbujeado en el fermentador; la cantidad total de gas de salida recuperado
durante todo el cultivo en lote es de 1250 kilogramos. Debido a la gran
viscosidad y la dificultad en la manipulación de soluciones de goma xantano,
la concentración final de la goma no se debe exceder el 3.5 % en peso. (a)
¿Cuánta glucosa y amoníaco se requieren?, (b) ¿Cuál es el porcentaje de
aire en exceso alimentado?

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Nombre de la Asignatura Biotecnología


Contenidos Balance de energía en bioprocesos.
Nombre de la Práctica Balance de energía en bioprocesos
Competencia Al resolver el seminario el estudiante
estará en capacidad de conocer el
balance de energía en bioprocesos
para aplicarlos en los Al finalizar el
taller el estudiante estará en la
capacidad resolver ejercicios
aplicados y aplicarlos en los trabajos
de laboratorios
Resultado de Aprendizaje El alumno identifica y describe los
aspectos básicos en bioprocesos.
Requerimiento Hojas blancas, tabla de conversiones,
pizarrón, calculadora, plumones.

SEMINARIO N°02
BALANCE DE ENERGIA EN BIOPROCESOS

1. El aprovechamiento de glicerina residual por transformación biológica en 1,3


propanodiol C3H8O2 (monómero de la industria de plásticos) puede
realizarse biológicamente mediante diversos microorganismos (Klebsiella,
Clostridium, Citrobacter, etc) dando diversa eficacia y concentraciones de
subproductos (acetato, butirato, lactato, succinato, etanol). En un reactor de
80 m3 (con agitación P/V=0.6KW/M3) con Clostridium butyricum se trata
una alimentación diaria de 2.5 m3/h (60% glicerina, 22% amoniaco, 18%
agua) obteniéndose a la salida una corriente líquida (47 % 1,3 propanodiol,
11% acido butírico,4.5% ácido acético, 4% biomasa, 33.5% agua)
habiéndose evaporado 60kg/h de agua y recuperado 500 kg CO2/h.
Considerar estado estacionario, la misma entalpía de reacción que a 25°C y
densidad del líquido como la del agua.
a) Calcular la cantidad de calor que se debe extraer debido a la biorreacción.
b) La total incluyendo la agitación y evaporación del agua.
Datos :
Entalpias de combustión : Δhc

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Compuesto Δhc
(KJ/KG)
Glicerina -1.8x10-4
Amoniaco -2.5x10-4
Agua 0
1,3 propanodiol -3.37x10-4
Acido butírico -2.47x10-4
Acido acético -1.45x10-4
Biomasa -2.12x10-4
Calor latente de vaporización del agua : 2431 KJ/Kg

2. En una reacción biológica, se consumen 0.4gr O2/s por m3 de reactor, con


una agitación de 2 KW y se evapora 1 kg/h de agua. Si se debe enfriar (retirar
el calor) haciendo circular agua fría a 10°C y caudal 1 m3/h, calcular la
temperatura de salida del agua de refrigeración. Discutir la posibilidad de
reciclar esta agua λvap 2430 KJ/kg agua, Cp(agua) 4184. KJ/m3.°C.

3. Se alimenta agua a 25°C a un tanque abierto calentado a una velocidad de


10 kg/h. El agua en estado líquido abandona el tanque a 88°C a una
velocidad de 9 kg/h y el resto 1 kg/h, se pierde en forma de vapor de agua.
estado estacionario, ¿Cuál es la velocidad de entrada de calor al sistema?

4. En el proceso de recuperación del ácido glucónico, el caldo de fermentación


concentrado, con un contenido de 20% en peso de ácido glucónico, se enfria
en un cambiador de calor como paso previo a su cristalización. Para ello
deben enfriarse hasta 6°C, 2000 kg/h de líquido a 90°C que proviene de un
evaporado. El enfriamiento se alcanza intercambiando calor con 2700 kg/h
de agua que se encuentran inicialmente a 2°C. Si la temperatura final del
agua de refrigeración es de 50°C.¿Cuál es la velocidad de pérdida de calor
de la disolución de ácido glucónico hacia los alrededores. Capacidad
calorífica del ácido glucónico 0.35 cal/gr.°C.

