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Ejercicios propuestos:

Biorreactores Continuos de Tanque Agitado de Mezcla Completa. 1) La tabla que se muestra a continuacin se presentan los datos obtenidos en un proceso de fermentacin, llevado a cabo en un biorreactor contino de tanque agitado operado en estado estacionario a varias velocidades de dilucin. a) Calcular los parmetros de la ecuacin de velocidad suponiendo que sigue una cintica de Monod b) Dada la concentracin de sustrato en la entrada del reactor de 100 [g/L] y asumiendo que la alimentacin es estril, calcule el rendimiento de sustrato y obtener una expresin para la velocidad de consumo de sustrato. c) Determinar el caudal de alimentacin que podr ser procesado en un reactor similar de 100 [m3] en estado estacionario, si se pretende convertir el 80% de una alimentacin estril conteniendo 120 [g/L] de sustrato.

X [g/l] S [g/l] -1 D [h ]

5.96 0.57 0.38

5.98 0.33 0.33

5.99 0.23 0.29

6.00 0.14 0.235

6.01 0.11 0.232

2) Un reactor simple de 5 litros de volumen til, presenta algunos problemas de diseo que ocasionan una imperfecta agitacin. El equipo se va a utilizar para cultivar una levadura de un m de 0,48 [h-1], Ks = 0,072 [g/L]. La alimentacin se har a 1,1 [L/h], con una concentracin de nutriente limitante de 6 [g/L] y un Yx/s de 0,43 [g/g]. Se supone que un 35% de flujo de alimentacin no pasa por el reactor, sino que se une a la corriente de salida, y que el resto del flujo ingresa al reactor. Determinar Qmax, , X y S. 3) En el desarrollo de una tecnologa microbiana para tratar un efluente industrial se requiere de un quimiostato de 120 litros de volumen de trabajo con un flujo de 20 [L/h]. La poblacin microbiana presenta un m de 0.22 [h-1], Ks de 1000 [ppm] e Yx/s de 0.28 [g/g]. Los ensayos preliminares, hacen recomendable trabajar a un D=0.82*Dc. Determinar la concentracin de sustrato en la alimentacin y en la descarga, y la concentracin celular en estado estacionario. 4) La corriente de recirculacin de un reactor es la corriente clara de un separador solidoliquido, por lo tanto el producto del sistema total es la corriente concentrada de clulas que sale del separador. El volumen de operacin del reactor es de 2,2 [m3] y el factor de concentracin c, es de 1,8. La velocidad de dilucin del sistema es de 0,31 [h-1]. La velocidad especfica de crecimiento mxima es de 0,62 [h-1], el Ks es de 0,077 [g/L], la fraccin de recirculacin es de 0,9, la concentracin de sustrato en la alimentacin es de 40 [g/L], con un Yx/s de 0.29 [g/g].

a) Calcular los valores estacionarios de la concentracin celular en el reactor y en la corriente concentrada, la concentracin de sustrato limitante, la velocidad especifica de crecimiento, la productividad de clulas en el reactor, y la velocidad msica de salida del sistema. b) Calcular las condiciones de operacin estacionarias de un reactor simple, del mismo volumen operando en condiciones equivalentes. 5) En un laboratorio de Bioprocesos, se dispone de un cultivo continuo que consiste en dos quimiostatos en serie de 80 litros de volumen de trabajo cada uno. Se requiere realizar un ensayo con una bacteria cuyo m de 0,57 [h-1]. Se trabajara con un medio definido por carbono, con un Ks de 0,09 [g/L], y un Yx/s de 0,43 [g/g]. A la primera etapa se alimentara un flujo de 32 [L/h], con una concentracin de sustrato limitante de 25 [g/L]. a) Determinar las condiciones de salida de cada etapa en estado estacionario b) Determinar la productividad volumtrica en cada etapa. 6) Un fermentador continuo de laboratorio de 2,5 litros est condicionado para operar con retencin de clulas para lo cual tiene dos salidas. Una con un micro filtro absoluto y la otra directa del caldo de cultivo. A travs de la salida del micro filtro sale una fraccin de 0.3. Establecer la ecuacin que define completamente la operacin del fermentador en estado estacionario. Calcular la concentracin celular y la concentracin de nutriente limitante en el fermentador en estado estacionario, si: m = 0.83 [h-1], Ks = 0.377 [g/L], e Yx/s = 0.33 [g/g]. Con un medio con 4 [g/l] de nutriente limitante y un flujo de 8.5 [ml/min].

