TRABAJO DE BIOQUÍMICA

ENZIMAS

INTEGRANTES:

DAYSI RAQUEL FLOREZ VERTEL

BRANDON PUELLO PETRO
BLEYDIS JOHANA JOHNS PACHECO
MARIA FERNANDA BELLO SALGADO
OSCAR ANDRES PEREZ LÓPEZ

DOCENTE:
MARIA DORIA RODRÍGUEZ

MARTES DE 3 A 6

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
BACTERIOLOGÍA
MONTERÍA - CÓRDOBA
2020
PREGUNTAS
 1. La penicilina es hidrolizada y con ello inactivada por la penicilinasa una enzima
presente en algunas bacterias resistentes. La cantidad de penicilina hidrolizada en
un minuto en una solución de 10 ml que contiene 10-9 g de penicilinasa purificada, se
midió como función de la concentración de la penicilina obteniéndose los siguientes
datos:

[penicilina] x 10-5 ( mol/L) Velocidad de hidrólisis(mol/min) x10-9

0,1 0,11

0,3 0,25

0,5 0,34

1,0 0,45

3,0 0,58

6,0 0,61

A. Graficar V contra [ penicilina]

Se realizará con los valores de la tabla anterior

 B. Graficar 1/V contra 1/[ penicilina]

se hará lo grafica con los siguientes valores:

 1/V 1/[penicilina]

9,09 10

4 3,33

2,94 2

2,22 1

1,72 0,33

1,63 1,16

y la gráfica queda así:

C. Hallar el valor de Km y Vmax (gráfica de Michaelis –Menten y Lineweaver-

Burk.
 D. Predecir la velocidad de hidrólisis, para una concentración de penicilina de
8x10- 5M

V= 0.11
Concentración: 0.1
0.11 ⇒ 0.1
x ⇒ 8x10-5

8x10-5 X 0.11 / 0.1 = 82.5 mol/min.

es la velocidad de hidrólisis para una concentración de 8x10- 5M

2. Una enzima tiene una constante de Michaelis –Menten Km= 0.0001, cuando la
concentración del sustrato es [S] = 0.1 M, se observa que en 15 minutos se destruye el
20% de sustrato.¿ Qué cantidad de sustrato se transformará en 30 minutos?

Km = 0,001%
[S] = 0,1M Tiempo = 15 min, se destruye 20% de sustrato
El 20% de 0,1 M = 0,02

15 ⇒ 20
30 ⇒ X

30 X 20 / 15 = 40% 40% de 0,1 = 0,04

0,04 M es la cantidad del sustrato que se transforma en 30 min

3. El enzima B- hidroxi aspartato aldolasa, cataliza la reacción de ruptura, por lo cual

el B-metil-B-hidroxi aspartato se convierte en piruvato y glicina, es decir:

[ S] mmol/ L V mmol/min 1 / [S ](L/mmol) 1 / V(min/mmol)

4,0 2,5 0,25 0,4

3,0 2,24 0,33 0,44

2,25 1,94 0,44 0,51

1,50 1,25 0,66 0,64

a. Complete la tabla anterior.

b. grafique V vs [S ]
c. grafique 1/V vs 1/ [S ]
 d. calcule Km y Vmax de la reacción enzimática en ambas gráficas. Explique
dichos resultados

Valores de Km y Vmax de la gráfica 1

Valores de Km y Vmax de la gráfica 2
EXPLICACIÓN DE RESULTADOS:
Tenemos que para la gráfica 1 se tomaron los últimos valores tanto de volumen como del sustrato
V= 1.55 y S= 1.50 y los primeros de estos V= 2.5 y S =4.0 donde se restaron los volúmenes y los
sustratos, este resultado nos dio el valor de una pendiente y sus interceptos y con la fórmula
( escribe la fórmula) se hallaron el Vmax= 1.02 y el Km= 0,3876
En la gráfica 2 se tomaron los valores de velocidad V= 0,64 S = 0.66, también, V= 0.4 S= 0.25,
con una velocidad máxima de Vmax= 3.95 Km= 2.30 , y se noto que el valor de Km aumentó en
la gráfica 2, al igual que la velocidad máxima

e. Determine la pendiente y los interceptos.

 f. prediga la velocidad de la reacción para una concentración de sustrato de 1
mmol/L.