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5. Se está desarrollando Saccharomyces cerevisiae aneróbicamente en cultivo


en continuo a 30°C. Como fuente de carbono se utiliza glucosa y como fuente
de nitrógeno amoníaco. Se produce una mezcla de glicerol y etano. En
estado estacionario, los caudales másicos de entrada y salida del reactor
son los siguientes :
Glucosa a la entrada : 36 kg/h
NH3 a la entrada : 0.40 kg/h
Células a la salida : 2.81 kg/h
Glicerol a la salida : 7.94 kg/h
Etanol a la salida : 11.9 kg/h
CO2 a la salida : 13.6 kg/h
H2O a la salida : 0.15 kg/h

6. Un calentador de serpentín se encuentra inmerso en un tanque agitado al


cual se alimenta un disolvente a 15°C con una capacidad calorífica de 2.1
KJ/Kg.°C a una velocidad de 15 kg/h. El disolvente calentado se descarga a
la misma velocidad. El tanque se llena inicialmente con 125 kg de disolvente
frio a 10°C. La velocidad de calentamiento del serpentin eléctrico es de 800
w. Calcular el tiempo requerido para que la temperatura del disolvente sea
de 60°C.

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Nombre de la Asignatura Biotecnología


Contenidos Transporte de materia : transferencia de
oxígeno.
Nombre de la Práctica Fluido en bioprocesos y transporte de
materia.
Competencia Al resolver el seminario el estudiante
estará en capacidad de conocer el tipo
de Fluido en Bioproceso y los
fenómenos de transporte de materia
al finalizar el taller el estudiante estará
en la capacidad resolver ejercicios
aplicados y hacer el diseño del
biorreactor.
Resultado de Aprendizaje El alumno identifica y describe los
aspectos básicos de los bioprocesos.
Requerimiento Hojas blancas, tabla de conversiones,
pizarrón, calculadora, plumones.

SEMINARIO N°03
FLUIDOS EN BIOPROCESOS Y TRANSPORTE DE MATERIA

1. Se analiza la reología de un caldo de Penicillium Chrysogenum utilizando


un viscosimetro de rodete. La densidad de la suspensión celular es
aproximadamente de 1000 kg/m3. Se colocan muestras del caldo sobre un
recipiente de cristal de 15 cm de diámetro y se agiran lentamente utilizando
para ello una turbina Rushton de 4 cm de diámetro. La velocidad de cizalla
media generada por este rodete es superior a la velocidad de agitación por
un factor de 10.2. Cuando el agitador mecánico se une a un dispositivo para
la medida del par de torsión y la velocidad de rotación, se obtuvieron los
siguientes resultados :
a) Puede describirse la reología de este cultivo utilizando el modelo de ley
exponencial?. Si es así calcular K y n.
b) Las medidas de viscosidad cuando se utilizan viscosímetros de rodete
debe realizarse bajo condiciones de flujo laminar. Compruebe que tipo
de flujo existe en este experimento.

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c) La utilización de turbinas para el viscosímetro de rodete restringe el


intervalo de velocidades de cizalla que pueden utilizarse. ¿Cómo se
mejora la situación si se utiliza un rodete de cinta helicoidal?
Velocidad del agitador (s-1) Par de torsión (Nm)
0.185 3.57x10-6
0.163 3.45x10-6
0.126 3.31x10-6
0.111 3.20x10-6

