UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA SEDE PITALITO

PROGRAMA DE INGENIERIA AGRICOLA

MANUAL DE LABORATORIO
2018
ASIGNATURA BIOQUIMICA FECHA 30 DE AGOSTO
TEMATICA CADENA TROFICA Y BIOENERGETICA TIEMPO DE PROGRAMACION 1 HORA 30 MINUTOS

PLANTEAMIENTO TEORICO
Una cadena trófica es una cadena alimentaria que se refiere a una secuencia lineal de organismos donde cada uno ocupa un nivel trófico diferente y
a través de los cuales los nutrientes y la energía pasan de un organismo a otro mediante consumo. La rede trófica consiste en varias cadenas
alimentarias interconectadas, de esta manera se desprenden un sin número de reacciones bioquímicas en cada uno de los organismos que ocupen
espacio dentro de esta red. Los compuestos bioquímicos también llamados macromoléculas o Biomoleculas son las encargadas de realizar procesos
de digestión, absorción, extracción, asimilación a nivel nutricional.

Las reacciones bioquímicas poseen características propias, pues son en general, exclusivos, como proteínas, ácidos grasos, glúcidos,
nucleótidos, la mayoría de gran peso molecular y que gracias a la actividad enzimática pueden ocurrir a gran velocidad además de ser
reguladas. Estas reacciones implican un cambio desde el concepto de metabolismo.

OBJETIVOS
Establecer mediante prácticas de laboratorio las secuencias y tipos de reacciones que pueden ocurrir en los organismos vivos con algunos
compuestos bioquímicos en los procesos de la cadena trófica y bioenergética.
Investigar experimentalmente los cambios físico-químicos en alimentos y nutrientes por la acción de movimientos, secreciones digestivas (ricas en
enzimas), durante los procesos de masticación, digestión y absorción.

MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
REACTIVOS

ESTUDIANTES: Preparación de una solución enzimática: macerar 5 gramos de habichuelas con 5 ml de agua destilada fría,
Habichuelas hasta obtener un extracto coloreado, centrifugar por 5 minutos a 5000 rpm, decantar el sobrenadante y
Harina de frijol o lenteja .completar con agua destilada hasta 20 ml, marcar
Aceite de cocina
Hepabil EXPERIMENTO 1.