4. Los siguiente datos experimentales corresponden a la acción de la enzima fosfatasa

sobre el glicerol fosfato:
 [ S] mmol/ L V mmol/min 1 / [S ](L/mmol) 1 / V(min/mmol)

0.100 0.91 10 1.0

0.050 0.83 20 1.2

0.020 0.67 50 1.5

0.010 0.50 100 2.0

0.005 0.33 200 3.0

0.002 0.17 500 5.8

0.001 0.09 1000 11.1

a. complete la tabla anterior.

b. grafique V vs [S ]

Se graficara con los siguientes datos

La gráfica queda así:

 c. grafique 1/V vs 1/ [S ]

Se graficara con los siguientes datos:

La gráfica queda así:

 d. calcule Km y Vmax de la reacción enzimática en ambas gráficas. Explique
dichos resultados

Se hallan los valores de Km en las gráficas

Se halla el valor de Vmax de las gráficas
e. Determine la pendiente y los interceptos.
 f. prediga la velocidad de la reacción para una concentración de sustrato de
0.0005 mol/L.

5. Explique mediante ecuaciones por lo menos 2 clases de enzimas.

● Hidrolasa.
 H20
NH - CO - NH² ⇒ CO, + 2 NH
Ureasa
Catalizan reacciones de hidrólisis, es decir, de ruptura de algún tipo de enlace introduciendo
grupos OH- e OH +. Actúan ligadas al agua.

● Transferasas
Glucosa +ATP ⇒ glucosa-6-fosfato + ADP
Glucoquinasa
Estas enzimas catalizan reacciones en las que se transfiere un grupo funcional, distintos del
hidrógeno, desde un sustrato a otro.

6. Explique mediante ejemplos concretos cómo se da la autorregulación o control de la

actividad enzimática.

Distintas células tienen diferentes necesidades y circunstancias que además, cambian a lo largo
del tiempo. Las células estomacales por ejemplo, necesitan enzimas distintas a las que necesitan
las células que almacenan grasas, las células cutáneas, sanguíneas o nerviosas. Una célula
digestiva también trabaja mucho más para procesar y descomponer los nutrientes inmediatamente
después de comer que muchas horas después de una comida. A medida que estas necesidades y
condiciones celulares cambian, también lo hacen la cantidad y funcionalidad de las diferentes
enzimas.
Los factores que pueden controlar la actividad de las enzimas. Estos incluyen el pH y la
temperatura así como:
● Moléculas reguladoras: La actividad enzimática pueden "prenderse" o "apagarse" con
moléculas activadoras e inhibidoras que se unen específicamente a la enzima.
● Cofactores: Muchas enzimas solo son funcionales cuando se unen a moléculas auxiliares
no proteicas conocidas como cofactores.
● Compartimentación: Almacenar enzimas en compartimientos específicos puede evitar que
causen daño o proporcionan las condiciones adecuadas para su actividad.
● Inhibición por retroalimentación: Las enzimas metabólicas clave suelen inhibirse por el
producto final de la vía que controlan (inhibición por retroalimentación).

7. Explique por qué el captopril y el enalapril son ejemplos de inhibidores competitivos

de la enzima conversora de la angiotensina.

Porque estos medicamentos bloquean la acción de una enzima del organismo que estrecha los
vasos sanguíneos. Si se relajan los vasos sanguíneos, se reduce la presión arterial y el corazón
recibe más sangre rica en oxígeno. Estos inhibidores de la ECA reducen la cantidad de sal y
líquido en el organismo, lo cual también ayuda a reducir la presión arterial.Por lo que, los
inhibidores de la ECA evitan que una enzima en del cuerpo produzca angiotensina II, una
sustancia que estrecha los vasos sanguíneos. Este estrechamiento puede causar presión arterial
alta y forzar al corazón a trabajar más. La angiotensina II también libera hormonas que elevan la
presión arterial..

8. Mencione ejemplos de drogas o sustancias que inhiben algunas de las enzimas en el

metabolismo de los peces.

● Lipasa Pancreática puede ser inhibida por el Orlistat

● La podemos encontrar en la digestión pancreática de los peces Endopeptidasas:
Elastasa I y II. Digieren elastina y otras proteínas estructurales. Puede ser inhibida
por La Alfa 1-antitripsina
● Glucosidasa puede ser inhibida por Acarbosa
● La proteasa puede ser inhibida por Amprenavir.