2. Una cepa de Azotobacter vinelandi esta siendo cultivada en un fermentador


agitado de 15 m3 para la producción de alginato. Bajo las condiciones
normales de operación, kLa es 0.17 s-1. La solubilidad del oxígeno en el
caldo es aproximadamente 8x10-3 kg/m3.
a) La velocidad especifica de consumo de oxigeno es 12.5
mmol/gr.h.¿Cual es la máxima concentración de células posible?.
b) .¿La bacteria sufre una inhibición del crecimiento después de verter
accidentalmente sulfato de cobre al cado de fermentación, lo que
produce una disminución en la velocidad de consumo de oxigeno hasta
3 mmol/gr.h. ¿Qué concentración máxima de células puede soportar
ahora el fermentador?
3. Un fermentador agitado de 20 l que contiene un cultivo de Bacillus
thuringiensis a 30°C se utiliza para la producción de un insecticida
microbiano. El valor de KLa se determina mediante el método dinámico. Se
corta el aire durante unos pocos minutos disminuyendo el nivel de oxígeno
disuelto y posteriormente se vuelve a restablecer. Cuando se alcanza el
estado estacionario, la tensión del oxígeno disuelto es el 78% de saturación
de aire. Se obtuvieron los siguientes resultados :
a) Calcular kLa
b) Se comete un error en la determinación del nivel de oxígeno disuelto en
estado estacionario, de manera que en vez del 78% se ha tomado un
valor de 70%. ¿Cuál es el porcentaje de error en kLa como resultado de
este 10% de error en la mediación de CAL?

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Tiempo 5 15
Tensión de oxígeno (% 50 66
saturación de aire)

4. Se cultiva la Serratia Marcescens en un medio dentro de un pequeño


fermentador agitado. Se mide el consumo de oxígeno a una concentración
celular de 22.7 g/l en peso de base seca.
a) Calcular la constante de velocidad para el consumo de oxígeno
b) Si se reduce la concentración celular a 12 gr/l cual es el valor de la
constante de velocidad?
Tiempo (min) Concentración de oxígeno (mmol/l)
0 0.25
2 0.23
5 0.21
8 0.20
10 0.18
12 0.16
15 0.15

5. Se inmoviliza la amiloglucosa procedente de la Endomycopsis bispora


sobre poliacrilamida gel. Se comparan las actividades de la enzima
inmovilizada y de la soluble a 80°C. Los datos de velocidad inicial medidos
con una concentración fija de sustrato se muestran en la siguiente tabla.
a) Cual es la vida media para cada forma de enzima.
Tiempo (min) Actividad enzimática (umol/mil.min)
Enzima soluble Enzima inmovilizada
0 0.86 0.45
3 0.79 0.44
6 0.70 0.43
9 0.65 0.43
15 0.58 0.41
20 0.46 0.40
25 0.41 0.39
30 --- 0.38
40 --- 0.37

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6. Para la eliminación de nitratos en aguas subterráneas se utilizan bacterias


desnitrificantes inmovilizadas en portadores de gel en un reactor agitado. A
una concentración de nitratos de 3 gr/m3, la velocidad de conversión es
0.011 g/m3.s catalizador. La difusividad efectiva del nitrato en el gel es
1.5x10-9 m2/s, los portadores son de 6 mm de diámetro y el coeficiente de
transferencia de materia líquido-sólido es 10-5 m/s.Km para las baterías
inmovilizadas es aproximadamente 25 g/m3.
a) Afecta la transferencia externa de materia a la velocidad de reacción
b) Cuanto se mejoraría la velocidad de reacción si se eliminarían las
resistencias externas e internas de la transferencia de materia./

7. Un caldo de fermentación con una viscosidad de 10-2Pa.s y densidad 1000


kg/m3 se encuentra agitado en un tanque de 50m3 con deflectores mediante
una hélice marina de 1.3 m de diámetro. La geometría del tanque viene
especificada en la gráfica. Calcular la potencia necesaria para una velocidad
del agitador de 4s-1.

