PROTOCOLOS DE LABORATORIO

BIOQUIMICA METABOLICA

GENERALIDADES
La práctica de laboratorio busca que el estudiante pueda muestrear: suelos, pastos, forrajes,
concentrados y sangre animal, en un sistema productivo, con el fin de utilizarlos como insumos
para el desarrollo de las prácticas de laboratorio.

Así mismo que cada estudiante pueda Aplicar técnicas analíticas instrumentales para determinar
en las muestras obtenidas en el sistema productivo;

- Actividad ureásica (AU)

- Actividad catalasa (AC)

- Materia orgánica (MO)

- Nitrógeno no proteico (NNP)

- Carbohidratos no estructurales (CNE)

Finalmente se desea generar la capacidad de analizar e interpretar los resultados obtenidos en la

práctica, a partir de la contrastación con valores reportados en literatura científica y plasmar los
conocimientos y conceptos adquiridos por medio de una evaluación de la actividad al final de la
jornada de laboratorio
TIEMPO DE DURACION

12 horas (4 horas para muestreo y 8 horas en el laboratorio)

FECHA DE REALIZACIÓN DE PRÁCTICA

De acuerdo a la programación establecida por cada CEAD

ORDEN DE LAS ACTIVIDADES A REALIZAR POR LOS ESTUDIANTES:

1. Inscríbase en el aplicativo de oferta integrada de laboratorios OIL de acuerdo a la zona donde

pueda realizar su practica

2. Descargue los siguientes documentos:

a. Guía de desarrollo del componente practico

b. Marco teórico

c. Protocolos de laboratorio

3. Lea detalladamente cada uno de esos documentos

4. Recoja las muestras de acuerdo con los protocolos del laboratorio

5. Asista a la práctica en el lugar, fecha y hora que programe el CEAD al que pertenece

6. Lleve bata blanca manga larga, bayetilla, marcador para vidrio o cinta de enmascarar

7. Lleve leído y estudiado el documento de marco teórico del laboratorio.

8. Recuerde que debe tener claros los conceptos del marco teórico ya que en el laboratorio se
hace Taller previo a los análisis y evaluación al final de los análisis.

9. Cada estudiante debe tener presente que debe entregar el Quiz Previo y la Evaluación al final
de cada jornada de laboratorio ya que son 2 puntajes vitales para el laboratorio.
ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA:
1. Protocolos guía de la actividad

2. Bata blanca

3. Cinta de enmascarar

4. Bayetilla roja

5. Muestras de origen biológico recolectadas y empacadas según la guía didáctica

6. Libreta de anotaciones

7. Lápiz, Esfero, Marcador Sharpie

8. Cámara fotográfica.

Importante = Leer muy bien el marco teórico de la práctica de laboratorio para desarrollar el Quizz
previo a la practica

SOBRE LA RECOLECCION DE LAS MUESTRAS

- Forraje o Muestras Vegetales

o Cortar aproximadamente 500 g de forraje o pasto de corte o cualquier material vegetal de interés
para su carrera (zootecnia, agronomía, Ingeniería agroforestal)

o Picar el material a un tamaño entre 2 y 5 cm

o Meter en bolsa de papel (material similar a bolsa de pan)

- Suelo

o Tomar aproximadamente 500 g de muestra de capa orgánica (primera capa hasta 10-15 cm de
profundidad, capa más negra)

o Empacar idealmente en bolsa Ziploc (bolsa con cierre hermético) o sino en bolsa de plástico muy
bien sellada

- Alimento concentrado
o Tomar 250g de alimento concentrado (para ganado, equinos, cerdos, aves, gatos o perros)

o Macerar por medio de un mortero o bien triturar con martillo u objeto similar

o Empacar idealmente en bolsa Ziploc (bolsa con cierre hermético) o sino en bolsa de plástico muy
bien sellada

- Leche

o Rotular de qué tipo de leche se trata

o Tomar muestra de leche de vaca o cabra o leche comercial

o Congelar en nevera tradicional

- Orina

o Rotular de qué tipo de orina se trata

o Tomar muestra de Orina de vaca o cabra o la especie disponible o bien de orina propia

o Congelar en nevera tradicional

- Sangre (opcional).

o De ser posible (contando con animales y un profesional o trabajador experto en toma de muestra
de sangre) tomar muestra de sangre en vacutainer (previamente marcado) de tapa morada (con
anticoagulante tipo EDTA). Congelar en nevera tradicional hasta el día del laboratorio.
PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES Y
PROTOCOLOS DE LA PRACTICA
ANALISIS DE UREASA
Titulación

Wm (g) = Peso de la muestra en gramos

Vf(mL) = Volumen del filtrado en mililitros
V HCl (mL) = volumen de HCl agregados hasta titular la solución
DETERMINACION DE MATERIA ORGANICA
1. Precalentar horno a 115ºc

2. Tomar la muestra de Forraje, suelo, madera, alimento, granos o concentrado y picarlo hasta alcanzar
tamaños de partícula entre 10 y 15 mm.
3. Tomar muestra en un crisol e introducir a horno o estufa de aire forzado por 1 hora a 115ºc
4. Precalentar Mufla a 550ºc
5. Al sacar la muestra moler o picar nuevamente hasta alcanzar un tamaño de partícula menor.
6. Pesar crisoles de mufla y registrar los pesos marcando los crisoles en la parte inferior y lateral con
marcador indeleble (también tener presente el lugar donde queda ubicado el crisol antes de introducir a
mufla) = Wc
7. Pesar 1g de muestra y almacenarlo en un crisol de Mufla = Wm
8. Introducir crisoles y tomar registro de su ubicación para posteriores cálculos
9. Dejar reposar crisoles durante 45 minutos a temperatura ambiente
10. Pesar crisol y muestra = Wcm

Para determinar el contenido de materia orgánica

En teoría, absolutamente todas las biomoléculas que se encuentran en una muestra cualquiera del eje SPA
al estar bajo las condiciones de la mufla (550ºc por 4 horas), se desnaturalizan y el remanente (denominado
cenizas, por obvias razones) es una representación relativamente cercana al contenido de minerales de la
muestra analizada.
En este sentido;
% Minerales = 100 - % MO
ANALISIS DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES

Procedimiento extracción – cuantificación – lectura espectrofotométrica

CALCULOS
Para calcular el contenido de CNE (%) se debe Hallar el factor de dilución (Fd) y luego aplicar la siguiente
ecuación

Donde;
Am = Absorbancia de la solución Estándar
Ast = Absorbancia de la solución Estándar
Fd = Factor de dilución
Vf = Volumen del filtrado de muestra
Wm = Peso de Muestra
ANALISIS DE ACTIVIDAD CATALITICA
NITROGENO NO PROTEICO