9. Defina los siguientes términos y mencione ejemplos.

a. Isoenzima o Isoenzimas

Son enzimas que difieren en secuencia de aminoácidos, pero catalizan la

misma reacción química. Estas enzimas suelen mostrar diferentes parámetros cinéticos o
diferentes propiedades reguladoras.

Ejemplos:
● Creatin fosfo quinasa o CPK: Aparece en forma de dímero con dos tipos de subunidades,
la M (tipo músculo) y la B (tipo cerebro).
● Lactato deshidrogenasa ó LDH: Es una enzima tetramérica que contiene solo dos
subunidades distintas: las designadas H del corazón (miocardio) y las M del músculo. .
● Transaminasas o Aminotransferasas GOT o AST y GPT o ALT: Actualmente se
determina por separado la glutámico oxalacético transaminasa o GOT, llamada también
aspartato aminotransferasa o AST, y la glutámico pirúvica transaminasa o GPT o alanino
aminotransferasa o ALT.
● Fosfatasa Alcalina o Fal: En el suero humano existen varios tipos de fosfatasa alcalina,
una enzima derivada de la membrana celular cuya función fisiológica no es conocida y
que hidroliza ésteres fosfóricos sintéticos a pH 9.
● Amilasa: Existen dos isoenzimas de la amilasa: la “P” o pancreática, que pasa más
fácilmente a la orina y la “S” o salival, más rápida en la electroforesis. Su distinta
proporción tiene interés diagnóstico, especialmente en las parotiditis para confirmar o
descartar la complicación pancreática.
 b. Zimógenos

La zimógeno o también conocida como proenzima es un precursor enzimático

inactivo. Un zimógeno requiere un cambio bioquímico (como una reacción de hidrólisis que
revele el sitio activo, o que cambie la configuración para revelar el sitio activo) para
convertirse en un enzima activo. El cambio bioquímico suele ocurrir en un lisosoma, donde
una parte específica de la enzima precursora se parte para activarla.

Ejemplos:
● angiotensinógeno
● tripsinógeno
● chymotrypsinogen
● pepsinógeno
● La mayoría de las proteínas en el sistema de coagulación (ejemplos, la protrombina, o
plasminógeno)
● Algunas de las proteínas del sistema del complemento

c. Holoenzima

Una holoenzima es una enzima que está formada por una parte proteica llamada
apoenzima combinada con una molécula no proteica llamada cofactor. Ni la apoenzima ni el
cofactor son activos cuando están por separado; es decir, para poder funcionar tienen que
acoplarse. Las holoenzimas son las enzimas combinadas y, en consecuencia, son catalíticamente
activas. Las enzimas son un tipo de biomoléculas cuya función es básicamente incrementar la
velocidad de las reacciones celulares.

Ejemplos:
● ARN polimerasa: La ARN polimerasa es una holoenzima que cataliza la reacción de
síntesis del ARN. Esta holoenzima es necesaria para construir cadenas de ARN a partir de
cadenas molde de ADN. Su función es agregar ribonucleótidos en el extremo 3 de una
molécula creciente de ARN.
● ADN polimerasa: La ADN polimerasa es también una holoenzima que cataliza la
reacción de polimerización del ADN. Esta enzima cumple una función muy importante
para las células porque es la encargada de replicar la información genética. La ADN
polimerasa necesita un ion con carga positiva, normalmente magnesio, para poder realizar
su función.
● Anhidrasa carbónica: La anhidrasa carbónica, también llamada deshidratasa de carbonato,
pertenece a una familia de holoenzimas que catalizan la conversión rápida del dióxido de
carbono (CO2) y el agua (H20) en bicarbonato (H2CO3) y protones (H+)..
● Hemoglobina: La hemoglobina es una holoenzima muy importante para el transporte de
gases en los tejidos animales. Esta proteína presente en los glóbulos rojos contiene hierro
 (Fe+2), y su función es transportar el oxígeno desde los pulmones hacia otras áreas del
cuerpo.
● Citocromo oxidasa: El citocromo oxidasa es una enzima que participa en los procesos de
obtención de energía, los cuales se llevan a cabo en las mitocondrias de casi todos los
seres vivos.
● Piruvato quinasa: El piruvato quinasa es otra holoenzima importante para todas las
células, debido a que participa en una de las rutas metabólicas universales: la glucólisis.
Su función es catalizar la transferencia de un grupo fosfato de una molécula llamada
fosfoenolpiruvato a otra molécula llamada adenosina difosfato.