8. El hongo Aureobasidium pullulans se utiliza para producir polisacárido


extracelular por fermentación de sacarosa. Transcurridas 120 horas de
fermentación se miden las siguientes fuerzas y velocidades de cizalla en un
viscosímetro de cilindro rotatorio.
Fuerza de cizalla (din/cm2) Velocidad de cizalla (s-1)
44.1 10.2
235.3 170
357.1 340
457.1 510
636.8 1020
a) Dibujar el reograma para este fluido
b) Determinar los parámetros no newtonianos del fluido
c) Cuál es la viscosidad aparente a las velocidades de cizalla : 15s -1 y 200 s-1

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9. Un fermentador agitado de 5 m de diámetro contiene un serpentin interno para


la transmisión de calor. El fermentador contiene un rodete de turbina para la
mezcla de 1.8 m de diámetro y opera a 60rpm. El caldo de fermentación tiene
las siguientes propiedades : µa=5x10-3 Pa.s; ⍴=1000 kg/m3; Cp=4.2 KJ/Kg.°C;
kfb=0.70 W/m.°C. Despreciando los cambios de viscosidad en la pared del
serpentin calcular el coeficiente de transmisión de c

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Nombre de la Asignatura Biotecnología


Contenidos Cinética de fermentaciones enzimáticas,
inmovilización de enzimas, biorreactores.
Nombre de la Práctica Cinética de Bioprocesos.
Competencia Al resolver el seminario el estudiante
estará en capacidad de conocer los
problemas de cinética para aplicarlos
en el diseño de un biorreactor y
explicar las fermentaciones.
Resultado de Aprendizaje El alumno describe la cinética de
fermentaciones enzimáticas y aplicarlas
al diseño de biorreactores enzimáticos.
Requerimiento Hojas blancas, tabla de conversiones,
pizarrón, calculadora, plumones.

SEMINARIO N°04
CINETICA DE BIOPROCESOS

1. A partir de cultivos en discontinuo de un microorganismo, se han obtenido los


parámetros del modelo de Monod que describe su crecimiento (µm=0,2 h-1 y
KS=0,35 g/L). Se desea llevar a cabo el mismo proceso en un biorreactor en
continuo de tanque agitado a escala industrial. Si la alimentación es estéril,
a) ¿Cuál es el volumen de reactor necesario para tratar un caudal de 500 L/h
de una corriente de substrato de 30 g/L si se desea alcanzar una
conversión del 90%?
b) ¿Cuál es la velocidad de dilución que permite maximizar la productividad
celular?
c) Si se sabe que el rendimiento de substrato en biomasa es de 0,09 g/g,
¿cuál será la productividad en biomasa?
d) Se propone modificar el equipo para incorporar un separador de biomasa
en la corriente de salida. Se obtiene así una concentración celular cuatro
veces mayor que la de salida del biorreactor. Si se desea obtener la misma
conversión global de sustrato y se aplica una relación de recirculación de
0,3, ¿Qué caudal será factible alimentar al reactor en estas condiciones?

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2. En la tabla se indican las concentraciones de substrato y biomasa en un


reactor continuo de tanque agitado operando en estado estacionario a varias
velocidades de dilución. Si la concentración de substrato en la alimentación
es de 70 g/L, calcular los valores de las constantes de Monod, m y KS, y el
rendimiento substrato en biomasa.

D (h-1) Substrato (g/L) Biomasa (mg/L)


0,3 4,5 3,26
0,25 4,1 3,36
0,20 1,6 3,96
0,12 0,8 4,06
0,08 0,4 4,16

Determinar la velocidad de dilución para maximizar la productividad celular

3. Dos fermentadores de tanque agitado están conectados en serie. El primero


tiene un volumen de operación de 100 L y el segundo de 50 L. La
alimentación del primer fermentador es estéril y contiene 5 g/L de substrato
y se alimenta al fermentador con un caudal de 18 L/h. El crecimiento
microbiano sigue una cinética de Monod, siendo los valores de K S y µm 120
mg/L y 0,25 h-1, respectivamente. Calcular la concentración de substrato en
el segundo fermentador en condiciones de estado estacionario y el
rendimiento del proceso.

4. Un microorganismo tiene una cinética de crecimiento que sigue el modelo de


Monod con los siguientes parámetros cinéticos y estequiométricos: µm=0,5
h-1, KS=2 g/L) y YX/S =1 g/g. Si se utiliza un fermentador de tanque agitado
con alimentación estéril (S0=50 g/L) a una velocidad de dilución de 0,402 h-
1, ¿Cuántos tanques en serie del mismo volumen, trabajando con la misma
D, serían necesarios para transformar el 98% del sustrato?.