LABORATORIO
Ácido clorhídrico concentrado
Yodo
Hidróxido de sodio 1%
Reactivos Fehling A y B
Cloruro de sodio 1%
Agua destilada
Ácido bórico 4%,
Ácido sulfúrico concentrado
NaOH 50%
HCl 0.01N
Indicador de Tashiro
2 Tubos para centrifuga
1 Centrifuga
1 Probeta de 50 ml
1 probeta 100 ml
Gotero
3 Vaso precipitado 50 ml,
2 vasos precipitado 250 ml
3 Erlenmeyer 50 ml
1 Estufa de digestión o mechero
2 Pipetas graduadas 2 y 5 ml
4 Tubos de ensayo
1 Balón de digestión
1 matraz de boca esmerilada
1 embudo de filtración
Papel filtro
Montaje de destilación simple
KJELDAHL
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MANUAL DE LABORATORIO
2018
REACCION DE ASIMILIACION DE CELULOSA
A una cantidad de celulosa, agregue, en el Erlenmeyer, 4-5 ml de HCl concentrado, y caliente a ebullición
suave durante 5 minutos como mínimo. Cada 1-2 minutos extraiga muestras (de 1-2 ml) y ensaye con yodo.
La reacción se dará por terminada cuando la muestra extraída no desarrolle coloración con la solución de
yodo. Coloque en un tubo de ensayo 3 ml de la solución resultante de la hidrólisis y neutralícela con NaOH.
Sobre la solución neutralizada practique la reacción de Fehling. Interprete los resultados con ecuaciones de
las reacciones.
Reacción de Fehling: Coloque en un tubo de ensayo 2 ml de Fehling A y 2 ml de Fehling B. Caliente a 60ºC
y añada 1 ml de solución problema. Agite y caliente a ebullición durante 1 minuto. Observe si se forma
insoluble, y sus características. Interprete la reacción que tuvo lugar.
EXPERIMENTO 2.
EXTRACCION DE PROTEINAS
Tomar 2 gramos de harina (frijol o lenteja tostado y licuado), agregar 10 ml de cloruro de sodio al 1%, dejar
estabilizar por 10 minutos. Llevar a la centrifuga a 2800rpm por cinco minutos.
Por decantación retirar el sobre nadante y agregar y agregar 25 ml de agua destilada. Marcar.
A) REACCION DIGESTION DE PROTEINAS
A 2 ml del extracto proteico agregar en un balón de digestión 30 gotas de ácido sulfúrico concentrado y 100
mg de mezcla catalizadora, llevar a estufa de digestión, tener en cuenta que este proceso es mejor realzarlo en
cabina de extracción debido a la emisión de vapores peligrosos, hasta una coloración verde esmeralda, dejar
enfriar.
B) REACCION DE ABOSORCION DE PROTEINAS
Transferir la solución obtenida en el experimento anterior a un matraz de boca esmerilada, es importante
lavar el balón de digestión con agua destilada y transferir el agua de lavado también al matraz para que no
haya perdida de muestra.
Realizar montaje de destilación Kjedahl simple como muestra la figura 1.
Detener la destilación después de 5 minutos de haber tomado coloración azul en el matraz de obtención
donde previamente se han adicionado 20 ml de ácido bórico más dos gotas de indicador.
Titular la solución obtenida con ácido clorhídrico 0,01 N hasta viraje del indicador, medir la cantidad de
ácido clorhídrico gastado
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EXPERIMENTO 4.
REACCION DIGESTION DE LIPIDOS
Vierta 100 mL de agua tibia en cada uno de dos vasos de precipitado. Vierta 5mL de aceite de cocina en
cada uno de los vasos de precipitado. En otro de los vasos de precipitado, prepare una solución al 1% de bilis
(pesar 1 gramo de Hepabil molido y disolverlo en 100 mL de agua). A uno de los vasos de precipitado que
contiene aceite y agua, agréguele 10 mL de la solución de bilis al 1%. Agite ambos vasos de precipitado y
observe lo que sucede. Deje de agitar y vuelva a observar lo que sucede en cada uno de los vasos.
CUESTIONARIO
1. COMO PUEDE SER LLAMADA la reacción del experimento 1?
2. Que organismo puede romper enlaces de la celulosa? ¿Qué tipo de enlaces?
3. La celulosa es un compuesto nutritivo para los humanos? ¿por qué?
4. ¿Cuál es la importancia de la solución enzimática? ¿qué nombre recibe esta enzima?
5. Que similitud tiene el apéndice A del experimento 2 con la digestión de proteínas en los seres vivos?
6. Que similitud tiene el apéndice B del experimento 2 con la absorción de proteínas en los seres vivos?
7. En que consiste la destilación por el método KJendal?
8. ¿Qué alimentos benefician la asimilación de las proteínas?
9. ¿Cómo actúa la bilis sobre los lípidos?
10. Mediante el experimento 4 se puede simular la digestión de los lípidos en los seres vivos?
11. Qué relación tiene cada una de las Biomoleculas en el proceso de la cadena trófica?
INFORME DE LABORATORIO
1. El informe de laboratorio de la práctica realizada deberá contener cada una de las ecuaciones de reacciones realizadas, con los
resultados, que podrán ser de valoración cualificada y la respectiva discusión de resultados.
2. En cada uno de los procedimiento analice la relación e esta reacción con el proceso en la cadena trófica, ubique el orden y en qué
organismo pueda ocurrir dicha reacción y por qué.

BIBLOGRAFIA
Ministerio de educación cultura y deporte. 75 experimentos en el aula secciones bilingües de Eslovaquia. Noviembre 2014.
Universidad industrial de Santander UIS. Manual de prácticas de laboratorio de bioquímica. Facultad de ciencias. Escuela de química. 2013.
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2018
Universidad de Guadalajara. Laboratorio de bioquímica. División de estudios de la biodiversidad e innovación tecnológica. 2014.
Universidad Nacional de Colombia. http://www.virtual.unal.edu.co/innovaciones/laboratorio-bioquimica.

ANEXOS
1. DESTILACION METODO KJENDAL