10. Se podría afirmar que la gran mayoría de las enfermedades producidas en los seres
vivos( peces) se debe en gran parte a la ausencia o mal funcionamiento de las
enzimas relacionadas con dicho órgano o tejido afectado.

No se podría afirmar ya que la mayoría de las enfermedades en peces se relacionan con

problemas enzimáticos, tiene afectación parte del metabolismo de las grasas, de los
carbohidratos, proteínas, pigmento epitelial y de los minerales. Estas patologías pueden ser
causantes de agentes infecciosos, parasitarios o pueden ser debido a falta de nutrición,
desequilibrios hormonales y defectos embriológicos en parte también por las condiciones físicas
y químicas anormales.

BIBLIOGRAFÍA
❖ https://es.wikipedia.org/wiki/Holoenzima#:~:text=Una%20holoenzima%20es%20una
%20enzima,enzima%20completa%20y%20activada%20catal%C3%ADticamente.
❖ Bárzana, E. y A. López-Munguía. 1995. La tecnología enzimática. En Biotecnología
Alimentaria, pp. 103-123. Limusa, México D.F.
❖ Chandrasekaran, A 1997. Industrial enzymes from marine microorganisms: The Indian
scenario. J. Mar. Biotechnol. 5: 86-89.
❖ Fenical, W. y PR. Jensen. 1993. Marine microorganisms: a new biomedical resource. In
Marine Biotechnology. Pharmaceutical and Bioactive Natural Products. Edited by
Attaway DH, Zaborsky OR, New York: Plenum Press, 1: 419-457.
❖ Harris, JM. 1993. The presence, nature, and role of gut microflora in aquatic
invertebrates: a synthesis. Microb. Ecol. 25: 195-231.
❖ León, J. 1996. Cepas nativas del bacterioneuston marino con actividad antagónica frente a
bacterias ictiopatógenas. Caracterización preliminar de substancias inhibitorias. Tesis Mg.
Sc. Universidad Católica de Valparaíso, Chile.
❖ León, J, P. Ramírez, M. Alcarráz y E. Castro. 1998. Bacterias marinas asociadas a
invertebrados: Evaluación del efecto inhibitorio frente a patógenos de peces, moluscos y
crustáceos. Libro de Resumen de la VII Reunión Científica de ICBAR, UNMSM, pp. 77.
❖ Martín, Y P. 1976. Importance des bactéries chez les mollusques bivalves-Haliotis, 1976-
78, volume 7: 97-103
❖ Martín, Y P y M. A. Bianchi. 1980. Structure, diversity and catabolic potentialities of
aerobic heterotrophic bacterial populations associated with continuous cultures of natural
marine phytoplankton. Microb. Ecology., 5: 265-279.
❖ Marty, P. y Y. Martin. 1992. Aerobic heterotrophic bacteria associated with some
Mediterranean coastal benthic invertebrates: Characterization of strains, exoenzyme and
antibiotic production. Mar Life. 1 (1): 1-8.
❖ Oliver, J. D. 1982. Taxonomic scheme for the identification of marine bacteria. Deep-Sea
Res. 29: 795-98.
❖ Pellón, F. 2000. Aislamiento y caracterización de bacterias marinas con capacidad
antibacteriana, asociadas a moluscos bivalvos en cultivos. Tesis para optar al Título
Profesional de Biólogo con mención en Microbiología-Parasitología, Facultad de Ciencias
Biológicas, UNMSM.
❖ Prieur, D. 1989. Deep-sea hydrothermal vents of 13o N (East Pacific Rise): preliminary
bacterial survey and biotechnological potentia Microbiology of extreme environments and
its potential for biotechnology. Da Costa, Duarte and Williams Eds., Elsevier Applied
Sciences, London and New York: 163-166.
❖ Sawabe, T, Y. Oda, Y. Shiomi y Y. Ezura. 1995 Alginate degradation by bacteria isolated
from the gut of sea urchins and abalones. Microb. Ecol. 30:193-202.
❖ Stanley, I. T y P. M. Stanley. 1986. Potential commercial applications in aquatic
microbiology. Microb. Ecol., 12:79-100.
❖ Enzima, apuntes de biologia, 4 de diciembre de 2017, por alicia mg, dogsity.
❖ Regulación enzimática, khant academy, hace 4 años.