7) A partir de cultivos en discontinuo de un microorganismo se han obtenido los parmetros del modelo de Monod que describe su crecimiento m = 0,2 [h-1], y Ks= 0,35 [g/L]. Se desea llevar a cabo el mismo proceso en un biorreactor en continuo de tanque agitado a escala industrial. a) Si la alimentacin es estril, Cul ser el volumen de fermentador necesario para tratar un caudal de 500 [L/h] de una corriente de sustrato de 30 [g/L] si se desea alcanzar una conversin del 90%? Cul ser la velocidad de dilucin que permite maximizar la productividad celular? Si se sabe que el rendimiento de sustrato en biomasa es 0,09 [g/g], Cul ser la productividad en biomasa? b) Se propone modificar el equipo incorporando un separador de biomasa en la corriente de salida. Se obtiene as una corriente de recirculacin con una concentracin celular cuatro veces mayor que la de salida del biorreactor. Si se desea obtener la misma conversin global de sustrato y se aplica una relacin de recirculacin de 0,3. Qu caudal ser factible alimentar en estas condiciones? c) Qu puede concluir comparando ambas respuestas?

8) Dos cepas microbianas coexisten en un fermentador continuo de mezcla completa y compiten por el mismo sustrato limitante. Suponer que se cumple el modelo cintico propuesto por Monod y que los rendimientos de sustrato en clulas son constantes e iguales para ambas. Plantear las ecuaciones que describen el sistema en funcin de los parmetros cinticos (m y Ks), los rendimientos y la velocidad de dilucin.

9) Una levadura es cultivada en un quimiostato simple de 110 litros de volumen de medio. La levadura es susceptible a inhibicin por la fuente de carbono y energa de acuerdo a: = ( + ) ( + )

Donde

m = 0,39 [h-1], Ks= 0,098 [g/L], KI = 0,5 [g/L] El fermentador se opera a una velocidad de dilucin de 0,21 [h-1], obtenindose una concentracin celular en estado estacionario de 7 [g/L]. a) Especifique (X y S) los estados estacionarios que se pueden obtener y analice su estabilidad. b) Disear un medio de cultivo adecuado bajo limitacin por carbono. Especifique slo las fuentes de C, N, P y Mg. c) Determine la mxima productividad volumtrica de clulas QXmx 10) En una planta de tratamiento se trata un efluente industrial en un quimiostato simple de un volumen til de 200 litros, el flujo que ingresa al reactor es de 35 [L/h]. Los lodos del reactor presentan una m = 0,34 [h-1], un KS de 1500 [ppm] y un Yx/s = 0,44 [g/g]. En pruebas realizadas en planta piloto se determin que es recomendable, para este tipo de efluentes, trabajar con una velocidad de dilucin del orden de 4/5 la velocidad de dilucin crtica. Determinar la concentracin del efluente a tratar en la entrada y en la salida del reactor, la eficiencia de remocin y la concentracin celular operando en estado estacionario.

11) Un sistema biolgico de un residuo industrial lquido, consiste en 3 reactores de estanque continuo agitados de 20, 30 y 70 [m3] respectivamente. Los dos tanques menores reciben cada uno 5000 [L/h] de un efluente que contiene 25 [g/L] de un compuesto organico limitante. La poblacin microbiana degrada el ril con un rendimiento celular de 0,33 [g/g], un Ks de 1300 [mg/L] y un m = 0,3 [h-1]. Los efluentes de estos reactores alimentan al tercero. a) Determinar las condiciones de crecimiento y salida de cada tanque.

b) Calcular las velocidades de consumo de sustrato (g/L) de cada tanque y del sistema completo. 12) Considere un microorganismo que sigue la cintica de Monod, donde m = 0,5 [h-1] y Ks= 2 [g/L]. En un reactor continuo perfectamente agitado en estado estacionario S0= 50 [g/L] e Yx/s = 1 [g/g] Cul ser la velocidad de dilucin a la que se debe operar para obtener la mxima produccin de clulas? 13) En una planta piloto se dispone de un sistema de fermentacin continua consistente en dos quimiostatos en serie de 50 litros de volumen de trabajo cada uno. Se desea cultivar una determinada bacteria (55% C; 11% N; 1,2% S; 2,0% Mg; 1,3% P) cuya velocidad especfica de crecimiento mxima es de 0,45 [h-1], en las condiciones del ensayo y su constante de afinidad es de 28 [mg/L] para glicerol, que ser utilizado como nutriente limitante. Considere un rendimiento en clulas constante de 0,45 [g/g]. La primera etapa se operar a D= 0,23 [h-1], con una concentracin de glicerol en la alimentacin de 18 [g/L]. La segunda etapa tiene una alimentacin secundaria de 6 [L/h] con 100 [g glicerol/L]. a) Determinar los valores estacionarios de X, S y en cada etapa. b) Determinar las productividades volumtricas de clulas en la primera etapa, en la segunda etapa y la productividad global del sistema. c) Cmo varan los resultados de (a) si la alimentacin secundaria incluye adems 5 g/L de clulas? 14) Se desea reducir la concentracin de un sustrato orgnico 5 [g/L] en 200 [L], usando microorganismos. El microorganismo seleccionado crece de acuerdo a la relacin de Monod con parmetros m = 0,27 [h-1], KS= 1 [mg/L], Yx/s = 0,15 [g/g]. Este ltimo coeficiente puede considerarse constante. El problema es determinar bajo qu condiciones de operacin se realizar el proceso: batch o continuo. Para ello dispone de un reactor de 10 litros de volumen til. a) Si el proceso se realiza en operacin batch, determine el tiempo necesario para reducir la concentracin de sustrato a 0,5 [g/L]. Asuma que la concentracin inicial de biomasa es de 0,1 [g/L]. b) Si el proceso se realiza en operacin de cultivo continuo, determine el tiempo necesario para llevar a cabo el proceso operando en estado estacionario. En este ltimo caso cmo afectara su resultado si Ks = 2 [g/L] 15) Usted dispone de la siguiente informacin experimental del crecimiento de una bacteria, obtenida en cultivo batch:

t (h) X (g/L) S (g/L) t (h) X (g/L) S (g/L)

0,00 0,10 100,0 6,50 2,56

0,50 0,13 99,93 7,00 3,29

1,00 0,16 99,84 7,50 4,22

1,50 0,21 99,72 8,00 5,42

2,00 0,27 99,57 8,50 6,95

2,50 0,35 99,38 9,00 8,93

3,00 0,45 99,13 9,50 11,45

3,50 0,57 98,82 10,00 14,70

4,00 0,74 98,41 10,50 18,86

4,50 0,94 97,89 11,00 24,19

5,00 1,21 97,22 11,50 31,01

5,50 1,56 96,36 12,00 39,60

6,00 2,00 95,26 12,50 4,10

93,84

92,02

89,69

86,70

82,86

77,94

71,62

63,51

53,11

39,78

22,71

1,25

0,00

a) Cul es la velocidad mxima de crecimiento b) Cul es el valor del rendimiento global de sustrato en clulas c) Cul sera el rango de velocidad de flujo de alimentacin que usted usara en fermentaciones de cultivo continuo de esta bacteria si el reactor tiene una capacidad de 20 litros. d) Usted realiza un experimento de cultivo continuo a velocidad de dilucin 0,35 [h-1]. Transcurrido un tiempo se observa que el cultivo est contaminado. El microorganismo contaminante se identifica y se sabe que ste tiene una velocidad mxima de crecimiento de 0,4 [h-1]. Es posible eliminar el contaminante? Justifique. 16) En un fermentador simple de una etapa se desea cultivar una bacteria en un medio compuesto de actico y sales minerales. El reactor tiene un volumen til de 9 litros y se ha determinado para el cido actico un Ks de 39 [mg/L], un valor de Yx/s constante e igual al 90% del mismo. Una experiencia de lavado arroj los siguientes resultados a D = 0,51 [h-1]
Tiempo (h) X (g/L) 0 3,0 1 2,85 2 2,5 3 2,0 4 1,6 5 1,05 7 0,82

a) Disear el medio de cultivo en cuanto a las fuentes de C, N, Mg y P, si se desea tener limitacin por actico y se opera a D=0,27 [h-1] b) Determinar la velocidad de dilucin a la cual se presenta la mxima productividad de clulas. 17) Considere un quimiostato operando bajo condiciones estacionarias con produccin de biomasa de acuerdo a la cintica de Monod. Asuma que la mxima velocidad especfica de crecimiento es 1 [h-1] y la constante de saturacin es 500 [mg/L]. La alimentacin es estril y contiene 10 [g/L] de sustrato carbono; el flujo de alimentacin es 300 [L/h]. El volumen de lquido