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5. Una línea de células de hibridoma ratón-ratón se utiliza para producir


anticuerpos monoclonales. Se estudió el crecimiento en un cultivo
discontinuo con los siguientes resultados: ¿calcular la velocidad específica
de crecimiento durante la fase de crecimiento?,¿ cuál es el tiempo de
duplicación del cultivo?

Concentración de
ln de Concentración de
Tiempo (días) células (células ml-
células (células ml-1x10-6)
1x10-6)
0 0.45
0.2 0.52
0.5 0.65
1 0.81
1.5 1.22
2 1.77
2.5 2.13
3 3.55
3.5 4.02
4 3.77
4.5 2.2

6. Se mide el número de esporas viables de una nueva cepa de Bacillus subtilis


en función del tiempo a varias temperaturas.
a) Calcular la energía de activación para la muerte térmica de las esporas
de B. subtilis.
b) Cuál es la constante de muerte específica a 100°C.
c) Calcular el tiempo necesario para matar el 99% de las esporas de una
muestra a 100°C.

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Tiempo Número de esporas a (N) :


(min)
T=85°C T=90°C T=110°C T=120°C
0 2.40E+09 2.40E+09 2.40E+09 2.40E+09
0.5 2.39E+09 2.38E+09 1.08E+09 2.05E+07
1 2.37E+09 2.30E+09 4.08E+08 1.75E+05
1.5 -- 2.29E+09 2.20E+08 1.30E+03
2 2.33E+09 2.21E+09 9.85E+07
3 2.32E+09 2.17E+09 2.01E+07
4 2.28E+09 2.12E+09 4.41E+05
6 2.20E+09 1.95E+09 1.62E+05
8 2.19E+09 1.87E+09 6.88E+03
9 2.16E+09 1.79E+09 --

7. Se utiliza una enzima para producir un compuesto en la fabricación de una


loción protectora contra el sol, vmax para la enzima es 2.5 mmol/m3.s y Km
es 8.9 mM. La concentración inicial de sustrato es 12mM. Representar el
tiempo necesario para la reacción en función de la conversión de sustrato en
un reactor discontinuo. La enzima se desactiva con una vida media de 4.4
horas. Compara con la gráfica el tiempo de reacción necesario para alcanzar
una conversión del sustrato del 90% en un reactor discontinuo.

Concentración si tb
Sustrato (mM) (h)
%
0 12.00 0
10
20
40
50
60
80
90
95
99

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8. El salicilato inhibe la acción catalítica de la glutamato deshidrogenasa.


Teniendo en cuenta los resultados experimentales de la tabla, determinar
a) Tipo de inhibición. Suponer que la concentración de salicilato es
constante
b) b) Valor de la constante de Michaelis Menten
c) C) La constante de inhibición del complejo enzima-inhibidor.

Co (mM) Cs (mM) 1.5 2 3 4 8 16


0 r (mM/min) 0.21 0.25 0.28 0.33 0.44 0.44
40 r (mM/min) 0.08 0.1 0.12 0.13 0.16 0.18

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RUBRICA DE EVALUACION
Tema : ________________________ Fecha : ________________________
Alumno : ______________________________________________________

PONDERACION CARACTERISTICAS A CUMPLIR CUMPLE OBSERVACIONES


SI NO

10% La estructura de los cálculos es limpia


y ordenada
20% El alumno es capaz de identificar
aquellos subsistemas para los cuales
se puede escribir los balances.
30% El alumno es capaz de escribir las
ecuaciones que emplearía para
calcular las variables determinadas del
proceso.
30% Es capaz de realizar cálculos de
balances para unidades y/o procesos
que incluyan corriente de recirculación
10% El alumno cumple con la entrega a
tiempo
Nota :
Docente :

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FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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