en el fermentador es 1000 litros. El rendimiento de biomasa es 0,5 [g biomasa /g sustrato consumido]. a) Discuta el significado fsico y fisiolgico de la velocidad crtica de dilucin y las implicancias de operar bajo esta condicin. Claramente determina un estado improductivo, entonces cul sera el inters de conocer y operar a esta velocidad? b) Determine la velocidad de dilucin crtica para la cintica y concentracin de alimentacin dadas. c) Qu modificaciones fsicas podra sugerir a este cultivo para operar a elevados flujos sin causar lavado? 18) En una planta piloto se dispone de un sistema de cultivo continuo que consiste en dos quimiostatos en serie de 50 [L] de volumen til cada uno. Se desea conocer el cultivo de una bacteria (55% C; 11% N; 1,2% S; 2,0% Mg y 1,3% P), cuya M = 0,45 [h-1], y su Ks = 28 [mg/L], para glicerol que ser el nutriente limitante. La primera etapa opera a una velocidad de dilucin de 0,32 [h-1], con una alimentacin de [18 g/L] de glicerol. La segunda etapa tiene una alimentacin secundaria de 6 [L/h] con 100 [g/L] de glicerol. a) Determinar los valores estacionarios de X, S, en cada etapa. b) Determinar la productividad volumtrica de clulas en la primera etapa, en la segunda etapa y la productividad global del sistema. 19) Se desea producir un metabolito P mediante una fermentacin continua con un microorganismo anaerobio facultativo en un sistema quimiostato de 2 etapas. La primera (200 litros de volumen til) se opera a D= 0,4 [h-1], en condiciones aerobias en las cuales P no se produce. El segundo reactor (300 litros) se opera sin aireacin y en l se produce un metabolito con Yp/s = 0,44 [g/g]. Se utiliza un medio limitado por sacarosa con una concentracin inicial de 15 [g/L]. En base a las condiciones de cultivo, en la primera etapa se tiene un M= 0,52 [h-1] , un Yx/s = 0,5 [g/g] y Ks = 0,018 [g/L]. La segunda etapa posee una alimentacin secundaria de 15 [L/h] de una solucin de 100 [g/L] de sacarosa. Se sabe adems que para la segunda etapa M = 0,3 [h-1], Yx/s = 0,25 [g/g] y Ks = 0,018 [g/L]. a) Determinar la concentracin final del producto. b) Discuta lo que sucedera en el sistema si el flujo de alimentacin se aumenta en 5 [L/h] para compensar una filtracin continua en el primer reactor que implica una prdida de 5 litros por cada hora de operacin. 20) Un fermentador de tanque agitado de 1500 litros de volumen de operacin es utilizado en un proceso continuo con una levadura de M= 0,34 [h-1] y un Ks = 80 [ppm]. La levadura presenta auxotrofa de un metabolito intermedio que es usado como nutriente limitante con un Yx/s = 4,5 [g/g] y una concentracin en la alimentacin de 5 [g/L] para un flujo de 165 [L/h]. El efluente del fermentador pasa por una centrfuga continua que produce una corriente concentrada de clulas, que es bombeada a otra seccin de la planta, y otra corriente clara que es recirculada

parcialmente al fermentador, purgndose el resto. El factor de concentracin es 3,3 y el factor de recirculacin medido despus de la purga es de 1,8. Si se desea que el flujo de la purga sea un 65% del flujo de la corriente concentrada de clulas, determine los valores de los flujos y la concentracin de clulas y nutrientes limitantes de todas las corrientes, cuando se opera en estado estacionario. Adems comparar los resultados con los que se obtendran con un quimiostato simple de 1 etapa. 21) Un quimiostato de 12 m3 de volumen con recirculacin de clulas y sin purga, posee una alimentacin fresca de 6240 L/h con una concentracin de 1,2 g/L. Se pide determinar el factor de concentracin en el separador, la concentracin celular en el fermentador y la concentracin de sustrato en el efluente. Datos: M = 0,62 [h-1] = 0,35 [h-1] KS = 0,2 [g/L] Yx/s = 0,5 [g/g]. 22) Se tienen dos reactores en serie perfectamente agitados. El segundo posee recirculacin parcial de clulas. Establecer las ecuaciones que caracterizan esta configuracin. Escriba las suposiciones y la notacin utilizada. 23) Se propone un sistema de fermentacin continua en rgimen permanente que consta de un fermentador con reciclo de clulas cuyo efluente alimenta un segundo fermentador. Sugiera una expresin que relacione la tasa especfica de crecimiento en el segundo reactor con los parmetros D, 1, X1 y X2. Considere: D=F/V es la tasa (velocidad) de dilucin, igual en ambos fermentadores La alimentacin fresca es estril es la razn de reciclo y c es el factor de concentracin

24) Un microorganismo tiene una cintica de crecimiento que sigue el modelo de Monod con los siguientes parmetros: M = 0,5 [h-1]; KS = 2 [g/L]; YX/S = 1 [g/g]. Si se utiliza un fermentador de tanque agitado con alimentacin estril (S0 = 50 g/L) a una velocidad de dilucin de 0,402 [h-1], cuntos tanques en serie del mismo volumen, trabajando con la misma D, seran necesarios para transformar el 98% del sustrato? 25) Se desea producir un metabolito P en un cultivo continuo de 2 etapas. En la primera etapa de 100 litros de volumen til, se acumula biomasa si produccin de P. La segunda etapa de 160 litros, recibe una alimentacin secundaria que contiene glucosa, inductor de la sntesis de P y un inhibidor total del crecimiento. La cintica de produccin de P est representada por: = 0,06

Determinar las condiciones de salida de cada etapa si F = 35 [L/h], F = 3 [L/h], S0 es de 20 [g/L], S0 es de 50 [g/L], M = 0,48 [h-1]; YX/S = 0,44 [g/g] e YP/S = 0,66 [g/g]